Construccin de una columna de Winogradsky

Daniel Alfaro Alfaro y Carolina Gonzlez Rojas

Laboratorio de Procesos Qumico Biolgicos, Profesor: Lic. Sandra Valds
Daz, Qumica Industrial, Escuela de Qumica, Universidad Nacional, Costa
Rica.
Fecha de Realizacin: 14/03/2016

Fundamento Terico:
La columna Winogradsky fue desarrollada por
el microbilogo ruso Sergey Winogradsky
(1853 1956), es una representacin sencilla y a
escala de cmo se encuentra formado un ecosistema
acutico natural, tambin permite conocer cmo se
constituyen los tapetes microbianos formados
principalmente por diferentes clases de
microorganismos, la manera en que se
desarrollan sus ciclos, y la interaccin entre
ellos que les permite coexistir entre ellos. La
columna representa un sistema completo y
autnomo. En la columna se pueden
diferenciar claramente tres zonas que son:1

Zona anaerobia: En la zona inferior

(baja concentracin de oxgeno) se
desarrollan
organismos
que
desempean procesos fermentativos
produciendo alcohol y cidos grasos
como subproductos de su metabolismo.
Estos productos metablicos son a su
vez el sustrato para el desarrollo de
bacterias reductoras de sulfato. Como
resultado se liberan
productos
sulfurados que difunden a la zona
superior creando un gradiente de
sulfuro de hidrgeno ascendente, donde
bacterias prpuras y verdes se
estratifican segn su tolerancia al
sulfuro de hidrogeno.

Fecha de entrega: 30/05/2016

zona microaerfila: En la zona media

(concentracin parcial de oxgeno) se
disponen bacterias sulfooxidadoras
aerobias y bacterias fotosintticas que
utilizan el azufre. Por encima de esta
zona pueden desarrollarse aquellas
bacterias prpuras que no utilizan el
azufre.
zona aerobia: En la zona superior
(alta concentracin de oxgeno) crecen
algas eucariotas y cianobacterias que
liberan oxgeno manteniendo aerobia
esta zona.2

La comunidad microbiana en el ambiente est

expuesta a cambios continuos por los factores
biticos y abiticos. Durante el da la
comunidad se enfrenta a cambios bruscos de
los factores abiticos como: luz y oscuridad;
aerobiosis y anaerobiosis; frio y calor. A estos
cambios hay que adicionar aquellos que se
presentan por cambios de la estacionalidad:
temperatura, precipitacin, sequia, vientos. La
interaccin de los microorganismos con el
conjunto de los factores abiticos que los
rodean determina la estructura que
presentarn las comunidades microbianas,
por ejemplo, en un medio con una elevada
salinidad, se desarrollaran microorganismos
halfilos capaces de utilizar esa concentracin
de sales.3

La columna de Winogradsky se utiliza

tradicionalmente para el aislamiento de
bacterias foto trficas verdes y rojas y de otros
anaerobios y para lograr el crecimiento
selectivo de una gran variedad de procariotas
aerobios y anaerobios. Se utiliza para
observar la distribucin y estratificacin de
poblaciones microbianas de acuerdo al efecto
que los factores ambientales tienen sobre la
comunidad de las muestras utilizadas de agua
y sedimento.3

empac la mezcla en 1/3 de la probeta

asegurando que no quedaran burbujas. Por
ltimo, se cubri con agua, se tap la probeta
con papel aluminio y se coloc en un lugar con
abundante luz solar por varias semanas.
Resultados
Cuadro l. Microorganismos observados en la
columna Winogradsky transcurrido varias
semanas.
Microorganismos
observados

Columna de
Winogradsky

Alga parda
Cianobacterias
Paramecio
Euglena
Rotfero
Pulga de agua
Alga verde
Figura 1. Columna de Winogradsky.
Materiales y Reactivos.
Materiales

Reactivos

Probeta de

Sulfato de

500 mL

sodio
Carbonato de

Papel aluminio

sodio

Procedimiento.
Se Procedi a pesar 0.5 g de sulfato de sodio
por cada 100 g de fango y 0.25 g de carbonato
de sodio por cada 100 g de fango, esto se
mezcl con el fango que se capt del
ambiente acutico, se le adicion tiras de
papel como fuente extra de carbono, se

Bacteria verde del

azufre

Observaciones de
Winogradsky a 9
preparacin.

la columna
semanas de

de
su

El agua de la columna posea un aspecto

limpio, puro, no ola mal a lo superficial. No
posea seales de algas en las paredes ni en
la superficie. Posea bacterias prpuras (muy
pocas), bacterias verdes y bacterias negras en
lo ms profundo de la Columna.

Anlisis de resultados
Los resultados de nuestra columna de
Winogradsky muestran muy poca presencia
de algas, el agua muy pura y el olor no es
detectable. Esto nos indica que las bacterias
aerobias, las cuales en esta columna son las
cianobacterias,
cumplieron
su
labor
metablica, la cual consta de su obtencin de
CO2 para su sintetizacin de carbohidratos y
el uso de H2O para formar O2 como parte de
su metabolismo; esto junto con las bacterias
hetertrofas que consumen los carbohidratos
de estas otras bacterias y producen CO2,
utilizan el Oxgeno para producir agua, la cual
es agua pura, y as se convierte en un ciclo de
purificacin superficial en la cual el agua se
limpia, as como pas en esta columna.
A pesar de esta purificacin la presencia de
algas y cianobacterias estaba presente,
observadas por microscopio, en donde se
pudieron observar las algas pardas y verdes
junto con rotferos y paramecios en mayor
cantidad, sin embargo, la ausencia visible de
algas a gran escala no nos permiti ver una
gran cantidad de cianobacterias.
Como pudimos observar, la columna es
estratificada, con diferentes reas, las cuales
dependen de la concentracin de Oxgeno y
de azufre. En la parte media, pudimos
observar una capa de bacterias verdes, las
cuales comprenden las del azufre, entre estas
el Chlorobium.
El NaSO4 utilizado en la parte baja es utilizado
por las bacterias del azufre, en condiciones
anaerobias, las cuales fueron las observadas
de color negro, en las cuales en la columna se
marc una gran franja negra. Estas son
representadas
por
Desulfovibrio,
que
comprenden una respiracin anaerobia en la
que utilizan estos sulfatos como respiracin,
en la que sus productos comprenden de
grandes cantidades de SH2. El SH2 reacciona
con cualquier forma del hierro presente en el
sedimento y as es como se crea el color
negro, mediante la creacin de sulfuro ferroso.

El SH2 creado por estas bacterias tambin

sube a la columna y es utilizada por las
bacterias verdes (como Chlorobium) y las
bacterias purpuras del azufre (como
Chromatium). Estas procesan el SH2 como el
elemento reductor para obtener energa.
Ms arriba deba de observarse las bacterias
rojo-prpuras no del azufre, sin embargo, no
se observaron. Atribuimos este suceso a la
poca presencia de bacterias prpuras, del
azufre, ya que al haber pocas bacterias
purpuras nos da una idea de la baja
concentracin de SH2 que produjeron las
bacterias Desulfovibrio, por lo que a baja
concentracin no lograran formarse. Las tiras
de papel eran para estas mismas bacterias,
como fuente extra de carbono, ya que estas
bacterias las necesitan para su fotosntesis ya
que son del tipo fotoorgantrofos.

Conclusiones

Los ecosistemas naturales acuticos

dependen de las concentraciones de
oxgeno y azufre presentes en el
ambiente

El ecosistema acutico es un ciclo en el

cual las bacterias ms profundas
producen alimento para las bacterias
que estn por encima de ellas hasta
llegar a la cianobacterias que
solamente dependen del oxgeno y
agua.

Los microrganismos y bacterias

dependen unos e otros, lo que crea un
ecosistema
que
puede
auto
sustentarse

Estos ecosistemas se encargan de

purificar el agua para los animales y los
dems seres vivos.

Cada ser de este ciclo cumple una

funcin
especfica.
Irrumpir
las
funciones de cualquiera afectara toda
la cadena y por ende el ciclo y su
funcin.

Bibliografa

1.

G., A. S., Z., M. M., & E, M. F. (N.D.).

Columna Winogradsky. Retrieved 05
23, 2016, from Columna Winogradsky:
http://www.academia.edu/8201405/CO
LUMNA_DE_WINOGRADSKY_1

2.

Gorriti, M., Moreno, J. R., Flores, M., &

Albarracn, V. (2012, 07 15). ResumenReduca. Retrieved 05 23, 2016, from
ResumenReduca:
http://revistareduca.es/index.php/biolo
gia/article/viewFile/966/997

3.

Borbn Alpizar, H., & Valds Daz , S.

(2014). Manual de Laboratorio de
Procesos Quimico Biolgicos. Heredia:
Universidad Nacional.