Ao de la Consolidacin Econmica y Social del Per

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

QUMICA ORGNICA
Tema:
Cromatografa en Capa Fina y C. sobre papel
Profesora:
Mara Elizabeth Fuentes Campos
Integrantes:
Daz Gutirrez, Rosa Yessenia
Limaco Junes, Jess Enrique
Sifuentes Amez, Silvia
Villalobos Valiente, Ricardo Alberto
Horario:
2:00 4:00 p.m.
Grupo:
G/F1- Laboratorio Q3

I. OBJETIVOS:

Lima, 26 de Mayo de 2010

Aprendizaje de la tcnica de cromatografa en capa fina y sobre papel.

Conocimiento de conceptos cromatogrficos: polaridad, fase mvil, fase

estacionaria, factor de retencin, etc.

Analizar la influencia del solvente en la separacin cromatogrfica.

Determinacin de los componentes orgnicos presentes en una muestra

usando sustancias patrn.

Comprobar como algunos colores estn formados por mezclas de otros

mas simples.

II. MARCO TERICO :

En toda separacin cromatogrfica hay una fase estacionaria y una fase mvil.
La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido que se queda fijo en la
misma posicin. La fase mvil puede ser un lquido o un gas que corre a travs
de una superficie y de la fase estacionaria. Las sustancias que estn en un
sistema de cromatografa interaccionan tanto con la fase estacionaria como con
la fase mvil. La naturaleza de estas interacciones depende de las propiedades
de las sustancias as como tambin de la composicin de la fase estacionaria.
La rapidez con que viaja una sustancia a travs del sistema de cromatografa
depende directamente de la interaccin relativa entre las sustancias y las fases
mvil y estacionaria. En el caso de una mezcla, si cada componente
interacciona diferente con la fase mvil y la fase estacionaria, cada uno de ellos
se mover diferente.
Cromatografa de capa fina: basa en el principio del reparto entre dos fases.
En general, una cromatografa se realiza permitiendo que la mezcla de
molculas que se desea separar (muestra) interaccione con un medio que se
denomina fase estacionaria. Un segundo medio la fase mvil que es inmiscible
con la fase estacionaria se hace fluir a travs de sta para elur a las molculas
en la muestra. Debido a que las distintas molculas en la muestra presentan
diferente coeficiente, la fase mvil a los distintos componentes con diferente
eficiencia, de modo que aquellos que en la fase mvil sern eludos ms rpido
que los que sean preferencialmente solubles en la fase estacionaria.
Cromatografa de papel: es un proceso donde el absorbente lo constituye un
papel de Filtro. Una vez corrido el disolvente se retira el papel y se deja secar,
se trata con un reactivo qumico con el fin de poder revelar las manchas.

III. MATERIALES:
Sustancias Qumicas
Almina
Cloroformo-metano

 Azul de metileno
Anaranjado de metilo
1-propanol-butanona-agua 4:1:1
Instrumentos del Laboratorio
Lminas portaobjeto
Capilar
Papel filtro
Tubo de ensayo
De proteccin
Guantes
Mascarilla
Lentes

IV.

PROCEDIMIENTO:
Se trabajara con placas de cromatografa en capa fina (c.c.f.) y de papel de
dimensiones mucho menores que las que se utilizan en laboratorios de anlisis
qumicos.

1. Cromatografa en capa fina:

a) se introducirn 2 laminas portaobjetos en una suspensin de almina
en una mezcla de cloroformo metano.

b) luego se dejan secar los portaobjetos y marcar 2 puntos en una lnea

imaginaria por encima de 1 cm del borde inferior.

c) En uno de los puntos se siembra un color y en el otro la mezcla y dejar

secar.

d) Se introducen el portaobjeto en una cmara de desarrollo que contiene

1-butanol-propanona-agua (fase mvil)

e) Finalmente antes de que el solvente este por llegar al borde se retira y

se marca el frente del solvente (para calcular el Rf).

2. Cromatografa sobre papel

a) marcar a 1.5 cm de uno de los extremos del papel filtro con un lapiz.
b) se divide la tira a lo largo en la mitad y en la mitad de la lnea trazada se
marca
un punto.
c) luego sembrar uno de los 2 colores y la mezcla uno en cada punto.

d) Se espera a que seque y se mete en un tubo de ensayo y se coloca en

solvente 1-propanol-butanona-agua. Sin tocar la zona de siembra.

e) Cuando la fase mvil haya ascendido 8 cm se retira el papel y se anota

el frente del solvente.

f) Se comparan las 2 muestras sembradas y se calcula el Rf de cada

sustancia.

V. RESULTADOS:

Cromatografa en capa fina, Thin Layer chromatografhy (TLC):

Componente A
Componente B

Distancia
recorrida
(cm)
Azul 0.7
Mezcla 3.5

Frente de RF
solvente
(cm)
1.2
0.583
4.5
0.778

Fenmeno fsico predominante: adsorcin

Nombre de la fase estacionaria: Almina
Solvente o sistema de solventes empleados: propanol,
acetona, agua
Dimensiones del soporte o fase fsica: altura=7.5cm.,
ancho=2.5cm., grosor=1ml.

Cromatografa sobre papel:

Anaranjado
Mezcla

Distancia
recorrida
(cm)
6
6

Frente de RF
solvente
(cm)
6.5
0.923
6.5
0.923

Fenmeno fsico predominante: Reparto

Nombre de la fase estacionaria: Papel filtro
Solvente o sistema de solventes empleado: Propanol,
acetona, agua
Dimensiones del soporte o fase fija: alto=17cm.,
ancho=2cm.

VI. CUESTIONARIO:
1) Qu entiende por Rx?

La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la

posicin de un compuesto sobre una placa como una fraccin decimal, mide la
retencin de un componente. Se define como: RF =
distanciadelcompuestodesdeelorigen / distanciadelamuestradesdeelorigen
Tambin se puede operar de la manera siguiente: Se selecciona un
compuesto (X), que tenga una posicin de desarrollo conveniente; todos
los dems compuestos sobre la placa se relacionan con ste. De esta
manera se tiene el , RX , ya que: Rx = Distanciarecorridaporelcompuesto /
distanciarecorridaporelcompuestodereferencia(X)
2.- Cules son las diferencias entre la cromatografa de capa fina y la de
papel?
Cromatografa en papel: muy utilizado en los laboratorios para realizar
anlisis cualitativos; la fase estacionaria est constituida simplemente por una
tira de papel de filtro (cromatografa de particin). La muestra se deposita en un
extremo colocando pequeas gotas de la solucin y evaporando el solvente.
Luego el disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por
capilaridad. Esto es, se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra
del lado de abajo dentro de un recipiente que contiene fase mvil en el fondo.
Despus de unos minutos cuando el solvente deja de ascender o ha llegado al
extremo se retira el papel y seca. Si el solvente elegido fue adecuado y las
sustancias tienen color propio se vern las manchas de distinto color
separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete
a procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz: la eleccin
del solvente y la del papel de filtro.
Cromatografa en capa fina: en la que un slido acta como fase estacionaria
(cromatografa de particin), se extiende en una capa delgada uniforme sobre
una placa, generalmente de vidrio.
La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase
estacionaria ser un componente polar y el diluyente ser por lo general menos polar
que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor
velocidad sern los menos polares.
3.- Cite algunas aplicaciones de la cromatografa en su especialidad.
Los mtodos de separacin de biomolculas cargadas, especialmente protenas, por
cromatografa de intercambio inico se estn desarrollando e introduciendo en la
industria alimentaria.
Otro factor importante ha sido el gran desarrollo experimentado en las propiedades de
separacin, capacidad y resistencia fsica y qumica de las resinas empleadas en la
operacin. El estudio bsico del equilibrio, cintica y efectos del pH y salinidad sobre
los soportes ha conducido al desarrollo actual de rellenos con excelentes propiedades

de retencin y separacin de las protenas contenidas en disoluciones, contribuyendo

al desarrollo de los equipos y procesos.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFA INICA

En el anlisis de agua
En la industria petroqumica
En la industria alimentaria
En la industria farmacutica

Sobre sus aplicaciones

El anlisis tanto cualitativo como cuantitativo de una mezcla compleja
cualquiera presenta siempre dificultades. La cromatografa en fase gaseosa, no
presenta una gran simplicidad pero an as es el mtodo ms indicado para
este tipo de procesos. Sus aplicaciones son muy numerosas, particularmente
en el campo de la qumica orgnica y la biologa.

Arsnico y antimonio en aguas naturales. Es interesante determinar su

forma qumica para estudiar sus ciclos biogeoqumicos. Aun ms, las
formas qumicas de selenio y arsnico han sido utilizadas para estimar la
intensidad redox en agua de lluvia.
En el anlisis orgnico de aguas.
En principio esta tcnica es aplicable a todos los compuestos voltiles y
estables a una temperatura elevada
Los hidrocarburos constituyen el mejor terreno de aplicacin de la
cromatografa en fase gaseosa. La complejidad de los productos
petroleros es tan grande que slo la cromatografa en fase gaseosa
permite el anlisis correcto. Es el campo que ms ha contribuido en el
desarrollo del mtodo Algunos de los casos ms frecuentes son el
metano, aromticos, terpenos.
La separacin de terpenos y de sus derivados oxigenados ha dado lugar
a numerosos trabajos. En particular, la industria alimentaria, ejemplo de
ello se encuentra en la separacin de los componentes de un zumo de
naranja.
Perfumes
Alcoholes presentan un anlisis ms complicado debido al
comportamiento que pueden presentar sus grupos hidroxilos, pero
decrece a medida que aumenta la cadena.
La deteccin clnica del etanol en la sangre es un buen ejemplo
Otros compuestos oxigenados tales como los aldehdos, las cetonas, los
acetatos los heterociclos; son analizados con xito.
Composs azots: el anlisis de las aminas es difcil porque quedan
irreversiblemente adsorbidas. Este problema se resuelve empleando una
fase estacionaria alcalina.
Compuestos orgnicos halogenuros, no polares.
Insecticidas y sus derivados, la industria alimentaria se interesa en estos
productos ya que existe un mtodo de deteccin de residuos de insecticidas en

los tomates por este mtodo. Si hay algn producto, como la carne o la leche,
que pueda contener sustancias nocivas para la salud stas se pueden
cuantificar para lograr un nivel ms bajo que el perjudicial.

Materiales plsticos entre ellos los polmeros.

ANLISIS DE LAS SUSTANCIAS NO ORGNICAS: gases
permanentes, agua (los problemas que presenta las soluciones acuosas
son los que presentan las soluciones polares en general, como lo
alcoholes y las aminas).
EN QUMICA BIOLGICA Y FARMACEUTICA.

4. Interprete los valores de Rf 0.05; 0.6 y 0.98

Este mtodo puede servir para intentar la identificacin de un compuesto ya
que el desplazamiento del disolvente es constante y caracterstico.
Se obtiene al dividir la distancia recorrida por la sustancia entre la distancia
recorrida por el solvente.
En el siguiente ejemplo sera:
_______ ______________
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
______________________
c
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _b _ _ _ _ __ _ _ _ _

a
______________________
A
B
C

Rf = 0.05 = a/d
Rf = 0.6 = b/d
Rf = 0.98 = c/d

5. Introducira algn cambio si se tiene un Rf. De 0.05 Por qu?

Habra un mnimo cambio ya que su valor de relacin frente es muy pequeo,
al parece el arrastre es inapreciable.

6.
Explique algn mtodo para localizar las bandas de absorcin
cuando se trabaja con sustancias incoloras en una columna.
Si la deteccin tiene que ser ptica y la sustancia es incolora, puede ser que
tenga adsorcin en la regin ultravioleta del espectro, y por ah la detectas. Si
no es as, se hace un mtodo de modificacin post-columna, a travs del cual
la sustancia que se desea (o buscas) toma color al reaccionar con otra.
7.
Qu es la electroforesis y cual es su principal aplicacin en los
compuestos biolgicos?
La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una corriente
elctrica controlada con la finalidad de separar biomolculas segn su tamao
y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa
Cuando una mezcla de molculas ionizadas y con carga neta son colocadas
en un campo elctrico, estas experimentan una fuerza de atraccin hacia el
polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las molculas
cargadas positivamente se desplazaran hacia el ctodo (el polo negativo) y
aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el nodo (el polo
positivo).

VII. CONCLUSIONES:

Se puede identificar que sustancias conforman una mezcla.

Se observo como los diferentes componentes de una mezcla se
separaban en las 2 tecnicas.
Se pueden realizar con pequeas cantidades de muestra.

VIII. RECOMENDACIONES:
No tocar el papel de cromatografa directamente con las manos, usar
guantes. Mantener el rea de trabajo limpia para mejores resultados.
No permitir que el solvente alcance el borde superior del papel.

Bibliografa:


Donald L. Pava. Gary M. Lampman, George S. Kriz. Randall G. Engel,
"Introduction to Organic Laboratory Techniques : A Small-Scale Approach".
Brooks Cole, 2da. (2004)

Bmice P.Y., "Organic Chemistry", Prentice Hall, Inc.. 4ta. Ed.(2004)

A. Keith Furr, "C.R.C. Handbook of Laboratory Safety". C.R.C. Press.

Inc., 5ta. Edicin. (2000)

Fessenden, R. J., Fessenden, J. S., "Organic Laboratoiy Techniques".

Brooks Cole; 3ra. Edicin (2001)

Donald L. Pava, Gary M. Lampman. George S. Kriz, "Organic

LaboratoiyTeclmiques". Brooks/Cole; . Edicin (2001)