En la medicin espectrofotomtrica se establece en la transmisin de la luz a

travs de un procedimiento para comprobar la concentracin de un soluto presente

en la misma. El aparato funciona conforme a un principio sencillo: se irradia una
muestra con una radiacin luminosa de longitud de onda conocida y se mide la
energa luminosa transmitida con una clula fotoelctrica situada detrs de la
muestra.
La prctica se realizo de manera virtual en el cual entramos a una pgina
(http://biomodel.uah.es/lab/inicio.htm) en donde procedemos a realizar de forma
didcticas la prctica de laboratorio y llamada Espectros de absorcin ultravioleta
de protenas y cidos nucledos. Tambin en ella digitalizamos los datos que se
nos administran en la prctica y procedemos a sacar unos resultados los cuales
mostraremos mas delante de forma numrica y grficamente.
La cantidad y pureza de los cidos nucleicos en una preparacin puede
estimarse mediante espectrofotometra. La absorcin a 260 nm permite
calcular
su concentracin: 1 unidad de absorbancia (UA) corresponde aproximadamente
a
50 g/mL para DNA de cadena doble y 40 g/mL para DNA de cadena simple y
RNA. El cociente A260/A280 da una estimacin de la pureza de los cidos
nucleicos:
una preparacin pura de DNA y RNA tiene un valor de A260/A280 de 1,8 y 2,0
respectivamente. Valores significativamente menores indican contaminacin
con
protenas o fenol, y, por consiguiente, no ser posible cuantificar con precisin
la
cantidad de cidos nucleicos.
Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para
reconocer las sustancias qumicas;
al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin se puede
estudiar la absorcin de
sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino tambin en
ultravioleta e infrarrojo.
Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa
radiante que absorbe un
sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las
mediciones a una
determinada longitud de onda.
La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo
de cuantos de
energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda est asociada
con los fotones, cada
uno de los cuales posee una cantidad definida de energa.

Una cubeta o cubeta de espectrofotmetro es un pequeo tubo de seccin circular o cuadrada,

sellado en un extremo, fabricado en plstico, vidrioo cuarzo (transparente a la luz ultravioleta) y
diseado para mantener las muestras durante los experimentos de espectroscopia.1 Las cubetas
deben ser tan claras o transparentes como sea posible, sin impurezas que puedan afectar a una
lectura espectroscpica. Al igual que un tubo de ensayo, una cubeta puede estar abierta a la
atmsfera por la parte superior o tener una tapa para sellarla. Tambin se puede
utilizar Parafilm para sellarla.