UNIVERSIDAD EL BOSQUE

PROGRAMA DE INGENIERA AMBIENTAL

MICROBIOLOGA AMBIENTAL
Leonard Fischer, Vernica Nieto Pea, Erika Paola Snchez Flrez y Karen Lizeth Torres
Echeverri
DESARROLLO TALLER IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
Respecto a las bacterias:
1. Cul es el principio de la tincin de gram?
La tincin de gram es una tcnica diferencial que es utilizada para la clasificacin de las bacterias
segn la morfologa, tamao y el color que toma.
El cristal violeta sirve como colorante bsico unindose a la pared celular bacteriana, con la ayuda de
lugol, las bacterias gram positivas, debido a su estructura y composicin de su pared celular retienen
el cristal violeta- lugol, lo cual se va a observar en el microscopio.
Las bacterias gram negativas, pierden el colorante bsico, ya que el contenido lipdico de la pared
clula, dando como resultado perdida de cristal violeta-lugol, Estas bacterias captan el colorante de
contraste por lo cual se presenta el color rojizo en al microscopio. (Rodriguez, 2005)
2. Realiza un cuadro donde indiquen 3 diferencias entre bacterias gram positivas de gram negativas.
Tabla 1. Diferencias entre gram positivas y gram negativas
Gram Positivas
Color violeta
Sensibles a los antibiticos
Si son tratadas por enzimas degradadoras de
peptidoglicano, pueden originar protoplasto.

Gram Negativas
Color rojizo o rosado
Flagelo polar (un flagelo en un polo)
Son tratadas por enzimas degradadoras
peptidoglicano, van a originar un esfero plasto.

3. A qu hace referencia los trminos protoplasto y esferoplasto?

Protoplastos. Son estructuras viables derivadas de una clula vegetativa. Se caracterizan por la
prdida total de la pared celular, causada por cambios fsicos como la modificacin de las condiciones
ambientales o qumicas. Se originan de las bacterias Gram positivas que, al no poseer membrana
externa facilitan el acceso de compuestos antimicrobianos al peptidoglicano. (Montoya, 2008)
Esferoplasto. Son clulas viables bacterianas incapaces de dividirse, pero se diferencian de los
protoplastos, porque han perdido parcialmente la pared y en determinadas condiciones, pueden
regenerarla completamente. Se obtienen por lo general, a partir de las bacterias Gram negativas.
(Montoya, 2008)
4. Cuando se cubren las necesidades nutricionales, fsicos y ambientales de las bacterias se puede
medir la velocidad de multiplicacin de las clulas bacterianas a travs de las curvas de
crecimiento. qu est sucediendo con las clulas bacterianas en cada fase a nivel metablico?
Respecto a los hongos:
1. Qu caractersticas macro y microscpicas tienen los siguientes hongos: Fusarium spp.,
Penicillium spp, Aspergillus spp, levaduras

Fusarium spp. Macroscpicamente el Fusarium sp, se caracteriza por producir colonias de

crecimiento rpido. Generalmente, su micelio es areo, abundante, algodonoso y con coloracin que
vara de blanco a rosado durazno. Un tipo de especies presentan usualmente un tinte de color fuerte
al reverso de la colonia (Rattink, et al.2000).
Microscpicamente el fusarium puede presentar tres clases de esporas: - Microconidias, que son
esporas unilaterales, sin septos, hialinas, elipsoidales, rectas o curvas, se forman sobre fialides
laterales, cortas, simples o sobre conidiforos poco ramificados, tienen 5 - 12 m (5x10 -6 - 1,2x10-5m)
de largo por 2.5 3.5 m (2.5x10-6m - 3.5x10-6m) de ancho.
- Macroconidias, las cuales son esporas de pared delgada, fusiformes, largas, relativamente curvas,
en forma de hoz, con varias clulas de tres a cinco septos transversales y tienen de 27 - 46 m
(2.7x10-5m - 4.6x10-5m) de largo por 3.0 - 4.5 m (3x10-6m - 4.5x10-5m) de ancho.
- Y las clamidioesporas, que son esporas formadas a partir de la condensacin de los contenidos de
las hifas y macroconidias, de paredes gruesas, mediante las cuales el hongo sobrevive en
condiciones ambientales desfavorables y sin poder tener acceso a plantas hospederas. Estas
esporas se forman simples o en pares, terminales o intercaladas; tienen un tamao de 5 a 15 m
(5x10-5m - 1.5x10-5m) de dimetro (Garces de granada, et al 1999)
Penicillium spp. El gnero Penicillium posee una gran variedad de especies. Las ms comunes son
Penicillium chrysogenum, Penicillium citrinum, Penicillium janthinellum, Penicillium marneffei y
Penicillium purpurogenum. La identificacin a nivel de especie se basa en las caractersticas
morfolgicas (tanto macro como microscpicas).
- Dentro de las caractersticas macroscpicas, las colonias de Penicillium son de crecimiento rpido,
filamentosas y vellosas, lanosas o de textura algodonosa. Al principio son blancas pero despus se
tornan de un color verde azulado, luego se vuelven gris verdosas, gris oliva, amarillentas o rosadas a
medida que pasa el tiempo. El envs de la colonia es plido o amarillento.
- Respecto a sus caractersticas microscpicas, las especies de Penicillium (excepto P. marneffei),
hifas septadas hialinas (1.5 - 5 m [1.5x10-5m - 5x10-6m] de dimetro), con conidiforos simples o
ramificados, mtulas, fialides y conidias. Las mtulas son ramificaciones secundarias que se forman
sobre los conidiforos. Las mtulas acarrean fialides en forma de frasco. La organizacin de las
fialides en la punta de los conidiforos es tpica (conocidas tambin como "penicilli"). Las conidias
(2.5 - 5m [2.5x10-5m - 5x10-6m] de dimetro) son redondas, unicelulares y pueden observarse como
cadenas no ramificadas en el extremo de las fialides. En su fase filamentosa, Penicillium marneffei es
microscpicamente similar a otras especies de Penicillium. En su fase de levadura, Penicillium
marneffei presenta clulas globosas o alargadas con forma de salchicha (3 - 5 m [3x10-6m- 5x10-6m])
que se multiplican por fisin.
Aspergillus spp. Aspergillus flavus (Caractersticas macroscpicas):
Colonias en CYA y CY20S de color verde olivceo a verde amarillento; micelio blanco; esclerocios,
cuando estn presentes, de color marrn oscuro a negro, variables en forma y tamao; reverso
incoloro, marrn claro o anaranjado; textura de la colonia variable, generalmente lanosa o flocosa.
Las colonias en MEA son de color olivceo y ocasionalmente verde oscuro; micelio blanco, apenas
visible; esclerocios a veces presentes de un tono marrn o negro, variables en tamao y forma; el
dorso es incoloro la mayora de las veces y a veces amarillo plido. Se puede encontrar una colonia
flocosa, especialmente en la zona central.
- Caractersticas microscpicas

Aspergillus flavus en agar glucosa de peptona a 30

Cabezas conidiales uniseriadas y biseriadas, generalmente de forma circular; estipes normalmente

rugosos, hialinos o de color marrn plido. Poseen vescula esfrica y mtulas ocupando
prcticamente toda la superficie de la vescula. Los conidios globosos o elipsoidales pueden ser lisos
o ligeramente rugosos.
Levaduras. Caractersticas macroscpicas: algunas son de color rosa o rojas porque tienen
carotenoides. Son polimorfas y debido a esto, pueden adoptar distintas formas dentro de la misma
especie y hasta en el mismo cultivo, lo cual depende de diversos factores, principalmente del sustrato
en que viven y de la edad de los cultivos. Debido a esto la forma no siempre puede tomarse como
factor en su clasificacin taxonmica. (Las Levaduras , s.f.)
En ocasiones cuando se reproducen las clulas, quedan unidas formando cadenas largas o cortas
que son los seudomicelios; asimismo, algunas de ellas pueden desarrollar largos filamentos que
forman un micelio verdadero. (Las Levaduras , s.f.)

- Caractersticas microscpicas: son unicelulares, sus clulas tienen forma y dimensiones variadas,
como son las esfricas ovoides, elipsoidales, cilndricas alargadas (filamentosas). Las dimensiones
ms comunes de las clulas varan entre 2 m (2x10 -6m) y 4 m (4x10-6m) de ancho y 2 m (2x10 -6m) a
8 m (8x10-6m) de largo; sin embargo, se encuentran levaduras alargadas que tienen 10, 15 o 25 m
de longitud, y aquellas que constituyen filamentos llegan a tener hasta 50, 70 y ms micrmetros. (Las
Levaduras , s.f.)
2. Cules son los requerimientos nutricionales de estos hongos?
El Fusarium oxysporum requiere de carbn y compuestos inorgnicos para producir la energa
necesaria para cumplir con sus funciones metablicas. Los nutrientes esenciales que necesita son el
carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, fsforo, potasio, magnesio, azufre, hierro, manganeso,
molibdeno y zinc. (Gallardo, 2004)
Para las levaduras: (Nitrgeno asimilable, necesidades en oxgeno, requerimientos lipdicos,
micronutrientes) (Urbina vinos blog, 2010)
3. Qu diferencias encuentran entre la curva de crecimiento de las bacterias y los hongos?
Dentro de las diferencias que se pueden encontrar en el crecimiento de las bacterias y los hongos
esta la duracin en las que ocurren cada una de las fases y el periodo de crecimiento como se
muestra en la siguiente tabla.
Tabla 2. Curva de crecimiento de las bacterias y los hongos

Hongos
Bacterias
Fase inicial o fase lag: En los hongos Fase de Latencia: Corresponde a un perodo
filamentosos termina entre las primeras 15 y 20
de transicin para los microorganismos cuando
horas del cultivo. (Monod, 1949)
son transferidos a una nueva condicin. En
Fase de crecimiento exponencial. sta se
encuentra seguida de un rpido crecimiento
exponencial que se extiende hasta las 50 o 75
horas desde inicio del crecimiento, durante las
cuales se producen ramificaciones hifales.
(Monod, 1949)

esta fase no hay incremento en el nmero de

clulas, aunque s una gran actividad en el
metabolismo. (Brooks, 1999)
Fase de Crecimiento Exponencial: Perodo
en que el crecimiento del microorganismo
ocurre de forma exponencial, es decir, cada

Fase final estacionaria o de retardo, en la

que se produce el mximo crecimiento de
biomasa. (Monod, 1949)

vez que pasa un determinado tiempo la

poblacin se duplica. (Brooks, 1999)
Fase Estacionaria: Perodo en que ocurren las
limitaciones

del

crecimiento,

ya

sea

por

agotamiento de algn nutriente esencial, por

acumulacin de productos txicos o por una
combinacin de las causas anteriores. (Brooks,
1999)
Fase de Muerte: Luego que culmine la fase
estacionaria,

comienza

una

progresiva

disminucin en el nmero de clulas viables,

cuando esto ocurre se dice que la poblacin ha
entrado en fase de muerte. (Brooks, 1999)
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