Professional Documents
Culture Documents
Teora celular
Todos los seres vivos estn formados por clulas o por sus
productos de secrecin. La clula es la unidad anatmica de la
materia viva, por lo que una clula puede ser suficiente para
constituir un organismo.
Todas las clulas proceden de clulas preexistentes, por divisin
de stas .
Las funciones vitales de los organismos ocurren dentro de las
clulas, o en su entorno inmediato, controladas por sustancias
que ellas secretan. Cada clula es un sistema abierto, que
intercambia materia y energa con su medio. En una clula
ocurren todas las funciones vitales, de manera que basta una
clula para tener un ser vivo. La clula es la unidad fisiolgica de
la vida.
Cada clula contiene toda la informacin hereditaria necesaria
para el control de su propio ciclo y del desarrollo y el
funcionamiento de un organismo de su especie, as como para la
transmisin de esa informacin a la siguiente generacin. As
que la clula tambin es la unidad gentica.
CELULA PROCARIOTA
Formas celulares, que carecen de ncleo y
organelas limitadas por membrana.
CELULA EUCARIOTA
Clula que tiene el ncleo y organelas rodeados por una
membrana (Compartamentalizacin), y cromosomas en los que
el DNA est combinado con protenas histnicas.
VIRUS
Partcula de cido nucleco envuelta por una cubierta proteica
(Cpside).
ADN Doble o simple banda
ARN
Las protenas de la cpside (protenas de envoltura) determinan
la especificidad de un virus; una clula puede ser infectada por
un virus si la protena viral puede "encajar" en uno de los
receptores especficos de la membrana celular de ese tipo de
clula.
Crecimiento
Incremento ordenado de todos los constituyentes y estructuras
celulares. En muchos microorganismos, este incremento continua
hasta que la clula se divide en dos nuevas clulas: Fisin binaria.
Tasa de crecimiento
Es el cambio del numero de clulas (Biomasa) por unidad
de tiempo
Tiempo de generacin
Tiempo que tarda una poblacin en duplicarse, o el tiempo
necesario
para
completar
un
ciclo
de
divisin.
Curva de crecimiento
# clulas
t (h)
# clulas
65536
0,5
8,5
131072
262144
1,5
9,5
524288
16
10
1048576
2,5
32
10,5
1572000
64
11
1832000
3,5
128
11,5
2000000
256
12
2100000
4,5
512
12,5
2150000
1024
13
2150000
5,5
2048
13,5
2150000
4096
15
2100000
6,5
8192
15,5
2000000
16384
18
1572000
7,5
32768
1.
2.
3.
4.
2500000
2000000
4
N clulas
t (h)
1500000
2
1000000
500000
1
0
0
10
20
t (h)
30
40
Condiciones ambientales
pH,
Temperatura,
Aw,
O2, y CO2
Nutrientes: Tasa C/N
Factores internos
Capacidad metablica
Temperatura
La temperatura afecta la estabilidad de las protenas
celulares porque induce cambios conformacionales que
alteran su actividad biolgica.
Ejemplo: Enzimas.
Todos los microorganismos tienen una temperatura ptima
de crecimiento. Esto significa que a determinada
temperatura la velocidad de duplicacin (o la velocidad de
crecimiento poblacional) de los microorganismos es mayor.
Adems presentan una temperatura mnima y mxima de
crecimiento.
Clasificacin
Rango de crecimiento
Temp optima
Termfilos
25 - 80 C
50 - 60 C
Mesfilos
10 - 45 C
20 - 40 C
Psicrfilo
-5 - 30 C
10-20 C
pH
La neutralidad mayora de los microorganismos crecen en pH
cercanos a la, entre 5 y 9.
Fuente de Carbono
Utilizada por los microorganismos para sintetizar los compuestos
orgnicos requeridos para formar las estructuras y realizar las
funciones celulares.
Oxigeno.
Los organismos vivos poseen diferentes requerimientos de oxigeno, pudiendo
clasificarse en:
Medio de cultivo
Mezcla equilibrada de nutrientes que en concentraciones
adecuadas y bajo condiciones fsicas ptimas permiten el
crecimiento optimo de los microorganismos.
Contiene una base mineral, fuente de carbono, nitrgeno y azufre;
atmsfera adecuada y los factores de crecimiento necesarios.
MEDIOS DE CULTIVO
Pueden clasificarse segn:
a) Su consistencia
b) Su utilizacin
c) Su composicin
d) Su origen
SEGN SU ESTADO FSICO (CONSISTENCIA).
1) Medios lquidos.
2) Medios slidos
3) Medios semislidos
SEGN SU UTILIZACIN.
1) Medios
2) Medios
3) Medios
4) Medios
5) Medios
6) Medios
7) Medios
8) Medios
9) Medios
comunes.
de enriquecimiento.
selectivos
inhibidores.
diferenciales.
de identificacin.
de multiplicacin.
de conservacin. ATENDIENDO A SU COMPOSICIN.
de transporte.
1) Medios complejos
2) Medios sintticos
3) Medios Semisintticos.
SEGN SU ORIGEN:
a) Naturales.
b) Sintticos.
c) Semisintticos
Cultivo de clulas
Eucariotas
Procariotas
Cultivo: Metodologa empleada para la multiplicacin de
clulas u organismos (Eucariotas y/o Procariotas), o para
el crecimiento de tejidos, en el que mediante el uso de un
medio de cultivo se favorece el crecimiento.
Ventajas
El cultivo puede ser iniciado a partir de una solo clula.
Ingeniera de tejidos
Piel, hgado, hueso, cartlago, etc
Trasplante de tejidos y rganos
Anticuerpos monoclonales
Hormonas (FSH), Enzimas
Vacunas virales (polio, aftosa, parvo, moquillo, etc.)
Protenas recombinantes
Alcaloides, pigmentos, aceites esenciales.
Nombre u organismo
Ciudad, Pas
N de
cultivos
ATCC
800
DSMZ
Braunschweig,
Alemania
500
ECACC
Salisbury, Wiltshire,
UK
1000
GEIMM
Genova, Italia
2300
Fuente: www.biotech.ist.unige.it/cldb/indexes.html
25
Tipos de cultivo
El soporte de cultivo
Brinda a las clulas, tejidos u rganos en Cultivo el
soporte fsico necesario para realizar sus reacciones
metablicas, desarrollar su metabolismo y desarrollar sus
procesos de crecimiento.
Vidrio
Plstico (poliestireno)
Microsoportes
Sustratos metlicos
Superficies tratadas
Matrices tridimensionales
Haces microcapilares permeables
Nuevos dispositivos
Recipientes de cultivo
Slido: Clulas adheridas a vidrio o distintos tipos de
materiales sintticos.
28
FRASCOS ESTTICOS
Recipientes de
cultivo
31
32
Agua
Sales
Glucosa
cidos grasos
Vitaminas
Suero
Pptidos
Micro y oligoelementos
Aminocidos esenciales
Factores de crecimiento
Reguladores del pH
Indicador de pH
Antiespumante
Antibiticos?
Factores crticos
Suero:
Ventajas: Gran aporte de nutrientes bsicos, protenas,
factores de crecimiento, hormonas, promotores de
adhesin, inhibidores enzimticos, etc.
Desventajas: Composicin indefinida, variabilidad entre
lotes, interferente en procesos de purificacin de
protenas, interferente en procesos de multiplicacin viral,
vehculo de entrada de contaminaciones, etc.
34
Factores crticos
Temperatura de cultivo: depende del origen de las clulas.
Mamferos: 37C, peces e insectos: 18-22C, aves: 38.5C, etc.
Contaminacion: importante en los laboratorios de cultivos
celulares, principalmente a escala industrial. Pueden ser por
levaduras, hongos, virus, bacterias, micoplasma, otras clulas,
etc.
Experticia: Contaminacin Operador-Muestra
35
Ventajas
Un solo tipo bien definido de clulas en cada cultivo
Fcil de manipular, condiciones controladas (pH, Temp,
Osmolridad, nutrientes, factores de crecimiento).
Disponibilidad
de
lneas
celulares
internacionalmente, de fcil acceso, validacin
establecidas
Ventajas
Alternativa al uso de animales
Sistema para estudiar, farmacos, cosmeticos, principios
fisiolgicos, citotoxicidad, etc.
Chequeo posterior en un nmero reducido de animales
Permite trabajar en pequea, media y gran escala
Las clulas pueden mantenerse congeladas (N liquido) por
largos perodos de tiempo con mnima prdida de viabilidad
Desventajas
No son animales enteros
Las clulas no estn organizados en verdaderos tejidos
El entorno es distinto
No hay interrelacin con otros tejidos
El comportamiento es distinto a la organizacin tridimensional en un
rgano.
Desventajas
Estrictos controles del ambiente: pH, temp, incubacin,
Costos elevados: Equipos, Medios, Suero fetal (Esterilidad
tica)
Inestabilidad Gentica, heterogenidad.
CLULAS VIVAS
ANIMALES DE
LABORATORIO
HUEVOS DE
POLLO
EMBRIONADOS
CULTIVOS CELULARES
Primarios, Secundarios y
Lneas celulares
CULTIVOS
CELULARES
RGANOS y TEJIDOS
Ventajas
Desventajas
CUIDADO!!! BIOTICA