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UNIVERSIDAD NACIONAL DE

SAN AGUSTN

FACULTAD DE INGENIERA DE PROCESO

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS


TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE
REMOCIN DE CROMO

INTEGRANTES
1. ALIAGA ROSADO LEIDY LALY
2. BATALLANOS VILCA YESSENIA
3. BOLIVAR HUARACHA YADMANI
4. CANAHUIRE PANDO ROSARIO DEL CARMEN
5. CANDIA MIRANDA BRENDA
6. CHACALTANA DONAYRE CARLOS
7. CHOQUE QUISPE MOISES FRANCISCO
8. CHUCTAYA QUISPE DIANA CAROLINA
9. COAQUIRA MERCADO YULY SANDRA
10. CONDO RAMOS YUDITH MILAGROS
11. HUACHACA CASQUINA ALEXANDRA
12. HUANCA AGUILAR EDGAR
13. MERMA CHUA DENNIS ALVARO
14. MONTES DAS JOHN SEBASTIAN
15. MORALES ARREDONDO LISET
16. SILVA MEZA FLOR MARLENY
17. TACO FLORES ELIZABETH MERCEDES
18. TAPIA FALCON NORMA LITZ
19. TICLLAHUANACO MACHACA GLORIA MIRIAM
20. VENA QUICAO GABRIELA KATHERIN
21. ZELA QUISPE JESSICA DANITZA

DOCENTE
:
Dr.
PAVEL
DELGADO SARMIENTO
CURSO
:
Reactores

Diseo

TURNO : Lunes 9-11 am

de

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE CROMO

Tabla de contenido
RESUMEN

Problemtica
Objetivos

FUNDAMENTOS TERICOS
2.1.
2.2.

Contaminacin del agua


Metales pesados
8

2.3. Tecnologas actuales para el tratamiento de efluentes con cromo y


otros metales pesados
12
2.4. La Melaza 14
3. METODOLOGA EXPERIMENTAL
18
3.1. Procedimiento
18
3.2. Operacin del sistema
.18
Parmetros para realizacin de la practica 18
Toma de muestra 19
CRECIMIENTO BACTERIANO SPEUDOMONA, E. COLI RESPECTO A LA
CONCENTRACION DE CROMO
20
3.4. Mtodos analticos 21
3.5. Diseo experimental

22

4. RESULTADOS EXPERIMENTALES
23
4.1.Programa de statistica SPSS 22

24

5.- CONCLUSIONES
36
5.1.Informe de ensayos 37
6.- BIBLIOGRAFA

40

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE CROMO

RESUMEN

La contaminacin por metales pesados es una problemtica que se


ha ido incrementando a lo largo de los ltimos aos a nivel mundial. En
Per, muchas industrias como son cromadoras, galvanizadoras y mineras,
descargan aguas residuales con contenidos de Cromo que rebasan los lmites
permisibles estipulados por la normativa en la materia vigente. En cuanto a los
sistemas de tratamiento, existen tecnologas para el tratamiento de aguas
residuales con presencia de cromo y otros metales pesados, basadas en
procesos fisicoqumicos.
Todos los reactores mencionados fueron operados hasta alcanzar su
estabilizacin y la remocin de cromo fue evaluada. En total, los
experimentos tuvieron una duracin de 20 das. Los sistemas fueron
dosificados con agua residual sinttica que cumpliera con las caractersticas
de un agua residual sanitaria-industrial convencional y una concentracin de
cromo pre-establecida a travs de bioensayos realizados en estudios previos
para asegurar la supervivencia de las especies vegetales y bacterias de
inters . A todos los reactores se les determinaron parmetros fisicoqumicos
y de metales pesados cada 4 das que era el tiempo de residencia hidrulica,
derivado de las ecuaciones de diseo para humedales artificiales con las
dimensiones estudiadas. Los resultados mostraron que en cada muestra 1
(0,09mg\L), muestra 2 ( 0,03g\L), Muestra 3 0,05 mg\L .

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE CROMO

Problemtica
Al hablar del desarrollo econmico que Per ha presentado en los
ltimos 60 aos, no es posible dejar de lado la influencia del crecimiento
industrial en la economa del pas. Se sabe que la mayora de las industrias
ejercen actividades que contribuyen al deterioro de la calidad de los
elementos que conforman el ecosistema.
Los ejemplos ms trascendentales son la sobreexplotacin de los
recursos naturales y la incorrecta disposicin de los residuos generados
en un proceso productivo. Estos ltimos traen como consecuencia
directa la contaminacin de los cuerpos de agua, el suelo y el aire con diferentes
sustancias de origen antropognico.
Asimismo, el crecimiento exponencial de la poblacin del pas y sus
nuevos hbitos de consumo han provocado que la demanda de agua para
uso y consumo humano tenga el mismo comportamiento. Dicha demanda ha
despertado el inters de la comunidad cientfica por crear, impulsar e
implementar mtodos de tratamiento de aguas residuales domsticas e
industriales, con el fin de poder tratarla y reutilizarla.
Los metales pesados son contaminantes inorgnicos cuya presencia es muy
comn en el agua y el suelo a nivel nacional, ya que diversas industrias (como
son la industria del papel, el uso de los plaguicidas y fertilizantes, y las
industrias que los fabrican, entre otras) los descargan directa e
indirectamente en cuerpos de agua ya que forman parte de los efluentes
de agua residual de sus procesos (Ambilis-Sosa y col., 2013).
La contaminacin derivada de la falta de infraestructura y de
servicios para el manejo y tratamiento adecuado de estas sustancias
inorgnicas ha deteriorado la salud de los acuferos. Los ecosistemas acuticos
han sido contaminados con una gran cantidad de metales pesados provenientes
de diversas actividades de origen antropognico. La contaminacin por
metales pesados puede tener efectos devastadores en los organismos
presentes en los ecosistemas acuticos ya que la presencia de stos afecta
la cadena trfica a travs de procesos de bioacumulacin y
bioconcentracin, causando as una afectacin potencial a la salud y el
desbalance del ecosistema (Vinodhini y Narayanan, 2008).
Los efectos txicos del cromo dependen de su forma qumica, solubilidad,
valencia y concentracin. En los cuerpos de agua es comn encontrar el
cromo en dos estados de oxidacin: Cr(III) y Cr(VI). El cromo hexavalente es
el estado de oxidacin ms nocivo para los organismos vivos, ya que tiende a
acumularse en la cadena trfica provocando graves problemas de salud, los
cuales (dependiendo del tipo y tiempo de exposicin) pueden provocar desde
irritacin y/o ulceracin en la piel y mucosas hasta necrosis renal y/o heptica y

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cncer pulmonar (Nordberg, 2001). Dada la problemtica que representa


el Cr, se han desarrollado nuevas tecnologas basadas en principios
fsicos y qumicos para tratar los efluentes industriales que son vertidos en
los cuerpos de agua con presencia de este metal pesado.

Objetivos
-

Objetivo general
Evaluar el efecto de bacterias tolerantes sobre la eficiencia de remocin de

cromo en aguas artificiales a escala laboratorio.


-

Objetivos especficos
Realizar un estudio comparativo entre la eficiencia de remocin de
cromo

que

presentan

los

sistemas

de

aguas

artificiales inoculados

con bacterias tolerantes y los inoculados con bacterias convencionales


-

de plantas de tratamiento de aguas residuales.


Comparar la eficiencia de remocin de cromo

sistemas de aguas sembrados con dos bacterias o microorganismos.


Identificar los parmetros fisicoqumicos de operacin que estaran
influyendo en la

eficiencia

de

remocin

de

que

presentan

cromo

en

los

aguas

artificiales
Hiptesis
Los sistemas de aguas artificiales inoculados con bacterianas
previamente identificado como tolerante, exhibirn un mejor desempeo en
la remocin de cromo en comparacin con los que se encuentran

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inoculados con bacterias presentes en plantas de tratamiento de agua residual


tpicas.

2. FUNDAMENTOS TERICOS
2.1
Contaminacin del agua
El incremento de la poblacin mundial ha requerido infraestructura para
satisfacer las necesidades de todas las poblaciones. Como consecuencia de ello
se requieren grandes cantidades de agua en actividades de todos los sectores,
desde el cultivo de alimentos hasta la produccin de bienes. Lo anterior resulta
en grandes cantidades de aguas con compuestos qumicos y materia orgnica,
que si no son tratados adecuadamente, terminarn impactando de manera
negativa los cuerpos de agua y los suelos receptores.
La contaminacin de las aguas superficiales es un problema que puede
ocasionar alteracin y destruccin del hbitat, efectos nocivos para la salud,
eutrofizacin, disminucin de poblaciones de peces y otros recursos (Escobar,
2002).
Tabla 1. Contaminantes, procesos y fuentes que afectan la calidad del
agua. (Modificada de Kraemer y col., 2001)

Contaminante
s

Descripcin

Fuentes
Efluentes

Contaminante
s
Se descomponen en el agua y
orgnicos no
disminuyen el oxgeno disuelto,
persistentes
contribuyendo con la eutrofizacin

industriales,
domsticos y
asentamientos
humanos
Efluentes

Son contaminantes inorgnicos de


industriales, centros
suma importancia por ser recalcitrantes
mineros,
a los tratamientos tradicionales

Metales

cromadoras,
precisamente por su alta toxicidad. Se
originan del rpido desarrollo industrial, asentamientos
humanos,

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principalmente alrededor de centros


Pesados

actividades militares,
industriales y mineros. Tambin pueden
industria del papel,
provenir de actividades militares,
curtidura,
escorrentas agrcolas y fuentes no
Puntuales

Galvanoplastia.

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Tabla 1. Contaminantes, procesos y fuentes que afectan la calidad del


agua. (Modificada de Kraemer y col., 2001) (continuacin).
Contaminante
s

Descripcin
Incluyen principalmente formas
qumicas
del nitrgeno y fsforo, que se
relacionan
ntimamente con el fenmeno de

Fuentes

Efluentes
domsticos,

Nutrientes
eutrofizacin. Se originan de desechos
humanos y animales, detergentes y
Escorrentas

Contaminacin Se debe a microorganismos patgenos


como coliformes fecales, amebas y
Microbiolgica
huevos de helmintos

industriales y
escorrenta agrcola

Efluentes
municipales
desechos
domsticos no
tratados y criaderos
de animales

Compuestos qumicos industriales,


dioxinas, plsticos, plaguicidas
agrcolas,
hidrocarburos de petrleo,
hidrocarburos

Fuentes industriales
provenientes de la
fabricacin de
explosivos,
plaguicidas, pinturas

Compuestos
aromticos policclicos, compuestos

y plsticos, entre

orgnicos persistentes, disruptores

otras. Otras fuentes

endocrinos, cianotoxinas y compuestos


rgano-estnicos de pinturas
Antinscrustantes

de estos
contaminantes son
los asentamientos
humanos y la
escorrenta agrcola

Txicos
Orgnicos

Son sustancias peligrosas no removidas


Compuestos
necesariamente por los tratamientos
qumicos traza convencionales y han sido reconocidos
y compuestos

Industria qumica y
farmacia. Desechos

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con disruptores endocrinos y

hospitalarios

Farmacuticos
Carcinognicos
6

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CROMO

En el siguiente apartado se detallan las caractersticas fisicoqumicas que


describen a los metales pesados, as como las implicaciones ambientales y
de salud pblica que genera su presencia en efluentes industriales sin un
adecuado tratamiento.
2.2.

Metales pesados

Se denominan metales pesados a aquellos metales cuya densidad es mayor


a 5 gcm-3 y tienen una masa molecular entre 63.5 y 200.6 gmol -1. Existen
excepciones ya que algunos metaloides son considerados metales pesados
por sus caractersticas qumicas o de tratamiento (Jimnez, 2001).
Una de las caractersticas ms importantes de los metales pesados es su
alta toxicidad, adems de su naturaleza inorgnica que le confiere
caractersticas no biodegradables, por lo que tienden a acumularse en los
seres vivos (Srivastava y Majumder, 2008).
La causa principal del elevado nivel de toxicidad es que los metales pesados
poseen una gran capacidad para unirse con molculas orgnicas. Su accin
directa sobre los seres vivos radica en el bloqueo de las actividades
metablicas, con nfasis en la activacin enzimtica por la formacin de
enlaces entre el metal y los grupos SH (sulfhidrilos) de las protenas,
causando daos irreversibles en los organismos (Vullo, 2003). Los efectos a
la salud humana varan dependiendo de cada metal y van en un rango
desde problemas gastrointestinales y pulmonares hasta cncer en el caso
del nquel (Borba y col., 2006) o dao al sistema nervioso central en el caso
del mercurio y plomo (Namasivayam y Kardirvelu, 1999; Naseem y Tahir,
2001).
La presente investigacin se centra en el cromo debido a la incorrecta
disposicin de los residuos provenientes de industrias como la
galvanoplastia, cromadoras y curtidura que se llevan a cabo en Mxico. Las
caractersticas toxicolgicas y ambientales particulares del cromo se
describen en el siguiente apartado.
2.2.1. El cromo, su toxicidad e importancia ambiental:
El cromo se encuentra distribuido en todo el planeta en forma mineral, ya
que no existe en estado elemental en la naturaleza.
La toxicidad del cromo se encuentra en funcin a su estado de oxidacin
siendo el catin ms txico el Cr(VI). Sin embargo, es el de mayor uso
en la industria por sus propiedades cidas y oxidantes . El Cr(VI)
forma parte de las sales hexavalentes, las cuales son solubles y
permeables a las membranas celulares. Estas sales se absorben
rpidamente y en gran cantidad por tres diferentes vas: inhalacin,
gastrointestinal y cutnea. Es sumamente carcinognico,
mutagnico y teratognico. Se ha demostrado que es 100 veces ms
txico y 1000 veces ms mutagnico que la forma trivalente. En solucin, el
cromo hexavalente existe como hidrocromato (HCrO4-), cromato
(CrO42), y dicromato (Cr2O72-). La abundancia de cada in depender del
pH del medio en el que se encuentre. incrementndose a valores de pH

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CROMO

bsico, el cual cuando llega a pH 13 da lugar a formas de Cr(VI) en


condiciones reductoras.
Es un metal que se utiliza ampliamente en metalurgia para aportar
resistencia a la corrosin y un acabado brillante. El cromo metlico se
utiliza para la fabricacin de acero, en tanto que sus formas hexavalente y
trivalente se usan para cromados, fabricacin de pinturas y pigmentos,
curtido de cueros, catalizadores y conservador de.
El Cr(VI) presenta una gran movilidad en el suelo y agua. An a
bajas concentraciones en estos sustratos, puede provocar dao en tejidos
animales y vegetales. Se absorbe fcilmente por inhalacin, ingestin y
contacto con la piel y mucosas.
Al no ser degradable, el cromo se acumula en los tejidos de los
organismos, desencadenando el fenmeno de bioacumulacin que, a travs
de la cadena trfica, produce el efecto de biomagnificacin.
En este sentido, en la entidad conocida como ATSDR (2008) se
describen los efectos txicos ocasionados por el Cr(VI) en
humanos, los cuales se mencionan a continuacin:
1. La respiracin de niveles altos de Cr(VI) causa irritacin de la nariz,
hemorragias nasales, lceras y perforaciones en el tabique nasal.
2. La ingestin produce malestar estomacal, lceras, convulsiones, dao
del hgado, rin y, a ciertas concentraciones, causa la muerte.
3. En contacto con la piel, causa irritacin y ulceraciones.
Aunado a los efectos mencionados, la Agencia Internacional para la
Investigacin del Cncer (IARC por sus siglas en ingls) de la Organizacin
Mundial de la Salud (OMS) ha determinado que el Cr(VI) es cancergeno
para los seres humanos (IARC, 1997). A pesar de los efectos txicos del
cromo que se han venido mencionando, existen en el pas numerosas
industrias generadoras de aguas residuales con contenidos de este metal,
de las cuales a continuacin se describen las ms representativas.
2.2.2. Industrias que producen cromo como residuo:
La Norma Oficial NOM-001-SEMARNAT-1996 (DOF, 2003) establece que el
lmite mximo permitido para la concentracin del cromo total vara
entre 0.5 y 1 mgL-1 como promedio mensual y entre 1.0 y 1.5 miligramos
por litro como promedio diario, dependiendo del cuerpo receptor. No
obstante la normativa mencionada, existen numerosas industrias a lo largo
del territorio nacional que vierten sus efluentes sin tratamiento previo
y con altas concentraciones de metales pesados a cuerpos de agua
subterrneos y superficiales.
Tabla 2. Concentraciones de cromo total en efluentes de industrias mexicanas

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CROMO

Con toda la problemtica del cromo y otros metales pesados que se


ha venido describiendo, se han implementado tecnologas de
tratamiento sobre todo para efluentes industriales. A continuacin se
describen algunos de estos tratamientos.

REDUCCIN DEL CROMO VI


La reduccin biolgica de Cr (VI) a Cr (III) permite considerar a los
microorganismos como una herramienta biotecnolgica para el tratamiento
de las aguas residuales contaminadas con cromatos, puede ocurrir bajo
condiciones aerbicas o anaerbicas y puede estar asociada a la fraccin
soluble o a la membrana celular. Por consiguiente, la reduccin extracelular
o periplsmica de Cr (VI) a Cr (III), que genera un compuesto impermeable y
no txico a nivel extracelular, puede ser considerada como un mecanismo
de resistencia a cromato. En bacterias, los mecanismos de resistencia a
cromato pueden ser codificados por genes plasmdicos o cromosmicos. Los
sistemas de resistencia codificados en el cromosoma se han relacionado
generalmente con la reduccin extracelular del Cr (VI) a Cr (III), tanto por
enzimas especficas como no especficas..
REDUCCIN ENZIMTICA DEL CROMATO
La reduccin del cromato se ha descrito en diversas especies bacterianas,
aunque slo unas pocas enzimas han sido caracterizadas. Ishibashi y col
sugirieron que las Cr (VI) reductasas pueden tener un papel primario
diferente a la reduccin de Cr (VI) y que esta segunda funcin adquirida de
las Cr (VI) reductasas puede relacionarse con el reciente incremento del Cr
(VI) en el ambiente. As, varias Cr (VI) reductasas han sido caracterizadas en
el contexto de sustratos alternos estas enzimas frecuentemente muestran
actividad de NADH: flavn oxidorreductasas.

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CROMO

La bacteria de E. coli, reduce cromato a travs de la formacin de un


complejo de Cr (III) con el cofactor NAD. Esta interaccin puede estar
relacionada con la notoria capacidad del Cr (III) para formar aductos con el
DNA. En conclusin, la reduccin de Cr (VI) parece ser una estrategia
importante de resistencia a cromato en bacterias, aunque el uso de
sustratos alternos, adems del Cr (VI), sugiere que la actividad de reduccin
de este in en los microorganismos es un mecanismo de adaptacin
enzimtica ocasionada por la creciente exposicin a cromato.
BIORREMEDIACIN DE CROMATO
A diferencia de los herbicidas, los pesticidas y otros compuestos txicos que
pueden degradarse biolgicamente, los metales pesados como el Cr no
pueden ser eliminados y permanecen en los suelos o sedimentos, donde se
liberan lentamente al agua. La remocin de cromato de agua contaminada
se ha realizado tradicionalmente a travs de la reduccin de Cr (VI) a Cr (III)
por mtodos qumicos o bioqumicos, seguidos de la filtracin/
sedimentacin. Sin embargo, la eliminacin del cromato por estos mtodos
resulta costosa e ineficiente A partir de que se ha encontrado que una gran
cantidad de microorganismos aislados, tanto de sitos contaminados con
cromato como de ecosistemas naturales no contaminados, con capacidad
para reducir Cr(VI), estos organismos han sido propuestos como alternativas
biotecnolgicas para la biorremediacin de la contaminacin por cromato.
En este contexto, se ha propuesto que esta enzima ChrR puede convertir a
E. coli en una bacteria eficiente para la remediacin de cromato. En sntesis,
es previsible en un futuro cercano, el uso de los microorganismos ya sea
nativos o modificados genticamente, para favorecer la remocin del Cr (VI)
de ambientes contaminados.

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CROMO

2.3 Tecnologas actuales para el tratamiento de efluentes con


cromo y otros
metales pesados:
2.3.1 Tecnologas fsicas:
2.3.1.1 Biosorcin (biomasa muerta): La utilizacin de
microorganismos como materia prima biosorbente de metales
pesados, ofrece una alternativa potencial a los mtodos ya
existentes para la desintoxicacin y recuperacin de metales
txicos o valiosos, presentes en aguas residuales industriales.
Muchas levaduras, hongos, algas, bacterias y cierta flora
acutica tienen la capacidad de concentrar metales a partir
de soluciones acuosas diluidas y de acumularlas dentro
de su estructura.
Los
microorganismos
utilizados
como biosorbentes
retienen los metales pesados a intervalos de tiempo
relativamente cortos al entrar en contacto con soluciones de
dichos metales. Esto puede minimizar los costos en un
proceso de remediacin, ya que no requiere el agregado de
nutrientes al sistema, por no requerir un metabolismo
microbiano activo.
2.3.1.2 Adsorcin: Actualmente la adsorcin es una opcin
econmica y efectiva para el tratamiento de metales
pesados en las aguas residuales. El carbn activado es la
principal materia prima utilizada por este mtodo, dada su
gran rea superficial . Sin embargo, en la actualidad se
experimenta el agotamiento de la fuente del carbn
activado comercial, propiciando que se incremente su precio de
adquisicin, por lo que se empieza a limitar su utilizacin como
adsorbente .
2.3.1.3 Filtracin con membranas: La filtracin con membranas
es una tecnologa que puede remover los iones de metales
pesados con gran eficiencia, pero es sumamente costosa y
compleja en su funcionamiento y operacin, aunado a que
con el transcurso del tiempo presenta ensuciamiento o
colmatacin, que da lugar a un bajo flujo por unidad de
rea o flux en ingls debiendo ser cambiada
peridicamente convirtindose en un desecho del cual debe
disponerse adecuadamente.
2.3.2 Tecnologas qumicas:
2.3.2.1 Precipitacin qumica: Consiste en la adicin de un agente
qumico al agua residual con la finalidad de que el metal
precipite en forma de flculos. Los agentes floculantes ms
utilizados son carbonatos e hidrxidos de sodio y calcio y

10

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CROMO

sulfuro de hierro. Los flculos (hidrxidos, sulfuros o carbonatos


metlicos) son el resultado de la reaccin de las mencionadas
sales con los metales contenidos en el agua residual .Este
mtodo de tratamiento es el ms utilizado en el sector industrial.
La gran desventaja de este mtodo, es la adicin de agentes
qumicos que al momento de precipitar con los metales
pesados, generan lodos txicos de baja densidad, haciendo
ms complicada la disposicin final de stos como residuos
peligrosos.
Adems, cabe destacar que el proceso de precipitacin
con sulfuros es peligroso, ya que los iones metlicos en
soluciones cidas pueden evolucionar a H2S que es un gas
txico, aunado a que los sulfuros metlicos tienden a
formar precipitados coloidales, lo cual puede provocar
problemas en las etapas de sedimentacin .
2.3.2.2 Electroqumica/intercambio inico: El proceso de
intercambio inico para la remocin de metales pesados en
aguas residuales, ha sido utilizado por muchas industrias,
ya que presenta atractivas ventajas como la capacidad para
tratar grandes volmenes de agua y altas eficiencias de
remocin. No obstante, las ventajas que se mencionan se
refieren a la utilizacin de resinas sintticas (Alyz y Veli,
2009), que son sumamente costosas.
Buscando resinas alternativas a las resinas sintticas,
se han hecho investigaciones utilizando resinas inorgnicas
de origen natural como la zeolita. Sin embargo, la capacidad
de remocin de metales pesados de las zeolitas es limitada
en comparacin con las resinas inorgnicas sintticas,
adems de que an se necesita mucho trabajo para la aplicacin
de zeolitas a escala industrial (Doula, 2009).
2.3.3 Tecnologas biolgicas:
2.3.3.1 Fitorremediacin: Se basa en la capacidad de
absorcin, acumulacin, volatilizacin y estabilizacin de la
vegetacin para eliminar, retener o disminuir la toxicidad de
contaminantes del suelo o del agua. El objetivo final de la
fitorremediacin no es solamente eliminar o reducir el
contaminante, sino su recuperacin como materia prima .
2.3.3.2 Estudios microbiolgicos relacionados con la remocin
de metales pesados: En paralelo a la fitorremediacin,
existen trabajos con bacterias tolerantes a los metales
pesados presentes en aguas residuales.Al respecto, se han
realizado estudios recientes, en los cuales se han encontrado
bacterias rizosfricas con tolerancia a altas concentraciones de
metales pesados. Estos estudios sugieren la posibilidad de la

11

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

remocin de metales pesados en sistemas de tratamiento


secundario, en especial en los humedales artificiales de
flujo subsuperficial por las caractersticas funcionales y
constructivas que poseen, basadas en tres principios
bsicos: la actividad bioqumica de microorganismos, el
aporte de oxgeno a travs de la vegetacin durante el da
y el apoyo fsico de un lecho inerte que sirve como soporte
para el enraizamiento de las hidrfitas, y para el desarrollo de
los microorganismos en forma de biopelcula.
2.4.3.2 Plantas
El papel de la vegetacin en los humedales est determinado
fundamentalmente por las races y rizomas. Las plantas son organismos
fotoauttrofos, es decir, que captan la energa solar para transformar el
carbono inorgnico en carbono orgnico.
Tienen la habilidad de transferir oxgeno a travs de hojas y tallos hasta
el medio donde se encuentran las races. Este oxgeno crea regiones
aerobias donde los microorganismos utilizan el oxgeno disponible para
producir diversas reacciones de degradacin de materia orgnica y
nitricacin. Adems, autores como Ansola y col. (2003); Avsar y col.
(2007) y Grisey y col. (2011); sealan la remocin de metales pesados
por fitorremediacin en sus diferentes investigaciones.
Tabla 3. Remocin de nutrientes por parte de las plantas ms utilizadas

Gner
o
Typh
a
Juncu
s
Scripus
Phragmites
Phalaris
Glyceria
Eichhornia
Hydrocotyle
Lemm
a

Biomasa
desarrollada
Remoci
n
5740-93390
7960-53300
7850-46000
1830-60000
8000-35000
9000-28600
80,000-110000
4000-60000
6000-26000

Nitrgeno
Remoci
n

Fsforo
Remoci
n

111-2630
800
125775
750-2450
801200
751500
420-5850
540-3200
350-6110

8400
110
18150
25199
23140
50425
105-1260
130-770
116-800

2.4.3.3 Microorganismos
Como en todo sistema de tratamiento biolgico o secundario, los
humedales artificiales contienen microorganismos que, para sus
funciones metablicas, emplean la materia orgnica como fuente de
carbono y energa. Para este tipo de sistemas, las bacterias se
desarrollan en forma de biopelcula, dado el medio de soporte y las
-2 -1
cargas orgnicas bajas que lo caracterizan (3- 30 kgDQOm
d )
(Muratova y col., 2003).

12

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

Finalmente, la interaccin entre las bacterias y la vegetacin presente en


los humedales artificiales como sistema de tratamiento propicia
mayores eficiencias de remocin de diferentes contaminantes tanto
orgnicos como inorgnico.
2.4 La Melaza
La melaza es conocida como un producto lquido el cual se obtiene de la
caa de azcar. Tambin se le conoce como miel de caa. Posee una
apariencia relativamente parecida a la miel, pero su color es un poco ms
oscuro, casi negro.
La melaza tiene un sabor dulce, parecido
al regaliz pero con un toque amargo. A su
vez, tiene un alto contenido nutrimental
de hidratos de carbono, as como
vitaminas del grupo B, minerales, y un
bajo contenido de agua.

Los azucares que constituyen la melaza: sacarosa, glucosa, levulosa,


maltosa, lactosa y azucares reductoras.
2.5.1 Composicin
La composicin de las melazas es muy heterognea y puede variar
considerablemente dependiendo de la variedad de caa de azcar, suelo,
clima, perodo de cultivo, eficiencia de la operacin de la fbrica, sistema de
ebullicin del azcar, tipo y capacidad de los evaporadores, entre otros. Por
otro lado, la melaza de caa se caracteriza por tener grados Brix slidos
disueltos de 68- 75% y un pH de 5.0- 6.1% (Castro, 1993).

Otra de las aplicaciones de la melaza es mantener una buena cantidad de


bacterias no patgenas, restando el espacio a bacterias patgenas (vibrios),
ya que la idea es que los organismos no patgenos tienen preferencia por
los azucares como fuente de carbohidratos y por competencia excluiran a
los patgenos.

La explicacin radica en ciertas caractersticas bioqumicas de las bacterias


que constituyen el gnero Vibrio, por ejemplo; el V. parahaemolyticus no
puede utilizar la sacarosa; mientras que otras bacterias, aparentemente
menos patognas, pueden utilizar el azcar as como tambin los altos
niveles de nutrientes (urea o nitrato) para su crecimiento, proliferacin y
competir a la vez con V. parahaemolyticus, por otros nutrientes disponibles
y necesarios para su crecimiento.

13

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

Composicin qumica de la melaza (Tllez 2004)

2.5.1.1 Azcares

Los principales azcares en la melaza son la sacarosa (60% - 63% en peso),


la glucosa o dextrosa (6% - 9% en peso), y la fructosa o levulosa (5% - 10%
en peso); estas dos ltimas constituyen la mayor porcin de los azcares
reductores

encontrados

en

los

anlisis.

La

fructosa

puede

sufrir

transformaciones al igual que la glucosa, debido a reacciones dependientes


de la temperatura. El contenido de glucosa y fructosa en las melazas puede
variar a causa de la hidrlisis de la sacarosa, a valores de pH cido y a
temperaturas altas (Castro, 1993).
2.5.1.2 No azcares
Los no azcares estn compuestos por 33% de sustancias inorgnicas (Fe ++
+

, K+, Na+, Ca2+, Mg2+, Zn2+, As3+, Cd2+, Hg+, Pb+ y Cl-, NO3-, SO2-); el 42%

corresponde a sustancias nitrogenadas (aminocidos, pptidos, colorantes);


y el 25% a sustancias orgnicas libres de nitrgeno (cidos carboxlicos,
alcoholes, fenoles, steres, vitaminas, gomas y dextranos) (Castro, 1993).
2.5.1.3
En

general

Cenizas
la

composicin

de

las

cenizas

de

las

melazas,

es

cualitativamente similar a la del jugo, del cual se obtiene stas. Casi todos

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

los anlisis publicados, muestran que el contenido de potasa vara alrededor


de 40% del peso del carbono total de la ceniza; el contenido de cal es de
10% al 20%, el de sulfatos vara entre el 10% y el 20%, y las sales de
magnesio, sodio, aluminio, la slice, los cloruros, fosfatos y los xidos de
hierro, completan el resto del contenido de cenizas (Castro, 1993).
2.5.1.4

Compuestos nitrogenados

Estn constituidos principalmente por aminocidos mono y dibsicos,


amidas cidas, betanas y pequeas cantidades de peptonas y nitratos.
Cuando los azcares reductores, glucosa y fructosa, son sometidos a los
procesos de clarificacin, en el tratamiento subsiguiente, se producen varias
reacciones, siendo la ms importante la de los aminocidos con estos
azcares, en la cual se forman productos coloreados como las melanoidinas
y los residuos
fermentables a los cuales se les ha encontrado un contenido aproximado de
68% de nitrgeno combinado, en melazas.
El Nitrgeno total de las melazas, vara entre 0.4% y 1.5% del peso total de
la melaza. La protena cruda frecuentemente se determina como porcentaje
en peso del contenido de nitrgeno (Castro, 1993).
2.5.1.5
cidos
El cido acontico, es el ms abundante de los cidos orgnicos presentes
en la caa que se acumula en las melazas, representando aproximadamente
el 6% del peso de slidos en la melaza. Los cidos mlico y ctrico estn
presentes en cantidades apreciables en las melazas. El cido Frmico est
presente como producto de descomposicin; la mayora de estos cidos son
metabolizados por los microorganismos, como fuente de carbono y no
presentan problemas de inhibicin de crecimiento (Castro, 1993).
2.5.1.6

Vitaminas

Aquellas vitaminas resistentes a la accin del calor y de los lcalis, aparecen


encontradas en las melazas. La niacina, cido pantotnico y riboflavina,
importantes para el crecimiento microbiano, pueden estar presentes en
cantidades significativas y otras vitaminas lo estn en cantidades muy
pequeas (Castro, 1993).
2.5.1.7

Fenoles y Compuestos voltiles

14

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

Los fenoles presentes en las mieles finales, provienen de la parte fibrosa de


la

caa,

stos

se

derivan

de

los

cidos

hidroxicinmico

parahidroxibenzico.
Es necesario tener en cuenta, que desde el punto de vista de la
fermentacin, algunos fenoles son indeseables, por presentar actividad
inhibitoria sobre el crecimiento de los microorganismos, a concentraciones
de

15

0.5g/L. Los cidos fenlicos que mayor actividad bacteriosttica han


demostrado son el cloragnico, el p-cumrico y el telrico; estos dos ltimos
son

capaces

de

inhibir

totalmente

el

crecimiento

de

algunas

bacterias(Castro, 1993).

3. METODOLOGA
3.1.

Procedimiento

Se utilizaron 9 reactores a partir de botellas de PVC de capacidad de


3 litros cada uno. De E.Coli. Las definidas como bacterias
convencionales fueron inoculadas directamente en los reactores a
partir de agua residual de la planta de tratamiento de aguas
residuales de la UNAM y se identificaron con la letra S. Las bacterias
presentes en las aguas residuales convencionales son principalmente
bacilos y cocos Gram positivos y Gram negativos de muy diversos
gneros (Metcalf y Eddy (2003).

Recojo de las muestra de agua para el estudio del crecimiento de


las bacterias para la remocin del Cobre. Medimos 1litro de
melaza para nuestra mezcla .

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

Medicin de 1 litro de bacterias y 18 litros de agua sin cloro


(muestra de agua de sequia)

Mezcla
de la muestra de agua , melaza , bacteria y solucin
madre de Cr

Se

16

mezcl hasta
conseguir una
mezcla homognea

Se realiz la activacin del (5%)


de la bacteria con la melaza.
De 5 a 7 das para activar la
melaza y se deposit en
botellas cerradas .Se necesita
llegar a la meta de a,5 mg /l
de Cr lmites permitidos en el
agua .
Un aproximado de 21 L de
solucin .

17

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

3.2. Operacin del sistema


Agua de alimentacin
Se utilizaron aguas de alimentacin sintticas con diferente composicin
pero sin cloro pues este cloro evitara la desnaturalizacin de las
bacterias , la cual dependi de la fase experimental. La primera fue
empleada en la fase de estabilizacin en funcin de la colonizacin y la
segunda en la etapa de remocin de cromo.

1.1.1.

Parmetros para realizacin de la practica

Cr+6 = 0.5 mg/l


Cr+3 = 5 mg/l
K2Cr2O7 = 294 g/mol
Cr2 = 104 g
X1 =

[ Cr+6 ] mg /l=5

X2 = , das = 23 19
X3 = Bact/ml = 400-300

#
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

X1
+
+
+
+
0
0
0

X2
+
+
+
+
0
0
0

X3
+
+
+
+
0
0
0

Cr
5
3
5
5
3
3
5
3
4

23
23
20
23
20
23
20
20
21.5

B
400
400
400
300
400
300
300
300
350

Y
I
II

III

Toma de muestras
La toma de muestras se llev a cabo segn el tiempo de residencia
hidrulico descrito. Para ello se utilizaron frascos de plstico previamente
lavados y esterilizados con capacidad de 50 mL. Este volumen de muestra
fue repartido para las determinaciones de demanda qumica de oxgeno
(DQO), slidos suspendidos totales (SST) y cromo total. Diariamente se
midieron los parmetros fisicoqumicos de potencial de hidrgeno (pH),
potencial xido reduccin (pOR) y temperatura (T).

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

Fechas para la toma de muestras:

18

4 julio
8 julio
6 julio

CRECIMIENTO BACTERIANO SPEUDOMONA, E. COLI RESPECTO A LA


CONCENTRACION DE CROMO

cantid
ad de
bacter
ias
(ml)
(dias)
400
23
400
23
400
19
300
23
400
19
300
23
300
19
300
19

[Cr6+ ]
5
3
5
5
3
3
5
3

max
=5
K=200

C bact (S)

tiempo

400

23

400

23

400
300

19
23

400
300
300
300

19
23
19
19

=dN/dt*
N
/max
3.333333
33 0.66667
3.333333
33 0.66667
3.333333
33 0.66667
3 0.60000
3.333333
33 0.66667
3 0.60000
3 0.60000
3 0.60000

C bact
(S)

/max
0.60000

300

0.60000

300

0.60000
0.60000

300
300

0.66667
0.66667
0.66667
0.66667

400
400
400
400

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

3.2.1.1. Influente
estabilizacin

para

la

fase

de

inoculacin

y
19

-1

Se utiliz una concentracin de DQO de 300 mgL a partir de sacarosa


(Melasa) para el crecimiento de los microorganismos, esta concentracin fue
calculada a partir de los valores tpicos para aguas residuales (Davis y
Cornwell, 1998; Metcalf y Eddy, 2003), los cuales son sealados en la Tabla
5. De igual manera, el influente contena una fuente de nitrgeno (30 mgL 1
), de fsforo (6 mgL-1) y de potasio (30 mgL1), utilizando sulfato de amonio
(NH4SO4), fosfato de sodio (Na 3PO4) y nitrato de potasio (KNO 3),
respectivamente, destacando que esta relacin de nutrientes coincide con
los requerimientos de los organismos auttrofos utilizados (Ordua, 2012).
Tabla 5. Valores tpicos de aguas residuales domsticas. Modificada de Davis y Cornwell,
(1998); Metcalf y Eddy (2003)

Composicin tpica de aguas residuales domsticas no tratadas


Baja
Media
Fuerte
Componente

(mgL-1 excepto cuando se indique otra unidad)

DBO5
DQO

100
250

200
500

300
1000

Slidos suspendidos

100

200

350

10

20

200

500

1000

20

40

80

10

20

Slidos
sedimentables, mLL
Slidos totales

-1

Disueltos
Nitrgeno Kjeldahl
Total
Fsforo total

3.2.1.2. Influente para la fase de remocin de cromo

Se utilizaron las mismas concentraciones para DQO y fuentes de nitrgeno,


fsforo y potasio que en el apartado 3.2.1.1.
Adicionalmente, a esta solucin le fueron aadidas las cantidades de sales
necesarias de dicromato de potasio (K2Cr2O7) para conseguir la
concentracin de
Cr a probar en el experimento, la cual es de 13 mgL -1. Esta concentracin
surge de los estudios previos de Ambilis-Sosa y col. (2013), los cuales

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CROMO

estipulan la concentracin inhibitoria media para bacterias y plantas


consideradas en el presente estudio. Adems es aplicable para efluentes de
algunas industrias relacionadas con la contaminacin de cromo.
20

19

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CROMO

3.4. Mtodos analticos


Tabla 6. Mtodos analticos utilizados en las determinaciones de los
parmetros empleados durante las fases experimentales
Determinacin

Referencia

Fundamento
Una gran cantidad de

Demanda qumica
de oxgeno

NMX-AA-030/1-SCFI2001. ANLISIS DE

compuestos
orgnicos
inorgnicos son oxidados con
una mezcla de cido crmico y

AGUA DETERMINACIN DE

Sulfrico
aebullicin.
muestra se coloca a reflujo en

LA DEMANDA

una disolucin de cido fuerte

QUMICA DE
OXGENO EN AGUAS
NATURALES,

con un exceso conocido de


Dicromato
de
potasio
(K2Cr2O7).
d
e
Despus de la
e digestin, l

RESIDUALES
Y RESIDUALES
TRATADAS

dicromato no reducido se mide


espectrofotomtricamente para
l
Determinar
a cantidad

L
a

de

(DOF,2013)
dicromato consumido y calcular
la materia oxidable en trminos
de oxgeno equivalente
PROY-NMX-AA-051/5-

Cromo

SCFI-2008. ANLISIS
DE AGUA DETERMINACIN DE
METALES POR
ABSORCIN
ATMICA EN AGUAS
NATURALES,
POTABLES,
RESIDUALES Y
RESIDUALES
TRATADAS
(DOF, 2009)

El
mtodo
para
La determinacin de metales por
espectrofotometra de
absorcin atmica se basa en
la generacin de tomos en
estado basal y en la medicin
de la cantidad de energa
absorbida por estos, la cual es
directamente proporcional a la
concentracin de ese elemento
en la muestra analizada

21

INFORME DEL EFECTO DE BACTERIAS TOLERANTES SOBRE LA EFICIENCIA DE REMOCIN DE


CROMO

3.5. Diseo experimental y manejo de datos


Como se ha venido mencionando, los parmetros que fueron
determinados para el presente proyecto fueron DQO, cromo total, SST,
pH, pOR y temperatura. Para cada uno de estos, fue aplicado un
anlisis estadstico basado en el diseo experimental mostrado en la
Tabla 7.
En la Tabla 7 se observa que se obtuvo por duplicado cada una de las
variables respuesta (parmetros cuantificados) en funcin de los
factores tipo de planta y tipo de bacterias.
Tabla 7. Diseo experimental seguido en el presente trabajo de
investigacin
cantidad de
MUESTR
bacterias
A
x1
x2
x3
(ml)
(dias)
1
1
1
1
400
23
2
3
4
5
6
7
8
Fuente propia

-1
1
1
-1
-1
1
-1

1
-1
1
-1
1
-1
-1

1
1
-1
1
-1
-1
-1

400
400
300
400
300
300
300

23
19
23
19
23
19
19

[Cr6+ ]
5
3
5
5
3
3
5
3

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22

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4.- Resultados experimentales


4.1 PROGRAMA DE STATISTICA SPSS 22

EN VISTA DE VARIABLES
23

EN VISTA DE DATOS

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5.- CONCLUSIONES

35

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El Cr(VI) tiene un efecto inhibitorio sobre el


crecimiento bacteriano, el cual es
directamente proporcional a la concentracin del in en el medio de
cultivo.
Al parecer, los medios complejos favorecen tanto el crecimiento como
la disminucin de cromo.
Todas las cepas bacterianas probadas tienen la capacidad de
disminuir la concentracin de Cr(VI) en el medio de cultivo.
Para un ptimo crecimiento micro bacteriano se debe de
considerar la muestra de agua sin cloro. Pues este inhibe su
crecimiento.

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Wastewater. 20th Edition. American Public Health Assoc., New York.
3. Chandra, P. & Kulshreshtha, K. (2004). Chromium accumulation and
toxicity in aquatic vascular plants. Botan. Rev.: 70(3), 313-327.
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bioreactors for the removal of Cr(VI) and organic matter from industrial
effluent. Biochem. Eng. J.: 44, 174-186.
5. Fukai, R. (1967). Valency state of chromium in seawater. Nature
(London): 213, 901.
6. Gadd, G.M. & White, C. (1993). Microbial treatment of metal pollution: a
working biotechnology. Trends in Biotechnology: 11, 353-392.

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