La informacin pasa de dos formas de una generacin o a otra.

El
huevo fertilizado (en las especies que presentan reproduccin sexual)
o las clulas hijas (en las que se reproducen por reproduccin
asexual) reciben un juego de estructuras organizadas preexistentes
cuya existencia reflejar la estructura celular. De la misma manera,
reciben un juego de genes, necesarios para la construccin de futuras
estructuras durante el desarrollo del organismo.
El material gentico funciona por la virtud que presenta de especificar
una gran variedad de protenas. Las creencias tempranas sobre la
naturaleza del material gentico estaban desviadas por una suposicin
errnea: que la estructura del material gentico era tan compleja como
las protenas que se especificaban a partir de l. Durante mucho
tiempo, se pens que slo las protenas tenan la suficiente diversidad
para generar nuevas protenas. Esta suposicin fue descartada
cuando se describi que el material gentico lleva la informacin
necesaria para especificar una protena en forma de un cdigo.
Cada gen funciona al representar una cadena polipeptdica especfica.
El concepto de que una protena consiste de series particulares de
aminocidos viene de la caracterizacin de la insulina por Sanger en
1950s. Sanger, describi que un gen consiste de segmentos de DNA
que tienen la misin de contener una secuencia de nucletidos que
representarn una secuencia de aminocidos en una protena.
Una caracterstica crucial de la estructura general del DNA es que es
independiente de la secuencia particular de los nucletidos que lo
componen. La secuencia de nucletidos en el DNA es importante, no
por su estructura per se, sino porque codifica para la secuencia de
aminocidos que constituye al polipptido correspondiente. La relacin

entre una secuencia de DNA y la secuencia de la protena

correspondiente, se denomina cdigo gentico.
La estructura y/o actividad enzimtica de cada protena est
determinada por la estructura primaria de aminocidos. Al determinar
la estructura primaria de cada protena, el gen es capaz de llevar toda
la informacin necesaria para especificar a un polipptido activo. Es
este sentido, un solo tipo de estructura -el gen- es capaz de
representar por si mismo una gama de formas polipeptdicas.
Juntos, los mltiples productos protecos de una clula, con funciones
estructurales o catalticas, son los responsables de estabilizar en
fenotipo. Por supuesto, adems de las secuencias de genes que
codifican para protenas, el DNA tambin contiene algunas secuencias
cuya funcin es ser reconocidas por molculas reguladoras,
usualmente protenas. Aqu, la funcin del DNA est determinada por
su secuencia directamente, no va un cdigo intermediario. En ambos
tipos de regiones, los genes expresados como protenas y secuencias
reconocidas como tales, constituyen informacin gentica.
Las mutaciones, son alteraciones heredables que cambian la
informacin gentica. Desde el descubrimiento de que el DNA es el
material gentico, el concepto de que la mutacin es un cambio en la
secuencia de nucletidos ocurre naturalmente. A travs del cdigo
gentico, un cambio en la secuencia de nucletidos lleva a un cambio
en la secuencia de aminocidos, alterando o inhibiendo la actividad de
la protena.
La existencia de las mutaciones, permite comparar las propiedades de
los genes silvestres (normales) con genes defectuosos. Gracias a la
identificacin de protenas alteradas por las mutaciones, es posible
caracterizar los productos de un gen. Y analizando los cambios que
ocurren en el fenotipo de un organismo, es posible identificar la
funcin de un gen.
El diseo estructural del DNA le permite cumplir con la funcin de
mantener y perpetuar su secuencia. El DNA consiste de dos hebras,
cada una de las cuales contiene una secuencia que corresponde a la
otra en forma predecible, una molcula individual de DNA en efecto,
consiste de informacin redundante. Esto permite que la secuencia de

cada hebra sea confirmada contra la otra, de tal manera que las
inconsistencias pueden ser corregidas. Debido a que las dos hebras
estn unidas solo por la accin de fuerzas de carcter no covalente, su
separacin es acompaada por una salida moderada de energa,
permitiendo su replicacin en condiciones fisiolgicas.

La unidad fundamental de la informacin en los seres vivos es el gen.

Un gen es definido bioqumicamente como un segmento de DNA (o en
algunos casos de RNA) que codifica la informacin requerida para
producir un producto biolgico funcional. Esta produccin en la
mayora de las veces, es una protena, pero tambin, el producto de
un gen puede ser una de mltiples clases de molculas de RNA.
Las investigaciones modernas sobre la estructura de los genes y su
funcin, ha ocasionado una revolucin comparable a la que ocurri
hace ms de 100 aos por la teora de Darwin del origen de las
especies. El conocimiento de cmo la informacin es almacenada y
utilizada en las clulas ha permitido penetrar en algunos de los
problemas fundamentales para entender la estructura y funcin
celular. De hecho esto ha permitido darle un nuevo marco a la ciencia
de la bioqumica.
Actualmente, el conocimiento de las vas de informacin emerge de la
convergencia de tres disciplinas diferentes: gentica, fsica y
bioqumica. La contribucin de estas disciplinas para dar origen a la
gentica bioqumica, empezaron con la descripcin de la estructura de
doble hlice del DNA por James Watson y Francis Crick en 1953. La
teora gentica contribuy con el concepto de codificacin por genes.
La fsica hizo posible la determinacin de la estructura molecular por
anlisis de difraccin de rayos x. La bioqumica revel la composicin
del DNA. El gran impacto de la hiptesis de Watson y Crick fue debida
mayoritariamente por su habilidad para conjuntar los resultados
derivados de todas estas fuentes.
El conocimiento de la estructura del DNA inevitablemente lleva a
cuestiones sobre su funcin. La estructura por si misma sugiere como
el DNA puede ser copiado, de tal forma que la informacin contenida

en l pueda ser transmitida de una generacin a la siguiente.

Entendiendo cmo la informacin en el DNA es convertida en
protenas funcionales llev al descubrimiento del RNA mensajero
(mRNA) y del RNA de transferencia (rRNA) y a la solucin del cdigo
gentico. Estos y otros avances, llevaron a la generacin del dogma
central de la biologa molecular, el cual define tres procesos
principales en la utilizacin celular de la informacin gentica. El
primero es la replicacin (o duplicacin), la copia de un DNA
progenitor para formar una molcula de DNA hija que tiene una
secuencia de nucletidos idntica a la original. El segundo proceso es
la transcripcin, el proceso por el cual partes de el mensaje
codificado en el DNA es copiado en forma de RNA. El tercer proceso
es la traduccin, en el cual el mensaje gentico codificado en
el mRNA es traducido en los ribosomas en una protena con una
secuencia especfica de aminocidos.
A la complejidad de las vas de informacin, se le suma la
biosntesis de las macromolculas portadoras de la informacin. La
formacin de los cidos nuclicos y protenas con las secuencias
correctas de nucletidos y aminocidos respectivamente, representa
precisamente, la forma exitosa de la expresin de molde a partir del
cual, se construye la vida. La formacin de los enlaces fosfodiester en
el DNA o los enlaces peptdicos en las protenas parecera trivial para
las clulas, pero el marco de patrones y reglas estabilizado en
la examinacin de las vas metablicas es aumentado grandemente
cuando se agrega la informacin a los procesos. La formacin de
enlaces especficos y la prevencin de errores en las secuencias de
estos polmeros, tiene un enorme impacto en las termodinmica,
qumica y enzimologa de los procesos biosintticos. Por ejemplo, la
formacin de un enlace peptdico, requiere una entrada de al rededor
de
21 kJ y
se
conocen
enzimas
relativamente
simples
que catalizan reacciones
comparables
energticamente.
Para
sintetizar el enlace peptdico correcto entre dos aminocidos
especficos a un punto dado en una protena, las clulas invierten al
rededor de 125 kJ de energa qumica y hacen uso de las actividades
combinadas de ms de 200 molculas de RNA, enzimas y protenas
especializadas. La informacin es muy costosa.
La dinmica interaccin entre los cidos nuclicos y las protenas es
otro tema central. Con la importante excepcin de algunas molculas

de RNA catalticas, el proceso que hace posible que los flujos de

informacin en las clulas, esta catalizado por protenas. Este proceso
es precisamente la cuna de la tecnologa del DNA recombinante. Con
esta tecnologa es posible obtener diagnsticos prenatales de
enfermedades genticas; la produccin de una amplia gama de
nuevos potentes agentes farmacolgicos; la secuencia del genoma
humano; la introduccin a nuevas tcnicas para la explotacin de
bacterias, hongos, protozoarios, plantas y animales; terapia humana
gnica y muchos otros avances.

transcripcin

DNA

RNA

PROTENAS
reversotranscripcin

n
Replicacin

Dogma central de la Biologa Molecular

Figura: el dogma central de la Biologa Molecular

traducci

Despus de que se demostr que el principio transformante era ADN, se

tena que demostrar que esta molcula provee del material gentico en diferentes
sistemas.
El bacteriofago T2, es un virus que infecta a las clulas de la
bacteria Escherichia coli. Cuando los virus T2 se ponen en contacto con las
bacterias, les inyectan algunos materiales. Despus de aproximadamente 20
minutos, las clulas explotan (se lisan) y liberan una gran cantidad de nuevos
virus.
Hershey y Chase (en 1952) marcaron radioactivamente a fagos T2 en sus
componentes de ADN (con 32P) o en los componentes de sus protenas (con 35S)

ADN
Protenas
Bacteriofago T2
Figura: representacin de la composicin de un bacteriofago T2.
Infectaron bacterias de Escherichia coli con los fagos marcados (1 en la
siguiente Figura) y dejaron continuar el ciclo (2 en la siguiente Figura)

1.-

2.-

Figura: representacin del experimento de Hershey y Chase 1

Las clulas de las bacterias infectadas, se rompieron por agitacin. La
solucin de clulas rotas se centrifug y se obtuvieron dos fracciones. Una de
ellas contena la cubierta vaca de los fagos (cpside), que fue liberada de la
membrana de las bacterias por la agitacin. La otra fraccin contena a las
bacterias infectadas. La mayora de la radioactividad del 32P estaba presente el
las bacterias infectadas. Los fagos producidos por la infeccin contenan
aproximadamente el 30% de la marca original de 32P y menos del 1% de las
protenas contenidas en los fagos originales:

Figura: representacin del experimento de Hershey y Chase 2

Este experimento mostr directamente que el ADN de los fagos originales

(parentales) entra a la bacteria y se vuelve parte de los fagos resultantes de la
infeccin (progenie), exactamente el patrn de herencia esperado del material
gentico.
Un fago (virus) se reproduce al apoderarse de la maquinaria de la clula
hospedera para manufacturar copias de l mismo. El fago procesa el material
gentico cuyas caractersticas son anlogas a las de los genomas celulares: es
completamente reproducido y est sujeto a las mismas reglas que gobiernan a la
herencia.
El caso de T2 refuerza la conclusin de que el material gentico es el ADN,
es parte del genoma de las clulas o virus.

Cuando se agrega ADN a poblaciones de clulas eucariontes en cultivo,

entra a las clulas y, en algunas de ellas resulta la produccin de nuevas

protenas. Este proceso puede hacerse rutinariamente con ADN purificado cuya
incorporacin lleva a la produccin de una protena particular:
Las clulas que carecen del gen TK no pueden producir timidina cinasa y
mueren en ausencia de timidina:

Agregando ADN TK+

Algunas
poseen el gen TK

Clulas carentes del

gen TK (TK-)

Clulas muertas

clulas

colonias de clulas TK+

clulas vivas

Figura: representacin del experimento de transfeccin.

Histricamente, estos experimentos, se denominan transfeccin cuando se
llevan a cabo con clulas eucariontes, son la contraparte directa de la
transformacin bacteriana.

Con estos experimentos, se demuestra que el ADN es el material gentico

de los eucariontes y que puede ser transferido entre diferentes especies y
continuar funcional.

El material gentico de todos los organismos y de muchos virus es ADN.

Pero algunos virus utilizan un cido nucleico alternativo, el cido ribonucleico
(ARN) como material gentico. Aunque su frmula qumica es muy poco diferente
de la del ADN, en estas circunstancias juega el mismo papel. Ejemplos de estos
virus, es el de la hepatitis, de la gripe o influenza y el de inmunodeficiencia
humana. La conclusin es que independientemente de si es ADN o ARN, el
material gentico de los seres vivos y de los virus es siempre un cido nucleico.

La idea de que el material gentico es un cido nuclico surge con el

experimento de transformacin de Griffith en 1928. En los ratones, la
bacteria Pneumococcus ocasiona la muerte por neumona. La virulencia de la
bacteria est determinada por la cpsula de polisacridos que forma parte de la
superficie celular y que le permite escapar de la destruccin por el hospedero. Los
diferentes tipos de Pneumococcus (I, II y III), tienen diferentes cpsulas, lo cual lo
hace tener una superficie lisa (L).
Cada tipo de Pneumococcus puede generar una variante incapaz de
generar la cpsula. Estas bacterias, tienen una cubierta rugosa (R) y
son avirulentas; al no tener la proteccin contra la destruccin contra la defensa
del hospedero, no ocasionan la enfermedad del ratn.
Cuando se mata a las bacterias L por medio de tratamiento trmico, pierden
la capacidad de infectar al ratn. Pero, al combinarse estas ltimas con bacterias
R, se obtiene un resultado diferente. Cuando ambas bacterias, Lisas inactivas y
Rugosas no virulentas, se inyectan juntas, el ratn muere por neumona. Adems,
bacterias S, pueden ser recuperadas del animal muerto.

Tipo de Pneumococcus
1.- Bacterias L vivas
2.- Bacterias L muertas por calor

Efecto en el ratn
(despus de la inyeccin)
muere
vive

3.- Bacterias R vivas

4.- Mezcla de 2 y 3

vive
muere

Tabla: resultados obtenidos por Griffith.

En el experimento original, las bacterias L muertas, eran del tipo III. Las
bacterias R vivas derivaron del tipo II. La bacteria virulenta recuperada, presenta
cpsula de tipo III. Por lo tanto, alguna propiedad de las bacterias L tipo III pueden
transformar a las bacterias vivas R, de tal forma que estas ltimas tienen cpsula
de polisacridos tipo III y por tanto son virulentas.
El componente de las bacterias muertas, responsable de la transformacin,
se denomin principio transformante. Este material pudo ser aislado al
desarrollar un sistema libre de clulas, en el cual el extracto de las bacterias L
muertas pudo ser agregados a las bacterias R vivas antes de ser inyectadas al
ratn. En 1944, Avery y colaboradores aislaron el principio transformante y
demostraron que es cido desoxiribonucleico (ADN).
En ese entonces, no se tena conocimiento de que el ADN era un
componente de las clulas de Pneumococcus, pero dcadas atrs se reconoca
como parte principal de los cromosomas eucariontes. Lo cual unific que las bases
de la herencia para procariontes y eucariontes.
Al discutir los resultados de la transformacin, Avery escribi:
Si estamos en lo correcto, esto significa que los cidos nuclicos no son
meramente importantes desde el punto de vista estructural, sino substancias
funcionalmente que determinan las actividades bioqumicas y caractersticas
especificas de las clulas, de tal forma que al conocer esta substancia qumica es
posible inducir cambios predecibles en las clulas.

Un cido nucleico consiste de una secuencia de subunidades unidas

qumicamente. Cada subunidad, contiene una base nitrogenada (anillo heterocclico de
tomos de carbono y nitrgeno), una azcar pentosa (anillo de 5 carbonos) y un grupo
fosfato:

Figura: representacin de una cadena de

nucletidos

Las pirimidinas que tienen un anillo de seis miembros

Figura: las pirimidinas.

Las purinas que tienen un anillo de 5 miembros fusionado a uno de 6:

Figura: las purinas

Cada cido nucleico contiene 4 tipos de bases. Las mismas dos purinas,
adenina (A) y guanina (G) estn presentes en el ADN y en el ARN. Las dos

pirimidinas, en el ADN son citosina (C) y timina (T), en el ARN, la timina se cambia
por el uracilo (U). La nica diferencia entre el uracilo y la timina es la presencia de
un substituyente metil en la posicin C5. De tal manera que en el ADN solo
existen A,G,C y T, mientras que en el ARN contiene A,G,C y U.

En los cidos nucleicos, se encuentran dos tipos de pentosas. Esta

caracterstica diferencia al ADN del ARN y les da el nombre a los dos tipos de
cidos nucleicos:

Figura: diferencias entre un ribonucletido y un desoxirribonucletido

En el ADN, la pentosa esla 2-desoxiribosa y en el ARN es la ribosa. La

diferencia la hace la presencia o ausencia de un grupo hidroxilo en la posicin 2
del anillo.

La base nitrogenada esta unida a la posicin 1 del anillo de la pentosa por medio
de un enlace glucosdico a la posicin N1 de las pirimidinas o a la N9 de las purinas. Para
evitar ambigedades entre la numeracin de los heterociclos y el anillo del azcar, las
posiciones de la pentosa se numeran como primos ().

Una base unida a una azcar se denomina nuclesido, cuando se une un fosfato,
la base-azcar-fosfato se denomina nucleotido:

Base

Nucleosido

Nucleotido

Abreviatura
ARN

Adenina

Guanina

adenosina

guanosina

cido adenlico

AMP dAMP

cido guanilico

Citosina

citidina

cido citidilico

Timina

timidina

cido timidilico

Uracilo

uridina

cido uridilico

ADN

GMP dGMP

CMP dCMP
dTMP
UMP

Tabla: los diferentes arreglos de los nucletidos.

Los nucletidos son los bloques de construccin a partir de los cuales se
construyen los cidos nucleicos. Los nucletidos estn unidos en una
cadena polinucleotdica con un esqueleto que consiste de series alternadas de residuos
de azcar y fosfato. La posicin 5 de un anillo de pentosa est conectada a la posicin 3
de la siguiente pentosa va un grupo fosfato (ver Figura 1). Por lo tanto, se dice que el
esqueleto de azcar-fosfato consiste de un enlace fosfodiester en posicin 5-3. Las
bases nitrogenadas estn por fuera del esqueleto.

El nucletido terminal en uno de los extremos de la cadena tiene el grupo 5 libre;

y al otro lado de la cadena tiene un grupo 3 libre. Es una convencin escribir las
secuencias de cidos nucleicos en la direccin 5-3, de tal forma que el extremo 5 est a
la izquierda y el 3 a la derecha.

Cuando el ADN o el ARN son rotos en sus nucletidos constituyentes, la ruptura

puede llevarse a cabo en cualquiera de los lados de los enlaces fosfodiester.
Dependiendo de las circunstancias, los nucletidos tienen su grupo fosfato unido a
cualquiera de las posiciones 5 3 de la pentosa:

Figura: posibilidades del acomodo de los grupos fosfato en las ribosas de

los nucletidos.

Todos los nucletidos pueden existir en una forma en la cual hay ms de un grupo
fosfato unido a la posicin 5 por ejemplo:

Figura: diferentes estados de fosforilacin de un nucletido

Todos los enlaces (, y ) son ricos en energa, la cual se utiliza como fuente
para mltiples actividades celulares. Los nucletidos 5trifosfatados son los precursores
de la sntesis de los cidos nucleicos.

La observacin de que las bases estn presentes en diferentes cantidades

en el ADN de diferentes especies llev al concepto de que la secuencia de bases
es la forma en la cual la informacin gentica es transportada.
Existen 3 evidencias que llevaron a Watson y Crick (en 1953) a la
construccin del modelo de la doble hlice del ADN:
1.- La difraccin de rayos X muestra que el ADN tiene una forma de hlice regular,
teniendo una vuelta casa 34 (3.4 nm) con un dimetro de aproximadamente 20
(2 nm). De acuerdo a lo anterior, debe tener 10 nucletidos por vuelta.
2.- La densidad del ADN sugiere que la hlice debe contener cadenas
de polinucletidos. El dimetro constante de la hlice puede ser explicado si las
bases de cada cara de la cadena estn hacia adentro y estn restringidas de tal
manera que las purinas estn siempre opuestas a las pirimidinas, evitando as los
pares purina-purina o pirimidina-pirimidina.
3.- La proporcin de G es siempre la misma que la de C en el ADN y las
proporciones de A son siempre las mismas que las de T. De tal forma que la
composicin de cualquier ADN puede ser descrita por la proporcin de sus
bases C+G la cual varia entre 26 y 74 % dependiendo de la especie.

Watson y Crick propusieron que las dos cadenas de polinuclotidos en la

doble hlice estn asociadas por puentes de hidrgeno entre las bases
nitrogenadas:
La siguiente figura muestra que usualmente, G solo puede hacer puentes
de hidrgeno con G, por el contrario, A solo puede unirse con T. Estas reacciones
se describen como pares de bases y las bases apareadas (G con C y A con T) son
complementarias.

Figura: complementariedad de los pares de bases de Watson y Crick.

El modelo requiere las dos cadenas de polinuclotidos corriendo en

direcciones (antiparalelas). Al observar la hlice, se aprecia que una hebra corre
en direccin 53, mientras que su hebra complementaria lo hace en direccin
3 5. Esto se refiere al enlace que se forma entre el grupo fosfato en posicin
3 de un nucletido y el grupo hidroxilo 5 en el siguiente nucletido, de tal forma
que en los extremos se encuentra un grupo3 libre de un lado y uno 5 del otro.

Figura: las cadenas de ADN son antiparalelas.

Los cromosomas eucariontes, consisten de ADN, ARN y protenas denominado

cromatina, son entidades dinmicas cuya apariencia varia con el estado del ciclo celular.
Su forma caracterstica condensada, solo se observa en la divisin (fase M del ciclo
celular). Durante la interfase (lo que resta del ciclo celular), cuando son transcritos y
replicados, estn muy dispersos y no pueden ser distinguidos individualmente.

Mitosis y divisin celular

(1h)
G2

Preparacin para la mitosis

(2-6h)

G1
Replicacin del ADN

G0

(6-8h)
inactividad (ti
empo variable)

Compromiso para la replicacin

del ADN
( 10h)

Figura: representacin del ciclo celular.

Existen dos tipos de cromatina:

Eucromatina: empaquetamiento poco denso

Heterocromatina: empaquetamiento denso

Cada uno de los 46 cromosomas humanos contienen entre 48 y 240 x10 6 pares
de bases (pb), por tanto su ADN que es muy probablemente continuo, mide
longitudinalmente entre 1.6 y 8.2 cm
(3.4 /pb). En la metafase, estn en su estado
condensado, por lo tanto miden entre 1.3 y 10 m. De acuerdo a lo anterior, es posible
deducir que el ADN tiene un empaquetamiento.

Cromosoma
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
X
Y
mitocondrial

Bases
(x106)
263
255
214
203
194
183
171
155
145
144
144
143
114
109
106
98
92
85
67
72
50
56
164
59
16571*

Tabla: millones de pares de bases por cada uno de los cromosomas

humanos.
*pares de bases

Figura: Esquematizacin del tamao de los cromosomas humanos.

A.- los 22 autosomas y los dos cromosomas sexuales. B.- el cromosoma
mitocondrial.

La manera en que el ADN en la cromatina tiene este alto grado de condensacin,

se debe a tres niveles de plegamiento:

Las protenas responsables del empaquetamiento del ADN se

denominan histonas. Estas protenas forman parte del alrededor de la mitad de la
masa
de
la
cromatina.
Hay
5
clases
principales
de histonas: H1, H2A, H2B, H3 y H4, todas ellas contienen una gran cantidad de
residuos cargados positivamente ( Arg y Lys).
Histona

H1
H2A
H2B
H3
H4

nmero
de residuos
215
129
125
135
102

Masa
(kD)
23.0
14.0
13.8
15.3
11.3

%Arg

%Lys

UEP*
-6

(x10 aos)

1
9
6
13
14

29
11
16
10
11

Tabla: caractersticas de las histonas.

8
60
60
330
600

*Unidad de periodo evolutivo: es el tiempo en el que la secuencia de aminocidos

de una protena cambia en 1% despus de que dos especies divergieron.
Las histonas, se unen ionicamente a los grupos fosfato del ADN cargados
negativamente. In vitro, esta interaccin, se puede romper con 0.5 M de NaCl.
Las histonas estn conservadas evolutivamente, su funcin es tan crtica que
no soportan cambios.
Las histonas son
objeto
de
modificaciones postraduccionales como metilaciones, acetilaciones y
fosforilaciones en residuo especficos (Arg, His, Lys, Ser y Thr). La mayora son
revertidos al alterarse la carga de la protena, lo que se refleja en su unin con el
ADN. Aunque estn conservadas evolutivamente, las modificaciones son
diferentes dependiendo el tejido o el estado del ciclo celular. Por ejemplo, el 10%
de la H2A tiene unido en el grupo de la Lys 119 en el carboxilo terminal a la
protena ubiquitina. En general, esta seal en el citoplasma resulta en la
degradacin de la protena.
En las clulas eritroides de embriones de pollo, existe una variante de H1
llamada H5, cuya funcin es desconocida (los eritrocitos de pollo, a diferencia de
los humanos, son nucleados).

En 1974 Roger Kornberg, describi al nucleosoma que es el primer nivel de

organizacin de la cromatina. Las evidencias que us Kornberg para ello fueron:

1.- la cromatina contiene aproximadamente el mismo

de histonas H2A, H2B, H3 y H4 y no ms de la mitad de H1.

nmero

de

molculas

2.- La cristalografa de rayos X indica que e la cromatina existe una estructura regular que
se repite cada 100 sobre la fibra. Este mismo patrn se observa cuando ADN purificado
se mezcla con cantidades equimolares de histonas, excepto H1.

3.- Micrografas electrnicas de la cromatina revelan que consiste de partculas de

aproximadamente 100 de dimetro conectadas a partir de ADN desnudo (como un
collar de cuentas) y son aparentemente las responsables del patrn de rayos X.

ADN
Desnudo

100

4.- Controlando el tiempo de digestin de la cromatina con la nucleasa micrococal, (que

rompe la doble hebra del ADN), se obtienen diferentes estructuras:

Monmeros

dmeros

trmeros

tetrmeros

Mediante experimentos de electroforesis en gel indican que cada partcula contiene

alrededor de 200 pares de bases.

5.- Experimentos de entrecruzamiento, indican

asocian paa formar el heterotetrmero (H3)2(H4)2.

que

las histonas H3

H4

se

Las observaciones de Kornberg lo llevaron a concluir que el nucleosoma, est

formado por el octmero (H2A)2(H2B)2(H3)2(H4)2, adems de aproximadamente 200
pares de bases de ADN. La quinta histona H1, postul que estaba asociada de alguna
manera en el exterior del nucleosoma.

El ADN,
el nucleosoma:

Cromatina

se

nucleasa
micrococal

enreda

alrededor de

cromatosoma

un octmero de histonas para

nucleasa

formar

ncleo del nucleosoma

micrococal

+
H1

cromatosoma: nucleosoma + H1

ncleo del nucleosoma: 146pb asociados con el octmero

El ADN removido por la digestin se denomina ADN de unin. Y varia de especie

a especie y de tejido a tejido entre 8 y 114 pares de bases, pero generalmente es de
aproximadamente 55pares de bases.

Cuando el ADN se replica in vivo, las hebras hijas, inmediatamente son

incorporadas en nucleosomas. Cuando el ADN se replica en presencia
de cicloheximida (inhibidor de la sntesis de ADN), slo una hebra hija tiene nucleosomas.

A medida que se disminuye la concentracin de NaCl en un experimento,

hasta la concentracin fisiolgica, la estructura de zig-zag de la cromatina forma
un filamento de 300 de grosor en el cual se observan los nucleosomas. La
hiptesis ms aceptada, dice que el filamento de 300 est formado por la suma
de los nucleosomas en un solenoide con 6 nucleosomaspor vuelta. El solenoide,
est estabilizado por las histonas H1 de forma cabeza-cola.

Los cromosomas de la metafase depletados de sus histonas presentan un

andamio fibroso de protena rodeado por un halo de ADN. Las hebras de ADN
forman giros que entran y salen del andamio en aproximadamente el mismo sitio.
La mayora de estos giros, tienen una longitud de entre 15 y 30 m (45-90 pares
de bases), de tal forma que cuando se condensan para formar el filamento de 300
, miden 6 m. De ah que se prediga que el dimetro de los cromosomas en
metafase sea de 1.0 m.

1.0 m

giro

andamio

giro

0.3m

0.4 m

0.3 m

Figura: Simulacin del corte transversal de un cromosoma humano en

metafase

Los daos en el ADN pueden ser reparados para mantener la integridad de la

informacin gentica, la importancia biolgica de la reparacin del ADN es evidente al

encontrar mltiples mecanismos de reparacin. Estos sistemas incluyen enzimas que

simplemente revierten la modificacin qumica, as como complejos enzimticos ms

complicados que dependen de la redundancia de la informacin en la molcula de

ADN duplex para reparar a la molcula.

Muchas enzimas reconocen a las bases modificadas en los nucletidos del ADN y

restablecen los errores a su estado original. Estas modificaciones pueden generar una

base alquilada, por ejemplo la O 6-metilguanina:

Figura: representacin de la molcula de la O6-metilguanina (a la

izquierda). A la derecha la guanina.

La O6-metilguanina frecuentemente causa la incorporacin de timina en vez de

guanina durante la duplicacin del ADN. Afortunadamente existe la O 6-metilguanina-

ADN metiltransferasa, que transfiere el grupo metilo de esta base modificada a uno de sus

residuos de cintena, este hecho inactiva a la protena.

Las ADN fotoliasas, pueden por medio de absorcin de luz, regresar a los
dmeros de pirimidina a sus estados monomricos.

Los dmeros de pirimidinas tambin pueden ser reparados por medio de reparacin

por corte de nucletidos (NER por sus siglas en ingls), en donde un oligonucletido que

contiene la secuencia lesionada, es cortado del ADN. El hueco que se genera por el NER

es posteriormente rellenado por la polimerasa especfica de que se trate. El corte lo lleva

a cabo la endonucleasaUvrABC, utilizando ATP en la reaccin, en Escherichia coli el

hueco es llenado muy probablemente por la ADN polimerasa I, seguido de la accin de

la ligasa. La reaccin de NER en los eucariontes necesita de al menos 16 polipptidos,

puede remover segmentos de entre 24 y 32 nucletidos.

endonucleasa UvrABC

PolI, ADN ligasa

Figura: representacin del sistema NER de reparacin del ADN

La

enfermedad autosmica recesiva

del Xenoderma pigmentosum (xenos:

seca(o); derma: piel), en los humanos se debe a la falta de poder reparador de la piel de

las lesiones causadas por luz UV.

Otra

enfermedad

asociada

con

los

procesos

NER,

de Cockayne que es una variacin del Xenoderma pigmentosum

es

el

sndrome

El

sitio apurinico o apirimidinico o

sitio

AP,

es

removido

por

enzima endonucleasa AP, el hueco es llenado por las ADNpolimerasa I y la ligasa.

Figura: representacin de la reaccin que cataliza la ADN glicosilasa

una

No todas las alteraciones en el ADN tienen consecuencias fenotpicas.

Por ejemplo, las mutaciones en los segmentos no codificantes del
ADN como los intrones y el ADN espaciador son a menudo invisibles.
De manera similar la redundancia en el cdigo gentico puede
enmascarar mutaciones puntuales. En muchos casos an y cuando
exista una mutacin, las protenas conservan su funcin debido a
substituciones conservativas (por el mismo tipo de aminocido o bien
porque la mutacin ocurre en un lugar de la protena no
necesariamente fundamental para la funcin. Por otra parte, una
simple mutacin puntual en el lugar adecuado puede alterar
irreversiblemente
el
metabolismo,
por
ejemplo
causando
cncer. Mas del 80% de los cnceres humanos son producidos por
carcingenos, que son molculas que daan al ADN o bien interfieren
con su replicacin o reparacin. Consecuentemente, muchos
mutgenos son carcingenos.
A la fecha existen alrededor de 60,000 molculas hechas por el
hombre que tienen importancia comercial, cada ao se agregan unas
mil a esta lista. La prueba necesaria para poner a un nuevo frmaco
en el mercado es de entre 3 y 7 aos y varios millones de dlares.

El mecanismo el cual se pierde control de la multiplicacin celular se ha

explicado por medio de dos teoras principales y complementarias:

Teora gentica: esta teora plantea que las alteraciones adquiridas en el

genoma de las clulas somticas, es decir las mutaciones somticas, dan
origen al cncer.

Teora epigentica: sugiere que una alteracin metablica induce la

expresin de algunos genes que originan neoplasia (tumor o cncer). Se
supone que normalmente estos genes estn reprimidos, es decir que no se
expresan.

Los estudios sobre los oncogenes han permitido responder preguntas sobre el
origen y causas de:

las mutaciones espontneas

la prdida de la regulacin de la expresin de algunos caracteres
codificados en el genoma
la accin de los carcingenos
los virus oncognicos
la predisposicin hereditaria a ciertas enfermedades.

En el hombre se han identificado ms de 40 genes cuya funcin est

relacionada directamente con los complejos sistemas de seales que regulan el
crecimiento, la proliferacin y la divisin celular. Estos genes reciben el nombre
de proto-oncogenes, debido a que bajo ciertas condiciones, pueden funcionar
como oncogenes, es decir, como secuencias de ADN que dirigen mecanismos que
llevan a la formacin de neoplasia:
ONCOGENES CONOCIDOS Y NEOPLASIAS ASOCIADAS.
Oncogen

Neoplasia

EGFR

Carcinoma espinocelular

H-RAS

Cncer de colon, pulmn y pncreas

K-RAS

Leucemia mieloide aguda, cncer de tiroides, melanoma

L-MYC

Cncer de pulmn

NEU

Neuroblastoma, cncer de mama

N-MYC

Neuroblastoma

RET

Cncer de tiroides

SRC

Cncer de colon

v-fos

Osteosarcoma

v-jun

Sarcoma

Para convertirse en oncogenes, los proto-oncogenes deben ser activados, es decir, son
modificados por 1.- sustancias qumicas, 2.- radiaciones o bien por 3.- algn

virus. Los mecanismos conocidos son para la activacin de los

oncogenes son los siguientes:
Transduccin.
Un
retrovirus
secuestra
un protooncogen incorporndose al genoma y convirtindose as en
un provirus. El provirus se inserta cerca del proto-oncogen; se produce

laco-transcripcin de la secuencia del proto-oncogn y de la secuencia

viral. El proto-oncogn transcrito se comporta anormalmente cuando
es reintroducido al genoma de otra clula constituyendo as, un
oncogn activado.
Mutagnesis por insercin. La clula es infectada por un virus que
posee un gen promotor; el promotor se inserta en la vecindad de
un proto-oncogn, esta accin ocasiona la prdida de la regulacin
del proto-oncogen, lo cual lleva a la generacin de un oncogn.
Redistribucin cromosmica. Una traslocacin es un evento en el
cual un gen localizado en un cromosoma cambia de lugar para
localizarse en otro cromosoma. Por ejemplo, en el linfoma de Burkitt el
gen c-myc localizado en el cromosoma 8, sale de este para insertarse
en el cromosoma 14, cerca del locus que codifica para la cadena
pesada de inmunoglobulina. Este hecho ocasiona la expresin
excesiva del gen c-myc convirtindolo en un oncogen. Otro ejemplo es
el cromosoma Philadelphia en
este
caso,
el
gen abl que
normalmente se localiza en el cromosoma 9 se inserta en el
gen vcr del cromosoma 22. Los genes vcr y abl se fusionan de manera
que, cuando se transcriben y traducen, se obtiene una protena de
fusin que consta de una parte de la cadena de aminocidos de un
extremo de vcr y la mayor parte o toda la protena abl. Se cree que
esta protena vcr-abl, posee un papel central en la generacin de la
leucemia, pero an no se sabe como acta. Este cromosoma se utiliza
con fines diagnsticos.
Mutaciones puntuales. Alteraciones moleculares en un punto preciso
del proto-oncogen.
Amplificacin: Se ha demostrado que la formacin de mltiples
copias de un oncogn (en particular de la familia erb), est relacionada
directamente con el grado de agresividad del cncer de mama.
Algunos oncogenes codifican para protenas como los factores de
crecimiento, o que participan directamente en la transcripcin o bien
en la replicacin del ADN. De ah que generalmente se acepta que los
oncogenes pueden aumentar:

la produccin de factores de crecimiento


el nmero de receptores para los diversos factores de
crecimiento

la afinidad de los receptores por los diversos factores de

crecimiento

la sensibilidad de la clula a la seal de proliferacin emitida por

la unin de algn(os) factor(es) de crecimiento con su(s) receptor(es).

Si partimos de la idea de que todos los organismos que hoy en da forman

la diversidad de nuestro planeta provienen como lo indica la teora del origen de
las especies de Charles Darwin de organismos precedentes, automticamente
salta una pregunta y es cmo se hicieron los nuevos organismos a partir de los
preexistentes? La respuesta est en la posibilidad de variacin que tiene el
material gentico de los seres vivos. Esta plasticidad se ve manifiesta cuando
ocurre el proceso de mutacin, que en este sentido se entiende como un cambio
en la secuencia de bases del ADN, lo que puede verse reflejado en el fenotipo del
organismo mutado. Estos cambios que generalmente se consideran como dainos
por que los asociamos a terribles enfermedades de origen gentico, son por
supuesto el vehculo de la evolucin biolgica.

El genoma humano con seguridad posee alrededor de 100,000 genes. La

secuencia completa de este genoma, estar lista para el ao 2003. La suma de
varias instituciones principalmente pblicas denominada proyecto del genoma
humano, no es la nica encargada de desarrollar esta empresa, la compaa
privada celera tambin contribuye a la secuenciacin de los alrededor de 300 mil
millones (3X1011 bien 300,000,000,000) de pares de bases.
El cromosoma 1 (la numeracin se refiere al tamao, un nmero mas
grande, supone una estructura mayor) posee 263X10 6 bases. En este cromosoma
se ha encontrado relacin con las siguientes enfermedades genticas:
Hay ms de 80 x 103 genes humanos. La secuencia completa estar lista para el
ao 2003.
Cromosoma 1: 263 x106 bases; Se ha encontrado relacin con las siguientes
enfermedades genticas:
Cataratas, homocistinuria, neuroblastoma,
sndrome
de EhlersDanlos, Rabdomiosacoma, glaucoma, enfermedad de Hirschsprung, exostosas,
sndrome de Schwartz-Jampel,hipofosfatasia, hiperprolinemia, cncer de seno,
sndrome de Bartter, melanoma, cncer de prstata, de cerebro, neuropata
de Charcot-Marie-Tooth,
distrofia corneal y
muscular,eritroqueratodermia,

sordera, porfiria, hipercolesterolemia, displacia, enfermedad de los discos

intervertebrales, limfoma, meduloblastoma,
carcinoma, adenocarcinoma,
enfermedad de maple, amaurosis, leucemia, sndrome de Zellweger, sndrome
de Stickler, sndrome de Marshall, enfermedad de Stargardt, retinitis pigmentosa,
enfermedad
de
almacenamiento
de
glucgeno, fundusflavimaculatus,
osteoporosis,
hipotiroidismo,
sndrome
de Waardenburg, feocromocitoma, suceptibilidad a
la psoriasis, hemocromatosis, picnodisostosis, enfermedad de Gaucher, sndrome
deVohwinkel, eritroqueratoderma,
anemia
hemoltica, eliptocitosis, piropoiquilocitosis, hiperlipidemia, esferocitosis, hiperparat
iroidismo,
esquizofrenia, diatetis hemorrgica, cardiomiopata,
enfermedad
de Dejerine-Sottas, enfermedad crnica granulomatosa, epidermlisis bulosa,
deficiencia
de quitotriosidasa, pseudohipoaldosteronismo, ateroscrlerosis,
sndrome de Sjogren, sndrome de van der Woude, deficiencia del factor de
coagulacin, enfermedad de Rippling, enfermedad de Alzheimer, deficiencia
en fumarasa, sndrome de Chediak-Higashi, sndromeMuckle-Wells, sndrome
de Zellweger, adrenoleucodistrofia, sndrome de Usher, sndrome de KennyCaffeycondrodispacia punctata entre otras.

La traduccin es el proceso mARN dirigido de biosntesis de polipptidos. A pesar

de que la formacin del enlace peptdico es una reaccin relativamente sencilla, la
complejidad del proceso traduccional, que involucra la participacin ordenada de ms de
100 macromolculas, esta determinada por la necesidad de unir 20 diferentes
aminocidos en un orden especfico determinado por un mARN.

El cdigo gentico
Cmo el ADN codifica la informacin?
De acuerdo con la hiptesis de un gen un polipptido, el mensaje gentico
contiene la secuencia de aminocidos de las protenas. La secuencia de bases en el ADN
es el nico elemento variable en este polmero montonamente repetitivo, de tal suerte
que la secuencia de aminocidos en una protena, est especificada por un segmento de
ADN.

Una secuencia de bases en el ADN puede especificar una secuencia de

aminocidos en muchas maneras. Con solamente 4 bases para codificar 20 aminocidos,
un grupo de muchas bases, denominado codon, es necesario para especificar un solo
aminocido. Un cdigo de tripletes (3 bases por codon), es el mnimamente requerido:

# de bases por codon

43 = 64

bases

diferentes tripletes de bases

si fuese un cdigo de dobletes (4 2), solo existiran 16 diferentes dobletes, que son
insuficientes para especificar a todos los aminocidos. Con un cdigo de tripletes, existen
dos posibilidades: a) 44 codones no codifican para aminocidos o b) algunos aminocidos
son codificados por mas de un codon. Desde el punto de vista matemtico, un cdigo
como el descrito en la opcin b, se denomina como redundante.

Otra pregunta interesante, es cmo el aparato de sntesis de protenas traduce

una secuencia de bases en codones?, el cdigo se puede sobreponer:

ABCDEFGHI
ABC puede codificar para un aminocido, BCD para el segundo, CDE para el tercero, etc.
Alternativamente, el cdigo puede ser no sobreponible i.e. ABC especifica
para una aminocido, as como DEF y GHI para otros. Lo anterior significa que el cdigo
contiene puntuacin interna:

ABC,DEF,GHI

en donde las comas representan bases particulares o secuencias de bases. Otra pregunta
relacionada es cmo el cdigo gentico especifica el empiezo y final de la cadena
polipeptdica?

El cdigo gentico est basado en tripletes, es no superponible, est libre de comas y es

redundante

El carcter de tipletes del cdigo gentico, fue estabilizado utilizando mutgenos

qumicos.