FACULTAD DE CIENCIAS FARMACUTICAS Y BIOQUMICA

Ao de la consolidacin del Mar de Grau

Universidad
IncaGarcilasodelaVega
Nuevos Tiempos, Nuevas Ideas
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACUTICAS Y BIOQUMICA

ANLISIS BIOQUMICO Y CLNICO I

TEMA:

COLORACIN WRIGHT

DOCENTE:

Garay Barbaran Lourdes Rosario

ALUMNA:

Gonzales Perez Deybi

CICLO:

IX

AULA:

1-A

Lima-Per
2016

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INTRODUCCIN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguneos, es necesario colorearlos. En
la mayora de los laboratorios los colorantes ms empleados para la tincin
hematolgica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con
la mezcla de eosina (cido) y azul de metileno (bsico). Adems se han
incorporado el empleo de derivados por oxidacin del azul de metileno que se
conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de
la coloracin prpura o roja de ciertas estructuras. Tanto la eosina como el azul
de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes
estructuras celulares, de forma que las que tienen carcter bsico fijan la eosina
mientras que las que poseen propiedades cidas fijan principalmente el azul de
metileno. Esto explica que las estructuras basfilas se tian de color azul
mientras que los competente acidfilas adquieren un color rosado. La diferente
afinidad de ciertas granulaciones citoplasmticas por dichos colorantes permite
clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.

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1. OBJETIVOS:
- Aprender, conocer y aplicar la tcnica de tincin Wright
- Identificar y distinguir cada uno de las clulas sanguneas
(abastonados, segmentados, eusinfilos, basfilos, monocitos y
linfocitos).
2. MARCO TEORICO:
La tincin de Wright es un tipo de tincin usada en histologa para facilitar la
diferenciacin de los tipos de clulas de la sangre. Se usa principalmente
para teir frotis de sangre y punciones medulares, para ser examinadas al
microscopio. En citogentica se usa para teir cromosomas, para facilitar el
diagnstico de sndromes y enfermedades.
Lleva el nombre James Homer Wright, su inventor, que la obtuvo modificando
la tincin de Romanowsky, en 1902. Debido a que ayuda a distinguir
fcilmente las clulas de la sangre se convirti en una tcnica muy usada
para el conteo de los glbulos blancos, una tcnica rutinaria usada cuando
hay sospecha de infecciones.
La tincin de Wright es una tincin de tipo Romanowsky.Una tincin de
Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidacin,
as como eosina Y o eosina B.
La accin combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky
que da una coloracin prpura a los ncleos de los leucocitos y a los
grnulos neutroflicos y da color rosado a los eritrocitos. Los componentes
de este efecto son el azul B y la eosina Y.
Las propiedades de tincin de Romanowsky dependen del enlace de los
colorantes a las estructuras qumicas y de las interacciones del azul B y la
eosina Y. Los agrupamientos de cidos nucleicos, las protenas de los
ncleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B,
colorante bsico. La tincin de Wright cuyo colorante est compuesto de
azul de metileno (que tie de color azul las partes cidas de las clulas) y
eosina (que tie las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la
fijacin de las clulas), adicionando a la preparacin buffer de fosfatos (que
rehidrata a las clulas despus de la exposicin con metanol)
La eosina Y, colorante cido, se fija a los agrupamientos bsicos de las
molculas de hemoglobina y a las protenas bsicas.

3.
-

MATERIALES E INSTRUMENTOS
Muestra sangunea
Micropipeta
Lminas portaobjeto secos y
sin grasa

Lmina biselada
Campo
Reactivo de coloracion de
wright

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Agua taponada

Microscopio electrnico

4. PROCEDIMIENTO :
a) Tcnica para obtener el frots sanguneo:
1) Tomar un portaobjeto y colocarlo en una posicin horizontal
2) Depositar una gota de sangre sobre el portaobjeto
3) Colocar el portaobjeto extensor sobre el portaobjeto en un ngulo
adecuado segn el volumen de la gota depositada
4) Deslizar el portaobjeto hacia la gota
5) Dejar que la gota de sangre tome contacto con todo el borde del
portaobjeto
6) Deslizar el portaobjeto por el portaobjeto, con la gota, a una
velocidad y ngulo constante
7) Secar al aire
8) Rotular.

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b) Tincin del frotis saguneo: Coloracin Wright

Despus que la placa con el frotis sanguneo este totalmente seca a
temperatura ambiente, se coloca sobre un puente para realizar la tincin.

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Cubrir completamente el frotis con 3 gotas del colorante de Wright.. El

colorante deber cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe
derramarse por los bordes despus agregar una cantidad adicional de agua
taponada.

Dejar por 5 minutos y luego lavar con agua a chorro cuidadosamente.

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Despus de lavar se deja secar a temperatura ambiente. Luego llevar el frotis

teido al microscopio para la posterior identificacin de celulas sanguneas.

5. RESULTADOS:

Abastonado

Glbulos
rojos

Segmentado

Linfocito

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Basofilo

Nonocito

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6. CONCLUSION:
La coloracion de Wright es uno de los mtodos mas importantes que nos
permite identificar en un frots sanguneo las diferentes clulas
sanguneas.
Se logr identificar y distinguir las clulas sanguneas: glbulos rojos,
Monocitos, abastonados, linfocitos, segmentados y basfilo.
7. RECOMENDACIONES:
- Antes de usar el portaobjetos, tiene que estar completamente
limpio, libre de grasa o suciedad, si no el frotis sanguneo puede
salir mal.
- Verificar que el portaobjeto biselado presente un borde
completamente parejo y liso.
- Se debe depositar la cantidad adecuada de sangre para evitar la
excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud y excesivo
grosor del frotis, porque durante la tincion en el momento del
lavado se puede desprender parte del frotis.
- Dejar que el colorante actue sobre el frotis durante un tiempo
determinado para que las clulas se tian completamente
- Durante el lavado debe hacerse con sumo cuidado y con un
suave chorro de agua, con la finalidad de no desprender el frotis
del portaobjeto.
- Dejar que se seque a temperatura ambiente.

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REFRENCIA BIBLIOGRFICA
http://kassandra.udea.edu.co/lms/moodle19/mod/resource/view.php?id=
3542
https://www.lls.org/sites/default/files/file_assets/sp_bloodcellschart.pdf
http://ihrdiagnostica.com/tecnicas/pdf/ColoracionWRIGHTv2.pdf
https://www.lls.org/sites/default/files/file_assets/sp_bloodcellschart.pdf
https://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&
cd=&ved=&url=http%3A%2F%2Fhematologiaparaelresidente.blogspot.c
om%2F2013%2F07%2Ftinciones-enhematologia.html&psig=AFQjCNEms1s6fXARz6WmA9K2Igr6783xag&us
t=1465746474149327

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