CDIGO: IDAMB-LAB-07

UCE- FAC.CCQQ
LABORATORIO
DE TOXICOLOGIA II

INSTRUCTIVO
DETERMINACIN DE
ALCALOIDES EN
MUESTRAS BIOLGICAS

Versin: 01
Fecha de vigencia: Marzo 2015

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1. OBJETIVO:
Extraer los diferentes alcaloides de las muestras biolgicas de personas intoxicadas o
farmacodependientes para su identificacin.
2. FUNDAMENTO:
Se fundamenta en la extraccin de principios activos de naturaleza alcalina,
considerados qumicamente como alcaloides, de muestras biolgicas, la purificacin
en medio cido, extraccin en medio alcalino y la identificacin de cada uno de ellos
mediante cromatografa de capa fina por comparacin con estndares conocidos.
3. DEFINICIONES: (Consultar:)
Farmacodependiente:
Alcaloides: Sustancia de origen natural, qumicamente son aminas primarias,
secundarias o terciarias, generalmente de accin txica.
4. RESPONSABILIDADES: (Las sealadas en indicaciones generales)
5. CONTENIDO:
MUESTRA: Orina recolectada en cualquier momento bajo vigilancia directa
REACTIVOS

EQUIPOS /MATERIALES

Ac. clorhdrico 1%
Amonaco
Cloroformo
Sulfato de sodio anhidro
React. de Dragendoff
Placas de slica gel G con aditivo F254
Eluente;
Acetato de etilo : l7
Metanol
:2
Amonaco
:l
Estndares en metanol 3mg/10cm3: cocana,
morfina, codena , herona, atropina,
estricnina, escopolamina

Embudo de separacin.
Placas de porcelana excavadas
Cmara cromatogrfica
Nebulizador
Lmpara de luz UV 254 y 396 nm
Centrfuga:
Capilares

PROCEDIMIENTO:

A 30 cm3 de orina, acidificar con 2 cm3 de HCl 1%,

Extractar con l5 cm3 de cloroformo, separar y descartar la fase orgnica
(cloroformo) que contiene impurezas solubles en medio cido.
La fase acuosa, alcalinizar con amonaco
Extractar con 20 cm3 de cloroformo,
Separar la fase orgnica,

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DETERMINACIN DE
ALCALOIDES EN
MUESTRAS BIOLGICAS

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Fecha de vigencia: Marzo 2015

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Secar mediante filtracin en sulfato de sodio anhidro,

Evaporar a sequedad en B.M.
El residuo disolver en l cm3 de metanol o en el solvente de extraccin.
Colocar unas gotas en la placa excavada y evaporar para reacciones de
identificacin preliminar y reservar el resto del extracto para la cromatografa.

Pruebas de identificacin preliminar

1. Reaccin de Dragendorff: Al extracto evaporado en la placa excavada, colocar unas

gotas de R. Dragendorff, en presencia de alcaloides se producir un precipitado de
color rojo ladrillo.
2. Reaccin de Marquis : Al extracto evaporado en la placa excavada, colocar unas
gotas de R. de Marquis, en presencia de alcaloides del opio aparecer una
coloracin violeta.
3. Reaccin Scott: Al extracto evaporado en la placa excavada, colocar 5 gotas de R.
de Scott, 2 gotas de HCL y 5 gotas de Cloroformo en presencia de cocana
aparecer un color azul turquesa en la fase de cloroformo.
Cromatografa en capa fina:

6.

El extracto obtenido realizar la siembra en la placa cromatogrfica con la ayuda

de un capilar, conjuntamente con estndares conocidos,
Controlar la intensidad de la siembre con la lmpara UV
Colocar la placa en la cmara cromatogrfica y correr la cromatografa en un
frente de 10 cm..
Secar al ambiente en forma horizontal,
Observar bajo Luz U.V. marcar las manchas
Revelar con reactivo de dragendorff, con lo que las manchas aparecen de color
rojo ladrillo, calcular los Rfs e identificar por comparacin con los RFs de los
estndares.

BIBLIOGRAFIA

1. NACIONES UNIDAS, 2008, Mtodos Recomendados para la Deteccin y anlisis

de drogas en especmenes biolgicos, Manual para Uso de los Laboratorios
Nacionales, Nueva York
2. Clarke, 1986, Insolation and Identification of Drugs, in Pharmaceutical Body Fluids
and Post-morten Material, 2do Edition, London.

http://www.calameo.com/read/000256586a5ab6c0efabc

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