Autoclave

En el laboratorio de Microbiologa es imprescindible trabajar con material y

soluciones estriles con objeto de que los resultados que se obtengan
correspondan al microorganismo o microorganismos que estn presentes en la
muestra en estudio y no a contaminantes que procedentes del medio o los
materiales, puedan desarrollarse y falsear las pruebas. Para ello antes de
comenzar el trabajo prctico se esterilizar, junto con los medios de cultivo, el
material que posteriormente va a ser utilizado. Se entiende por esterilizacin
los procedimientos por los cuales se eliminan todas las formas vivas de
microorganismos, sean patgenos o no, que se hallen en un material. Esta
esterilizacin suele efectuarse con calor hmedo en unos aparatos
denominados autoclaves.
Qu es el autoclave?
El autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de Microbiologa. Es
un sistema cerrado donde se forma vapor de agua que se somete a una
presin elevada, una atmsfera, lo que hace que el agua alcance una
temperatura de 121C causando la desnaturalizacin de enzimas lo que
conlleva a la muerte de los microorganismos y la destruccin de las esporas.
Habitualmente, se esteriliza a 121C durante 20 minutos.
El funcionamiento del autoclave
El proceso completo de esterilizacin en un autoclave se compone de
diferentes fases:
1. Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo
del caldern, se va produciendo vapor que desplaza el aire, hacindolo
salir por la vlvula de purgado que est abierta. Esta fase termina
cuando se alcanza la temperatura de esterilizacin.
2. Fase de esterilizacin: Una vez cerrada la vlvula de purgado y
alcanzada la temperatura de esterilizacin previamente seleccionada se
inicia el proceso de esterilizacin.
3. Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilizacin, deja de
funcionar la resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor
y la presin y temperatura del caldern empieza a bajar poco a poco.

Algunas consideraciones para una correcta esterilizacin del material

1. Para que la esterilizacin de medios de cultivo sea eficaz, la temperatura
y el tiempo seleccionados deben alcanzarse en todo el lquido.
2. Los recipientes con cierre hermtico deben ser introducidos en el
autoclave sin cerrar totalmente el tapn, para facilitar la entrada del
vapor durante el proceso. Al vaciar el autoclave despus de la
esterilizacin procederemos a cerrar totalmente estos recipientes.
3. Los recipientes vacos precisan de un tiempo de esterilizacin mayor que
los recipientes con lquido en su interior.