ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE

CHIMBORAZO
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE INGENIERA EN BIOTECNOLOGA AMBIENTAL

Microbiologa Ambiental
NIVEL: Quinto.
PARALELO: A.

INTEGRANTES:
Bur Sofa
Erazo Sofa
Licta Edwin
Mayanquer Paola
Tierra Nataly
Paredes Johana
DOCENTE: Ing. Sofa Godoy

PERIODO ACADMICO: OCTUBRE 2015 FEBREO 2016.

PRCTICA 3

TEMA: Anlisis Microbiolgico del aire por el mtodo de sedimentacin

1. OBJETIVOS.
OBJETIVO GENERAL.
Evaluar la calidad del aire en diferentes ambientes de la facultad.
OBJETIVOS ESPECFICOS.

Conocer los diferentes microorganismos que estn presente en el aire en diferentes

ambiente.

Determinar el nmero de colonias formadoras de colonias en cada una de las

muestras analizadas

Cuantificar la presencia de aerobios mesfilos y de hongos en el aire.

2. INTRODUCCIN.
El aire, en los aspectos fsicos y biolgicos es comparable a un ocano, con sus
masas fluidas diferenciadas, mezclas de masas, turbulencias heterogneas, plancton
(aeroplancton) suspendido y bentos ligado a las superficies.. El aire de interiores
tambin es comparable con una red hidrogrfica con ros (pasillos), torrentes
turbulentos (corredores) y lagunas (salas estancadas). Debido a esto en los
muestreos de interiores: no solo se deben muestrear las salas deben tomarse
muestras a distintas alturas en: rincones de los locales, en sus inmediaciones, puertas
y pasillos, y el aire de la calle del edificio.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
MATERIALES:
Erlenmeyer 250 mL

Algodn

Cajas Petri

Mechero

Papel aluminio
REACTIVOS:
Agar PCA
Agar Sabouraud
Agua destilada
EQUIPOS:
Estufa 35 C

4. PROCEDIMIENTO
Preparar los medios mencionados y luego que estos se hayan secado destaparlos en
diferentes lugares de la facultad. El tiempo de exposicin es de 30 minutos luego de esto
tapar nuevamente las cajas. Incubar a 35 C por un lapso de 24 horas y observar el
crecimiento en cada una de las cajas Petri. La siguiente frmula permite calcular las
colonias depositadas por m3 de aire.

Donde:
X = nmero de microorganismos en el aire ( UFC/m3)
a= nmero de colonias contadas en la placa Petri r
2 = superficie de la placa petri en cm2
t = tiempo de exposicin en minutos
5. MARCO TEORICO
Microbiologa del Aire
El aire contiene en suspensin diferentes tipos de microorganismos, especialmente
bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo depende del origen, de la direccin
e intensidad de las corrientes de aire y de la supervivencia del microorganismo. Algunos
microorganismos se encuentran en forma de clulas vegetativas, pero lo ms frecuente
son las formas esporuladas, ya que las esporas son metablicamente menos activas y
sobreviven mejor en la atmsfera porque soportan la desecacin. Las producen hongos,
algas, lquenes, algunos protozoos y algunas bacterias. En el aire se aislan
frecuentemente bacterias esporuladas de los gneros Bacillus, Clostridium y
Actinomicetos.
Bacterias y el aire
A lo largo de nuestra vida, los humanos respiramos cerca de 500 millones de litros de
aire, muchos de los cuales contienen polvo y gotas de humedad, en los que se
encuentran presentes microorganismos; estos no crecen en el polvo pero pueden ser
transitorios y variables, dependiendo del ambiente. Su nivel se controla naturalmente
mediante el grado de humedad, tamao y nivel de las partculas de polvo, la temperatura
y la velocidad del aire, as como la resistencia de los microorganismos a las sequas. Por
lo general, el aire seco con bajo contenido de polvo y una temperatura ms alta tiene un
nivel microbiano bajo. Si el entorno contiene una fuente de patgenos por ejemplo

granjas de animales y aves de corral, planta de tratamiento de aguas residuales, sector

de manipulacin de alimentos crudos, hospitales, entre otros; se pueden transferir
diferentes tipos de bacterias incluidas patgenos y virus por medio del aire.
Los microorganismos del aire proceden del suelo, del agua, de las plantas, de los
animales y de otras fuentes. En el aire de ambientes exteriores predominan los
microorganismos del suelo. En los interiores, la concentracin de microorganismos es
considerablemente ms alta especialmente de los que derivan del tracto respiratorio
humano.
Muchos microorganismos sobreviven con dificultad en el aire, y por ellos algunos
patgenos solo se transmiten en los humanos en distancias cortas. No obstante otros
patgenos resisten condiciones de sequedad y pueden permanecer vivos en el polvo
durante largos periodos de tiempo.
Durante el estornudo se genera un gran nmero de pequeas gotas de lquido y se
produce un nmero considerable de ellas mientras tosemos o cuando simplemente
hablamos. Cada pequea gota infecciosa tiene un dimetro de unos 10 m y puede
quedar suspendida en el aire conteniendo una o dos clulas bacterianas. Debido a su
pequeo tamao estas gotas se evaporan rpidamente en el aire, dejando un ncleo de
materia orgnica y de mucus al que se adhieren las bacterias.
Los Hongos y el aire:
De todos los microorganismos presentes en la atmosfera, las esporas de los hongos
(clulas encargadas de la reproduccin) representan el grupo ms numeroso. La
inhalacin de esporas fngicas puede desencadenar una variedad de sntomas
respiratorios, como rinitis alrgica, asma, bronquitis crnica, entre otras.
Dichas enfermedades dependen de la especie, las condiciones del medio en el que se
desarrolla el hongo, el clima, y la actividad inmunolgica del sujeto. Las estimaciones del
numero mundial de especies de hongos son muy variables, pero existen por lo menos
un milln y probablemente alcancen los cinco millones. Su presencia en la atmosfera ha
sido demostrada por su crecimiento en medios de cultivo, denominndose cultivables,
sin embargo, se considera que es una pequea parte de la poblacin que es
aerotransportada, dado que la mayora podra estar muerta o encontrarse en forma viable
no cultivable.
Factores como la temperatura, la humedad relativa del aire y la exposicin a la luz solar
y la lluvia pueden disminuir rpidamente el proceso de dispersin de las esporas.
Algunas enfermedades fngicas transmitidas por el aire, son responsables de

enfermedades pulmonares, desde donde pueden invadir otros tejidos y producir una
enfermedad sistmica. Por otra parte las esporas de varios mohos causan reacciones de
hipersensibilidad que afectan el aparato respiratorio superior. Estudios epidemiolgicos
han demostrado que la inhalacin de las esporas de algunos hongos son la causa de
problemas respiratorios asociados al sndrome del edificio enfermo y otras
enfermedades ocupacionales.
El control microbiolgico del aire se integra como parte del proceso de aseguramiento de
la calidad, que tiene en cuenta un riesgo de naturaleza microbiana, cualquiera sea el
campo de actividad.
(Norpacific S.A., 2009)
La atmsfera no tiene una microbiota autctona pero es un medio para la dispersin de
muchos tipos de microorganismos (esporas, bacterias, virus y hongos), procedentes de
otros ambientes. Algunos han creado adaptaciones especializadas que favorecen su
supervivencia y permanencia. Los microorganismos dispersados por el aire tiene una
gran importancia biolgica y econmica. Producen enfermedades en plantas, animales
y humanos, causan alteracin de alimentos y materiales orgnicos y contribuyen al
deterioro y corrosin de monumentos y metales.
La Microbiologa del aire comienza en el siglo XIX, con Pasteur y Miquel que disearon
mtodos para estudiar los microorganismos en el aire y descubrir la causa de algunas
enfermedades.
Desde entonces numerosos investigadores han trabajado en este campo tanto en el aire
exterior como en recintos cerrados. Las enfermedades transmitidas por el aire,
producidas por bacterias, virus y hongos, son las respiratorias (neumona, tosferina,
tuberculosis, legionelosis, resfriado, gripe), sistmicas (meningitis, sarampin, varicela,
micosis) y alrgicas.
(M. C. De la Rosa, 2015)
Tcnica de muestreo ambiental
Sedimentacin
Es el mtodo ms rudimentario de medicin de microorganismos en el ambiente.
Consiste en la exposicin de placas de Petri al ambiente durante un cierto tiempo. Este
mtodo tiene la ventaja de que se puede realizar en todas las condiciones habituales de
trabajo y en tiempo real, es el ms econmico y requiere muy poco tiempo de dedicacin.
El resultado ha de expresarse como: u.f.c (unidades formadoras de colonias) /cm2/hora
(no puede referirse a un volumen de aire, por lo que los resultados no pueden ser

cuantitativos/volumen de aire, pero si comparativos). Los tiempos de exposicin no

deben ser extremadamente largos para evitar que se reseque la superfi cie de la placa.
(Scharlab, 2013)

6. RESULTADOS
Colonias formadas en: Caja Petri con Agar PCA
BACTERIAS

TIPOS

Forma

Irregulares

Borde

ondulado

Elevacin

Plana

Superficie

Rugosa

Consistencia

Cremosa

Color

Color crema

Luz transmitida

Traslucida

Luz reflejada

Opaca

Colonias formadas en: Caja Petri con Agar Sabouraud

HONGOS

TIPOS

Forma

CIRCULAR IRREGULAR RIZOIDE

Borde

Entero

Ondulado

Lobulado

Elevacin

Convexa

Elevadas

Convexa

Superficie

Lisa

Rugosa

Rugosa

Consistencia

Cremosa

Membranosa

Membranosa

Color

Negro

Rojo

Amarillo

Luz transmitida

Opaca

Opaca

Traslucida

Luz reflejada

Opaca

Opaca

Opaca

Conteo de las unidades formadoras de colonia en: Caja Petri con Agar PCA
=

. 5. 104
. 2 .
( 76 ).5.104

= (3.1416).(13.5)2

= 221.2299477UFC/m3=2.21x102 UFC/m3

(30 min)

 Conteo de las unidades formadoras de colonia en: Caja Petri con Agar Sabouraud

. 5. 104
=
. 2 .
( 98 ).5.104

= (3.1416).(13.5)2

=285.2701957 UFC/m3 = 2,85x102 UFC/m3

(30 min)

7. OBSERVACIONES
Caja Petri con Agar PCA

Caja Petri con Agar Sabouraud

1. Observamos el crecimiento de

1. Observamos el crecimiento de

bacterias aerobicas ya que el agar

hongos en diversos colores, como:

es especfico en bacterias de

Amarillo, blancos, rojos, verdes y

superficie aerbica.

negros

8. DISCUSIN DE RESULTADOS.

El aire contiene en suspensin diferentes tipos de microorganismos, especialmente

bacterias y hongos. La presencia de uno u otro tipo depende del origen, de la
direccin e intensidad de las corrientes de aire y de la supervivencia del
microorganismo.
Observamos las diferencias entre bacterias y hongos

1. Las bacterias son organismos procaroticos, cuya principal caracterstica es carecer

de membrana nuclear, lo que lleva a que su material gentico este disperso
libremente en el citoplasma.
2. Los Hongos, son organismos eucaroticos, que se caracterizan por presentar una
membrana nuclear. Este hecho favorece que su material gentico se encuentre
separado de los dems orgnelos y pueda realizar divisiones de su ncleo,
necesarias para la esporulacin, que es la principal forma de reproduccin de este
organismo.
Las bacterias viables presentes en el aire suelen estar lesionadas debido a una
deshidratacin notable. Por lo tanto, no es conveniente recoger las muestras de aire
sobre medios selectivos, sino sobre medios que permitan la revivificacin de estos
microorganismos.
Microorganismos aerobios mesfilos son aquellos microorganismos que se
desarrollan en presencia de oxgeno libre y a una temperatura comprendida entre
20C y 45C con una zona ptima entre 30C y 40C.
En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de
desarrollarse a 30 C en las condiciones establecidas. En este recuento no se
especifica los tipos de microorganismos.
9. CONCLUSINES.

Encontramos microorganismos aerobios mesofilas tales como bacterias en el agar

PCA diferenciadas porque crecen en temperaturas de 20 a 40 C, mientras que en el
Agar Sabouraud hubo el crecimiento especfico solo de diferentes tipos de hongos,
los mismos que fueron diferenciados por sus hifas, pero desconocamos su nombre.
Determinacin del nmero de colonias formadoras en cada una de las muestras.

1.- Conteo de las unidades formadoras de

2.-Conteo de las unidades formadoras de

colonia en: Caja Petri con Agar PCA

colonia

. 5. 104
. 2 .

Caja

Petri

con

Agar

Sabouraud

( 76 ).5.104

= (3.1416).(13.5cm)2

en:

(30 min)

=221.2299477UFC/m3
=2.21x102 UFC/m3

. 5. 104
. 2 .
( 98 ).5.104

= (3.1416).)(13.5cm)2

(30 min)

=285.2701957 UFC/m3
= 2,85x102 UFC/m3

Conteo de la presencia de aerobios mesfilos y de hongos en el aire.

Al cuantificar la presencia de aerobios mesofilos y hongos en el aire obtuvimos como

resultado en la caja Petri con Agar PCA un total de 2.21x102 UFC/m3, mientras que en
la segunda caja Petri con Agar sabouraud dio como resultado 2,85x102 UFC/m3.

10. RECOMENDACIONES

Es recomendable realizar el muestreo del aire con las condiciones normales de

funcionamiento del establecimiento, puesto que de esta manera se obtiene un
resultado acorde de la carga microbiana a la que se est normalmente expuesto.

Tener en cuenta el tipo de agar a usarse para la obtencin de bacterias o de hongos,

para la diferenciacin de microorganismos al momento del conteo de las diferentes
cajas Petri.

11. ANEXOS

Caja Petri con Agar PCA

CAJA PETRI CON PRECENCIA DE

BACTERIAS AEROFILAS

CONTEO MICROBIANO
87

ESCUELA SUPERIOR

FACULTAD DE

INGENIERIA EN

POLITECNICA DE CHIMBORAZO

CIENCIAS

BIOTECNOLOGIA

ESCUELA DE CIENCIAS

AMBIENTAL

QUIMICAS

Caja Petri con Agar PCA

OBSERVAMOS
ASIGNATURA DE

Fecha:12/12/2015

MIBROBIOLOGIA

CURSO : Quinto

AMBIENTAL

PARALELO: A

Caja Petri con Agar Sabouraud

CONTEO MICROBIANO
88

CAJA PETRI CON PRECENCIA DE

HONGOS

ESCUELA SUPERIOR

FACULTAD DE

INGENIERIA EN

POLITECNICA DE CHIMBORAZO

CIENCIAS

BIOTECNOLOGIA

ESCUELA DE CIENCIAS

AMBIENTAL

QUIMICAS

Caja Petri con Agar Sabouraud

OBSERVAMOS
ASIGNATURA DE

Fecha:12/12/2015

MIBROBIOLOGIA

CURSO : Quinto

AMBIENTAL

PARALELO: A

Referencias
M. C. De la Rosa. (8 de 4 de 2015). Microbiologia del Aire. Obtenido de El aire: hbitat y
medio de transmisin:
https://www.google.com.ec/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&cad=rj
a&uact=8&ved=0ahUKEwiNw468ydbJAhXHeCYKHfzsBxMQFggaMAA&url=http%3A
%2F%2Frevistas.ucm.es%2Findex.php%2FOBMD%2Farticle%2Fdownload%2FOB
MD0202110375A%2F21767&usg=AFQjCNGBLcm2rz2Qd3XM9i6QP
Norpacific S.A. (6 de Enero de 2009). EL CONTROL MICROBIOLOGICO DEL AIRE. Obtenido
de http://www.norpacific.com.br/spanish/dicas/docs/062_1.pdf
Scharlab. (12 de Novimebre de 2013). CONTROL MICROBIOLOGICO AMBIENTAL DE
SUPERFICIES. Obtenido de
http://www.cienytech.com/catalogos/Microbiologia/Controlsup.pdf