TFEMarielaureCollignon PDF

Universit de Lige
Facult des sciences appliques

Laboratoire de Gnie Chimique
Etude du mlange par P.I.V. et P.L.I.F.

dans un bioracteur de culture cellulaire
Travail de fin dtudes prsent par
Marie-Laure COLLIGNON
pour l'obtention du grade
dingnieur civil chimiste
Anne Acadmique 2006-2007
Promoteur : Pr. M. CRINE
Remerciements
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Remerciements
Je tiens tout dabord exprimer toute ma gratitude Monsieur le Professeur Michel CRINE
pour la qualit de son enseignement et pour loccasion quil ma donne de raliser ce travail
de fin dtudes.
Je remercie galement la Socit GlaxoSmithKline Biologicals et plus particulirement

Messieurs Jean-Franois CHAUBARD et Ludovic PEETERS ainsi que Madame Sandrine
DESSOY pour avoir permis de donner un aspect concret cette tude en lappliquant une
situation relle. Je tiens galement souligner le plaisir que cela aura t de collaborer avec
eux.
Je tiens prsenter ma reconnaissance Mesdames Domique TOYE et Emeline VERDIN

pour leur suivi attentif, leurs conseils judicieux et leurs encouragements qui mont t dune
grande aide.
Je remercie Messieurs les Professeurs Pierre MARCHOT et Philippe THONART qui ont
accept de faire partie de mon Jury.
Ma gratitude sadresse galement Monsieur le Professeur Christian GRANFILS pour son

aide prcieuse, son accueil et sa grande disponibilit.
Je ne peux oublier mes parents, ma sur et mon compagnon pour leur soutien et leur aide
durant ces cinq annes.
Enfin, je remercie toutes les personnes qui, directement et indirectement, mont aide lors de
la ralisation de ce travail.
Marie-Laure
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Rsum
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Rsum
Etude du mlange par P.I .V. et P.L.I.F dans un bioracteur de culture cellulaire
Travail de fin d tudes prsent par : Marie-Laure Collignon
en vue de lobtention du grade dIngnieur Civil Chimiste
Anne acadmique 2006-2007
Ce mmoire consiste en ltude exprimentale de lhydrodynamique et du mlange dans un
bioracteur de 20 litres de culture de cellules animales sur microporteurs. Les rsultats
obtenus serviront aux chercheurs de la socit GlascoSmithKline Biologicals qui procdent
actuellement la monte en chelle partir dun bioracteur de 20 litres pour atteindre une
chelle industrielle de plusieurs mtres cubes. Ds lors un grand nombre de paramtres ont t
imposs tels que la gomtrie du systme et la gamme des vitesses de rotation du mobile et le
type de celui-ci (hlice TT).
Les techniques exprimentales utilises sont la P.I.V. (Particle Image Velocimetry) et la
P.L.I.F. (Planar Laser Induced Fluorescence) qui permettent daccder respectivement au
champ de vitesses et champ de concentrations dans un plan vertical clair par le laser.
Ce travail consiste en une tude paramtrique au cours de laquelle nous avons fait varier les
diffrents constituants du nombre de Reynolds dans une cuve agite : la vitesse de rotation N,
la taille du mobile d et la viscosit du fluide .
Nous avons dtermin exprimentalement les grandeurs globales suivantes : le dbit et
nombre de pompage, le dbit et nombre de circulation, la puissance dissipe globalement et le
nombre de puissance y correspondant, la hauteur thorique quivalente dune pompe et le
temps de mlange. Nous avons galement caractris lhydrodynamique et le mlange de
manire locale : en dcrivant le champ de vitesses dans le plan clair par le laser, en
dterminant la rpartition du cisaillement et de la dissipation de lnergie dans ce mme plan
et en reprsentant le mlange par un modle compartiment constitu dun rseau de cuves
parfaitement mlanges mises en srie. Lvolution de ces grandeurs globales et locales en
fonction des paramtres du nombre de Reynolds a t analyse. Les rsultats obtenus
donneront des informations importantes qui aideront les chercheurs de G.S.K. BIO. affiner
leur stratgie de scale-up.
Enfin, un des points cruciaux de lopration de mlange est le maintien en suspension
complte des petites billes sur lesquelles se dveloppent les cellules qui sont appeles les
microporteurs. La vitesse de rotation qui permet le maintien de cette suspension complte a
t caractrise exprimentalement et laide dun modle qui pourra tre aisment utilis
lors du processus de scale-up.
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Table des matires
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Table des matires

Remerciements ...........................................................................................................................1
Rsum .......................................................................................................................................3
Table des matires ......................................................................................................................5
Listes des symboles utiliss ........................................................................................................9
Introduction ..............................................................................................................................12
Chapitre I Rappels thoriques................................................................................................23
1
Hydrodynamique au sein dune cuve agite.................................................................24

1.1
1.1.1
Lcoulement laminaire ( Re < 10 40 )........................................................24
1.1.2
Lcoulement transitoire ( 10 40 < Re < 10 000 100 000 ) .......................25
1.1.3
Lcoulement turbulent (10 000 100 000 < Re )........................................25
1.1.4
Les mobiles dagitation ................................................................................27
1.2
Les paramtres globaux du mlange ....................................................................30
1.2.1
La puissance volumique dissipe .................................................................30
1.2.2
Le dbit de pompage et le dbit de circulation .............................................33
1.2.3
Mlange et temps de mlange ......................................................................35
1.3
Les rgimes dcoulement ....................................................................................24
Paramtres locaux du mlange .............................................................................36
1.3.1
Le cisaillement..............................................................................................36
1.3.2
La dissipation de lnergie............................................................................38
La suspension des particules dans une cuve agite ......................................................40
Chapitre II Matriels et mthodes .........................................................................................43

1
Cuve agite ...................................................................................................................44

1.1
Cuve......................................................................................................................44
1.2
Moteur ..................................................................................................................45
1.3
Mobile dagitation : Hlice TT de Mixel..............................................................46
Mesures P.I.V. ..............................................................................................................46

2.1
Principe.................................................................................................................46
2.2
Dispositif exprimental.........................................................................................48
2.3
La corrlation croise ...........................................................................................49
2.4
Traitement des images ..........................................................................................53
Mesures P.L.I.F. ...........................................................................................................56

3.1
Thorie la base de cette mthode .......................................................................56
3.2
Application de cette mthode ltude du mlange.............................................57
Page 6
Table des matires

3.3
Dispositif exprimental complmentaire..............................................................57
Les microporteurs .........................................................................................................58
Fluide utilis lors des mesures P.I.V. et P.L.I.F. ..........................................................62
Chapitre III Rsultats obtenus par la mthode P.I.V. ............................................................64

1
Description des champs de vitesses obtenus par les mesures P.I.V. ............................65
1.1
Introduction ..........................................................................................................65
1.2
Description qualitative de lcoulement dans le plan du laser .............................65
1.3
Influence de la viscosit sur la structure de lcoulement ....................................67
1.4
Influence de la vitesse de rotation sur la structure de lcoulement .....................68
1.5
Influence de la contre-pale sur la structure de lcoulement ................................68
1.6
Effet du diamtre du mobile sur la structure de lcoulement..............................69
1.7
Conclusion ............................................................................................................71
Dbit et nombre de pompage, dbit et nombre de circulation......................................73

2.1
Mthodologie........................................................................................................73
2.2
Rsultats................................................................................................................74
La puissance dissipe....................................................................................................78
3.1
Mthodologie........................................................................................................78
3.2
Evolution de la puissance et du nombre de puissance avec le Reynolds..............78
3.3
Puissance dissipe dans 20L de Cytodex1TM et concept de Metzner et Otto .......82
3.4
Hauteur quivalente dune pompe ........................................................................83
Rpartition du cisaillement dans le plan clair par le laser.........................................86

4.1
Mthodologie........................................................................................................86
4.2
Explication gnrale des rpartitions du cisaillement ..........................................87
4.3
Influence de la viscosit de la solution sur la rpartition du cisaillement ...........89
4.4
Influence de la vitesse de rotation du mobile sur la rpartition du cisaillement ..90
4.5
Influence de la taille du mobile sur la rpartition du cisaillement........................90
4.6
Influence de la position de la contre-pale sur la rpartition du cisaillement ........91
4.7
Conclusions ..........................................................................................................91
Rpartition de la dissipation de lnergie .....................................................................93

5.1
Mthodologie........................................................................................................93
5.2
Description de la rpartition de la dissipation de lnergie .................................94
5.3
Effet de la viscosit sur la dissipation de lnergie ..............................................96
5.4
Effet de la vitesse de rotation du mobile sur la dissipation de lnergie ..............96
5.5
Effet de la contre-pale sur la dissipation de lnergie...........................................96

Page 7
Table des matires

5.6
Effet du diamtre du mobile sur la dissipation de lnergie .................................96
5.7
Conclusions ..........................................................................................................97
Chapitre IV
1
Rsultats obtenus par la mthode P.L.I.F. .........................................................99
Le temps de mlange ..................................................................................................100

1.1
Mthodologie......................................................................................................100
1.2
Traitement des images ........................................................................................101
1.3
Rsultats..............................................................................................................102
1.4
Discussion...........................................................................................................105
1.4.1
Influence du point dinjection.....................................................................105
1.4.2
Influence du Reynolds ................................................................................105
Modle compartiment de mlange............................................................................108

2.1
Description du modle........................................................................................108
2.2
Equations du modle ..........................................................................................109
2.3
Rsultats..............................................................................................................112
2.4
Conclusions ........................................................................................................113
Chapitre V
Maintien en suspension des microporteurs .......................................................115
Introduction ................................................................................................................116
Dtermination de la distribution de la taille des microporteurs..................................116
Dtermination de la vitesse de rotation minimale de maintien en suspension ...........119
Conclusions ............................................................................................................................123
1
Synthse des rsultats obtenus....................................................................................124
Retombes positives sur le processus de scale-up......................................................130
Limitations des rsultats obtenus et perspectives futures ...........................................131
Bibliographie ..........................................................................................................................135
Annexes ..................................................................................................................................138
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Listes des symboles utiliss
Page 9
Liste des symboles utiliss
A
b
C
Cv
Cx
d
D
dp
E0
F
g
H
H*
L
m
N
P
QC
QP
tC
tM
tP
U
U
u
u
u
UC
V
v lim
vss
Vp
Y
m
[m]
[N.m]
[%]
[-]
[m]
[m]
[m]
[J]
[m/s]
[m]
[m]
[m]
[-]
-1
[s ] ou [rpm]
[W]
[m/s]
[m/s]
[s]
[s]
[s]
[m/s]
[m/s]
[m/s]
[m/s]
[m/s]
[m/s]
[m]
[m/s]
[m/s]
[m/s]
[m]
Section balaye par lagitateur

largeur de contre pales
Couple
Concentration volumique en particules
Coefficient de trane dune particule
Diamtre du mobile dagitation
Diamtre de la cuve
Diamtre moyen des billes de microporteurs
Energie du laser
Fluorescence de la Rhodamine 6G
Acclration de la pesanteur
Hauteur de liquide dans la cuve
Hauteur thorique du mobile
Hauteur de la pale de lagitateur
Exposant de la loi de Zaki
Vitesse de rotation du mobile dagitation
Puissance effectivement transmise au fluide agit
Dbit de circulation
Dbit de pompage
Temps de circulation
Temps de mlange
Temps de pompage
Vitesse instantanne
Vitesse moyenne
Fluctuation de la vitesse = U- U
Moyenne des fluctuations de la vitesse
Valeur quadratique moyenne des fluctuations de la vitesse
Vitesse ascensionnelle
Volume de la phase liquide agite
Vitesse limite dune particule
Vitesse limite dune particule selon le modle de Zaki
Vitesse priphrique des pales
Distance entre le fond de cuve et le mobile dagitation
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Lettres grecques :
Coefficient de proportionnalit entre la fluorescence, la
concentration en Rhodamine 6G et lnergie du laser
[-]
[s-1]
[W/kg]
[m]
[Pa.s]
Viscosit dynamique du liquide
[m/s]
Viscosit cinmatique
[m/s]
Viscosit turbulente
[kg/m]
Masse volumique du liquide
[kg/m]
Masse volumique des billes de microporteurs
[N/m]
Taux de cisaillement
[-]
Vitesse de cisaillement
Dissipation dnergie par unit de masse
Echelle de Kolmogorov
Coefficient de frottement
Groupements adimensionnels :
N2 d
Fr =
g
Fr
Nombre de Froude du mobile
Np
Nombre de puissance du mobile dagitation
NQP
Nombre de pompage du mobile dagitation
N QP =
QP
N d3
NQc
Nombre de circulation du mobile dagitation
N QC =
QC
N .d 3
Re
Nombre de Reynolds du mobile
ReP
Nombre de Reynolds dune particule
Np =
Re =
Re P =
P
N3 d5
N d2
d P vlim
Acronymes :
P.I.V.
P.L.I.F.
RPM
Particule Image Velocimetry

Planar Laser Induced Fluorescence
Round Per Minute
Page 11
Introduction
Page 12
Introduction
Les racteurs polyphasiques cuve agite sont largement utiliss dans de nombreux domaines
de lindustrie chimique. Citons par exemple les racteurs slurry catalytiques, les racteurs
de cristallisation ractive, les racteurs de polymrisation en suspension et les bioracteurs.
Ces racteurs mettent en uvre une phase solide finement divise mise en suspension dans
une phase liquide. Dans certains cas, une phase gazeuse peut galement tre disperse sous
forme de bulles dans la phase liquide.
Lhydrodynamique, les mcanismes physico-chimiques impliqus ainsi que la mise en uvre

industrielle de ces appareils ont fait lobjet de nombreuses tudes.
Le choix des conditions opratoires et de la gomtrie du systme doit rpondre aux objectifs
suivants :
-
le contrle de lhomognit de la suspension solide ;
le contrle de lintensit des transferts massiques et thermiques entre le liquide et le

solide ;
le contrle de lintensit des contraintes mcaniques entre le liquide et le solide.
Les bioracteurs occupent une place particulire dans cette famille de racteurs
polyphasiques. En effet, la phase solide est constitue dorganismes vivants et ceux-ci sont
fortement sensibles aux mcanismes cits ci-dessus. Les bioracteurs de cultures
microbiennes sont utiliss depuis de nombreuses annes, tandis que ceux de cultures de
cellules animales ne se dveloppent que depuis quelques dizaines dannes. Ils sont
notamment utiliss dans la synthse de vaccins antiviraux.
Le principe de la vaccination fut dcouvert en 1796 par le docteur Edward Jenner. Lorsquune
personne entre en contact avec un agent pathogne (virus, microbes, ), son systme
immunitaire ragit en deux tapes :
-
la reconnaissance de lagent pathogne ;
la production danticorps pour liminer celui-ci.
Le but de la vaccination est de rduire la priode de reconnaissance et ainsi limiter linfection.

Pour rduire cette priode, le systme immunitaire doit une premire fois rencontrer lagent
pathogne et mmoriser ses caractristiques. Pour ce faire, des agents pathognes
inactivs (c'est--dire morts) ou attnus (c'est--dire vivants mais dont la croissance est
limite) sont introduits dans lorganisme. Depuis quelques dizaines dannes, des vaccins dits
sous-unitaires sont apparus sur le march. Ils sont composs dune ou plusieurs sortes de
Page 13
Introduction
molcules (par exemple : une protine de surface dun virus) prsentes dans lagent pathogne
et ayant le mme effet sur le systme immunitaire.
La production de ce type de vaccin se fait en plusieurs tapes.

1. Synthse de la substance active ;
Pour ce faire, une culture cellulaire est ralise. Cette culture est ensuite infecte
par lagent pathogne qui se multiplie dans les cellules htes.
2. Purification de lagent pathogne ;
3. Inactivation de lagent pathogne ;
4. Purification de lantigne ;
5. Ajout dadjuvant et packaging.
Ce travail de fin dtudes concerne uniquement ltape de culture cellulaire et plus

particulirement ltude de lhydrodynamique au sein du bioracteur. Il fait suite au mmoire
ralis par Ludovic Peeters [PEE06] en partenariat avec la socit GlaxoSmithKline
Biologicals.
Cette recherche sinscrit dans un projet de monte en chelle dun procd de culture
cellulaire sur microporteurs en cuve agite. In fine, une chelle de production industrielle de
plusieurs mtres cubes devra tre atteinte.
Les cellules, utilises pour produire le vaccin, sont des cellules adhrentes c'est--dire
quelles ne peuvent se multiplier que si elles sont adsorbes sur une surface adquate. De
nombreux supports peuvent tre choisis ; ils peuvent tre en verre, en plastique. De plus, la
surface dadhsion peut prendre des formes varies. Les cellules pourraient tre cultives sur
un support plastique plan (comme les modules Cell Factory NunclonTM). Il suffirait
daugmenter le nombre de modules pour raliser la monte en chelle. Nanmoins, cette
augmentation saccompagnerait dun accroissement de la taille et du poids des racteurs, ce
qui exclut lutilisation de ces supports ds lchelle de 80 litres. De plus, ce type de support
ncessite de nombreuses manipulations manuelles qui sont impossible raliser grande
chelle.
Page 14
Introduction
Figure 0-1: Support plastique plan
Figure 0-2: Microporteurs
Ds lors, une autre forme de support a t choisie pour les plus grandes chelles. Le choix
sest port sur des microporteurs qui sont des billes en polymre dun diamtre moyen de
250m mises en suspension dans le milieu de culture et appeles Cytodex1TM. Cette solution
prsente lavantage de maximiser le rapport de la surface accessible aux cellules sur le
volume dquipement.
Dans un bioracteur de plusieurs mtres cubes, une culture sera
optimale si au moins une cellule adhre chaque microporteur durant la phase daccrochage,
ainsi la surface disponible sera totalement exploite durant la phase de croissance. Ds lors,
linoculum doit contenir un trs grand nombre de cellules et une ampoule cellulaire de
laboratoire sera largement insuffisante. Partant de cette ampoule cellulaire, une culture
statique sur support plastique plan sera dabord ralise petite chelle. Cette culture servira
dinoculum pour une premire culture damplification sur microporteurs. Une deuxime
culture damplification cellulaire sera ralise pour atteindre le niveau de concentration
cellulaire de linoculum du racteur de plusieurs mtres cubes.
Figure 0-3: Processus d'amplification cellulaire
La gomtrie du racteur tudi dans ce mmoire, a t impose par les travaux raliss
pralablement chez G.S.K. BIO. Un rapport diamtre sur hauteur gal 1 et un
positionnement du mobile dagitation au tiers de la hauteur ont t choisis pour maintenir une
similitude gomtrique entre les bioracteurs utiliss afin dexploiter plus aisment les
rsultats dune chelle lautre lors du scale-up.
Page 15
Introduction
Le choix des mobiles dagitation est galement bas sur les rsultats obtenus lors dune
prcdente tude effectue chez GSK [PEE06]. Cette tude portait sur la premire phase du
processus de scale-up depuis lchelle dun bioracteur de 20 litres celle dun bioracteur de
80 litres. La difficult majeure provenait du fait que les cultures petite chelle avaient t
faites avec un agitateur de fabrication interne GSK, dont les caractristiques (nombre de
pompage, nombre de puissance, ) ntaient pas connues et qui prsentait des coins saillants,
potentiellement mal adapts une culture de cellules sensibles au microcisaillement. Afin de
faciliter les tapes suivantes du scale-up, un mobile dagitation standard, de caractristiques
connues a t slectionn : lhlice TT Mixel. Ce mobile prsente les avantages suivants :
-
Cest un mobile axial et donc efficace dun point de vue pompage, ce qui permet
dune part de mettre en suspension les microporteurs et dautre part de dissiper
lnergie dans un volume important et de manire relativement douce au niveau du
cisaillement subi par les cellules ;
Ses nombres de pompage et de puissance sont tels que les grandeurs qui caractrisent
lhydrodynamique dans le bioracteur de 80 litres sont compatibles avec celles qui
rgnaient dans le bioracteur de 20 litres. Les grandeurs qui ont t envisages sont la
vitesse priphrique des pales, le nombre de Reynolds, le dbit de pompage, le dbit
de circulation, le taux de cisaillement en turbulence isotropique, la puissance
volumique dissipe, la hauteur thorique du mobile dagitation, les indicateurs de
collisions des particules avec les microtourbillons, entre elles, avec les parois du
bioracteur et avec lagitateur. Ces indicateurs ainsi que le taux de cisaillement
permettent de caractriser les contraintes mcaniques imposes aux cellules et la
pnalit de celles-ci sur la croissance cellulaire.
Figure 0-4: Agitateur de fabrication interne GSK
Figure 0-5: Hlice TT de Mixel
Page 16
Introduction
Le choix de limiter le nombre de contre-pales 2, alors que dans la littrature [ROUa] les
nombres de pompage et de puissance sont dtermins pour trois contre-pales, est galement
dict par les rsultats pralables de chez GSK. Les tests de culture dans le bioracteur de
20 litres avaient t raliss avec deux contre-pales. Il a t dcid de ne pas modifier ce
paramtre lors de la monte en chelle par souci de continuit dun part et dautre part car les
bioracteurs de 80 litres disponibles ne disposaient que de deux contre-pales.
Afin de mettre en vidence les paramtres et les hypothses qui influencent la stratgie de
scale-up, rappelons rapidement la procdure traditionnellement utilise :

-
Tout dabord, le but de lopration de mlange doit tre dtermine ;
Ensuite, les grandeurs caractristiques importantes doivent mises en vidence. Cellesci seront maintenues constantes lors de la monte en chelle.
Enfin, il sera vrifi que les autres grandeurs hydrodynamiques moins cruciales
petites chelles ne deviennent pas limitantes grandes chelles.
Dans le cas prsent, lopration de mlange sert homogniser le milieu, que ce soit au
niveau du maintien en suspension des microporteurs ou au niveau de luniformit des
concentrations des substrats.
Lvaluation des grandeurs caractristiques est ralise sur base de corrlations empiriques.
Cette dmarche a t applique lors dune tude prliminaire ce travail et les conclusions
suivantes ont t obtenues. A petite chelle, le facteur limitant est limportance des contraintes
mcanique imposes aux cellules. Celles-ci augmentent avec la puissance volumique dissipe
P/d. Partant de cette constatation, il semble raisonnable de proposer une monte en chelle
qui maintienne la similitude gomtrique et la puissance volumique dissipe. Ceci provoque
une diminution de vitesse de rotation et ds lors du temps de circulation. Le mlange tant
moins intense grande chelle, il peut limiter les transferts de matire et de chaleur et devenir
critique.
Leffet dune monte en chelle en maintenant la similitude gomtrique et le temps de
circulation constant a galement t tudi. Dans ce cas, la puissance volumique dissipe
augmente comme le carr du facteur dchelle.
Les contraintes appliques aux cellules
pourraient devenir inacceptables. De ces deux tudes, il a t dduit quune situation

intermdiaire entre un scale-up puissance volumique dissipe constante et un scale-up
temps de circulation constant devra tre trouve.
Page 17
Introduction
Nanmoins cette dmarche prsente une srie de limitations. La principale est lutilisation de
corrlations empiriques pour lestimation des paramtres caractristiques du mlange. Dans
ces corrlations, il apparat des nombres tels que le nombre de pompage et le nombre de
puissance, dont les valeurs peuvent tre influences par le nombre de contre-pales. Les
valeurs mentionnes dans la littrature sont gnralement relatives des cuves agites
quipes de trois contre-pales alors que deux contre-pales sont utilises dans la prsente
tude. De plus, les nombres pourraient tre galement influencs par le comportement
rhologique de la suspension de Cytodex1TM. Pour ces deux raisons, il conviendra de
consolider la stratgie de scale-up en validant exprimentalement les nombres de pompage et
de puissance.
Un des buts de lopration de mlange est de maintenir en suspension les microporteurs. Il est
ds lors important de connatre la vitesse de rotation minimale de lagitateur en dessous de
laquelle la suspension complte nest plus assure c'est--dire que les plus grosses particules
stagnent au fond de la cuve. Dans un premier temps, celle-ci est calcule en galisant la
vitesse de chute, calcule par le modle de Stokes tenant compte des interactions entre
particules, la vitesse ascensionnelle, obtenue par le rapport du dbit de circulation sur la
section de passage du fluide ascendant. Le dbit de circulation et la section de passage du
fluide ascendant peuvent tre calculs par des corrlations mais les valeurs obtenues
prsenteraient ds lors les mmes limitations que celles cites prcdemment dues au nombre
de contre-pales et au comportement rhologique du fluide. Ils seront donc mesurs
exprimentalement. La distribution de la taille des microporteurs, ainsi que la viscosit du
milieu devront tre prises en compte pour le calcul de la vitesse de chute. Ces deux-ci ntant
pas connues, elles seront galement mesures exprimentalement.
Ltude de lcoulement du fluide dans le racteur est indispensable afin dapporter des
informations cls pour le choix de la meilleure situation intermdiaire entre un scale-up
puissance dissipe constante et un scale-up temps de mlange constant. Par exemple, la
rpartition dans la cuve du taux de cisaillement permettrait de connatre les contraintes
imposes aux cellules. Ce type de rpartition ne peut tre dduite des paramtres globaux tels
que le temps de circulation ou le puissance volumique dissipe. Elles vont tre mesures
exprimentalement.
Page 18
Introduction
Les techniques exprimentales utilises seront la P.I.V. (Particle Image Velocimetry) et la
P.L.I.F. (Planar Laser Induced Fluorescence) qui sont bien adaptes ltude des coulements
dans une cuve agite. La technique P.I.V. permet de mesurer les champs de vitesses
instantans dans un plan vertical de la cuve. La technique P.L.I.F. complte les mesures P.I.V.
en donnant accs la carte de concentration dun traceur fluorescent dans ce mme plan.
La technique P.I.V. a dj t utilise pour caractriser lhydrodynamique dans un bioracteur

Couette-Taylor de culture de cellules animales [HAU03]. Elle pourra ds lors tre applique
dans le cas prsent. Elle a des nombreuses applications dans des domaines trs varis.
Citons par exemple :
-
ltude de lhydrodynamique dans les cuves agites,
ltude de lcoulement de lair autour dun corps en aronautique,
ltude de lcoulement des fluides dans une chambre de combustion dun moteur,
Les champs de vitesses obtenus par mesure P.I.V. peuvent tre directement exploits pour
calculer les caractristiques hydrodynamiques de lcoulement dans la cuve telles que le dbit
de pompage, le dbit de recirculation, la rpartition du taux de cisaillement dans le plan, la
rpartition de la dissipation de lnergieDans de nombreuses tudes, ces champs de vitesses
sont galement utiliss pour valider des modles dcoulement calculs par la mcanique des
fluides numriques (CFD). Dautres techniques telles que lanmomtrie fil chaud (HFA)
ou lanmomtrie laser effet Doppler (LDA) permettent galement daccder au champ de
vitesses dans la cuve. Nanmoins la technique P.I.V. prsente lavantage considrable de
donner instantanment le champ de vitesses dans tout le plan alors que les mthodes HFA et
LDA ne donnent que la vitesse en un point du plan ; pour obtenir le champ de vitesses dans
tout le plan, les mesures doivent tre rptes aux diffrents points. La technique P.I.V. a par
contre le dsavantage de ne donner que les deux composantes de la vitesse comprises dans le
plan alors que les autres mthodes donnent accs au trois composantes de la vitesse.
Nanmoins, le plan vertical clair par le laser est orient selon lcoulement principal et la
composante tangentielle non mesure est gnralement faible grce la prsence de contrepales qui cassent le mouvement rotatif transmis au fluide par lagitateur en rotation. Ainsi, la
technique P.I.V. sera favorise par rapport aux mthodes HFA et LDA car elle permet de
raliser un gain de temps non ngligeable.
Page 19
Introduction
La technique P.L.I.F. donne accs la carte de concentration dun traceur fluorescent dans le
plan. Elle est souvent couple la technique P.I.V. car les mesures peuvent tre ralises
simultanment. Elle permet de savoir comment un traceur va se rpartir dans la cuve lorsque
celui-ci est inject en un point. Il sagit dune mthode de traceurs au mme titre que la
mthode conductomtrique ou la mthode colorimtrique, nanmoins, elle se distingue par le
fait quau lieu davoir un seul dtecteur, elle a une infinit de dtecteurs placs en chaque
point du plan. La technique P.L.I.F. va permettre ainsi de mesurer le temps de mlange en
chaque point du plan.
Lobjectif gnral de ce mmoire est la caractrisation du mlange dans un bioracteur en

verre de 20 litres, en similitude gomtrique avec celui de 80 litres utilis chez GSK. Les
rsultats exposs dans les chapitres suivants vont venir tout dabord complter ltude du
scale-up ralis par GSK. En effet, les diffrentes hypothses vont tre vrifies ou leves :
-
Les nombres de pompage et de puissance vont tre mesurs exprimentalement ;
La distribution de la taille des microporteurs va tre mesure et prise en compte pour

le calcul de la vitesse de rotation minimum en dessous de laquelle la suspension nest
plus complte.
Ensuite, des rsultats supplmentaires, telles que les mesures des champs de vitesses et du
taux de cisaillement, vont permettre davoir des informations qui seront essentiels pour choisir
une stratgie de monte en chelle judicieuse.
Les objectifs spcifiques de ce mmoire sont les suivants :

1. La caractrisation exprimentale du macromlange par les techniques de mesures
P.I.V. et P.L.I.F. ;
2. La rpartition spatiale des microporteurs dans la cuve en fonction de la vitesse
dagitation ;
3. La reprsentation du mlange par un modle empirique de macromlange.
Lors de la caractrisation exprimentale du mlange, le comportement rhologique de la

suspension de Cytodex1TM est pris en compte. La dtermination de la courbe de viscosit de
la suspension en fonction du cisaillement ncessite un appareillage spcial qui maintient les
microporteurs en suspension durant la mesure. Cet appareillage ntant pas notre disposition
et nayant aucune information fiable sur le comportement rhologique de la suspension, nous
Page 20
Introduction
avons dcid de raliser une tude paramtrique au cours de laquelle les mesures P.I.V. et
P.L.I.F. sont ralises dans des solutions Newtoniennes composes deau et de glycrine et
donc la viscosit varie entre 3 centipoises et 31 centipoises.
Les conditions qui permettent dobtenir une suspension complte de microporteurs dans la
cuve seront dtermines en plusieurs tapes. Tout dabord, la distribution de la taille des
microporteurs sera mesure exprimentalement. Diffrentes techniques ont t testes :
analyse granulomtrique par diffusion de rayonnement, par compteur Coulter et par analyse
dimages. Cette information sera utilise pour dterminer la vitesse limite de chute des
microporteurs par le modle de Stokes tenant compte des interactions entre particules. La
vitesse de rotation minimum en dessous de laquelle la suspension nest plus complte pourra
ainsi tre calcule et vrifie exprimentalement en filmant le comportement de la suspension
en fonction de la vitesse de rotation.
Enfin, le mlange dans le racteur sera reprsent par un modle de macromlange. Les
paramtres des diffrents modles tests seront dtermins par ajustement entre les courbes de
rponse thorique et les courbes exprimentales mesures par P.L.I.F. Un signal de type
impulsion de Dirac sera utilis.
Figure 0-6: Modle de Voncken
Figure 0-7: Modle de Levenspiel
Parmi les modles envisageables, citons par exemple, le modle de Voncken [HOL64] qui
reprsente les boucles de recirculation du fluide par un modle piston dispersif. Les
irrgularits telles que les distributions de vitesses et des longueurs des chemins
dcoulement, les changes de matires entre boucles sont reprsentes par un coefficient de
dispersion. Le coefficient de dispersion est le premier paramtre du modle ; le second
paramtre est le temps moyen de circulation du fluide dans la boucle de recirculation. Ce
modle est trs couramment utilis, mais il nest pas trs explicite dun point de vue
physique : on reprsente lcoulement dans la cuve agite par un coulement piston dispersif.
Le modle de Levenspiel [LEV62] permet de mieux reprsenter ce quon observe
Page 21
Introduction
exprimentalement, car lcoulement dans la cuve est modlis par une srie de cuves
parfaitement mlanges mises en srie. Le modle de Levenspiel comporte galement deux
paramtres : le nombre de cuves et le temps moyen de circulation du fluide dans la boucle de
recirculation.
Avant daborder ces diffrents points, un rappel thorique des diffrentes notions importantes
pour la comprhension des rsultats simpose.
Page 22
Chapitre I
Rappels thoriques
Page 23
Chapitre I : Rappels thoriques
Hydrodynamique au sein dune cuve agite
1.1
Les rgimes dcoulement [PEE06], [VER05], [ROUb]
Exprimentalement, nous constatons que trois rgimes dcoulement au sein de la cuve se

succdent lorsque nous augmentons la vitesse de rotation de lagitateur. faibles vitesses, le
rgime laminaire est observ. hautes vitesses, le rgime turbulent apparat. Entre les deux
cas extrmes, un rgime transitoire existe. Ces diffrents types d'coulement se distinguent
par le comportement des filets de fluide les uns par rapport aux autres. Chaque mode
dcoulement est caractris par un intervalle de valeur du nombre de Reynolds ; celui-ci sert
ainsi dchelle de rfrence. Le nombre de Reynolds est un nombre adimensionnel. Il traduit
limportance des forces dinertie par rapport aux forces de viscosit. Ds lors, son expression
thorique est :
Re=
.vitesse caractristique.longueur caractristique
o est la densit du fluide (kg/m3), la viscosit dynamique du fluide (Pa.s).

Lorsque le nombre de Reynolds est appliqu une cuve agite, la longueur caractristique est
le diamtre d de lagitateur en mtre et la vitesse caractristique est N*d o N est la vitesse de
rotation en s-1. Lexpression du nombre de Reynolds devient :
N d2 N d2
Re =
=
O est la viscosit cinmatique (m/s2).
1.1.1 Lcoulement laminaire ( Re < 10 40 ) [VER05],[ROUb]

Lcoulement laminaire est caractris par des valeurs du nombre de Reynolds trs faibles. Ce
rgime est dcrit par des trajectoires de paquets de fluides toutes parallles et labsence de
mouvement de fluide dans une autre direction que celle impos par lagitateur. Ds lors, le
mlange entre couches parallles na lieu que par diffusion molculaire et est indpendante de
la puissance fournie qui est dissipe sous forme de chaleur par le frottement visqueux.
Page 24
1.1.2 Lcoulement transitoire ( 10 40 < Re < 10 000 100 000 ) [VER05]

Lcoulement transitoire est dcrit par lapparition de tourbillons instables: ils se forment en
un point et disparaissent presque instantanment pour se reformer ailleurs. des vitesses de
rotation croissantes, cette turbulence apparat d'abord dans le voisinage immdiat de
l'agitateur et gagne ensuite progressivement le reste de la cuve. Le passage d'un rgime
l'autre dpend de causes qui provoquent la naissance de tourbillons. En effet, les perturbations
existantes au sein du fluide en mouvement ne peuvent pas se maintenir pour des faibles
nombres de Reynolds infrieurs une valeur comprise entre 10 et 40. Elles sont au contraire
d'autant plus facilement entretenues que le nombre de Reynolds est lev et suprieur des
valeurs de 10 000 100 000. Dans une cuve agite, la valeur du nombre de Reynolds pour
lequel les transitions se font entre les diffrents coulements est fonction de la configuration
du systme d'agitation : hauteur de liquide par rapport au diamtre de la cuve, prsence et
nombre de baffles, rapport des diamtres du mobile d'agitation et de la cuve, position, type et
gomtrie du mobile d'agitation
1.1.3 Lcoulement turbulent ( 10 000 100 000 < Re ) [VER05], [ROUb], [MAR07]
Lorsque l'coulement devient suffisamment rapide, ou que les particules de fluide subissent
des acclrations assez svres pour que stablissent des composantes de vitesse
perpendiculaires l'coulement principal, l'coulement devient turbulent. Exprimentalement
des tourbillons et des structures en filaments sont observs, ce sont les structures cohrentes.
Ces structures ont un spectre de taille. Les plus grandes ont une taille du mme ordre de
grandeur que le diamtre de lagitateur ; les plus petites ont une dimension caractristique de
quelques microns. Lorsque la turbulence est observe en un point fixe, il est constat que
celle-ci nest pas uniforme dans le temps mais que des bouffes de turbulence se produisent
alatoirement. Ce phnomne sappelle lintermittence de la turbulence. De ces deux
constatations, il est dduit que la turbulence est htrogne dans le temps et dans lespace.
Diffrents modles ont t mis au point pour dcrire la turbulence.
Page 25

Un premier modle est lapproche de Reynolds.
Celui-ci dcrit lcoulement turbulent comme un
coulement moyen auquel se superpose un
coulement
fluctuant
dans
le
temps.
Par
exemple, la composante horizontale de la vitesse

dune particule de fluide Ux est gale la somme
de la vitesse moyenne U x et dune fluctuation
alatoire ux telle que la moyenne de ces
fluctuations u x soit nulle.
Figure I-1: Evolution en fonction du temps de la

vitesse en un point donn
Lorsque cette dcomposition est ralise dans les bilans de matire, de chaleur et dimpulsion,
les moyennes du produit de deux variables, comme par exemple u x u y ne sannulent pas car
la moyenne du produit de deux variables alatoires nest pas gale au produit de leurs
moyennes lorsquelles sont corrles.
Ds lors, le nombre dinconnues dans les bilans
augmente alors que le nombre dquations reste inchang. Le systme est dit non ferm ; des
quations supplmentaires devront tre introduites pour dterminer les inconnues. Ces
quations sont obtenues en crivant des modles de turbulence. Citons par exemple, le modle
Boussinesq qui postule que lcoulement turbulent possde une viscosit accrue appele la
viscosit turbulente T . Cette viscosit est relie la grandeur ui u j , appele le tenseur de
contrainte de Reynolds deux dimensions par la relation :
. ui .u j = .T
U x
,
y
o est la densit du fluide et Ux la vitesse suivant laxe x.
Lintroduction de cette
expression dans le bilan dimpulsion permet de le rsoudre aprs avoir dtermin la valeur de
la viscosit turbulente.
Un second modle, qui dcrit lcoulement turbulent au mme titre que lapproche de
Reynolds, est le modle de la turbulence homogne et isotrope de Kolmogorov. Celui-ci bien
qutant en contradiction avec lhtrognit de la turbulence donne de bons rsultats en
premire approximation. Ce modle suppose que la turbulence est homogne et isotrope. Ds
lors u 'x = u ' y = u ' z o u fait rfrence la valeur quadratique moyenne de la fluctuation. Il
stipule galement que les grands tourbillons, crs par le mouvement de lagitateur et
caractriss par des basses frquences de rotation, conduisent une cascade de structures de
Page 26

plus en plus petites, qui tournent de plus en plus vite, entre lesquelles se transfre lnergie.
Dans les structures les plus petites et tournant extrmement vite (micro chelle), les gradients
de vitesses sont trs levs et les forces de frictions visqueuses contrecarrent leur mouvement
en transformant irrversiblement lnergie cintique en nergie vibrationnelle molculaire, qui
est finalement dissipe en chaleur.
Figure I-2: Concept de Kolmogoroff d'un spectre de taille de tourbillons
Cette chelle partir de laquelle les forces d'impulsion (turbulentes) et les forces visqueuses
(laminaires) s'quilibrent et en dessous de laquelle la dissipation visqueuse prend place est
appele lchelle de Kolmogorov k . Les petites structures sont alimentes en permanence en
nergie car les bouffes de fluide sont renouveles par lagitation constante du mobile. Cet
tat stationnaire implique que la taille des petits tourbillons est indpendante de la taille des
gros tourbillons et ne dpend que de la puissance dissipe localement. Cette puissance
dissipe par unit de masse vaut : ~
u' 3
Dans un dispositif dagitation donn, cette
puissance dissipe sera proportionnelle la puissance volumique dagitation
P
. Le facteur de
V
proportionnalit va dpendre du point considr dans la cuve et du type dagitateur.
1.1.4 Les mobiles dagitation [VER06], [ROUb]

Deux famille dagitateurs existent : Les agitateurs axiaux et les agitateurs radiaux.
Il est vident que l'coulement gnr dans une cuve dpend fortement du type de mobile
d'agitation utilis. La forme et la disposition d'un agitateur dans une cuve doivent tre
adaptes aux fonctions que doit remplir l'agitateur :
La premire fonction est le transfert de lnergie au fluide pour le mettre en

mouvement. Cette fonction est appele laction de pompage ;
Page 27
La seconde est le mlange des composants du fluide impliqus dans le procd. Cette
fonction est appele laction de turbulence.
Le volume de la cuve agite peut tre dcompos en deux rgions dont le degr de mlange
est trs diffrent. Dans la rgion proche de lagitateur, le mlange va tre important et cette
rgion est caractrise principalement par laction de turbulence. Dans le reste du rcipient, le
fluide circule, sous laction du pompage, selon des boucles de recirculation et le mlange est
beaucoup moins intense et se fait par diffusion molculaire et par dispersion laminaire .
Cette dernire rsulte du fait quil existe des distributions de vitesses des diffrents filets
fluides et des dispersions de longueurs des boucles de circulation. Le rsultat de l'opration de
mlange dpendra du rapport de ces deux actions dont la valeur sera essentiellement lie au
type et la gomtrie de l'agitateur.
Il existe une grande varit d'agitateurs dont les caractristiques dpendent de l'application
laquelle ils sont destins. Les diffrentes formes peuvent tre classes en plusieurs catgories
selon les critres suivants :
la direction de l'coulement secondaire qui est induit (radial, axial) ;
le rapport des diamtres de l'agitateur et de la cuve ;
la gamme de viscosit dans laquelle ils sont utilisables,
Dans la mesure o tout agitateur cre un coulement tangentiel par la transmission de son
mouvement rotatif au liquide, l'coulement dans une cuve agite est ncessairement
tridimensionnel. Nanmoins, la prsence de contre pales, leur position et leur nombre rduit
fortement cette composante tangentielle par rapport aux composantes situes dans un plan
vertical. En pratique, il s'est avr utile de diffrencier les mobiles d'agitation selon la
direction de l'coulement principal la sortie de lagitateur. Nous distinguons les mobiles
courant radial et les mobiles courant axial.
Le mobile courant radial expulse le fluide perpendiculairement laxe de lagitation. Les

lignes de courant atteignent la paroi de la cuve et se divise en deux. Les particules de fluides
sont ensuite ramenes vers lagitateur par des boucles de recirculation qui divisent la cuve en
quatre rgions diffrentes.
Page 28
Figure I-3: Reprsentation de l'coulement dans les agitateurs axiaux et radiaux
Ce type de mobile cre des effets de cisaillement importants et est appel mobile de
turbulence. Les turbines de Rushton et les turbines pales incurves font partie de cette
catgorie dagitateur.
Figure I-4: Mobile radial: gauche: turbine Rushton 6 pales droites. droite: turbine droite 6 pales
incurves
Le mobile courant axial pompe le fluide dans la direction parallle laxe dagitation. Les
lignes de courant se divisent en deux au fond du rcipient. Lcoulement est caractris par
deux zones de recirculation. Ces mobiles assurent une circulation du fluide importante et sont
appels des mobiles de pompage. Se trouvent dans cette catgorie des mobiles tels que l'hlice
marine, la turbine pales inclines ou d'autres mobiles de conception plus labore et de
marques dposes.
Figure I-5: Mobiles axiaux (a) hlice marine, (b) turbine pales inclins, (c) Prochem Maxflo Hydrofoil,
(d) Lightnin A315
Page 29
1.2
Les paramtres globaux du mlange
1.2.1 La puissance volumique dissipe [VER05], [ROUb], [EKA91]

Comme explicit dans lintroduction, la culture cellulaire tudie dans ce mmoire est
sensible aux contraintes mcaniques. Ds lors, la puissance volumique dissipe est un lment
cl du scale-up. Il convient dexpliciter les notions qui y sont lies. Premirement, il faut
diffrencier la puissance volumique dissipe de la puissance consomme par le moteur. La
premire est mesure directement sur larbre du moteur dagitation ; elle correspond aux
nergies mcanique et thermique effectivement transfres au fluide par unit de temps et par
unit de volume. Il faut y ajouter les divers rendements mcaniques et lectriques du moteur
pour calculer la puissance consomme par celui-ci.
Si le mobile dagitation est assimil une pompe et que la puissance dissipe est calcule par
lquation de Bernoulli, alors :
P = p Qp
o Qp est le dbit volumtrique (m3/s) et p la variation de pression (Pa).
Le dbit volumtrique pomp Qp est gal au produit de la vitesse priphrique des pales
v p ( = N d ) et de la section balaye A. Pour un mobile coulement axial A =
d2
4
, et pour un
mobile coulement radial A = Ld o L est la hauteur de la pale avec L = cd o c est une

constante. La section balaye A est donc proportionnelle d
dans tous les cas, ce qui
entrane :
Qp N d 3
L'augmentation de pression p est contrebalance par les pertes de charges du systme qui
sont calcules selon la mme expression que celle utilise pour dterminer la perte de charge
dans une conduite. Elles sont proportionnelles au coefficient de frottement (-), la densit
(kg/m3) et au carr de la vitesse de l'coulement U (m/s) :
p U2
Or la vitesse de lcoulement est reli au dbit volumique par: U =
Qp
A
Nd 3
d2
Page 30

p N2 d2
D'o
P N3 d5
Et finalement :
C'est la relation fondamentale utilise pour le calcul de la puissance dissipe en mlange, o

et les autres coefficients de proportionnalit sont regroups pour former le nombre de
puissance Np (adimensionnel), galement appel nombre de Newton ou nombre d'Euler :
P = Np N3 d5
Le nombre de puissance Np est quivalent un coefficient de frottement dans les coulements
en conduite. II dpend du nombre de Reynolds Re, de la gomtrie et du nombre de Froude
Fr. Ce dernier reprsente le rapport entre la force centrifuge et la gravit. Nanmoins les
effets du nombre de Froude sont ngligeables dans une cuve baffle car les contre-pales
empchent la formation dun vortex dans lequel les effets de gravit deviendraient non
ngligeables.
Ds lors, en labsence de vortex, la relation qui lie le nombre de puissance au Reynolds est du
type :
N p = k .Re x
O les valeurs de k et de x dpendent du rgime dcoulement et de la gomtrie tudie.
La reprsentation de lvolution du nombre de puissance en fonction du nombre de Reynolds
est appele la courbe de puissance.
Des exemples sont repris dans la figure 6
Figure I-6: Courbe de puissance pour divers agitateurs. ( H/L=1)
Fondamentalement, trois zones diffrentes se distinguent (les bornes sont donnes titre
indicatif puisque le passage d'un rgime l'autre varie en fonction du fluide, du mobile, de la
gomtrie globale) :
Page 31
Re < 10 : en rgime laminaire, le nombre de puissance diminue inversement au
nombre de Reynolds :
N p Re 1
ou
Np =
c
c.
=
Re N .d 2
P varie donc en fonction de la viscosit. La valeur de la constante c dpend du mobile

dagitation.
10 < Re < 10 4 : en rgime transitoire, il n'y a pas de relation simple entre Ne et Re. La
forme de la courbe est diffrente selon le schma d'coulement engendr par le

mobile.
Re > 104 : en rgime turbulent et en prsence de contre-pales, le nombre de puissance
est constant et indpendant du nombre de Reynolds. Cela signifie que l'on a

P N3 d5
Dans ce cas, P est indpendante de la viscosit et fortement dpendante du diamtre
du mobile d.
Bien que les fabricants fournissent des abaques de Np versus Re pour de larges gammes du
nombre de Reynolds et de la viscosit, la dpendance exacte entre ces grandeurs n'est que
rarement connue ou disponible dans la littrature publique. De nombreux facteurs
gomtriques influencent la valeur de la puissance dissipe : position de l'agitateur, nombre de
mobiles, prsence et nombre de contre-pales, hauteur de liquide, etc. La mthode la plus
exacte est de le dterminer exprimentalement dans le cas du dispositif tudi.
Une deuxime mthode pour caractriser la puissance dissipe est de dfinir la hauteur
thorique H* du mobile dagitation. Cette hauteur thorique reprsente la hauteur thorique
quune pompe dissipant la mme puissance raliserait. Elle est calcule par la relation :
P = .g.Q p .H * . La hauteur thorique H* est li directement la turbulence cre au sein de la

solution. Elle sera utilise par la suite pour comparer laction de la turbulence et laction de
pompage de lagitateur.
Page 32
1.2.2 Le dbit de pompage et le dbit de circulation [VER05], [ROUb],

[EKA91]
Il est plus difficile de dfinir le dbit volumique Q dans le cadre d'un coulement libre comme
celui qui existe dans une cuve agite que dans le cas de lcoulement dun fluide dans une
conduite. Des effets d'entranement existent entre les filets de fluide qui passent rellement
dans lagitateur et ceux situes dans le reste de la cuve. Nous devons donc diffrencier le dbit
de pompage primaire Qp (qui prend place uniquement sur la hauteur d'un mobile radial ou sur
la largeur d'un mobile axial) du dbit de circulation Qc (ou de pompage secondaire), qui prend
en compte l'entranement du fluide adjacent et qui est donc suprieur au dbit de pompage
primaire. Ce dbit de circulation Qc correspond au dbit total entran et peut valoir jusqu'
2,5 fois plus que le dbit de pompage, bien que d'autres auteurs affirment
qu'exprimentalement ce rapport vaut 1,8.
Figure I-7: Dbit de pompage Qp pour un mobile radiale (gauche) et pour un mobile axiale (droite)
Les dbits de pompage Qp et de circulation Qc se calculent comme suit pour un mobile axial :
r2
Q p = 2 v axiale (r , z = 0) r dr
0
r0
Qc = 2 v axiale (r , z ) r dr
0
Avec r la distance par rapport laxe de

lagitateur et z la distance sous lagitateur.
Notons r2 est le rayon de lagitateur tandis
que r0 est la distance mesure par rapport
laxe de lagitateur partir de laquelle la
vitesse vaxiale sannule.
Figure I-8: Dfinition du dbit de pompage et de

circulation
Page 33

Seule la composante de la vitesse axiale est prise en compte. Cette faon de faire provient de
lanalogie avec une pompe sans calandre qui dbite un volume par unit de temps gale
celui du mobile. La composante radiale nest pas prise en compte car le fluide ne sait pas
sortir radialement travers la paroi de la pompe. La valeur de dbit de pompage ainsi
calcule pourra tre compare la hauteur thorique quivalente de cette mme pompe. En
effet, le dbit de pompage caractrise laction de pompage du mobile tandis que la hauteur
thorique quivalente caractrise son action de turbulence. Ainsi un mobile qui a un rapport
Qp/H* faible indique que celui-ci a tendance dissiper rapidement sa puissance sous forme de
turbulence. Le volume, dans lequel cette turbulence est dissipe, est faible. Ce type de mobile
est appel mobile turbulence ; il sagit principalement des mobiles coulement radial.
A loppos, lorsque quun mobile a un rapport Qp/H* lev, il transmettra dabord son nergie
sous forme de dbit avant que celle-ci ne se transforme de lui-mme en turbulence aprs un
certain temps. Ainsi, la turbulence sera rpartie de manire plus homogne dans le volume
liquide.
Ces mobiles appels mobile pompage sont gnralement des agitateurs
coulement axial.
Exprimentalement, il est dmontr que le dbit de pompage est proportionnel la vitesse de

rotation du mobile N et proportionnel au cube du diamtre du mobile d, ainsi :
Q p = N Qp N d 3
Le coefficient de proportionnalit NQp est appel le nombre de pompage. Sa valeur dpend de
la gomtrie du systme et du rgime hydrodynamique et donc du nombre de Reynolds. Pour
des coulements turbulents, NQp devient constant et indpendant du Reynolds.
De la mme faon que le nombre de pompage, le nombre de circulation Nc (-) se dfinit
comme :
N Qc =
Nous constatons que, similairement au rapport
Qc
N d3
Qc
Qp
, le rapport
N Qc
N Qp
est proche de 2, car :
Page 34
N Qc
N Qp
Qc
N d 3 Qc
=
=
Qp
Qp
3
Nd
Une autre grandeur, qui est dduite du dbit de pompage, est le temps de pompage. Elle est
obtenue en divisant le volume de liquide contenu dans la cuve par le dbit de pompage. Il est
dfini comme tant lintervalle de temps moyen entre deux passages dune mme particule de
fluide dans lagitateur. De mme, on obtient le temps de circulation en divisant le volume de
liquide par le dbit de circulation. Ce temps reprsente lintervalle de temps moyen entre
deux passages dans le mme sens dune particule de fluide travers un plan horizontal bien
dfini.
1.2.3 Mlange et temps de mlange [VER05], [ROUb], [MAR07]

Le mlange peut tre dfini comme le processus qui diminue l'htrognit d'un systme, par
exemple le contenu d'une cuve. Diffrents mcanismes contribuent pour rduire les
htrognits. En rgime laminaire, la diffusion intervient principalement. Dans ce
processus, les molcules agites par les mouvements thermiques browniens semblent dcrire
une marche alatoire dans les trois directions de lespace. La consquence de cette marche
alatoire est que la diffusion nest pas efficace pour de grandes distances. Par contre, elle
conduit une homognisation parfaite pour les trs petites chelles et aprs un temps
suffisant. Cest le mcanisme ultime de mlange. En rgime turbulent, diffrents mcanismes
interviennent diffrentes chelles. Lorsquun fluide est mlang une autre, lors dun test
de traceurs par exemple, des agrgats de fluides vont se former sous linfluence des gradients
de vitesses.
Ces agrgats ont une concentration homogne mais la concentration et la
composition voluent dun agrgat lautre. Sous leffet du cisaillement turbulent, la taille
des agrgats diminue progressivement ; la surface de contact entre agrgats augmente par
consquence. La taille des agrgats diminue jusqu lchelle de Kolmogorov o les forces de
viscosit lemportent sur laction de la turbulence. Pour des tailles plus petites que lchelle de
Kolmogorov, le mlange est assur par le cisaillement laminaire et la diffusion molculaire
jusqu une dimension en-dessous de laquelle la diffusion efface les variations de
concentrations restantes. Cette dimension est lchelle de Batchelor ; elle est de lordre de
grandeur du micron.
Page 35

Le temps de mlange tM est dfini comme tant lintervalle de temps ncessaire entre le dbut
de lagitation et le moment o un degr dhomognisation choisi est obtenu dans des
conditions dagitations bien dtermines. Ltat initial est gnralement ralis par linjection
instantane dune certaine quantit de traceur. La dfinition dune composition uniforme
dpend de lchelle laquelle on se situe. Il est bien vident que le temps de mlange ne sera
pas le mme si on se situe lchelle du millilitre ou lchelle molculaire. Le temps de
mlange est fonction des caractristiques physico-chimiques du fluide mlanger, des
conditions dagitation et du systme cuve-agitateur.
Pour un systme dagitation donn et en rgime turbulent, une loi du type : N .tM = k ' Rex a
t trouve exprimentalement. k et x sont des constantes qui dpendent uniquement du type
de mobile.
1.3
Paramtres locaux du mlange
Dans une cuve agite par un mobile, la vitesse des particules de fluide nest pas la mme
partout mais caractrise par un champ de vitesses ; Elles sont maximales dans la zone
djection du mobile et voluent le long des diffrentes boucles de recirculation. Grce aux
mesures P.I.V., nous avons accs ce champ de vitesses sous la forme dun tableau
reprenant la norme et les composantes des vecteurs vitesses disposs des intervalles
rguliers dans le plan clair par le laser. Cette information nous permet de calculer le
gradient des vitesses moyennes et instantanes et daccder la rpartition du cisaillement et
de la dissipation dnergie dans le plan clair par le laser.
1.3.1 Le cisaillement [EKA91], [VER05]

Le cisaillement est classiquement introduit par lexemple suivant : lorsquun fluide est plac
entre deux plaques parallles, lune immobile, lautre se dplaant la vitesse v, un gradient
de vitesse perpendiculaire lcoulement va stablir dans le fluide. En effet, les particules de
fluide, situes au niveau de la plaque immobile, ont une vitesse nulle ; tandis que celles,
situes au niveau de la plaque mobile, se dplacent la vitesse v. La vitesse de cisaillement,
lie ce gradient de vitesses, est dfinie par :
( x, t ) =
d v ( x, t )
dx
Page 36
( x, t ) =
V max
x
Figure I-9: Reprsentation du cisaillement au sein dun matriau pris en sandwich entre deux plans
parallles dont l'un est fixe et l'autre est mobile
o x est orient selon la direction du gradient de vitesse. Elle sexprime en s-1 et est appel le
shear rate en anglais. Suite ce mouvement laminaire de cisaillement, deux couches
adjacentes se dplacent l'une par rapport l'autre, ce qui engendre des forces de frottement
paralllement la surface des couches. Ces forces tangentielles F sont appeles forces de
cisaillement. Le rapport de la force de cisaillement par unit de surface dfinit la contrainte de

dF
cisaillement =
. Cette contrainte de cisaillement, appel shear stress en anglais, a la
dS
dimension dune pression et sexprime en Pascal.
La contrainte de cisaillement et la vitesse de cisaillement sont relies par une loi rhologique
qui dpend de la nature et des proprits du matriau. En effet, la vitesse de cisaillement
rsultant de l'application d'une contrainte de cisaillement dpend de la rsistance que la
substance oppose l'coulement. Cette rsistance est appele la viscosit du fluide et les trois
grandeurs sont relies par la loi rhologique suivante :
Figure I-10: Contrainte de cisaillement en fonction de la vitesse de cisaillement
Si une substance a une viscosit qui est indpendante de la contrainte de cisaillement, on

l'appelle un fluide Newtonien. Dans ce cas, la reprsentation de la contrainte en fonction de la
Page 37

vitesse de cisaillement sera une droite. A loppos, on appelle un fluide Non - Newtonien
ceux dont la viscosit varie avec la contrainte de cisaillement.
Dans une cuve agite, les particules de fluides voisines se dplacent des vitesses
diffrentes. Grce aux mesures P.I.V., nous connaissons les composantes de la vitesse
comprises dans le plan clair par le laser. En parallle avec lcoulement entre deux
plaques, nous pouvons dfinir le cisaillement de la composante Ux de la vitesse comme le
gradient de cette composante dans la direction y et le cisaillement de la composante Uy de la
vitesse comme le cisaillement de cette composante dans la direction x.
1.3.2 La dissipation de lnergie [Mar07],[BAL],[EKA91]

Physiquement, la dissipation de lnergie peut tre explique de la sorte :
Lorsque des particules de fluide frottent les unes sur les autres, une partie de leur nergie
cintique est transforme irrversiblement en chaleur d aux frottements visqueux. La vitesse
laquelle cette nergie mcanique est transforme en chaleur en chaque point est appele la
dissipation de lnergie en ce point. Limportance de la dissipation sera dautant plus leve
que le gradient de vitesse entre les particules de fluide est important et que la viscosit et ds
lors les frottements visqueux sont levs.
Cette dissipation dnergie intervient lchelle de Kolmogorov. En effet, les gradients de

vitesses et les frottements visqueux sont les plus levs dans les petits tourbillons tournant
la frquence la plus leve sur eux-mmes. La thorie de Kolmogorov a t explique au
point 1.1.3, nous conseillons donc au lecteur de relire cette section.
Il existe de nombreuses expressions pour calculer la puissance dissipe en chaque point.
Elles ont toutes la structure dun gradient de la fluctuation de la vitesse u au carr multipli
par la viscosit. Nous utiliserons dans ce travail celle propose par Baldi& al [BAL] qui est la
plus complte :
2
2
2

u
u
u
2 u x + y + u z + 2 u x y + u x u z + y u z
y dx
x y z
z dx
z dy
=
2
2
2
2
u 2 u 2
u y u z
y
x
x
z
+
+
+
+
+
+
z z y y x x
Page 38

Par les mesures P.I.V., seules les fluctuations de vitesses ux et uy
u
gradients x
x
u y
,
y
u z
,
y
ainsi que les
u x
,
sont accessibles. Les gradients non mesurs seront
y
obtenus en supposant une turbulence isotropique. Ds lors, en coordonnes cylindriques o

les vecteurs r et z sont compris dans le plan du laser caractris par un =0, les grandeurs
sont relies par les relations suivantes :
2
2
2
u 1 ur u z
=
+

2 r z

2
2
2
2
2
2
ur u u z u 1 ur u z
=
=
+

=
=
2 z r
r z
2
2
ur u u z u
1 ur u z
=

+
dr
dz
4 r z
Ainsi, lexpression de la dissipation dnergie devient :
2
2
2
u 2
ur u z
u z
ur
u z
r
= 2
2
3
3
2
+
z dr
z
z
r
r
Cette expression sera applique pour le calcul de rpartition de la dissipation de lnergie dans
le plan clair par le laser.
Page 39
La suspension des particules dans une cuve agite

[PEE06], [ROUb], [EKA91]
Comme indiqu dans lintroduction, un des objectifs poursuivi dans ce travail est la
caractrisation de la rpartition des microporteurs dans la cuve agite en fonction de la vitesse
dagitation. Afin de comprendre la mthodologie qui sera suivie dans les chapitres suivants,
introduisons deux notions fondamentales.
La premire est ltat de la suspension. En effet, il faudra distinguer une suspension partielle,
dune suspension complte et dune suspension uniforme. La premire se caractrise par le
fait quune partie seulement des particules est mise en suspension ; les plus grosses restants
sur le fond de la cuve. A loppos, toutes les particules sont mises en suspension dans une
suspension complte mais la concentration nest pas uniforme partout. La concentration est
uniforme dans la cuve lorsque la suspension uniforme est atteinte.
Figure I-11: Illustration d'une suspension partielle, complte et uniforme
Le choix de ltat de la suspension dpendra de lobjectif poursuivi lors de lopration de

mlange. Gnralement, la suspension complte est choisie car elle permet daccder
compltement la surface disponible dveloppe par laire extrieure des microporteurs sans
pour autant consommer un surplus dnergie ncessaire pour lhomognisation de la
concentration.
Page 40

La deuxime notion fondamentale est la sdimentation des microporteurs. Lorsquune
particule chute dans un milieu liquide, plusieurs forces agissent sur elle :
La force de gravit exerce par lattraction de la Terre :

F = solid .Vsolide .g o g est lacclration de la pesanteur
La pousse dArchimde qui est la rsultante des forces de pression

exerce sur un solide lorsque celui-ci est plong dans un liquide :
A = liquide .Vliquide dplac .g
La force de trane qui rsulte de leffet de frottement entre la

1
particule et le liquide adjacent : T = .C x .liquide . As .v 2 o Cx est le
2
coefficient de trane ; As est la surface de la projection de la sphre
sur le plan perpendiculaire direction de la chute et v est vitesse de
chute de la bille.
Au temps initial lorsque la vitesse de la particule et la force de trane sont nulles, la particule
acclre puisque la force de gravit est suprieure la pousse dArchimde. Trs rapidement,
suite laugmentation de la vitesse de chute et de la force de trane, la particule atteint une
vitesse limite constante rsultant de lgalit des forces orientes vers le bas et vers le haut.
Dans le cas dune particule sphrique de diamtre d, cette vitesse est calcule en galisant les
forces et vaut :
v limite =
4d
3Cx
solide
1 .g
liquide
Dans la littrature [15], le coefficient de trane est reli au Reynolds de la particule par la
relation : Cx =
Re p
24
o le Reynolds de la particule est dfini par : Re p =
Ainsi, lexpression de la vitesse limite devient : v limite =
d particule .vlimite .liquide
d p2 .( s l ).g
18.
Cette expression permet de mettre en vidence les grandeurs ncessaires pour modliser la
sdimentation de la particule; savoir la densit du liquide et du solide, la taille de la particule
et la viscosit du fluide. Nanmoins, lorsque plusieurs particules chutent dans un liquide, le
coefficient de trane dune particule sera influenc par le sillage des autres particules. Cela
modifiera la vitesse limite de chute. Zaki [9] a dvelopp un modle tenant compte de ces
Page 41

interactions entre particules. Dans son modle, il corrige la vitesse limite dune seule particule
par la concentration volumique en solide Cv en % et par un facteur empirique m :
v ss = v lim ite (1 Cv ) ]
m
O m = 4,375.Re p 0,0875
Connaissant toutes les grandeurs ncessaires, la vitesse limite de chute peut ainsi tre
calcule. Afin de maintenir une suspension complte, la vitesse de chute des plus grosses
particules doit tre compare la vitesse ascensionnelle. Celle-ci est obtenue en divisant le
dbit de circulation la section de passage du fluide ascendant. Le dbit de circulation tant
reli la vitesse de rotation, ce raisonnement permet de dterminer la vitesse de rotation
minimale partir de laquelle on obtient une suspension complte.
Page 42
Chapitre II
Matriels et mthodes
Page 43
Chapitre II : Matriels et Mthodes
Cuve agite
1.1
Cuve
L'installation exprimentale consiste en une cuve transparente en verre dun diamtre intrieur
D de 305 mm, munie de 2 contre-pales dune largeur b de 30 mm. Le mobile est une hlice
TT produite par Mixel. Deux agitateurs seront tests ; le premier a un diamtre d de 125 mm,
le second a un diamtre d de 150 mm. Ils seront tous deux placs une distance Y de 103
mm du fond de la cuve, ce qui correspond au tiers de la hauteur du fluide (H=315mm). Le
fond de la cuve est hmisphrique et son volume utile est de 20 litres. Les figures 1 et 2
illustrent cet agencement :
Figure II-1: Reprsentation de la gomtrie du

bioracteur tudi
Figure II-2: Photographie de la cuve
La cuve doit tre fabrique en un matriau transparent pour permettre la ralisation des
mesures P.I.V. et P.L.I.F. qui sont des mthodes optiques. De plus, si les mesures taient
ralises telles quelles, les images apparatraient dformes en raison dune part de la
courbure de la cuve et dautre part de la diffrence dindice de rfraction entre lair et le fluide
prsent dans la cuve. Pour remdier ce problme, la cuve en verre est place dans une cuve
rectangulaire en plexiglas remplie galement du mme fluide.
Page 44
Moteur
1.2
Deux moteurs ont t utiliss durant cette tude :

Le premier a t employ durant les mesures
P.I.V. et P.L.I.F. Ses caractristiques sont :
Marque : Jane & Kunkel K.G
Modle : RM27W
Puissance : 90 W
Gamme de vitesses : 40 1440 rpm
Figure II-3: Moteur Jane & Kunkel K.G vu de profil (gauche)

et de face (droite)
Le second achet en cours dexprimentation

pour accder la mesure de la puissance
dissipe se caractrise par :
Marque : Heidolph
Modle : RZR 2102 Control
Puissance : 100 W
Gamme de vitesses: 12 2000 rpm
Figure II-4: Moteur Heidolph vu de profil (gauche) et de face

(droite)
Le second moteur tant lectronique, la vitesse

relle
est
affiche
sur
le
panneau
de
commande. Par contre, le premier moteur tant

nettement plus ancien et la vitesse tant rgle
mcaniquement par un levier, elle est mesure
grce
un
phototachymtre
dont
les
caractristiques sont :
Marque : Lutron
Modle : DT-2268
Gamme de vitesses: 5 99999 rpm
Rsolution : 0.1 rpm
Prcision : 0.05% de la vitesse mesure
Figure II-5: Phototachymtre Lutron vu de face (gauche) et

den haut (droite)
Les vitesses de rotation appliques lors de cette tude sont comprises entre 50 rpm et 120 rpm.
Cette gamme de vitesses est impose par les travaux raliss pralablement par GSK. Elle
permet de dissiper la mme puissance que celle dissipe dans le racteur de 80 L.
Page 45
La mesure de la puissance dissipe est obtenue par la mesure du couple affiche par le moteur
Heidolph.
1.3
Mobile dagitation : Hlice TT de Mixel
Lhlice TT de Mixel est un mobile axial compos de 3 pales incurves inclines dun angle
moyen de 45. La pale est compose de 4 paliers comme indiqu en pointill sur la figure 6.
Elle a une paisseur de 2 mm et une hauteur de 27 mm. Deux diamtres de mobiles seront
tests : 125 mm et 150mm.
Figure II-6: Schma de principe de l'hlice TT vu den haut (a) et de profil (b)
Figure II-7: Hlice TT125
Mesures P.I.V.
2.1
Principe [VER05], [PIVguide02]
Figure II-8: Hlice TT150
La vlocimtrie par images de particules, communment appele P.I.V. (Particle Image

Velocimetry), est une mthode optique non intrusive permettant d'obtenir des cartes de
vitesses instantanes dans un plan de l'coulement tudi. Pour lenregistrement des clichs, le
fluide est ensemenc par des microparticules fluorescentes de densit voisine celle du fluide
afin que ces microparticules suivent lcoulement.
Page 46
Figure II-9: Schma de principe de la P.I.V.
Une source laser pulse gnre deux impulsions lumineuses dcales dans le temps d'un
intervalle dt programmable. Ces impulsions traversent un dispositif optique qui transforme le
faisceau en un plan de lumire. Les particules prsentes dans ce plan sont ainsi claires
deux instants diffrents.
Une camra CCD, place perpendiculairement au plan lumineux, permet d'enregistrer les
positions des particules pour chaque impulsion lumineuse, celles-ci tant enregistres sur des
clichs diffrents. Lenregistrement de ce doublet dimages est ralis un grand nombre de
fois.
Le champ de vitesses de l'coulement V peut tre obtenu partir de cette exprience en

appliquant la formule suivante :

1 D
V=
M t
o D est le dplacement des particules pendant l'intervalle de temps dt, et M est facteur
dchelle qui existe entre la taille de lobjet sur limage et sa taille relle.
Les dplacements dune particule durant dt peuvent tre mesurs s'il est possible d'identifier
dans chaque clich le point lumineux qui correspond la mme particule, c'est--dire si le
problme de correspondance de la P.I.V. peut tre rsolu. Cest ralis par corrlation croise
( cross-correlation ). Cette mthode est dtaille dans les paragraphes suivants.
Page 47
Dispositif exprimental
2.2
(a)
(c)
(b)
(d)
Figure II-10: Photographies (a) de linstallation au complet, (b) du laser, (c) des camras CCD , (d) du
corrlateur en temps rel
Le systme P.I.V.-P.L.I.F. Dantec 1500 system (Dantec, DK) comprend :
Un laser Nd-Yag double cavit dune puissance 2x30 MJ qui produit un faisceau
dune longueur donde de 532 nm. Ce laser est le modle Solo II-30 de la marque New
Wave Gemini ;
Deux camras Hi/Sense P.I.V./ P.L.I.F. de 1280 1024 pixels fournies par Dantec. Il
sagit de camras CCD (Charge Coupled Device) quipes dun objectif AF Micro
Nikkor 60 mm F 2.8D de la marque Nikon ;
Un processeur corrlateur en temps rel 2500 de la marque Dantec ;
Le logiciel FlowManager version 4.00.27 produit par Dantec Dynamics ;
L'ensemencement se fait au moyen de particules de rsine de mlamine marques la

rhodamine B (coloration rose) d'un diamtre moyen compris entre 20 et 40 m et
Page 48

d'une densit gale 1,5 g/cm3. Ces particules mettent un rayonnement maximum
une longueur donde de 590 nm. Un filtre est plac sur les camras afin que le
rayonnement mis par les particules soit enregistr tout en arrtant le rayonnement
mis par le laser. Ce filtre coupe le rayonnement dont la longueur donde est infrieure
570 nm.
La corrlation croise [VER06], [PIVguide02]
2.3
Autour de la rsolution du problme de correspondance des particules, diffrentes tapes

importantes du processus de traitement des images interviennent. Il est ncessaire de les
dcrire afin de comprendre la forme des rsultats obtenus. Ces tapes sont :
La division de limage en fentres dinterrogations dune taille de 32 pixels de large

sur 32 pixels de long. Il y a environ 4000 fentres dinterrogations pour une image.
Ces fentres doivent contenir un minimum de 5 10 particules afin dobtenir un signal
de bonne qualit ;
La rsolution du problme de correspondance pour les particules dans chaque fentre

dinterrogations et lobtention du dplacement moyen des particules comprises dans
cette fentre ;
Le calcul du vecteur moyen dans chaque fentre dinterrogation, calcul partir du

dplacement moyen et du temps entre les deux clichs ;
La validation du vecteur obtenu. En effet, diffrents phnomnes parasites peuvent

rendre le vecteur calcul compltement erron. Par exemple, certaines particules
sortent de la tranche de fluide illumine durant l'intervalle de temps dt et d'autres y
entrent.
Certaines
particules
napparaissent
que
dans
lune
des
fentres
dinterrogations lorsque le dplacement est grand par rapport la taille de celle-ci.
Le problme de correspondance est rsolu par la mthodologie mathmatique suivante.

Dans chaque fentre dinterrogation, un dplacement spatial moyen des particules peut tre
observ dun clich lautre. Ce dplacement spatial peut tre dcrit par un modle de
traitement dun signal numrique linaire comme montr ci-dessous :
Page 49
Figure II-11: Fonction de dplacement spatial
La fonction f ( m, n) dcrit lintensit de la lumire enregistre au temps t au sein de la fentre

dinterrogation et la fonction g ( m, n) dcrit lintensit de la lumire au temps t + t . Cette
dernire peut tre considre comme le rsultat de lapplication dune fonction du
dplacement spatial s ( m, n) la fonction f ( m, n) auquel a t ajout la fonction bruit d ( m, n) .
Les fonctions en lettres capitales sont les transformes de Fourier des fonctions
correspondantes et (u , v) sont les coordonnes dans le domaine frquentiel.
La fonction du dplacement spatial s ( m, n) est directement lie l'coulement du fluide et au
temps entre les deux clichs, tandis que la fonction bruit d ( m, n) rsulte du mouvement de
certaines particules qui entrent ou sortent de la fentre dinterrogation dans la priode entre
les deux images. La tche la plus difficile est l'valuation de la fonction du dplacement
spatial s ( m, n) sur base des valeurs mesures de f ( m, n) et g ( m, n) car la prsence du bruit
complique les choses. La mthode choisie pour estimer la fonction s ( m, n) est la technique
statistique de corrlation croise spatiale. La fonction de corrlation croise fg ( m, n ) est
donne par la relation suivante :
fg ( m, n ) = E f ( m, n ) , g ( m, n )
fg ( m, n ) =
f ( k , l ) g ( k + m, l + n )
k = l =
Lorsque beaucoup de particules s'accordent avec le dplacement calcul, la valeur de la

corrlation est trs leve. Mais il existe galement de petits pics de corrlation croise l o
quelques particules isoles s'accordent avec d'autres particules. La premire est la vraie
corrlation, tandis que les autres sont des corrlations alatoires.
Les particules entrant ou sortant de la fentre dinterrogation entre les deux prises de vues ne
contribuent pas la corrlation vraie car la position initiale ou finale de la particule est
manquante. Elles contribuent cependant aux corrlations alatoires et diminuent ainsi le
rapport signal sur bruit. Nanmoins, le pic le plus intense sera considr comme la vraie
Page 50

corrlation, bien quil puisse tre un pic correspondant au bruit dans le cas dun signal de trs
mauvaise qualit. La position de celui-ci par rapport au centre donne accs la direction, au
sens et la longueur du dplacement des particules dans la fentre dinterrogation.
Figure II-12: Analyse par corrlation croise numrique
A noter que pour avoir un rapport signal sur bruit le plus lev possible, il est conseill
dajuster lintervalle de temps entre deux impulsions lumineuses de manire avoir un
dplacement moyen infrieur au quart de la taille de la fentre dinterrogation. Une
concentration de 5 10 particules par fentre dinterrogation est galement recommande.
Enfin, notons que le logiciel utilise en pratique les transformes de Fourier afin de calculer
efficacement et plus rapidement la corrlation croise. Le processus de calcul est illustr sur la
figure 13.
Lorsque la corrlation est calcule par transforme de Fourier, cette mthode suppose que le
motif dcrit par la position des particules est rgulier. Ceci conduit des particules fantmes
et des corrlations fantmes la priphrie de la fentre dinterrogation. Ce problme est
illustr la figure 14. La window function permet dliminer cela en modifiant lintensit
lumineuse des pixels par un facteur variant entre 0 et 1 selon la position de celui-ci dans la
fentre dinterrogation.
Page 51
Figure II-13: Organigramme de traitement numrique de P.I.V.
Puisquune partie de la fentre dinterrogation nest plus prise en compte, il est conseill de
raliser un overlapping . Cette opration est illustre la figure 15.
Elle consiste
dterminer le vecteur vitesse qui existe dans une fentre dinterrogation dcale par rapport
la grille dfinie pralablement. Cette opration ne permet pas daugmenter la rsolution de
lcoulement tudi mais doit tre vue comme une interpolation obtenue partir des images
brutes. Enfin, la filter function permet damliorer le rsultat obtenu en attnuant le bruit
provenant, par exemple, de la rflexion lumineuse sur les surfaces prsentent dans le local.
Page 52
Figure II-14: Les particules fantmes et les corrlations

fantmes (flches en pointills) montres dans la figure
gauche sont limines grce la window fonction
dans la figure droite.
Figure II-15: Ilustration d'un overlapping de

50% verticalement
Traitement des images
2.4
Afin dobtenir des images brutes de qualit, divers paramtres doivent tre rgls :
La concentration en particules fluorescentes suffisantes pour avoir 5 10 particules

par fentre dinterrogation ;
Lintervalle de temps entre limage A et limage B dun doublet dimages afin davoir
un dplacement moyen des particules infrieur au quart de la taille de la fentre
dinterrogation.
Un mauvais rglage entrane un rapport signal / bruit faible et se marque par un nombre
important de vecteurs dorientation et de norme aberrantes. Ces paramtres ont t rgls
exprimentalement. La concentration a t ajuste en comptant le nombre de particules par
fentre dinterrogation. Lintervalle de temps optimal a t dtermin en testant une gamme
assez large et en observant son influence sur lvolution du nombre de vecteurs aberrants et
sur lvolution de la norme des vecteurs vitesses. Plus lintervalle de temps est faible et plus
le nombre de vecteurs errons chute. Par contre, lorsque lintervalle de temps devient trs
faible, le dplacement devient trs faible et proche de la limite mesurable et lerreur
augmente. En thorie, la limite devrait tre la taille dun pixel. En pratique, le systme a t
amlior et permet linterpolation de la transforme de Fourier dans un pixel ; ce qui rduit la
limite [13]
1
me de la taille dun pixel.
64
Page 53

Une deuxime mthode pour augmenter la rsolution
des dplacements observables est de rduire la taille
de la zone observe et ds lors la taille que
reprsente un pixel dans limage. Cette mthode a
t applique. Les deux zones tudies sont
indiques par le cadre rouge et le cadre bleu
reprsentant respectivement le coin suprieur gauche
et le coin infrieur gauche de la cuve sur la figure
16. Lcoulement dans la deuxime moiti de la
cuve est obtenu en supposant une symtrie axiale
autour de laxe de lagitateur.
Figure II-16: Zones observes durant l'tude

P.I.V.
Sur base de cette tude, voici les intervalles de temps choisis :
50 rpm
67,5 rpm
85 rpm
102,5 rpm
120 rpm
t pour lhlice TT125
t pour lhlice TT150
Zone basse
5500 s
4500 s
Zone haute
11000s
9000 s
Zone basse
4750 s
3875 s
Zone haute
9500 s
7625 s
Zone basse
4000 s
3250 s
Zone haute
8000s
6250 s
Zone basse
3250 s
2625 s
Zone haute
6500s
4875 s
Zone basse
2500 s
2000 s
Zone haute
5000s
3500 s
Pour chaque vitesse, 150 doublets dimages ont t enregistrs.

Une fois les images brutes obtenues, le programme Flowmanager laisse une grande libert au
niveau des traitements possibles. Le traitement suivant a t appliqu dans chaque cas :
1. Cross-corrlation : Fentre dinterrogation de 32X32 pixels
Window function : Gaussian : k=1.19

Overlapping : 50% horizontalement et verticalement
Filtre : Low-Pass Gaussian : k=5
2. Pose dun masque qui limine du traitement la zone situe hors de la cuve ainsi que la
zone o se trouve lagitateur.
Page 54

3. Validation des vecteurs obtenus par la mthode :
Moving average validation : Taille de la fentre 3X3 pixels

Nombre ditrations : 3
Facteur dacceptance : 0. 06
4. Calcul du champ de vitesses moyen en ne tenant compte que des vecteurs valids.
Les termes mis en gras sont les paramtres sur lesquels un choix est possible. Ils ont t
ajusts de manire rduire le nombre de vecteurs aberrants tout en ne modifiant pas les
normes et directions des vecteurs corrects.
Le dtail de la signification des coefficients est repris en annexe pour le lecteur intress.
Nanmoins une explication sur la validation par Moving Average Validation simpose.
Cette mthode est base sur le fait que le champ de vitesses volue doucement et que ds lors
un vecteur sera accept ou rejet sur base dune comparaison de sa direction et de sa norme
avec ses voisins.
Dautres mthodes de validation existent. Citons la Peak Height
Validation qui rejette un vecteur si le rapport des tailles du 1er et 2me pics de la corrlation
croise est infrieur une certaine valeur o encore la Velocity Range Validation qui
rejette un vecteur si sa norme est en dehors dun certain intervalle. Les diffrentes validations
ont t testes. Nanmoins la Moving Average Validation prsente de nombreux
avantages par rapport aux autres. Elle limine totalement les vecteurs aberrants. De plus, elle
les substitue par la moyenne obtenue sur les vecteurs voisins. Le choix du nombre minimum
de voisins (8 voisins dans ce cas-ci) rduit fortement le risque de lissage de lcoulement qui
masquerait les changements de direction locaux et brutaux.
Les donnes enregistres dans FlowManager peuvent tre exportes sous format ASCII et
traites par d'autres logiciels. Nous pouvons ainsi effectuer des calculs supplmentaires et
obtenir des graphiques permettant de prsenter les rsultats sous une forme plus conviviale.
Nous avons choisi de traiter nos rsultats laide du logiciel Matlab (version 7.01). Les
diffrentes routines que nous avons conues sont prsentes en annexe. Elles nous permettent
de raliser les graphiques en 2D des champs de vitesses et de calculer les grandeurs globales
du mlange telles que les dbits de pompage et de circulation mais galement les grandeurs
locales telles que le cisaillement, les contraintes et la dissipation de lnergie.
Page 55
Mesures P.L.I.F.
3.1
Thorie la base de cette mthode [PLIFGuide02]
La mthode P.L.I.F. est une mthode non intrusive qui permet davoir accs la carte de
concentration dans un plan de la cuve. Le dispositif exprimental utilis pour cette mthode
est exactement le mme que celui utilis pour la mthode P.I.V. La principale diffrence
rside dans le fait quau lieu davoir une rpartition uniforme des particules fluorescentes
(P.I.V.) dans la cuve, nous nous intressons la manire dont volue au cours du temps une
injection de quelques millilitres dune solution de concentration donne en la substance
fluorescente.
Afin de relier lintensit lumineuse mesure par la camra aux concentrations, un bref rappel
sur la fluorescence simpose. La fluorescence est un processus de dsexcitation atomique au
cours duquel un photon est mis. Ce photon a une nergie plus faible que celui qui a servi
exciter latome. Ainsi, il aura une longueur donde plus grande. En consquence, le spectre
dabsorption et le spectre dmission des particules fluorescentes sont diffrents.
Figure II-17: Spectres d'absorption et d'mission de la Rhodamine 6B dans l'eau
A laide de filtre, il est possible de mesurer uniquement lintensit lumineuse provenant de la

fluorescence des particules. Cette intensit F dpend du niveau dnergie E que le laser
dissipe dans un volume donn Vc, de la concentration en particules fluorescentes C et des
proprits physiques du milieu utilis. Ces grandeurs sont relies par la loi :
F = f optic . Ac .Vc .E.C.Q (T )
O f optic est un facteur qui tient compte de paramtres optiques de linstrumentation ;
Page 56

Q est le rendement quantique de particules la temprature T ;
Ac correspond au phnomne dabsorption qui est intgr sur lentiret du chemin
optique qui spare la particule de la camra. Il vaut : Ac = e .L.C o est le facteur
dabsorption du fluide et L la longueur du chemin optique.
A faible concentration, le phnomne dabsorption est trs faible, Ac vaut 1 et la concentration

est relie lintensit de fluorescence F par une loi linaire:
C
F
avec c = f optic .Vc .Q
c .E0
Le paramtre c devra tre dtermin par une courbe de calibration afin de pouvoir relier par
la suite lintensit fluorescente mesure la concentration qui y correspond.
Application de cette mthode ltude du mlange [Mar06]
3.2
[PLIFguide02]
Cette mthode permet de suivre lvolution au cours du temps dune injection de traceur dans
le plan de la cuve illumin par le laser. Il sagit dune mthode de traceur au mme titre que
la mthode conductomtrique ou la mthode colorimtrique, nanmoins, elle se distingue par
le fait quau lieu davoir un seul dtecteur, elle en a une infinit placs en chaque point du
plan. Cependant, elle ne permet pas de suivre le mlange jusqu lchelle de Batchelor. En
effet, la taille dun pixel dans limage sera lchelle limite o une diffrence de concentration
est distinguable. Cette taille est de lordre de grandeur de 0.3 mm, soit largement suprieur
un micron.
Dispositif exprimental complmentaire
3.3
Le dispositif exprimental (camra, laser, processeur, logiciel) est exactement le mme que
celui utilis lors des mesures P.I.V. Nanmoins, il se distingue par deux points :
Les particules de Rhodamine B sont remplaces par une solution de Rhodamine 6G

(coloration orange)
Puisque la Rhodamine 6G et la Rhodamine B mettent un rayonnement la mme

longueur donde (590 nm), les mesures simultanes P.I.V. et P.L.I.F. ne sont possibles
quen remplaant les particules de mlanine marques la Rhodamine B par des
particules de polyamide dun diamtre moyen de 20 m, dune densit de 1,03 g/cm
Page 57

et mettant dans le visible. Ds lors, un autre filtre laissant passer les rayonnements de
longueurs donde comprises entre 3 nm et 532 nm est utilis pour les mesures P.I.V.
Afin de se rapprocher dun signal Dirac o

lentiret de la Rhodamine 6G est injecte
en un temps trs court, les injections dune
solution de rhodamine 6G 0,008g/L sont
ralises laide dune seringue mdicale de
5ml. Cette quantit permet daugmenter la
concentration en Rhodamine 6G dans la cuve
de 2g/L par injection. La solution de
Rhodamine 6G est injecte au point souhait
dans la cuve grce un dispositif spcifique
Figure II-18: Dispositif d'injection
illustr la figure 18.
Malheureusement, le processeur ayant des problmes de mmoire vive lors de

lenregistrement simultan des mesures P.I.V. et P.L.I.F.,
il a t dcid de raliser
uniquement les mesures P.L.I.F. afin que celles-ci soient de qualit. Lintervalle de temps
entre deux images est fix 250 ms et la camra est rgle en single frame (une seule
image par pulse du laser) afin daugmenter sa sensibilit.
Les images correspondant aux injections ainsi que celles servant pour la courbe de calibration
sont exportes du programme Flowmanager en format tif 16 bits. Elles seront traites dans
lenvironnement Matlab (version 7.01) afin de dterminer le temps de mlange et de
permettre lajustement dun modle compartiment.
Les microporteurs
Dans lapplication qui nous concerne, les cellules cultives dans le bioracteur ne peuvent se
multiplier que si elles saccrochent un support. Pour les raisons dcrites dans lintroduction,
GSK a dcid qu partir dune chelle de 80 litres la culture aurait lieu sur des billes de
Cytodex1TM. Ces billes translucides sont constitues dune matrice de dextrane rticule dans
laquelle sont rpartis de manire homogne des groupes N-N-dithylaminothyl chargs
positivement.
Ces billes sont non poreuses ; les cellules se dveloppent selon une
Page 58

monocouche cellulaire la surface de celles-ci. La granulomtrie de ces microporteurs aura
ainsi de limportance car elle dfinira la surface totale disponible pour la reproduction
cellulaire. Cette surface ne sera rellement disponible que si la suspension des microbilles est
complte. Ltat de la suspension sera influenc par la taille et la densit des microporteurs.
Daprs le fabricant, cette densit moyenne vaut 1.03 ce qui est suprieure la densit de
leau. La taille des microporteurs suit une loi normale qui dpend de la manire dont le
Cytodex1TM est prpar.
Diffrentes techniques ont t utilises pour dterminer la distribution de la taille des

microporteurs. In fine, seule lanalyse dimage donne des rsultats concluants.
Voici un rcapitulatif des techniques utilises :
1. Analyse granulomtrique par diffusion et absorption de rayonnements

a) Principe [ALL] : Lorsquune particule sphrique est claire par un rayon
laser, un motif de diffraction vient se superposer limage gomtrique. La
taille du motif dpend de la taille de la particule, les petites particules
diffractant la lumire selon un angle plus grand que les grandes particules. La
solution contenant les billes de Cytodex1TM est place dans une cellule en
verre agite par un barreau magntique qui maintient les particules en
suspension. Lorsque le rayon traverse leau, aucune image de diffraction nest
observe. Lorsquil traverse une particule, un dispositif optique amne limage
de diffraction sur un dtecteur solide multi-lements. Cette opration tant
rpte un grand nombre de fois par minute, un modle de diffraction tel que
celui de Fraunhofer ou Mie permet dobtenir la distribution de la taille en
volume des billes de Cytodex1TM.
Page 59
Figure II-19: Schma de principe de la granulomtrie par diffusion et adsorption de rayonnement
b) Appareillage utilis :
- Un granulomtre Matersizer 2000 hydro 200S de la marque Malvern
- Le programme de traitement est fourni par la firme Malvern. Le modle de
diffraction de Mie a t appliqu pour dterminer la taille des particules.
2. Analyse granulomtrique par compteur Coulter

a) Principe [ALL] : La solution de Cytodex1TM est disperse dans un lectrolyte
contenu dans un rcipient. Un tube perc dun orifice calibr est plong dans
llectrolyte et deux lectrodes de platine sont places de part et dautre de la
paroi du tube. Lcoulement seffectue travers lorifice sous leffet dune
pompe vide. Un courant circule entre les deux lectrodes et lorsquune
particule franchit lorifice, elle dplace son propre volume dlectrolyte,
changeant limpdance lectrique de lorifice. Ce changement est dtect sous
la forme dimpulsions de tension dont lamplitude est proportionnelle au
volume de la particule. Les impulsions sont mesures et comptes. Suite une
calibration avec des particules de tailles connues, la distribution de la taille en
volume des particules de Cytodex1TM est mesure.
Page 60
Figure II-20: Schma de principe du compteur Coulter
b) Appareillage utilis :
- Le Coulter Multisizier II ;
- Orifice de 1 mm de diamtre ;
- Etalon utilis : CC size standard L43 certified NIST traceable, la taille
nominale des billes de latex utilises est de 43 m;
- Llectrolyte est de lisoton 2 (mlange de NaCl 9g/L, de conservateurs et de
dtergents).
3. Analyse dimages au microscope

a) Principe : Une goutte de solution
contenant les billes de Cytodex1TM est
place entre deux lames dun microscope dobjectif grossissement de 2,5 X.

Limage observe (figure 21) est enregistre et cette
opration
est
rpte
une
quarantaine de fois afin dobtenir

un chantillon dont les tailles sont
reprsentatives de la population des
billes de Cytodex1TM. Les images
sont
ensuite
traites
par
un
programme danalyse dimages qui

TM
dtermine les contours des billes et Figure II-21: Image des billes de Cytodex1
le rayon quivalent.
obtenu au microscope avec un grossissement

de 2.5 fois
Page 61
b) appareillage utilis :
- Microscope Olympus Provis avec observation en transmission et objectif de
grossissement de 2,5 X ;
- Camra Olympus D-50 ;
- Calibration ralise avec une grille de calibration, Pyser SGI Limite, S2
Micrometer dune taille de 5 mm par graduation de 0,05 mm avec un certificat
NAMAS ;
- Programme danalyse dimages : Lucia, V4.80, Image Analysis System (CZ).
La routine applique lors du traitement dimages se trouve en annexe
Lorsque la distribution de la taille des microporteurs est dtermine, la vitesse de chute des
plus grandes est calcule par le modle de Stockes amlior par lquation empirique de Zaki
afin de tenir compte des interactions entre particules. Pour obtenir une suspension complte,
la vitesse de rotation minimale de lagitateur qui assure une vitesse ascensionnelle suprieur
la vitesse de sdimentation est calcule. Cette vitesse de rotation tant infrieure 50 rpm
(plus petite valeur teste pour les mesures P.I.V.), la vitesse ascensionnelle y correspondant a
t extrapole des mesures P.I.V.
Les rsultats obtenus ont t vrifis exprimentalement en plaant 20 L dune solution de

Cytodex1TM dans la cuve. Une gamme de vitesses allant de 12 rpm 50 rpm par pas de 3 rpm
a t teste. Pour chaque vitesse, le dispositif exprimental P.L.I.F. ( savoir la camra, le
processeur et le programme Flowmanager) a t utilis pour enregistrer une image toutes les
5 secondes pendant 1 heure.
Fluide utilis lors des mesures P.I.V. et P.L.I.F.
Lutilisation des mthodes P.I.V. et P.L.I.F. ncessite que le milieu soit transparent
puisquelles sont bases sur des mthodes optiques. La suspension contenant les billes de
Cytodex1TM tant trouble, un fluide aux proprits rhologiques similaires doit tre trouv. La
premire tape consiste dterminer la courbe de lvolution de la viscosit en fonction du
cisaillement de la solution contenant les billes de Cytodex1TM. Celle-ci a t ralise grce au
viscosimtre rotatif Bohlin Rheometer CS . Diffrentes types de cellules ont t testes :
cylindres coaxiaux, cone-plan, plan-plan. Une rampe de cisaillement a t impose avec des
Page 62

intervalles de temps de stabilisation entre chaque niveau trs court de lordre de 5 secondes.
Des courbes ont ainsi t obtenues qui tendaient montrer que la suspension de Cytodex1TM
avait un comportement rhofluidifiant. Puisquil tait difficile de trouver un fluide ayant les
mmes proprits rhologiques que la solution contenant les billes de Cytodex1TM, il a t
dcid dutiliser diffrents fluides Newtoniens (solutions de glycerine-eau) dont les viscosits
sont susceptibles de couvrir la gamme de valeurs de viscosit de la solution de Cytodex1TM
dans les conditions de cisaillement rencontres dans la cuve agite. Lors de la dtermination
de la courbe de viscosit de la glycrine, il a t remarqu que les cellules du viscosimtre
avaient une inertie de lordre de 300 secondes et que ds lors les courbes obtenues pour la
solution contenant les billes de Cytodex1TM taient errones. Lorsquun intervalle de temps de
lordre de 300 secondes entre chaque niveau de cisaillement est impos, les billes de
Cytodex1TM ont le temps de sdimenter et seule la viscosit de leau est mesure. Pour obtenir
des mesures fiables de viscosit de la solution de Cytodex1TM, il faut remplacer la partie
mobile du rhomtre rotatif (spindle) par un dispositif spcifique qui maintient les particules
en suspension. Les dlais de livraison pour un dispositif de ce type tant trs long (2 mois) et
le problme ayant t dcouvert assez tardivement (fin mars), nous navons pas pu disposer,
dans le cadre de ce travail, dune mesure fiable de la courbe de viscosit de la suspension de
Cytodex1TM en fonction du cisaillement. Une autre stratgie a du tre adopte. Celle-ci
consiste en ltude paramtrique de lcoulement dans la cuve en fonction de la viscosit. Une
solution Newtonienne compos dun mlange deau et de glycrine a t utilise. Une gamme
de viscosits allant de 3 centiPoises (0.003 Pa.s) 30 centiPoises a t teste.
Un
prolongement intressant pour valider cette stratgie aurait t de faire les mesures P.I.V. et
P.L.I.F. dans un fluide aux mmes proprits rhologiques que celles de la suspension de
Cytodex1TM. Malheureusement, la courbe de viscosit en fonction du cisaillement de la
suspension de Cytodex1TM est arrive trop tardivement (mi mai). Ce prolongement fera ds
lors lobjet dun prochain travail.
Page 63
Chapitre III
Rsultats obtenus par la mthode P.I.V.
Page 64
Chapitre III : Rsultats obtenus par la mthode P.I.V.
Description des champs de vitesses obtenus par les

mesures P.I.V.
1.1
Introduction
Les mesures P.I.V. ont t ralises dans cinq solutions composes dun mlange deau et de
glycrine dont les viscosits sont respectivement 3.15 cP, 9.96 cP, 15.26 cP, 24.6 cP et
31.06 cP. Cinq vitesses de rotation N du mobile ont t testes : 50rpm, 67.5 rpm, 85 rpm,
102.5 rpm et 120 rpm. Le mobile utilis pour mlanger le fluide est une hlice TT (Mixel).
Deux hlices seront testes. La premire a un diamtre d de 125 mm (TT125). La seconde a

un diamtre d de 150 mm (TT150).
Si nous nous souvenons que le nombre de Reynolds dans une cuve agite est dfini
par Re =
N d2
, nous constatons que ltude paramtrique poursuivie dans ce travail fait
varier les diffrents termes qui influencent la valeur du Reynolds.
1.2
Description qualitative de lcoulement dans le plan du laser
Comme expliqu dans la partie appareils et mthodes , le champ

de vitesses nest pas mesur dans lentiret
de la cuve afin
daugmenter la rsolution. La camra est fixe sur les deux zones

reprsentes par le rectangle bleu et le rectangle rouge.
Lcoulement dans le reste de la cuve est obtenu en supposant une
symtrie verticale autour de laxe du mobile dagitation. Ds lors
pour chaque condition, deux images seront obtenues : une
correspondant la zone haute en rouge, lautre correspondant la
Figure III-1: Zones sur
zone basse en bleu. Notons que ces deux zones se chevauchent lesquelles ont t ralisees
les mesures P.I.V.
partiellement.
La structure de lcoulement obtenue dans chaque condition est sensiblement la mme. Elle
est illustre sur la figure 2 o la coloration du fond indique la valeur de la norme du vecteur
vitesse, tandis que leur orientation est reprsente par les flches roses :
Page 65
Masque de laxe et mobile dagitation
Paroi de la cuve
Zone commune aux deux images
Angle
djection
Figure III-2 : Description du champ de vitesse (m/s) produit par lhlice TT125, tournant une vitesse de
85 rpm dans un mlange glycrine eau dune viscosit de 24.6 cP
Lagitateur tourne dans le sens des aiguilles dune montre et vu linclinaison 45 de ses
pales, il aspire le fluide de haut en bas. Ce mouvement cre dans la cuve quatre zones :
Une zone djection situe lextrmit de la pale du mobile. Langle form par
linclinaison de flux avec la verticale est appel angle djection .
Deux boucles de recirculation (zone 2 et zone 3) Elles ont en commun la zone djection
et se sparent au niveau de la paroi de la cuve. La premire remonte le long de la paroi et
Page 66

repasse finalement dans lagitateur. La seconde descend le long de la paroi. Elle remonte
en direction de lagitateur mais les particules de fluide appartenant cette boucle ne
repasseront pas dans lagitateur vu la forme de celui-ci et le pompage de haut en bas
quil imprime au fluide. Elles seront rentraines par les particules de fluide appartenant
la zone djection. Notons que le masque appliqu sur limage est plus grand que la
projection de lhlice TT car cette projection varie suivant langle de rotation. Le masque
couvre toutes ces projections.
Une zone situe en haut de la cuve (zone 4). Lorsque la viscosit est faible et la vitesse
de rotation du mobile est leve, cette zone est englobe dans la premire boucle de
recirculation. Dans le cas contraire, une troisime boucle de recirculation se forme comme
1.3
Influence de la viscosit sur la structure de lcoulement
Comme reprsent sur les figures 1 5 des page 1 4 du fascicule annexe, lobservation la
plus frappante est laugmentation de langle djection lorsque la viscosit augmente. Lorsque
la viscosit augmente, les forces de frottements entre filets de fluide voisins augmentent et
dissipent plus rapidement lnergie cintique fournie au fluide par le mobile. Le fluide perdant
ainsi plus rapidement son inertie, il sera plus vite aspir par la zone situe juste au dessus de
lagitateur et caractrise par une dpression. La premire boucle de recirculation situe cot
du mobile sera, ds lors, plus courte. Ce phnomne a galement une consquence sur
lcoulement dans la zone suprieure de la cuve. Lorsque la viscosit est faible, cette zone fait
partie intgrante de la boucle de recirculation situe gauche de lagitateur. Par contre,
lorsque la viscosit devient importante, une boucle de recirculation tournant dans le sens
contraire des aiguilles dune montre se forme.
La viscosit na pas quun effet sur lorientation des vecteurs vitesses, elle a galement un
effet sur leur norme. Nous constatons que la zone bleue marine, situe en haut gauche de
limage de la zone haute et caractrise par des vitesses faibles, grandit lorsque la viscosit
augmente. Notons que la valeur de la norme du plus grand vecteur diminue lgrement. Pour
une vitesse de rotation de 85 rpm de lhlice TT150, cette norme passe de 0.230 m/s 0.211
m/s lorsque la viscosit augmente de 3.15 cP 31.06 cP.
Page 67

Lensemble de ces phnomnes est donc d laugmentation des forces de frottement qui
dissipent lnergie cintique des particules de fluide rduisant ainsi leur inertie.
1.4
Influence de la vitesse de rotation sur la structure de

lcoulement
Comme observ sur les figures 1 5 des pages 5 8 du fascicule annexe, un accroissement de
la vitesse de rotation du mobile augmente les vitesses des particules de fluide dans la zone
djection et dans les boucles de recirculation. La taille de la zone, situe dans la partie
suprieure gauche du plan et caractrise par des faibles vitesses, diminue. Nous constatons
galement que langle djection du fluide diminue lgrement lorsque la vitesse de rotation
du mobile augmente.
Lorsque le mobile tourne plus vite, il transmet aux particules de fluide une plus grande
nergie cintique, une plus grande vitesse et ds lors une plus grande inertie. Cest cette plus
grande inertie qui explique que les particules de fluide se dplacent plus longtemps dans la
direction axiale (angle djection plus petit) impose par les pales du mobile et quelles
atteignent un mme point dans la cuve avec une vitesse plus importante.
1.5
Influence de la contre-pale sur la structure de lcoulement
La cuve dispose de deux contre-pales en plexiglas. La position de celles-ci vis--vis du

dispositif P.I.V. ne peut pas tre quelconque : elles ne peuvent pas tre dans le plan du laser
sous peine dattnuer par absorption lnergie de celui-ci dans le reste de la cuve ; elles ne
peuvent pas tre devant le plan du laser dans une zone observe par la camra car elles
dforment limage et donnent naissance de nombreux vecteurs aberrants. Ds lors, elles sont
places comme indiqu sur la figure 3 pour toutes les mesures P.I.V. Seule la moiti gauche
de la cuve a t observe par la camra. Ce plan se situe 135 aprs la contre-pale puisque le
Page 68

mobile tourne dans le sens des aiguilles
dune montre. Les places de la camra et
laser
du laser ont t interverties pour les

mesures P.L.I.F afin davoir suffisamment
de recul avec la camra pour enregistrer
lentiret de la cuve. Nous avons profit
camra
Figure III-3 : Disposition du plan du laser vis--vis des

contres-pales.
de ce changement de position pour

raliser une srie de mesure P.I.V. et voir
linfluence de la contre-pale sur la structure de lcoulement. En effet, le plan observ se

trouve 45 aprs la contre-pale. Dans les deux configurations, les distances de la camrta et
du laser vis--vis de la cuve sont rests identiques afin dtre dans les mmes conditions.
Notons que la camra enregistre la partie situe droite de lagitateur dans le plan. Le
mlange prsent dans la cuve a une viscosit de 3.15 cP. Les cinq vitesses de rotation ont t
testes. Les rsultats obtenus sont prsents sur les figures 1 5 des pages 9 16 du fascicule
annexe. La structure de lcoulement est fondamentalement semblable. Deux lgres
diffrences sont noter. Les boucles de recirculation dans la zone basse ont une forme
lgrement plus allonge. De mme, la zone haute en bleu marine, caractrise par des faibles
vitesses, au lieu dtre localise en haut de limage le long de la paroi, se trouve dcale de
celle-ci denviron 3 cm vers le centre de la cuve. Cette distance correspond la largeur de la
contre-pale. Ces deux constatations montrent que la contre-pale a un effet sur la structure de
lcoulement mais cette effet semble suffisamment faible que pour juger lhypothse de
symtrie de lcoulement autour de laxe de rotation acceptable.
1.6
Effet du diamtre du mobile sur la structure de lcoulement
Pour tudier linfluence du diamtre du mobile sur la structure de lcoulement, diffrents

critres de comparaison vont tre utiliss.
Les deux mobiles seront dabord compars mme vitesse de rotation. Lavantage de cette
comparaison est quelle est directe vu la manire dont les mesures ont t prises mais les
rsultats obtenus sont qualitativement vidents avant mme de raliser les mesures.
Les deux mobiles seront ensuite compars mme vitesse en bout de ple. Dans la littrature
[ROUb],[PEE06], cette vitesse priphrique est relie au taux de cisaillement maximum
appliqu au fluide car cest aux extrmits des pales du mobile que les gradients de vitesses
sont les plus importants. Ce critre est intressant car il permet la comparaison des deux
Page 69

mobiles mme cisaillement maximum. Les vitesses priphriques ont t calcules pour les
vitesses de rotation testes. Les conditions mises dans la mme couleur pourront tre
compares :
Tableau III-1:Vitesse en bout de pale en fonction de la vitesse de rotation et du diamtre du mobile
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT125
0.327 m/s
0.441 m/s
0.556 m/s
0.670 m/s
0.785 m/s
TT150
0.392 m/s
0.531 m/s
0.667 m/s
0.805 m/s
0.942 m/s
Enfin, les deux mobiles pourront tre compars sur base dune mme puissance volumique
dissipe. Dans la thorie de la turbulence isotopique, nous avons vu que lnergie tait
transfre travers une cascade de tourbillons de tailles dcroissantes jusqu lchelle de
Kolmogorov. A cette chelle, les tourbillons ont une longueur caractristique = 3
P
une certaine vitesse
P
v = V2

et
qui sont toutes les deux fonctions de la puissance volumique
dissipe P/V. Le microcisaillement est dfini par : i = v et est ds lors aussi fonction de la
puissance volumique dissipe. Lorsque la taille caractristique des microtourbillons est de

lordre de grandeur de la taille des billes de Cytodex1TM, le microcisaillement subit par les
cellules accroches aux billes peut tre important. Ds lors, le critre de comparaison des
mobiles mme puissance dissipe est intressant car il permet de les comparer mme
niveau de microcisaillement. Les mesures et les rsultats au niveau de la puissance volumique
dissipe seront dtaills au point 3. Lhlice TT125 pourra tre compare lhlice TT150
aux vitesses de rotation suivantes car elles dissipent dans ces cas une mme gamme de
puissances volumiques :
Tableau III-2: Vitesses de rotation auxquelles l'hlice TT125 dissipent une mme puissance volumique que
l'hlice TT150
TT125
TT150
67.5 rpm
50 rpm
102.5 rpm
67.5 rpm
La culture cellulaire tant sensible au cisaillement, ces deux derniers critres donneront une
des cls pour le choix du rapport
d
optimal pour le processus de scale-up. Notons que le but
D
Page 70

de ltude ralise dans ce travail se limite fournir une srie dinformations qui viendront
complter celles dont disposent les chercheurs de G.S.K. BIO. A aucun moment, nous ne
pourrons conclure quun rapport
d
est meilleur que lautre car nous navons quune vue
D
fractionne du problme. En effet, nous ne disposons daucune information sur laration du

bioracteur et sur les proprits physiologiques des cellules (contraintes maximales
supportes, laps de temps maximal au cours duquel les cellules supportent une concentration
non optimale en une substance sans changer de mtabolisme...).
Les figures 1 5 des pages 5 8 du fascicule annexe montrent qu mme vitesse de rotation,
plus le diamtre du mobile augmente, plus les vitesses des particules de fluides en chaque
point de la cuve augmentent. Ceci parait logique. A mme vitesse de rotation, un plus grand
mobile pompera un plus grand dbit. Le volume de liquide dans la cuve restant constant, cela
se traduit par des vitesses en chaque point plus importantes. Ds lors, les particules de fluides
ayant des vitesses plus grandes, elles ont une plus grande inertie et la boucle de recirculation
situe gauche du mobile est plus allonge. Nous constatons galement que lorsque le mobile
est plus grand, la zone djection est plus large, ce qui parait logique galement.
Nous constatons que lorsque la vitesse en bout de pale est la mme pour les deux hlices, la
mme gamme de vitesses est observe dans lentiret de lcoulement et les angles djection
sont trs proches. Nanmoins, la largeur de la zone djection pour lhlice TT150 est
toujours suprieure celle de lhlice TT125. Ceci sexplique simplement par le fait que la
pale est plus grande et a ds lors une plus grande zone djection.
Lorsque les deux mobiles sont compars mme puissance dissipe, nous constatons que les
vitesses dans la zone djection sont lgrement plus faibles et que langle djection est plus
grand pour lhlice TT150. La largueur de la zone djection de lhlice TT150 est toujours
suprieure celle de lhlice TT125.
1.7
Conclusion
Nous constatons que toutes les conditions testes donnent lieu une structure dcoulement
semblable. Le nombre de Reynolds a nanmoins un effet sur la taille des boucles, leur nombre
et les vitesses en chaque point de la cuve. Cet effet dpend de la viscosit du fluide, de la
Page 71

taille du mobile et de la vitesse de rotation de celui-ci. La position de la contre-pale vis--vis
du plan observ a galement un effet mais faible vis--vis des autres paramtres.
Page 72
Dbit et nombre de pompage, dbit et nombre de
circulation
2.1
Mthodologie
Les dbits de pompage Qp et de circulation Qc sont obtenus partir des champs de vitesses
selon les formules suivantes :
r2
Q p = 2 v axiale (r , z = 0) r dr
0
r0
Qc = 2 v axiale (r , z ) r dr
0
Le plan z choisi pour les calculer est illustr la figure 4 :
Figure III-4: Position des plans travers lesquels sont calculs les dbits de pompage et de circulation
Comme expliqu au point 1.2.2 du rappel thorique, pour raliser lanalogie du mobile
dagitation avec une pompe et comparer le dbit de pompage la hauteur quivalente H*, le
dbit de pompage est mesur en intgrant les vitesses axiales travers la section balaye par
le mobile, situe dans le plan juste en dessous lagitateur. La moiti de cette section est
indique par la ligne blanche horizontale sur la figure 4. La position de la section travers
laquelle le dbit de circulation est calcul est plus arbitraire. Nous avons choisi de garder le
mme plan que celui du dbit de pompage. La moiti de la section, travers laquelle sont
intgres les vitesses axiales, est reprsente par la ligne blanche prolonge par la ligne noire.
Page 73

En effet, nous arrtons dintgrer les vitesses axiales pour un rayon r0 o celles-ci changent de
signe.
Les nombres de pompage et de circulation sont calculs grce :
N Qp =
2.2
Qp
Nd
N Qc =
Qc
N d3
Rsultats
Le tableau 3 donne une srie de rsultats sur lesquelles nous pouvons voir linfluence de la
viscosit, du diamtre du mobile et de sa vitesse de rotation sur les dbits de pompage et de
circulation.
Tableau III-3: Dbits et nombres de pompage et de circulation de l'hlice TT
Re
TT125
Qp
NQp
Qc
Nqc
Nqc/Nqp
3.15cP
m/h
m/h
50 rpm
3.03
0.517
4.51
0.770
1.49
4480
67.5 rpm
4.10
0.518
5.84
0.738
1.42
6049
85 rpm
5.44
0.546
8.22
0.825
1.51
7617
102.5 rpm
6.25
0.521
9.24
0.769
1.47
9185
120 rpm
7.50
0.533
10.94
0.777
1.45
10753
Re
TT125
Qp
NQp 1
Qc
Nqc
Nqc/Nqp
31.06 cP
m/h
m/h
50 rpm
1.55
0.265
3.55
0.607
2.28
503
67.5 rpm
2.39
0.303
4.77
0.603
1.98
679
85 rpm
2.95
0.296
6.18
0.620
2.09
855
102.5 rpm
4.15
0.346
7.81
0.650
1.87
1031
120 rpm
4.78
0.340
9.34
0.664
1.95
1207
Re
TT150
Qp
NQp 1
Qc
Nqc1
Nqc/Nqp
3.15 cP
m/h
-m/h
50 rpm
5.15
0.509
6.07
0.600
1.17
6452
67.5 rpm
7.41
0.542
8.80
0.643
1.18
8710
85 rpm
8.96
0.521
10.47
0.608
1.16
10969
102.5 rpm
10.92
0.526
12.75
0.614
1.16
13227
120 rpm
12.76
0.525
15.50
0.638
1.21
15485
Re
TT150
Qp
NQp
Qc 1
Nqc
Nqc/Nqp
31.06 cP
m/h
m/h
50 rpm
2.50
0.247
3.91
0.386
1.56
724
67.5 rpm
3.55
0.260
5.38
0.393
1.51
977
85 rpm
5.70
0.331
8.48
0.492
1.48
1231
102.5 rpm
7.12
0.343
10.32
0.497
1.44
1485
120 rpm
9.89
0.407
14.20
0.584
1.43
1738
Logiquement, laugmentation de la vitesse de rotation entrane laugmentation des dbits de

pompage et de circulation.
Page 74

Laugmentation du diamtre du mobile mme vitesse de rotation entrane galement des
plus grands dbits de pompage et de circulation. Bien quil ait t dit au point 1.4 qu mme
vitesse en bout de pale1 la gamme de vitesses pour les deux hlices soit la mme, nous
constatons que le dbit de pompage est plus grand pour lhlice TT150 que pour lhlice
TT125. Ceci est simplement du au fait quon intgre sur une plus grande surface. Lvolution
des dbits de pompage et circulation avec le diamtre du mobile mme puissance dissipe2
est le rsultat de deux effets antagonistes. En effet, nous avons dit au point 1.4 que les vitesses
en chaque point sont plus faibles pour lhlice TT150. Mais lorsque nous calculons les dbits
nous intgrons sur une plus grande surface pour lhlice TT150. Suivant que la diminution de
la vitesse est contrebalance ou non par laugmentation de la surface dintgration, nous
obtenons des dbits de pompage et de circulation respectivement plus grands ou plus petits
pour lhlice TT150.
Laugmentation de la viscosit diminue les dbits de pompage et de circulation. Ce rsultat

tait attendu car, comme expliqu au point 1.3, limportance de la composante radiale crot
lorsque la viscosit augmente. Nanmoins si nous calculons un dbit total compos du dbit
axial travers la surface de lagitateur et du dbit radial travers la surface cylindrique qui
entoure le mobile, nous constatons que ce dbit total diminue toujours avec la viscosit. Ce
rsultat vient soutenir la constatation faite au point 1.3 o il avait t dit que la norme de la
vitesse maximale diminuait. Nanmoins, il faut garder en mmoire que la mthode P.I.V. ne
donne accs quaux deux composantes de la vitesse comprises dans le plan clair par le laser.
La troisime composante lie au mouvement de rotation du fluide nest pas nulle, volue
srement avec la viscosit du fluide et doit avoir un effet sur les deux autres composantes de
la vitesse et ds lors sur les dbits calculs sur base de ces vitesses.
Afin davoir une vue complte, il est plus judicieux de regarder lvolution des nombres de
pompage et de circulation en fonction du Reynolds que den tudier les effets spars des
diffrentes composantes du Reynolds. Cette volution est reprsente aux figures 5 et 6.
1
Pour rappel les hlices sont compares mme

vitesse en bout de pale pour les couples de vitesses de
rotation suivants :
TT125
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
TT125
67.5 rpm
102.5 rpm
TT150
50 rpm
67.5 rpm

puissance dissipe pour les couples de vitesses de
rotation suivants :
Page 75
Lvolution du nombre de pompage des deux hlices est identique car les deux sries de
rsultats se superposent dans le graphique. Il crot progressivement avec le nombre de
Reynolds pour atteindre une valeur constante lorsque le rgime devient turbulent. Cette
volution est celle classiquement observe pour les mobiles axiaux.
Evolution du nombre de pompage en fonction du nombre de Reynolds

0.6
0.5
Nombre de pompage
0.4
TT125
TT150
0.3
0.2
0.1
0
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
nombre de Reynolds
Figure III-5: Evolution du nombre de pompage en fonction du nombre de Reynolds
Evolution du nombre de circulation en fonction du nombre de Reynolds

0.9
0.8
nombre de circulation
0.7
0.6
0.5
TT125
TT150
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
nombre de Reynolds
Figure III-6: Evolution du nombre de circulation avec le nombre de Reynolds
Page 76

Le nombre de circulation crot galement avec le nombre de Reynolds pour atteindre une
valeur constante lorsque le rgime devient turbulent. Par contre, nous constatons que lhlice
TT125 a des nombres de circulation plus levs que lhlice TT150 mme valeur du nombre
de Reynolds.
Les valeurs des nombres de pompage et de circulation, obtenues lorsque lcoulement devient
turbulent, sont lgrement infrieures celles obtenues dans la littrature et indiques dans le
tableau 3.
Tableau III-4: valeurs du nombres de pompage et de circulation de l'hlice TT trouves dans la littrature
Nom de lauteur
Nombre de
Nombre de
Nombre de contre-pale,
pompage
circulation
diamtre du mobile, d/D
Mavros & al [MAV 96]
0.73
0.91
4, d =95 mm, 0.5
Baudou & al [BAUD 97]
0.63
0.79
inconnu
Aubin & al [AUB01]
0.67
1.13
4, d =95 mm, 0.5
0.55
0.78
2, d=125 mm, 0.4
0.55
0.62
2, d=150 mm, 0.5
Mixel : hlice TT [ROUa]
0.96
inconnu
3, 0.25<d/D<0.5
Mixel : hlice TTP [ROUa]
0.65
inconnu
3, 0.25<d/D<0.5
Ce travail
Cette valeur plus faible est srement due la gomtrie du dispositif et en particulier au
nombre de contre-pales. Celles-ci cassant le mouvement rotatif du fluide, le mouvement,
dans les plans passant par laxe du mobile, doit tre plus important. La seule manire de
vrifier cette thse est de raliser les mesures P.I.V. avec 3 ou 4 contre-pales. Cette tude fera
lobjet dun futur travail.
La valeur fournie par le fabricant est nettement suprieure toutes les autres valeurs
rapportes dans la littrature pour le mme mobile. Suite un contact avec le service clientle,
nous avons appris que les amliorations, apportes lhlice TT et permettant davoir un
nombre de pompage aussi important, ne sont effectives que pour des hlices de tailles
consquentes. Pour des hlices TT obtenues par moulage et de tailles infrieures 200 mm, il
faut prendre en considration le nombre de pompage de lhlice TTP valant 0.65. Lors du
scale-up, il faudra garder en mmoire lvolution du nombre de pompage en fonction de la
taille de lhlice. Nanmoins, cette volution va dans le bon sens pour la rsolution du
problme de maintien en suspension des billes de Cytodex1TM.
Page 77
La puissance dissipe
3.1
Mthodologie
Nous accdons la mesure de la puissance dissipe grce la valeur du couple affiche sur le
moteur. La valeur de ce couple affiche dpend de la puissance lectrique consomme par le
moteur. Afin de retirer les pertes dues au rendement mcanique du moteur, la procdure
suivante est applique :
Laxe de lagitateur est retir du mandrin du moteur ;
Le moteur tourne durant 15 minutes vitesse maximale afin de chauffer ;
Le moteur est ensuite rgl la vitesse de rotation laquelle la mesure du couple doit
tre ralise ;
La valeur du couple est amene zro grce au bouton calibration ;
Laxe de lagitateur, lextrmit duquel est fix lagitateur, est replac dans le
mandrin du moteur ;
Le moteur est relanc la vitesse de rotation laquelle la mesure du couple doit tre
ralise, cette mesure saffiche sur lcran ;
Notons que le rendement lectrique du moteur est pris en compte dans la relation qui existe
entre la puissance lectrique consomme et le couple. Cette relation a t tablie par les
concepteurs de moteur Heidolph. La puissance dissipe est obtenue par : P= C. N o le
couple C sexprime en N.m et la vitesse de rotation N sexprime en rad.s-1.
3.2
Evolution de la puissance et du nombre de puissance avec le

nombre de Reynolds
Le tableau 5 donne une srie de rsultats sur lesquels nous pouvons voir linfluence de la
viscosit, du diamtre du mobile et de sa vitesse de rotation sur le couple et la puissance
dissipe.
Comme attendu, le couple ainsi que la puissance dissipe augmentent progressivement

lorsque la vitesse de rotation et la viscosit du fluide augmentent.
Ils augmentent fortement mme vitesse de rotation lorsque le diamtre du mobile augmente.
Le couple tant le produit dune force multiplie par la distance o celle-ci est applique, il est
Page 78

normal quil augmente lorsque le diamtre du mobile augmente. A mme vitesse en bout de
pale3, le couple et donc la puissance dissipe augmentent galement lorsque le diamtre du
mobile augmente. La comparaison des deux mobiles mme puissance dissipe est dans ce
cas-ci triviale.
Tableau III-5: Couple, puissance dissipe et

nombre de puissance de l'hlicce TT
Puissance
W
0.0017
0.0094
0.0222
0.0409
0.0649
Puissance
W
0.0087
0.0213
0.0370
0.0588
0.1026
Puissance
W
0.0139
0.0415
0.0830
0.1566
0.2597
Puissance
W
0.0235
0.0534
0.1201
0.1940
0.3057
1.0
Np
0.091
0.197
0.236
0.251
0.245
Np
0.411
0.400
0.356
0.326
0.350
Np
0.293
0.346
0.354
0.387
0.394
Np
0.446
0.402
0.463
0.433
0.419
0.9
0.8
Couple [N.cm]
Couple
N.cm
~0
0.12
0.25
0.38
0.52
Couple
N.cm
0.16
0.3
0.42
0.55
0.82
Couple
N.cm
0.26
0.58
0.93
1.46
2.06
Couple
N.cm
0.45
0.75
1.35
1.82
2.33
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
Viscosit [cp]
50 rpm
68 rpm
85 rpm
102 rpm
120 rpm
hlice TT de diamtre de 150 mm

3.0
2.5
Couple [N.cm]
TT125
3.15cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT125
31.06 cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
3.15 cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
31.06 cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
hlice TT de diamtre de 125 mm
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
0.00
10.00
20.00
30.00
Viscosit [cp]
50 rpm
68 rpm
85 rpm
102 rpm
120 rpm
Figure III-7: Evolution du couple en fonction

vitesse de rotation et de la viscosit
de la
Comme pour les nombres de pompage et de circulation, regardons lvolution du nombre de

puissance en fonction du nombre de Reynolds.

rotation suivants :
TT125
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
Page 79
Evolution du nombre de puissance en fonction du nombre de Reynolds

0.5
0.45
Nombre de puissance
0.4
0.35
0.3
TT125
0.25
0.2
TT150
0.15
0.1
0.05
0
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
18000
Nombre de Reynolds
Figure III-8: Evolution du nombre de puissance en fonction du nombre de Reynolds
Bien que la dispersion des points soit importante, lvolution du nombre de puissance en
fonction de Reynolds est similaire celles prsentes dans le rappel thorique et la figure 9
qui est fournie par le fabricant : En rgime laminaire, le nombre de puissance diminue de
manire linaire avec le nombre de Reynolds. En rgime transitoire, lvolution avec le
nombre de Reynolds est plus complique. En rgime turbulent, le nombre de puissance est
indpendant du nombre de Reynolds.
Figure III-9: Evolution du nombre de puissance de l'hlice TT et l'hlice TTP en fonction du nombre de
Reynolds, gravure founie par le fabricant Mixel.
Page 80

Les points sur la figure 8 sont fort disperss car la mesure du couple nest pas prcise. Les
couples mesurs sont trs faibles dans labsolu, de lordre de 0.1 2 N.cm et par rapport aux
couples que le moteur est capable de mesurer de manire prcise (valeur nominale de 200
N.cm). La rsolution daffichage du couple est de 0.1 N.cm. Dans chaque configuration, trois
mesures ont t ralises et souvent le couple oscille entre deux valeurs spares de 0.1 N.cm.
La valeur du couple choisie pour le calcul de la puissance et le calcul du nombre de puissance
est la moyenne des trois mesures.
La valeur constante du nombre de puissance obtenue en coulement turbulent est compare

avec celles trouves dans la littrature :
Tableau III-6: Comparaison du nombre de pompage obtenu avec ceux trouvs dans la littrature
Nom de lauteur
Nombre de
Nombre de contre-pale,
pompage
diamtre du mobile, d/D
Mavros & al [MAV 96]
0.65
4, d =95 mm, 0.5
Baudou & al [BAUD 97]
0.60
inconnu
Aubin & al [AUB01]
0.74
4, d =95 mm, 0.5
0.25
2, d=125 mm, 0.4
0.40
2, d=150 mm, 0.5
Mixel : hlice TT [ROUa]
3, 0.25<d/D<0.5
Mixel : hlice TTP [ROUa]
0.38
3, 0.25<d/D<0.5
Ce travail
Les mmes conclusions, que celles faites pour le dbit de pompage, peuvent tre tires. La
gomtrie du systme influence le nombre de puissance. Pour des hlices TT obtenues par
moulage et de tailles infrieures 200 mm, il faut prendre en considration le nombre de
puissance de lhlice TTP valant 0.38. Nous obtenons cette valeur pour lhlice TT dun
diamtre de 150 mm. Nous obtenons une valeur plus faible pour lhlice TT dun diamtre de
125 mm. Ceci peut partiellement sexpliquer par lerreur sur la mesure. En effet, les points
correspondant aux Reynolds les plus levs sont les mesures ralises dans le mlange eau
glycrine de 3.15 cP. Les couples correspondant ces expriences, comme montrs dans le
tableau 4 sont trs faibles et compris entre 0.1 0.55 cP. Par exemple, si on augmente le
couple mesur 120 rpm de 0.55 0.65, ce qui correspond limprcision sur les mesures, on
obtient un nombre de puissance de 0.3 au lieu de 0.25.
Page 81

Nanmoins, tout comme le nombre de pompage, il conviendra de garder en mmoire lors du
scale-up, que le nombre de puissance passera de 0.38 1 pour des hlices TT de tailles
consquentes. Contrairement au nombre de puissance, cette transition va dans le mauvais sens
car elle signifie que laction du microcisaillement du mobile augmente. Cela pourrait tre
nfaste pour la culture cellulaire.
TM
3.3 Puissance dissipe dans 20L de Cytodex1
et concept de
Metzner et Otto
Le couple dvelopp par le moteur lorsque la cuve est remplie de 20L de Cytodex1TM a t
mesur. Ces valeurs sont compares avec celles obtenues dans le mlange eau-glycrine afin
davoir une ide de lordre de grandeur de la viscosit apparente du Cytodex1TM comme
dfinie par le concept de Metzner et Otto [EKA91]. Lorsquun fluide est Non - Newtonien, la
viscosit dans la cuve na pas une valeur unique mais un spectre de valeurs qui dpend de
la rpartition spatiale des gradients de vitesses au sein du fluide. La viscosit apparente est
dfinie comme la viscosit moyenne existant dans la cuve. Elle est dtermine
exprimentalement comme suit : considrons deux quipements (cuve et mobile d'agitation)
identiques, dont l'un contient un fluide Newtonien, et l'autre un fluide Non-Newtonien. Ces
fluides sont agits la mme vitesse de rotation, tout en restant dans le domaine laminaire. La
viscosit du fluide Newtonien est modifie en changeant sa concentration en additif jusqu
obtenir la mme puissance dissipe par l'agitateur dans les deux cuves. Dans ce cas, puisque
toutes les variables sont identiques, on peut affirmer que les viscosits apparentes sont gales
dans les deux systmes. Nous pouvons alors dterminer la viscosit apparente du fluide NonNewtonien dans ces conditions exprimentales en mesurant celle du fluide Newtonien. Les
rsultats suivants sont obtenus :
Tableau III-7: Comparaison des puissances dissipes pour la suspension de Cytodex1TM et pour le
mlange eau-glycrine
TT125
Couple
Puissance
TT 125
Couple
Puissance
3.15cP
N.cm
50 rpm
~0
0.0017
67.5 rpm
0.12
85 rpm
TM
Cytodex1
N.cm
50 rpm
~0
0.00085
0.0094
67.5 rpm
0.01068
0.25
0.0222
85 rpm
0.15
0.25
102.5 rpm
0.38
0.0409
102.5 rpm
0.35
0.0373
120 rpm
0.52
0.0649
120 rpm
0.5
0.0628
0.0222
Page 82

TT150
Couple
Puissance
3.15cP
N.cm
50 rpm
0.26
0.0139
67.5 rpm
0.58
0.0415
TT 150
Couple
Puissance
W
50 rpm
N.cm
0.3
0.0157
67.5 rpm
0.55
0.0391
0.0578
TM
Cytodex1
85 rpm
0.93
0.0830
85 rpm
0.65
102.5 rpm
1.46
0.1566
102.5 rpm
1.33
0.1459
120 rpm
1.65
0.2073
120 rpm
2.06
0.2597
Nous en dduisons, puisque les puissances dissipes dans un mlange eau-glycerine sont
lgrement suprieures celles dissipes dans une suspension de Cytodex1TM, que la viscosit
apparente de la suspension doit tre lgrement infrieure 3.15 cP. Ceci semblerait tre
confirm par les mesures de viscosit ralises avec le rhomtre quip du spindle qui
maintien en suspension les billes de Cytodex1TM durant la mesure. Ces mesures montrent que
la suspension se comporte comme un fluide Newtonien dune viscosit de 0.83 cP. Notons
que le fait que la suspension soit Newtonienne nempche nullement dutiliser le concept de
Metzner et Otto. En effet, ce concept sert mesurer une viscosit moyenne qui dans le cas
dun fluide Newtonien est la valeur prsente en chaque point de la cuve.
3.4 Hauteur quivalente dune pompe et comparaison de laction de
turbulence et de circulation
Le mobile dagitation peut tre assimil une pompe. On dfinit la hauteur thorique
quivalente du mobile H* la hauteur de liquide que raliserait une pompe dissipant la mme
nergie. Cette grandeur est calcule par : P = .g .Q p .H * . Le rapport de
Qp
H*
permet de
comparer laction de circulation, caractrise par Qp, et laction de turbulence, caractrise

par H*, du mobile. Les rsultats suivants sont obtenus :
TT125
3.15 cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
3.15 cP
50 rpm
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
Tableau III-8: Hauteur thorique quivalente et rapport de Qp/H*

H*
Qp
Qp/H*
TT 125
H*
Qp
m
m/h
m/s
31.15 cP
m
m/h
0.00021
3.03
3.93
50 rpm
0.00171
1.55
0.00076
4.10
1.48
67.5 rpm
0.00266
2.39
0.00138
5.44
1.09
85 rpm
0.00384
2.95
0.00224
6.25
0.77
102.5 rpm
0.00438
4.15
0.00293
7.50
0.71
120 rpm
0.00656
4.78
H*
Qp
Qp/H*
TT 150
H*
Qp
m
m/h
m/s
31.15 cP
m
m/h
0.00091
5.15
1.56
50 rpm
0.00288
2.50
0.00185
7.41
1.11
67.5 rpm
0.00448
3.55
0.00313
8.96
0.79
85 rpm
0.00644
5.70
0.00492
10.92
0.61
102.5 rpm
0.00845
7.12
0.00688
12.76
0.51
120 rpm
0.00945
9.89
Qp/H*
m/s
0.25
0.25
0.21
0.26
0.20
Qp/H*
m/s
0.24
0.22
0.24
0.23
0.29
Page 83
Nous constatons que, tout comme la puissance dissipe et le dbit de circulation, la hauteur
thorique quivalente augmente lorsque la vitesse de rotation du mobile augmente. Par contre
le rapport du dbit de pompage sur la hauteur quivalente diminue. Cela signifie que laction
de la turbulence du mobile prend le pas sur laction de circulation.
Lorsque la viscosit augmente, ce rapport chute dramatiquement. En effet, laugmentation de

viscosit fait diminuer le dbit de pompage et augmenter la puissance dissipe et la hauteur
thorique quivalente.
Lorsque le diamtre du mobile augmente mme vitesse de rotation, le dbit de pompage et

la hauteur thorique quivalente augmentent. Mais cette dernire augmentant plus fortement
que le dbit de pompage, leur rapport diminue. Ds lors, mme vitesse de rotation, lhlice
TT150 a une action de turbulence par rapport son action de pompage plus marque que
lhlice TT125.
Par contre, lorsque les deux hlices sont compares mme vitesse en bout4 de pale, nous
constatons que le dbit de pompage et la hauteur thorique quivalente sont plus faibles pour
lhlice TT125 que pour lhlice TT150. Nanmoins dans quatre cas sur six, leur rapport est
galement lgrement plus faible pour lhlice TT125 que pour lhlice TT150. Ainsi mme
niveau de cisaillement maximum, lhlice TT125 a une action de turbulence par rapport son
action de pompage lgrement plus marque que lhlice TT150.
Enfin, mme puissance dissipe5, les valeurs de hauteur thorique obtenues sont comprises
dans la mme gamme. Notons que les cas compars dans chaque couple ne dissipent pas
exactement la mme puissance mais plutt une gamme de puissances assez proche. Comme
indiqu au point 2.2, lvolution des dbits, quand nous passons de lhlice TT125 lhlice
TT150, dpend si la diminution de vitesse est contrebalance ou non par laugmentation de la
4

rotation suivants :
TT125
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
TT125
67.5 rpm
102.5 rpm
TT150
50 rpm
67.5 rpm

rotation suivants :
Page 84
section de calcul du dbit de circulation. Le rapport de
Qp
H*
augmente nettement lorsque la
taille du mobile augmente dans le cas dune solution eau-glycrine de 3.15 cP. Il diminue par
contre trs lgrement dans le cas dune solution eau-glycrine de 31.06 cP. Puisque la
viscosit de la suspension de Cytodex1TM est plus proche de 3.15 cP, nous en concluons, qu
mme niveau de microcisaillement, laction de la turbulence de lhlice TT150 par rapport
son action de pompage est plus importante que celle de lhlice TT125.
Ces conclusions sont tires des grandeurs globales de mlange. Les grandeurs locales, telles
que la rpartition du cisaillement et de la dissipation dnergie dans le plan clair par le laser,
vont permettre de les affiner.
Page 85
Rpartition du cisaillement dans le plan clair par le

laser
4.1
Mthodologie
Grce aux mesures P.I.V., nous avons accs au champ de vitesses dans le plan clair par le
laser. Nous pouvons donc calculer, grce au logiciel Matlab, le champ des gradient de
vitesses y correspondant puisque les vecteurs vitesses sont calculs des intervalles connus,
denviron 2.6 mm lun de lautre et que les valeurs de leurs composantes sont reprises dans
une matrice. Pour rappel, le cisaillement ( x, t ) =
d v ( x, t )
dx
est gnralement dfini en se
basant sur lexemple dun fluide plac entre deux plaques dont lune est immobile et lautre
mobile. Le mouvement de la plaque mobile cre un gradient de vitesse dans le fluide dans la
direction perpendiculaire lcoulement. Par analogie, deux composantes de cisaillement
peuvent tre dfinies dans un plan de la cuve :
La premire dudy correspond au gradient de la composante horizontale Ux de la

vitesse dans la direction verticale y.
La seconde dvdx correspond au gradient de la composante verticale Uy de la vitesse

dans la direction horizontale x.
Ces cisaillements seront reprsents en valeur absolue dans lensemble des figures
commentes dans la suite de ce travail.
Afin de tenir compte de la contribution des deux cisaillements, une grandeur appele
supercis est dfinie comme la somme algbrique des valeurs absolues de dudy et dvdx.
Nous aurions pu calculer supercis par le calcul de la norme
dudy 2 + dvdx 2 . Cette mthode
aurait donn les mmes rsultats qualitatifs que celle que nous avons applique et na pas plus
de sens physique. En effet, pour calculer la norme du cisaillement totale applique en un point
de la cuve, il faut connatre la composante de la vitesse Uz situe hors du plan clair par le
laser ainsi que les quatre composantes du cisaillement (
dU y dU x dU z dU z
,
,
,
) galement
dz
dz dx dy
situes hors du plan clair par le laser. Nous ny avons pas accs par la mthode P.I.V. Ds
lors la mthodologie suivie doit tre vue comme une premire estimation de la position des
zones haut cisaillement et des valeurs de cisaillement subies par les cellules. Une technique
telle que la 3 D P.I.V. permettrait daccder ces composantes manquantes. Ds lors, une
Page 86

rponse plus prcise sur les niveaux de cisaillement pourra tre donne le jour o linstallation
actuelle sera amliore pour permettre de faire des mesures 3 D P.I.V.
4.2 Explication gnrale des rpartitions du cisaillement

Premirement, il ne faut pas lier une vitesse importante en un point un cisaillement
important en ce point. En effet, un cisaillement ne sera important que si les composantes de
vitesses de particules de fluides voisines varient fortement. De mme, des particules de
fluides, caractrises par des vitesses importantes mais trs proches les unes des autres, seront
caractrises par des cisaillements faibles. Ces remarques sont illustres la figure 11.
Si nous nous dplaons de haut en bas le long des lignes blanches sur les deux figures 10 et 11
de la page suivante :
La composante de la vitesse Ux augmente assez rapidement (figure10) ce qui se

marque par un cisaillement croissant.
Une valeur maximale de cisaillement est obtenue pour une valeur de Y=100 mm.
Celui-ci dcrot ensuite pour atteindre une valeur minimale Y=80 mm. Par contre la
composante de la vitesse Ux ne cesse de crotre jusquau Y=80 mm. Lexplication est
illustre sur les schmas ci-dessous. Le profil de Ux selon Y est une cloche prsentant
2 points dinflexion. Avant le premier point dinflexion, la concavit de la courbe est
oriente vers le haut, sa pente et donc le cisaillement croissent en chaque point. Aprs
le point dinflexion, la concavit est oriente vers le bas, la pente et le cisaillement
diminuent en chaque point jusqu atteindre un minimum correspondant au maximum
de la courbe Ux en fonction de Y.
Y=80
Idu /dyI
Y=100
Y=100
Y=65
Y=65
Y=80
La valeur du cisaillement raugmente de Y=80 Y=65. Elle rediminue ensuite alors

que la composante Ux de la vitesse ne cesse de dcrotre de Y=80 jusque Y=30. Cette
Page 87

volution sexplique exactement de la mme manire. Notons que la valeur du
Y (mm)
cisaillement de Ux selon Y est en valeur absolue.
Y (mm)
Figure III-10: Champ de vitesses (m/s) dans le cas d'un solution d'eau-glycrine de 31.06 cP mlange par
l'hlice TT150 85 rpm
Figure III-11: Cisaillement (s-1) de la composante U selon la direction y pour une solution eau-glycrine de
31.06 cP mlange par l'hlice TT150 85 rpm
Page 88

Comme attendu, dans tous les rsultats, la zone haut cisaillement est situe la priphrie de
la zone djection l o les gradients de vitesses sont les plus marqus. Elle est galement
importante le long de la paroi de la cuve o les particules de fluide sont brutalement arrtes.
Elle est relativement faible dans le reste de la cuve.
4.3 Influence de la viscosit de la solution sur la rpartition du
cisaillement dans le plan clair par le laser

Si nous observons lvolution de la rpartition spatiale (figures) et en valeur (histogrammes)
du cisaillement en fonction de la viscosit, nous tirons les observations et conclusions
suivantes :
La valeur maximale du cisaillement de la composante Ux dans la direction y (dudy6)

augmente avec la viscosit (figures 1 5 des pages 17 22 du fascicule annexe).
Comme vu au point 1.3, lcoulement la sortie de la pale devient de plus en plus
radial lorsque la viscosit augmente. Il est ds lors attendu que le gradient de vitesse
la priphrie de la zone djection soit plus marqu.
A contrario, la valeur maximale du cisaillement de la composante Uy dans la direction

x (dvdx7) diminue avec la viscosit (figures1 5 des pages 23 28 du fascicule
annexe). Cela provient de la diminution de limportance de la composante Uy dans la
zone djection. Son gradient de vitesse est ds lors moins marqu.
La gamme de valeurs de la grandeur supercis, qui est dfinie comme la somme

algbrique des valeurs absolues de dudy et dvdx, nvolue pas avec la viscosit
(figures 1 5 des pages 29 34 du fascicule annexe). Bien que les valeurs de supercis
ne semblent pas varier avec la viscosit, la contrainte lie ce cisaillement augmente
dun facteur 10 lorsque la viscosit passe de 3.15 cP 31.06 cP (figures 1 5 des
pages 33 36 du fascicule annexe). En effet, cette contrainte est dfinie comme le
produit de la valeur de supercis par la viscosit de la solution eau-glycrine.
Notons que les zones haut cisaillement (dudy, dvdx, supercis) restent localises la
priphrie de la zone djection et au niveau de la paroi de la cuve. Leur lger
dplacement avec laugmentation de viscosit nest d qu laugmentation de langle
djection dj observe au point 1.3.
Afin dallger le texte, nous appellerons dornavant le cisaillement de la composante U dans la direction y par
dudy.
7
De mme, nous appellerons le cisaillement de la composante V dans la direction x par dvdx.
Page 89
4.4 Influence de la vitesse de rotation du mobile sur la rpartition
du cisaillement dans le plan clair par le laser

Sur les figures 1 5 des pages 29 54 du fascicule annexe, nous constatons que tous les
cisaillements (dvdx, dudy, supercis) augmentent lorsque la vitesse de rotation du mobile
augmente. Ce rsultat tait attendu puisque les vitesses dans la zone djection augmentent.
Ds lors le gradient de vitesse la priphrie de cette zone et au niveau de la paroi augmente
galement. Une augmentation assez brutale est observe dans chaque cas lorsque la vitesse de
rotation passe de 102.5 rpm 120 rpm. Nous aurions pu penser que cela provient dun
changement de rgime dcoulement. Ce nest pas le cas. En effet, sur toutes les figures
reprenant les champs de vitesses (figures 1 et 5 des pages 3 8 )et correspondant des
Reynolds varis, nous constatons que lcoulement juste en dessous de lextrmit de la pale
nest pas aussi rgulier 120 rpm que pour les autres vitesses. Pour les mesures faites 120
rpm, lintervalle de temps entre deux couples dimage est proportionnelle au temps ncessaire
pour que le mobile tourne dun tiers de tour. Ds lors, les champs de vitesses instantans
enregistrs sont tous caractriss par une mme position de la pale de lagitateur par rapport
au plan du laser. Il faudra faire attention de ne plus se retrouver dans cette situation dans les
futures mesures car celles-ci nintgrent pas toutes les situations rencontres dans la cuve.
4.5 Influence de la taille du mobile sur la rpartition du cisaillement
dans le plan clair par le laser

La taille du mobile ne modifie pas la position des zones haut cisaillement ; celles-ci sont
localises la priphrie de la zone djection et au niveau de la paroi pour lhlice TT125 et
pour lhlice TT150.
A mme vitesse de rotation, nous constatons sur les figures et sur les histogrammes (pages 39
54 du fascicule annexe) que la gamme de valeurs de dudy, dvdx et supercis, obtenues avec
lhlice TT de 125mm de diamtre, sont chaque fois infrieures celles obtenues avec lhlice
TT de diamtre de 150mm. Ceci tait attendu. En effet, dune part la gamme de vitesses dans
la zone djection est moins tale pour lhlice TT125 que lhlice TT150. Dautre part, le
volume occup par lhlice TT125 est moindre que celui occup par lhlice TT150. Lespace
disponible pour la zone djection et les deux boucles de recirculaiton est donc plus grand.
Ds lors, une gamme de valeurs plus troite dans un volume plus grand induit forcment des
gradients de vitesses plus faibles.
Page 90
A mme vitesse en bout de ple8, nous observons sur les figures et sur les histogrammes
(pages 39 54 du fascicule annexe), une mme gamme de valeurs pour dudy, dvdx et
supercis. La rpartition de ces valeurs dans le plan clair par le laser est semblable. Cette
observation dmontre exprimentalement que la vitesse en bout de pale est bel et bien relie
au cisaillement maximum.
A mme puissance dissipe9, nous observons sur les figures et sur les histogrammes (pages 39
54 du fascicule annexe) que les cisaillements maxima (dudy, dvdx, supercis) sont plus
faibles pour lhlice TT150 que pour lhlice TT125. Ce rsultat tait attendu puisque nous
avions dj observ au point 1.6 que les vitesses maximales dans la zone djection sont plus
faibles pour lhlice TT150 et que cette zone djection tait plus large. Ds lors ces deux
phnomnes conduisent des gradients plus faibles.
4.6
Influence de la position de la contre-pale sur la rpartition du

cisaillement dans le plan clair par le laser
Dans la description de lcoulement, nous avions dj not que linfluence des contres pales
sur la structure de lcoulement tait extrmement faible. Son influence sur la rpartition du
cisaillement est encore moins perceptible. Ds lors, nous ne nous attarderons pas sur ce point
et le lecteur intress trouvera sur le cd-rom joint ce travail les images correspondant la
rpartition spatiale et en valeur du cisaillement pour un mlange deau et de glycrine de
3.15cP dans la 1re et la 2me configuration.
4.7
Conclusions
En rsum, nous avons remarqu que laugmentation de la viscosit augmentait la valeur

maximale de dudy, diminuait la valeur maximale de dvdx mais avait peu deffet sur les
gammes de valeurs de supercis. Elle a par contre un effet important sur la gamme de valeurs

rotation suivants :
TT125
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
TT125
67.5 rpm
102.5 rpm
TT150
50 rpm
67.5 rpm

rotation suivants :
Page 91

des contraintes car celles-ci sont gales au produit de supercis, qui est constant, par la
viscosit qui augmente dun facteur 10.
Laugmentation de la vitesse entrane llargissement de la gamme de valeurs de dudy, dvdx

et supercis.
A mme vitesse de rotation, les gammes de cisaillements induits par lhlice TT125 sont plus
troites que celles induites par lhlice TT150.
A mme vitesse en bout de pale, la gamme de cisaillements est la mme pour les deux hlices.
Ce rsultat montre exprimentalement que la vitesse en bout de pale est directement lie au
cisaillement maximum.
A mme puissance dissipe, les gammes des cisaillements induits par lhlice TT125 sont
plus larges que celles induites par lhlice TT150.
Enfin, leffet de la contre ple est non perceptible.
Noublions pas que la mthode applique est une premire estimation des valeurs de
cisaillements auxquelles pourraient tre soumises les cellules. En effet, elle ne donne pas une
rponse complte dans le sens o nous navons pas accs la composante de la vitesse et aux
cisaillements hors du plan clair par le laser.
Page 92
Rpartition de la dissipation de lnergie
5.1
Mthodologie
Comme expliqu dans le rappel thorique au point 1.3.2, la dissipation de lnergie en un

point est la vitesse laquelle lnergie cintique des particules de fluide est transforme
irrversiblement en chaleur par les frottements visqueux entre les filets de fluide voisins dans
un tourbillon extrmement petit (chelle de Kolmogorov) tournant trs rapidement sur luimme. Elle sexprime donc en Joule/s et elle sera dautant plus importante que les gradients
des fluctuations de la vitesse sont grands et que la viscosit est grande.
Comme expliqu au point 1.3.2 du rappel thorique, il existe de nombreuses expressions pour
calculer la dissipation de lnergie en chaque point. Nous avons choisi la mthodologie de
Baldi & Al [BAL] car celle-ci a t mise au point spcifiquement partir de mesures P.I.V.
Lorsque nous faisons lhypothse dune turbulence isotropique pour le calcul des
composantes non connues, lexpression de Baldi, pour le calcul de la dissipation de lnergie
en chaque point partir des mesures P.I.V., devient :
2
2
2
u 2
ur u z
u z
ur
u z
r
+
= 2
2
3
3
2
z dr
z
z
r
r
O ur et uz sont les composantes des fluctuations de la vitesse en coordonnes cylindriques

dans lesquelles les coordonnes r et z sont relatives au plan clair par le laser caractris par
=0.
La dissipation de lnergie se produit lchelle de Kolmogorov. Puisque les mesures P.I.V.

ne permettent pas de descendre une chelle aussi petite, nous nobtiendrons en chaque point
quun pourcentage de la valeur de la dissipation de lnergie. Ce pourcentage dpend du
rapport de la rsolution des mesures P.I.V. vis--vis de lchelle de Kolmogorov en ce point.
La rsolution des mesures P.I.V. telles quelles ont t prises est de 2.66 mm puisquun
vecteur moyen est calcul sur une zone de 32X32 pixels avec un overlapping de 50% et quil
y a 6 pixels par mm. Lchelle de Kolmogorov est de lordre de 50 m dans la zone proche de
lagitateur o la dissipation de lnergie est importante. Elle est de lordre de grandeur de 1
mm dans le reste de la cuve. Daprs ltude ralise par Piirto & al [PII00], il semblerait
Page 93

que lorsque le rapport de la rsolution spatiale sur lchelle de Kolmogorov est proche de 2, la
valeur estime de la dissipation de lnergie partir des mesures P.I.V. reprsente 90% de la
valeur relle. Elle chute 65% lorsque le rapport vaut 9. Nous navons aucune information
pour des rapports plus levs.
Une mthode pour augmenter la rsolution des mesures P.I.V. et se rapprocher de lchelle de
Kolmogorov est de rduire la taille de la zone observe par la camra. Ainsi les mesures
seraient ralises dans une srie de petites zones. La rpartition de la dissipation de lnergie
dans lentiret de la cuve serait obtenue en remettant bout bout ces diffrentes zones.
Nanmoins cette mthodologie ncessiterait normment de temps. Elle pourrait faire lobjet
dun futur travail. De plus, le sujet de la dissipation de lnergie calcule partir des mesures
P.I.V. est un domaine trs complexe qui fait lobjet de nombreuses tudes actuellement. Ds
lors, nous naurons la prtention que de laborder de manire qualitative en insistant surtout
sur la manire dont la viscosit, la vitesse de rotation du mobile et la taille modifient sa
rpartition spatiale. Nous garderons en mmoire que les valeurs obtenues en chaque point ne
reprsentent quun certain pourcentage de la valeur relle et que ce pourcentage nest pas
connu de manire prcise.
5.2
Description de la rpartition de la dissipation de lnergie dans

le plan clair par le laser
Dans chaque condition teste, la structure reprsente la figure 12 et 13 est obtenue pour la
rpartition de la dissipation de lnergie dans le plan clair par le laser.
Figure III-12: Rpartition de la dissipation de l'nergie dans la zone haute pour une solution eau glycrine
de 24.60 cP mlange par lhlice TT125 85 rpm
Page 94
Figure III-13: Rpartition de la dissipation de l'nergie dans la zone basse pour une solution eau glycrine
mlange par l'hlice TT125 tournant 85 rpm
Nous constatons que la dissipation de lnergie est trs importante la sortie de la pale de
lagitateur. Elle est encore leve dans la zone djection et est trs faible dans le reste de la
cuve. La zone djection et la zone la sortie de la pale sont caractrises par des fluctuations
de vitesses importantes car la turbulence y est marque. Leur gradient est galement important
comme il est montr la figure 14. Ds lors il est logique vu lexpression de la dissipation de
lnergie que celle-ci y soit importante dans ces zones.
du/dy+dv/dx: somme des cisaillement, solution de glycerine de 24.60cp, TT125, 85rpm
16
160
14
Z (mm)
140
120
12
100
10
80
60
40
20
20
40
60
80
100 120
X (mm)
140
160
180
200
Figure III-14: Gradient de la fluctuation (s-1) de la vitesse pour une solution eau glycrine de 24.60 cP
mlange par l'hlice TT125 tournant 85 rpm
Page 95
5.3
Effet de la viscosit sur la dissipation de lnergie
Nous constatons sur les figures 1 5 pages 57 et 60 du fascicule annexe, que laugmentation
de la viscosit ne modifie pas la taille de la zone o la dissipation de lnergie est suprieure
celle dans le reste de la cuve. Par contre les valeurs dans cette zone augmentent lorsque la
viscosit augmente. Ceci tait attendu. En effet, lorsque la viscosit augmente, les frottements
visqueux augmentent et la dissipation de lnergie augmente. Ce raisonnement se voit
galement directement dans lexpression de la dissipation de lnergie o la valeur de la
viscosit apparat.
5.4
Effet de la vitesse de rotation du mobile sur la dissipation de

lnergie
Nous constatons sur les figures 1 5 des pages 61 64 du fascicule annexe que
laugmentation de la vitesse de rotation induit une augmentation de la dissipation de lnergie
dans la zone situe la sortie de la pale de lagitateur et dans la zone djection. Lorsque la
vitesse de rotation augmente, la turbulence dans la zone djection augmente et les gradients
de la fluctuation de la vitesse augmentent galement. Vu lexpression de la dissipation de
lnergie, il est normal que celle-ci augmente en chaque point.
5.5
Effet de la contre-pale sur la dissipation de lnergie
Dans la description de lcoulement, nous avions dj not que linfluence des contres pales
sur la structure de lcoulement tait extrmement faible. Son influence sur la rpartition de la
dissipation de lnergie est encore moins perceptible. Ds lors, nous ne nous attarderons pas
sur ce point et le lecteur intress trouvera sur le cd-rom joint ce travail les images
correspondant la rpartition de la dissipation de lnergie pour un mlange deau et de
glycrine de 3.15cP dans la 1re et la 2me configuration.
5.6
Effet du diamtre du mobile sur la dissipation de lnergie
A mme vitesse de rotation, la dissipation de lnergie dans la zone djection et la sortie de

la pale est plus importante pour lhlice TT150 que pour lhlice TT125. En effet, lhlice
TT150 induit des gradients de fluctuations de la vitesse plus importants. Notons quau point
3.4, il avait dj t remarqu que le rapport
Qp
H*
de lhlice TT150 est plus faible que celle de
Page 96

lhlice TT125, ce qui signifie que laction de turbulence par rapport laction de pompage de
lhlice TT150 est plus importante que celle de lhlice TT125.
A mme vitesse en bout de pale10, la dissipation de lnergie dans la zone djection et la
sortie de la pale est lgrement plus importante pour lhlice TT125 que pour lhlice TT150.
Notons quau point 3.4, il avait dj t dit que laction de la turbulence par rapport laction
de pompage de lhlice TT125 tait plus important que celle de lhlice TT150.
A mme puissance dissipe11, la dissipation de lnergie est dans la mme gamme de valeurs
pour lhlice TT125 et lhlice TT150. Or lnergie dissipe tant relie au microcisaillement
par sa formule, cela confirme bien que les comparaisons, dans les paragraphes prcdents
faites mme puissance dissipe, le sont mme niveau de microcisaillement.
5.7
Conclusions
La dissipation de lnergie est importante la sortie de la pale du mobile et dans la zone

djection. Ceci tait attendu car la turbulence et les gradients de fluctuations de la vitesse u y
sont marqus. Elle est faible dans le reste du plan clair par le laser.
Laccroissement de la vitesse de rotation de lagitateur et de la viscosit entrane

laugmentation de la dissipation de lnergie. En effet, ces deux grandeurs augmentent
respectivement les gradients de la fluctuation de la vitesse et les forces de frictions qui
apparaissent dans lexpression de la dissipation de lnergie en un point.
A mme vitesse de rotation, laugmentation du diamtre
entrane laugmentation de la
dissipation de lnergie dans la zone djection et la sortie de la pale du mobile.

A mme vitesse en bout de pale, laugmentation du diamtre du mobile entrane une lgre
diminution de la dissipation de lnergie dans la zone djection et la sortie de la pale du
mobile.
10

rotation suivants :
TT125
85 rpm
102.5 rpm
120 rpm
TT150
67.5 rpm
85 rpm
102.5 rpm
11
TT125
67.5 rpm
102.5 rpm
TT150
50 rpm
67.5 rpm

rotation suivants :
Page 97

Ces deux volutions avaient dj t observes lorsque les mobiles avaient t compars sur
base de leurs rapports
Qp
H*
A mme puissance dissipe, les deux mobiles ont une mme gamme de valeurs de la
dissipation de lnergie dans la zone djection et la sortie de la pale. La dissipation de
lnergie tant relie par dfinition au microcisaillement, cela confirme bien que les
comparaisons ralises dans les paragraphes prcdents mme puissance dissipe, le sont
galement mme niveau de microcisaillement.
Enfin, leffet de la contre ple est non perceptible.
Page 98
Chapitre IV
Rsultats obtenus par la mthode P.L.I.F.
Page 99
Chapitre IV : Rsultats obtenus par la mthode P.L.I.F.
Le temps de mlange
1.1
Mthodologie
Le temps de mlange tM est dfini comme tant le temps ncessaire, dans des conditions
dagitation bien dfinies, pour quune injection de traceur se rpartisse de manire uniforme
dans la cuve. Ce temps est mesur exprimentalement grce au dispositif P.L.I.F. Cette
mesure intresse les chercheurs de G.S.K. BIO. car ils sont confronts une situation
similaire lorsquils rgulent, par exemple, le pH par injection dacide ou de base. Dune part,
il est utile de savoir si linjection se rpartit dans la cuve ou si elle reste confine lendroit
o elle est injecte. Dautre part, la valeur du temps de mlange pourra tre compare la
dure durant laquelle les cellules supportent un pH diffrent du pH optimal sans changer de
mtabolisme. Les conditions dinjection optimales pourront ainsi tre choisies. Afin daider
au choix de celles-ci, diffrents paramtres ont t intgrs dans ltude :
Deux points dinjection sont tests. Suite aux contraintes de maintien de la strilit
en cours de culture cellulaire, les points dinjection ne peuvent tre placs que dans la
zone situe la surface du liquide ou dans la zone situe sur la paroi latrale
cylindrique du racteur. Le premier point test est situ la surface du liquide, 3 cm
de laxe de lagitateur. Cette distance laxe a t choisie car elle doit correspondre au
temps de mlange le plus faible pour une injection en surface. En effet, daprs les
mesures P.I.V., lcoulement y est descendant et caractris par des vitesses plus
importantes que dans la zone situe prs de la paroi de la cuve. Ds lors, linjection de
traceur passera aprs un dlai plus court travers le mobile qui la rpartira dans
lentiret de la cuve. Le second point dinjection test est situ sur la paroi de la cuve
hauteur de lagitateur. Cet endroit permet galement un passage assez rapide du
traceur travers lagitateur, ce qui se traduit par un temps de mlange court ;
Trois vitesses sont testes : 50 rpm, 85 rpm, 120 rpm. Les mesures aux vitesses 67.5
rpm et 102.5 rpm ne seront pas ralises car une mesure P.L.I.F. ncessite
intrinsquement un temps nettement plus important quune mesure P.I.V. De plus,
contrairement aux mesures P.I.V. o la moyenne est ralise sur 150 images ce qui
rduit fortement lerreur alatoire, une injection ne reprsente quune seule mesure.
Elle devra ds lors tre rpte deux fois.
Deux viscosits sont testes. Il sagit de la viscosit minimale (3.39 cP) et maximale
(31.39 cP) analyses par P.I.V.
Page 100
Les expriences seront ralises avec lhlice TT125 et lhlice TT150 afin de mettre
en vidence linfluence du diamtre du mobile sur le temps de mlange.
Traitement des images
1.2
Les donnes brutes obtenues sont des images o le niveau de gris est proportionnel en chaque
point la concentration en traceur. Afin de trouver le coefficient de proportionnalit, une
courbe de calibration doit tre ralise. Nanmoins, la valeur du niveau du gris nest pas
uniquement influence par la concentration en substance fluorescente, elle dpend galement
de lnergie du laser comme le montre la relation suivante [PLIFGuide] :
F C c E0
O F est la fluorescence qui est proportionnelle au niveau de gris,

C est la concentration en la substance fluorescente,
c est le coefficient de proportionnalit qui doit tre dtermin par calibration,
E0 est lnergie du laser.
Or comme indiqu dans les publications de Kling&al [Kling], lnergie du laser varie dun
pulse lautre dans le temps. Un energy pulse meter qui est une cellule photolectrique
mesurant chaque pulse lnergie du laser permettrait de corriger chaque image mais
linstallation utilise nen est pas quipe.
Nous pouvons cependant estimer lerreur
introduite en observant la variation du niveau de gris sur un jeu de 300 images correspondant
une concentration uniforme de 20g/L. Cette variation en niveau de gris est retraduite en
concentration et vaut 0.55 g/L.
Ensuite, lorsquune image concentration constante est analyse, on observe que le niveau de
gris de chaque point nest pas constant. Ds lors lnergie du laser varie dans lespace.
Deux phnomnes se superposent :
Dune part, lnergie du laser nest pas constante dans le plan ; elle est plus importante
dans laxe du laser quen priphrie de cet axe.
Dautre part, lnergie du laser est attnue par la matire traverse (verre, solution,
pale de lagitateur) ; elle sera donc plus importante dans la premire moiti de la
cuve situe du cot du laser que dans lautre moiti.
Page 101

Afin de tenir compte de ces deux phnomnes, les coefficients de la courbe de calibration sont
dtermins en chaque pixel de limage grce une routine cre dans lenvironnement Matlab
(version 7.01) et place en annexe.
1.3
Rsultats
La premire ide pour dterminer le temps de mlange a t de tracer lvolution au cours du

temps de la concentration de la substance fluorescente en chaque pixel de limage. Cette
mthode tait irralisable dun point de vue technique (temps de calcul prohibitif et ressources
informatiques insuffisantes) car une image est compose de 1280 pixels X 1024 pixels et une
injection est constitu de 300 images.
La mme mthodologie a ds lors t applique un nombre limit de points dans limage.

Nanmoins, comme observ dans la figure 1 ci-dessous, lvolution de la concentration varie
fortement dun point lautre. Un critre permettant de dterminer le temps de mlange dans
la cuve tait ds lors difficile dfinir.
Figure IV-1: Evolution au cours du temps de la concentration aux endroits indiqus par un point rouge
dans limage. Conditions exprimentales : viscosit 3.39 cP, vitesse de rotation 50 rpm, hlice
TT125, injection au point situ la surface du liquide.
Page 102
Puisqu au moment de linjection et les secondes qui suivent la gamme de niveau de gris dans
limage est trs tale, une dtermination du temps de mlange sur base de lvolution de la
variance est possible. Un masque est dabord appliqu afin dliminer la zone de limage
situe hors de la cuve ainsi que les zones problmatiques telles que celles correspondant la
contre-pale, laxe de lagitateur, au mobile et son ombre. La concentration en traceurs est
calcule en chaque point grce la courbe de calibration du point.
Une variance de
concentration dans lentiret de la zone non masque est calcule. Cette opration est rpte
pour les diffrentes images correspondant une injection. Les diffrentes images successives
sont espaces dun intervalle de temps de 250 ms. La routine Matlab ralisant ces oprations
est reprise en annexe. Comme illustr la figure 2 ci-dessous, la variance est constante avant
linjection. Elle augmente brutalement lors de linjection et puis diminue progressivement.
Elle redevient constante lorsque la concentration en substance fluorescente est uniforme dans
la cuve. Le bruit observ provient de la variation de lnergie du laser qui provoque une
variation de variance de 2.5 units.
Figure IV-2: Evolution de la variance au cours du temps
Le temps de mlange est obtenu en mesurant le temps entre le moment o la variance

augmente et le moment o elle redevient constante. Afin de valider la mthode, les valeurs
Page 103

mesures ont t compares celles obtenues en observant visuellement les diffrentes
images successives. Le critre choisi pour le temps de mlange est le temps ncessaire pour
que plus aucun filet de fluide nait un niveau de gris diffrent de ces voisins. Ce critre est
Figure IV-3: Illustration du critre:

gauche : dbut d'injection
au milieu : le temps de mlange nest pas encore atteint car certains filets de fluide sont encore
plus claires que leur voisins (indiqu par les flches rouges).
droite : le temps de mlange est atteint.
Notons que les lignes obliques trs claires observes en haut de la cuve sont dues une
interfrence entre le rayon du laser incident et le rayon du laser rflchi par la surface du
liquide. La ligne claire verticale situe droite de la cuve est le tube mtallique permettant
linjection du traceur en position basse.
La comparaison des temps de mlange obtenus par les deux mthodes montre que la mthode
base sur la variance sous estime fortement les temps de mlange. En effet, la variance
correspondant de faibles variations de concentration entre filets de fluide voisins est proche
de la valeur concentration uniforme et sa variation est du mme ordre de grandeur que celle
induite par la fluctuation de lnergie du laser. Nanmoins, les faibles variations de la
concentration entre filets de fluide voisins restent perceptibles lil. Cest pourquoi les
rsultats de temps de mlange exprims en seconde et prsents ci-dessous seront bass sur la
mthode visuelle.
3.39 cP
TT125
50 rpm
85 rpm
120 rpm
Tableau IV-1: Tableau rcapitulatif des temps de mlange obtenus en seconde

31.39 cP
Injection Injection Injection Injection
Injection Injection Injection
Injection
TT125
basse 1 basse 2 haute 1 haute 2
basse 1 basse 2 haute 1
haute 2
Non
Non
29.503 50.748 39.497 31.505
50 rpm
80.246
exploitable exploitable
Non
21.752 21.501 19.758 21.501
85 rpm
72.504 53.497
85.002
exploitable
15.753 12.007 14.752
13.26
120 rpm
33.129
41.5
83.205
77.501
Page 104
TT150
Injection Injection Injection Injection

basse 1 basse 2 haute 1 haute 2
TT150
Injection Injection
basse 1 basse 2
Injection
haute 1
50 rpm
22.753
20.499
34.5
35.751
50 rpm
65.514
61.749
85.252
85 rpm
120 rpm
15.002
8.302
11.746
9.51
20.249
11.748
22.001
10.004
85 rpm
120 rpm
37
19.756
30.254
18.506
71.002
54.748
1.4
Injection
haute 2
Non
exploitable
82.759
44.755
Discussion
1.4.1 Influence du point dinjection

Les temps de mlange obtenus en injectant le traceur la surface du liquide sont 1,2 fois 2,5
fois plus levs que ceux obtenus lorsque le traceur est inject au niveau de la surface latrale.
Nanmoins nous remarquons dans le tableau 1 que cette tendance est moins marque lorsque
le mlange a lieu avec lhlice TT125 dans un fluide dune viscosit de 3.39 cP.
La carte des champs de vitesses obtenus par P.I.V. (figures 1 et 5 des pages 1 4 du fascicule
annexe) ainsi que leurs gradients (figures 1 et 5 des pages 29 32 du fascicule annexe)
explique cette tendance. Le traceur se trouve dans une zone o les vitesses sont plus
importantes et ont un effet plus dispersant (gradient de vitesses lev) lorsquil est inject le
long de la surface latrale (appele zone basse) que lorsquil est inject la surface du liquide
(appele zone haute). De plus, le point dinjection bas est plus proche du mobile que le point
dinjection haut. Il faut ds lors un dlai plus court pour que le paquet de traceur atteigne une
premire fois le mobile et soit dispers dans la cuve par celui-ci.
Le choix de rguler le pH en injectant un acide ou une base travers la surface latrale du
racteur hauteur du mobile savre donc plus judicieuse.
1.4.2 Influence du Reynolds travers la vitesse de rotation, la viscosit
et le diamtre du mobile
Dans toutes les configurations, lorsque la vitesse de rotation augmente, le temps de mlange
diminue. Si on trace le graphique de lvolution du temps de mlange en fonction de la vitesse
de rotation, on obtient dans la majorit des cas une droite de pente ngative ou une hyperbole
dcroissante trs aplatie.
Page 105

Evolution du temps de mlange avec la vitesse de rotation du mobile
TT125 3.39 cp injection basse
TT125 3.39 cp injection haute
90
temps de mlange (s)
80
70
60
50
40
30
20
10
0
0.7
0.9
1.1
1.3
1.5
vitesse de rotation (s-1)
1.7
1.9
2.1
Figure IV-4: Evolution du temps de mlange avec le vitesse de rotation du mobile
Lorsque la viscosit augmente, le temps de mlange augmente fortement. Ceci est d deux
faits ; dune part, le coefficient de diffusion diminue si la viscosit augmente, dautre part, la
solution injecte est compose deau et de Rhodamine 6G. Or pour atteindre une viscosit de
31.39 cP, la cuve est remplie dun mlange de 72% de glycrine et de 28% deau dont la
densit vaut 1200 kg/m. Le fluide inject ayant une densit gale 1000 kg/m, une partie de
celui-ci a tendance remonter la surface du liquide et de ne sy incorporer progressivement
que par diffusion. Ce phnomne aurait pu tre supprim en dissolvant la rhodamine 6G dans
un mlange eau-glycrine et en injectant ce mlange dans la cuve mais cela na pas t fait car
lorsque les chercheurs de G.S.K. BIO. injectent une solution acide ou basique pour rguler le
pH, la elle na pas ncessairement la mme densit que le milieu de culture.
Lorsque le diamtre de lagitateur augmente et mme vitesse de rotation, la valeur du temps

de mlange diminue de 12 47% suivant les configurations. Ceci sexplique par les mesures
P.I.V., o les vitesses sont plus importantes (figures 1 5 des pages 5 8) et le cisaillement
plus fort (figures 1 5 des pages 51 54) lorsque le diamtre de lagitateur augmente. Le
volume occup par lagitateur est galement plus important. Or cette rgion est caractrise
par une turbulence plus importante qui favorise lhomognisation de la concentration. La
comparaison des deux hlices sur base de la mme vitesse en bout de pale et sur base de la
mme puissance dissipe ne peut pas tre faite dans ce cas-ci. En effet, puisque les mesures
nont pas t faite 67.5 rpm et 102.5 rpm, les couples sur lesquels nous avions fait la
comparaison dans les rsultats P.I.V. disparaissent.
Page 106

Comme expliqu dans le rappel thorique, il existe une relation entre temps de mlange et le
Reynolds dans la cuve pour des systmes gomtriquement semblables, munis de chicanes et
travaillant en rgime turbulent : N . tM = k ' Re x o k et x dpendent du type de mobile. Les
valeurs de k et de x ont t dtermines par ajustement par la mthode des moindres carrs :
Tableau IV-2: Paramtres ajusts de l'quation reliant le temps de mlange au Reynolds
TT125
TT125
TT125
TT150
TT150
TT150
TT150
injection basse injection haute injection basse injection basse injection haute injection basse injection haute
3.39 cP
3.39 cP
31.39 cP
3.39 cP
3.39 cP
31.39 cP
31.39 cP
x
k
0.6926
3.616
0.6459
3.818
0.9440
4.235
0.6454
3.258
0.6598
3.160
0.9379
4.455
0.9321
4.744
Les valeurs de x obtenues permettent de savoir que la relation entre le temps de mlange et la
vitesse de rotation nest pas linaire dcroissante mais faiblement hyperbolique (tM N-0.35 ou
tM N-0.06). Les valeurs de x et k dpendent de la viscosit. Cela provient srement du
problme de diffrence de densit expliqu ci-dessus. Par contre, les valeurs de x et k ne sont
pratiquement pas influences par la taille de lagitateur et le point dinjection. Lajustement de
lquation sur les rsultats exprimentaux nest pas parfait en toutes valeurs. Nanmoins, cette
relation ajuste pourra servir comme premire approximation pour le calcul du temps de
mlange dans dautres conditions ou pour la stratgie de scale-up.
En conclusion, les phnomnes qui font augmenter le Reynolds, telle que laugmentation de la
vitesse de rotation, laugmentation du diamtre de lagitateur et la diminution de la viscosit,
ont pour effet de diminuer le temps de mlange. Si ce temps de mlange savrait
problmatique pour la qualit de la culture cellulaire, il serait possible de le rduire en jouant
sur ces 3 paramtres. Mais en pratique, une fois la taille de lagitateur choisie et la viscosit
impose par la composition du milieu de culture, seule la vitesse de rotation permet de rduire
le temps de mlange. Nanmoins, une vitesse importante entranera des cisaillements et
contraintes importants qui rduiront galement la qualit de la culture cellulaire. Un optimum
devra donc tre trouv, qui dpendra du mtabolisme cellulaire. Ces grandeurs limites
(contraintes maximales, temps maximal dexposition un pH non optimal) sont toujours
ltude dans les laboratoires de G.S.K. BIO.
Page 107
Modle compartiment de mlange
2.1
Description du modle
Sur base des mesures P.I.V. et P.L.I.F., le mlange dans la cuve est reprsent laide dun
modle compartiment. Ce modle, comme reprsent la figure 5 et 6, est compos de 9
zones considres comme parfaitement mlanges.
3
1
4
2
9
Figure IV-5: Compartimentage de la cuve

vu de face
Figure IV-6: Compartimentage de la cuve

vu d'en haut
La cuve est dcoupe sur sa hauteur en 3 zones :
La zone infrieure comprend la calotte sphrique (hauteur = 128 mm) ;
Les deux autres se rpartissent de manire gale le volume cylindrique situ au dessus
de la calotte sphrique. (hauteur = 97 mm)
Chaque zone est compose de 3 compartiments :
Le compartiment central est un cylindre dont le diamtre est gal celui du mobile ;
Les deux compartiments priphriques se partagent le reste du volume.
Cette structure a t choisie sur base des observations faites partir des mesures P.I.V. et
P.L.I.F. Grce aux mesures P.I.V., nous constatons un coulement important dans le plan
vertical du laser. Cet coulement est traduit par les dbits dchanges axiaux (flches noires)
et radiaux (flches rouges et bleues) travers les diffrentes zones et compartiments. Grce
aux mesures P.L.I.F., nous constatons que la composante transversale de la vitesse non
mesure par P.I.V. nest pas ngligeable puisque le paquet de traceurs fluorescents sort
certains moments du plan du laser pour rapparatre dans le plan de lautre cot de laxe de
lagitateur. Ce mouvement est pris en compte grce la forme des compartiments (cylindre
Page 108

centrale et deux demi couronnes) et grce aux dbits de rotation reprsents par les flches
jaunes et vertes.
2.2
Equations du modle
Les conventions suivantes ont t prises pour les noms des dbits et des concentrations :
Dbits de rotation
debTR : zone haute
debMR : zone du milieu
debBR : zone basse
Dbits radiaux
Lcoulement tant symtrique selon laxe de lagitateur dans le plan clair par le laser, le
dbit radial provenant du compartiment 1 et entrant dans le compartiment 2 est suppos gal
celui provenant du compartiment 3 et entrant dans le compartiment 2. Les deux dbits
radiaux sortant du compartiment 2 sont aussi gaux. Le mme raisonnement est appliqu la
zone du milieu et la zone basse.
debTin : entrant dans le compartiment 1
debTout : sortant du compartiment 1
debMin : entrant dans le compartiment 4
debMout : sortant du compartiment 4
debBin : entrant dans le compartiment 7
debBout : sortant du compartiment 7
Dbits axiaux
debCTdown : orient comp. 1 vers comp. 4
debCTup : orient comp. 4 vers comp. 1
debCBdown : orient comp. 4 vers comp. 7
debCBup : orient comp. 4 vers comp. 7
debPTdown : dbit axial priphrique dirig
debPTup : dbit axial priphrique dirig
zone haute vers zone milieu

debPBdown : dbit axial priphrique dirig
zone milieu vers zone basse
zone milieu vers zone haute

debPBup : dbit axial priphrique dirig
zone basse vers zone milieu
Noms des concentrations

CT1 : zone 1
CT2 : zone 2
CT3 : zone 3
CM1 : zone 4
CM2 : zone 5
CM3 : zone 6
CB1 : zone 7
CB2 : zone 8
CB3 : zone 9
Sur base des donnes gomtriques de la cuve, les volumes des diffrents compartiments sont
calculs. Ces volumes tant fixes au cours du temps, les dbits volumiques entrant dans un
compartiment doivent tre gaux aux dbits volumiques sortant de ce mme compartiment.
Ceci introduit les 6 contraintes suivantes sur le choix des dbits imposs dans le modle :
Page 109
zone centrale haute
debCTup + 2 debTin = deCTdown + 2 debTout
zone centrale milieu
debCTdown + debCBup + 2 debMin = debCTup + debCBdown

+2 debMout
zone centrale basse
debCBdown +2 debBin = debCBup + 2 debBout
zone priphrique haute
debPTup + debTR + debTout = debPTdown + debTR + debTin
zone priphrique milieu
debPTdown + debPBup + debMout + debMR = debPTup

+ debPBdown + debMin + debMR
zone priphrique basse
debPBdown + debBR + debBout = debPBup + debBR + debBin
Des onze dbits pouvant tre choisis librement, huit sont dtermins partir de rsultats P.I.V.
et les trois dbits de rotation sur lesquels nous ne disposons daucune valeur numrique sont
estims.
Disposant de tous les paramtres du modle, lvolution de la concentration au cours du temps

dans les diffrents compartiments est obtenue grce aux quations diffrentielles suivantes :
Compartiment1:
dCT 1
1
=
( debTin (CT 2 + CT 3) ) ( 2 debTout CT 1) ( debCTdown CT 1) + ( debCTup CM 1)
dt
VT 1
Compartiment 2:
dCT 2
1 ( debTin CT 2 ) + ( debTout CT 1) + ( debTR (CT 3 CT 2) ) ( debPTdown CT 2 )
=
dt
VT 2 + ( debTPup CM 2 )
Compartiment 3:
dCT 3
1 ( debTin CT 3) + ( debTout CT 1) + ( debTR (CT 2 CT 3) ) ( debPTdown CT 3)
=
dt
VT 3 + ( debPTup CM 3)
Page 110

Compartiment 4:
dCM 1
1 ( debMin (CM 2 + CM 3) ) ( 2 debMout CM 1) + ( debCTdown CT 1)
=
dt
VM 1 ( debCTup CM 1) ( debCBdown CM 1) + ( debCBup CB1)
Compartiment 5:
( debMin CM 2 ) + ( debMout CM 1) + ( debMR (CM 3 CM 2) ) +
1
dCM 2
=
( debPTdown CT 2 ) ( debPTup CM 2 ) ( debPBdown CM 2 )
dt
VM 2
+ ( debPBup CB 2 )
Compartiment 6:
( debMin CM 3) + ( debMout CM 1) + ( debMR (CM 3 + CM 2) )
1
dCM 3
=
+ ( debPTdown CT 3) ( debPTup CM 3) ( debPBdown CM 3)
dt
VM 3
+ ( debPBup CB3)
Compartiment 7:
dCB1
1 ( debBin (CB 2 + CB3) ) ( 2 debBout.CB1) + ( debCBdown CM 1)
=
dt
VB1 ( debCBup CB1)
Compartiment 8:
dCB 2
1 ( debBin CB 2 ) + ( debBout.CB1) + ( debBR (CB3 CB 2) ) + ( debPBdown CM 2 )
=
dt
VB 2 ( debPBup CB 2 )
Compartiment 9 :
1 ( debBin CB3) + ( debBout.CB1) + ( debBR (CB3 + CB 2) ) + ( debPBdown CM 3)
dCB3
=
dt
VB3 ( debPBup CB3)
A ces quations diffrentielles sont ajoutes des conditions initiales qui simulent linjection de
5 ml dune solution aqueuse de Rhodamine 6G de concentration 8 mg/L dans la zone 1 ou la
zone 6 suivant le point dinjection choisi.
Page 111
2.3
Rsultats
La figure 7 illustre un exemple dvolution au cours du temps de la concentration en

Rhodamine 6G obtenue par le modle dans les diffrents compartiments. La figure 8
reprsente lvolution obtenue dans les mmes conditions partir des images P.L.I.F o la
valeur de la concentration est la moyenne des concentrations des pixels compris dans un
compartiment. Les autres rsultats obtenus sont repris dans le cd-rom joint ce travail.
Figure IV-7: Evolution de la concentration dans chaque compartiment obtenu partir du modle
Conditions opratoires : hlice TT125 tournant 50 rpm dans une solution eau-glycrine dune viscosit
de 3.15 cp. Linjection de 5 ml dune solution de Rhodamine 6G 8mg/L est ralise dans le compartiment
6.
Figur
e IV-8: Evolution de la concentration dans chaque compartiment obtenu partir des mesures P.L.I.F. Les
conditions opratoires sont identiques celle de la figure 7
Page 112
Notons que chelle de temps ne sont pas les mmes dans les deux sries de rsultats. Dans la
figure 7, linjection se produit au temps zro tandis que dans la figure 8 linjection a lieu au
temps t =8 secondes.
Nous constatons que le modle donne une volution similaire aux rsultats exprimentaux
pour les compartiments 2, 5, 7, 8 et 9. Pour le compartiment 6, dans lequel a lieu linjection,
la dcroissance annonce par le modle nest observe sur les rsultats exprimentaux qu
partir du temps t=10 secondes. Enfin le modle ne rend pas compte des rsultats
exprimentaux pour les compartiments 2, 3 et 4.
Ces constations sont expliques si nous imaginons les scnarios suivant :
Les rsultats exprimentaux montre que les particules de traceurs se dplacent en paquets
aprs les secondes qui suivent linjection. Ce paquet quitte le compartiment 6, atteint le
compartiment 3 et puis le compartiment 1 et puis le compartiment 4. Dans ce compartiment, il
est dispers dans les compartiments 7, 8 et 9 sous laction du mobile dagitation.
Par contre, le modle dans sa conception suppose que linjection de traceurs dans le
compartiment 6 se repartit de manire uniforme et instantane dans ce compartiment aprs
linjection. Cette concentration en traceurs uniforme mais suprieure celle du reste de la
cuve se rpartit progressivement selon les dbits dchange entre les compartiments. Ds lors,
la diffrence de scnarios dans le compartiment 6, 1, 3 et 4 explique pourquoi les volutions
de la concentration sont diffrentes. Pour les compartiments 2, 5, 7, 8, 9, le paquet de traceurs
ayant t disperss par le mobile dagitation, le scnarios propos par le modle et celui
obtenu par les rsultats exprimentaux sont les mmes. Les volutions de la concentration
obtenues sont ds lors semblables.
2.4
Conclusions
Comme nous venons de lexpliquer, ce modle ne permet pas de rendre compte compltement
du mlange dans la cuve observ par P.L.I.F.
De plus, les modles compartiments prsentent certaines limitations quil convient davoir en
mmoire.
Page 113

Premirement, plusieurs modles fondamentalement diffrents dans leur conception (cuves
parfaitement mlanges en rseau ou coulement piston dispersif) peuvent donner lieu au
mme rsultat. Il est ds lors trs difficile de faire une discrimination entre les modles. Au
mieux, un choix est fait sur base du type dcoulement auquel nous sommes confronts. Ici,
ce choix nous a conduit crer un modle constitu dun rseau de cuves en srie puisque
lcoulement est caractris par des boucles de circulation dans lesquelles le mlange est plus
ou moins intense.
Deuximement, il est extrmement difficile de prouver quun modle reprsente mieux la
ralit quun autre dans une mme famille de modles (ici rseau de cuves en srie). En
consquence, les modles compartiments et leurs paramtres ne peuvent pas tre extrapols
dune chelle lautre car ils ne sont pas suffisamment lis lcoulement pour que
lextrapolation ait un sens.
Le modle prsent dans ce travail nest quune premire approche de la modlisation du

mlange dans le bioracteur. Un modle nettement plus complexe, bas sur les phnomnes
hydrodynamiques sera dvelopp dans le cadre dun doctorat. Il sera bas sur le suivi
lagrangien dune particule de fluide en rsolvant le bilan de forces qui sapplique sur celle-ci.
Il sera ds lors extrapolable dautres chelles et donnera des rponses sur le temps de sjour
moyen quune particule de fluide et ds lors par extension quune cellule passe en un point du
racteur, sur l histoire des contraintes et des gradients de concentration quelle subit, etc.
Page 114
Chapitre V
Maintien en suspension des microporteurs
Page 115
Chapitre V : Maintien en suspension des microporteurs
Introduction
Les cellules cultives sont adhrentes c'est--dire quelles ne peuvent grandir et se multiplier
que si elles se fixent une surface solide. Le choix de la surface solide sest port sur des
microbilles de Cytodex1TM afin de maximiser le rapport de la surface disponible vis--vis du
volume du racteur. Ds lors, un des buts de lopration de mlange est le maintien en
suspension de ces billes de Cytodex1TM afin de rendre la totalit de la surface disponible la
multiplication cellulaire. Comme indiqu dans le rappel thorique, il existe trois types de
suspension: partielle, complte et uniforme. Dans le cas prsent, une suspension complte sera
recherche car elle permet daccder la totalit de la surface disponible tout en minimisant
la puissance consomme. La vitesse de rotation de lagitateur qui permet de maintenir cette
suspension complte dpend de la vitesse de sdimentation des plus grosses particules. Celleci est influence par la diffrence de densit entre le solide et le liquide, par la viscosit du
fluide et par la taille des particules. Cette dernire est fortement influence par la prparation
des billes de Cytodex1TM comme expliqu dans la partie appareils et mthodes . La
distribution de la taille devra donc tre mesure exprimentalement.
Dtermination de la distribution de la taille des

microporteurs
Comme indiqu dans la partie appareils et mthodes , diffrentes mthodes ont t testes
jusqu obtenir une mthode qui donne des rsultats plausibles.
Disposant dun accs ais lappareillage, la premire mthode teste est la granulomtrie
laser base sur lanalyse par la thorie de Mie de la taille de limage de diffraction cre par
linteraction du faisceau laser avec la particule. Cette mthode donne des rsultats douteux
car, comme il est possible dobserver sur la figure 1 suivante, un pic correspondant des
petites particules de taille infrieure 70 m apparat ; ces particules ntant pas observes au
microscope. Ce phnomne a t galement observ par Ulrich Teipel [TEI02] qui a tudi la
caractrisation de particules transparentes par granulomtrie laser. Les particules de
Cytodex1TM tant translucides, les deux situations sont analogues. Dans son tude, Teipel a
montr que ces particules taient fictives en comparant les rsultats obtenus par granulomtrie
laser avec ceux obtenus par sdimentation et compteur cloutier. De plus, il dmontre que ce
Page 116

phnomne apparat lorsquil y a une imprcision sur la valeur relle de lindice de rfraction
du matriau transparent. Dans la littrature, lindice de rfraction du dextrane varie entre 1.34
et 1.51. Lors des mesures, les diffrentes valeurs dindice de rfraction ont t testes mais
donnent toutes lieu la mme distribution et la prsence du pic correspondant aux particules
fictives.
taille des particules en m
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
550
100
18
90
16
80
14
70
12
60
10
50
40
30
20
10
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
% en volume cumul
% en volume
20
0
550
Figure V-1: Distribution en volume de la taille des microporteurs obtenue par granulomtrie
laser
Daprs les donnes du fournisseur, la distribution de la taille des billes de Cytodex1TM est
caractrise par :
Tableau V-1: Distribution en volume de la taille des billes de Cytodex1TM fournie par le fabricant
pourcentage Diamtre
5%
147 m
190 m
50 %
248 m
95 %
O la colonne de gauche indique le pourcentage de particules dont la taille est infrieure au

diamtre donn dans la colonne de droite.
Ces valeurs ne concordant pas avec les rsultats exprimentaux obtenus par granulomtrie
laser et la publication de Teipel ayant t repre posteriori, il a t suppos que la mthode
ntait pas adapte vu la transparence des billes de Cytodex1TM. Une mthode non optique a
donc t recherche.
Page 117

Lanalyse granulomtrique par compteur cloutier paraissait prometteuse car elle est base sur
les proprits lectriques du milieu. Le lien entre les proprits lectriques et la taille des
particules est obtenu par une calibration avec des particules talons. Malheureusement, la
mthode ne donne pas de rsultat exploitable car les particules de Cytodex1TM sont charges
positivement contrairement aux particules talons qui sont non charges; la relation tailleproprits lectriques nest ds lors pas la mme.
taille des particules m
6
20
40
60
80
100
120
140
160
100
90
5
80
70
60
3
50
40
% en volume cumul
% en volume
2
30
20
1
10
0
20
40
60
80
100
taille des particules m
120
140
0
160
Figure V-2: Distribution de la taille des particules de Cytodex1TM par granulomtrie par compteur
Cloutier
En dernier recours, lanalyse granulomtrique par analyse dimages sest ds lors impose.
Cette mthode a t envisage en dernier lieu car elle paraissait plus fastidieuse. Par contre,
elle prsente lassurance dobtenir une distribution de taille de particules de Cytodex1TM
exacte si le nombre de particules est suffisant et reprsentatif de la population. Environ 800
particules ont t enregistres et mesures. Les rsultats sont prsents la figure 3. La
distribution en volume de la taille des particules de Cytodex1TM est caractrise par :
Tableau V-2: Distribution de la taille des billes de Cytodex1TM obtenue par analyse d'images
pourcentage Diamtre
5%
196 m
208 m
10 %
248 m
50 %
308 m
90 %
319 m
95 %
377 m
99 %
Page 118
Ces valeurs (par exemple : d50%=248m) sont plus leves que celles annonces par le
fabricant (par exemple : d50%=190 m) ce qui dmontre linfluence de la prparation des billes
Cytodex1TM sur leur taille. Par contre, ltalement des valeurs par rapport la valeur moyenne
(d95%-d5%=123m) est proche de celui annonc par le fabricant (d95%-d5%=101m).

100
3
150
200
250
300
350
400
100
90
2.5
80
70
60
1.5
50
40
% en volume cumul
% en volume
1
30
20
0.5
10
0
100
150
200
250
300
350
0
400
Figure V-3: Distribution en volume de la taille des particules de Cytodex1TM par analyse d'image
Dtermination de la vitesse de rotation minimale de

maintien en suspension
La vitesse de chute des particules a t calcule par la loi de Stockes amliore par la relation
empirique de Zaki [EKA91],[BLA] :
v limite =
d p2 .( s l ).g
18.
Page 119
v ss = v lim ite (1 Cv ) ]
m
O m = 4,375.Re p 0,0875
Cv est le pourcentage en volume de solide
Lors de culture cellulaire, une cellule peut saccrocher plusieurs billes de Cytodex1TM. Ce
cas sera galement pris en compte. Les rsultats suivants sont obtenus en prenant comme
donnes : l=1000, s=1030, g=9.81m/s, =0.000891, Cv=0.87%
Tableau V-3: Vitesse de chute des billes de Cytodex1TM suivant leur taille
Diamtre de la particule (m)

231
321
400
Grappe de deux billes de taille moyenne
dp quivalent = 333
Grappe de 3 billes de taille moyenne
dp quivalent = 441
Grappe de 4 billes de taille moyenne
dp quivalent= 500
Vitesse limite de chute m/s

0.00094
0.00182
0.00283
0.00196
0.00345
0.00443
Dans une large gamme de vitesses de rotation, lcoulement dans la cuve est caractris par
deux boucles de recirculation. La vitesse ascensionnelle moyenne dans chaque boucle a t
calcule sur base des rsultats obtenus par P.I.V. pour la vitesse de rotation de 50 rpm pour
chaque agitateur et pour une viscosit de 3.15 et 31.06 centipoises.
Tableau V-4: Dbits (l/s) passant dans les boucles haute et basse suivant la viscosit
TT125
TT150
3.15 cP
Boucle basse
Boucle haute
0.0113
0.0323
0.0145
0.0522
31.06 cP
Boucle basse
Boucle haute
0.0103
0.0335
0.0157
0.0456
Ces valeurs sont deux dix fois suprieures aux vitesses de chute. 50 rpm tant la vitesse de
rotation la plus faible teste par P.I.V., la vitesse de rotation minimale permettant dgaliser la
vitesse ascensionnelle et la vitesse de chute des plus grosses particules a t dtermine par
extrapolation. Premirement, le dbit de circulation totale dans la cuve est calcul pour
nimporte quelle vitesse de rotation par Qp=NQc. N. d3 o le nombre de circulation NQc par
dfinition ne dpend pas de la vitesse de rotation. Les dbits de recirculation dans chacune des
deux boucles de recirculation ont t mesurs pour les 5 vitesses de rotation testes par P.I.V.
afin de dfinir le pourcentage moyen de fluide qui passe dans la boucle basse et dans la boucle
haute. Enfin, ces deux dbits moyens diviss par la surface transversale correspondant au
Page 120

fluide ascendant dans chacune des boucles donnent les vitesses ascensionnelles moyennes
respectives. Les valeurs reprises dans le tableau 4 montrent que la boucle basse est
caractrise par des vitesses ascensionnelles plus faibles que la boucle haute ; cest donc elle
qui imposera la vitesse de rotation minimale de lagitateur pour maintenir en suspension
complte les billes de Cytodex1TM.
Tableau V-5: Vitesse de rotation minimale assurant une suspension complte
Si une seule
bille de
dp= 400m
TT125
TT150
13 rpm
12 rpm
3.15 cP
Si grappes de 4
billes moyennes
dp=500 m
20 rpm
19 rpm
31.06 cP
Si une seule
Si grappes de 4
bille de
billes moyennes
dp= 400m
dp=500 m
14 rpm
13 rpm
22 rpm
21 rpm
Le tableau 5 montre que linfluence de la viscosit et linfluence de la taille de lhlice sont

trs faibles.
Afin de valider la mthodologie, 20 litres dune solution de Cytodex1TM ont t placs dans la
cuve. Une gamme de vitesses allant de 12 rpm 50 rpm par pas de 3 rpm a t teste et le
comportement de la suspension a t film. Lintrt tant port sur le maintien en suspension
et non la mise en suspension, le point de dpart des enregistrements est une suspension
uniforme. Plusieurs exemples de ces films sont places sur le cd-rom fourni avec ce travail.
Pour de faibles vitesses de rotation, lensemble des particules sdimente selon un coulement
piston ; les grosses particules entranant probablement dans leur sillage les plus petites. Ds
que lpaisseur de la couche stagnante de grosses particules se stabilise, les petites particules
se remettent en suspension dans lensemble de la cuve. Le phnomne de sdimentation en
coulement piston est de moins en moins marqu lorsque la vitesse de rotation augmente
jusqu' atteindre la vitesse de maintien en suspension complte. Lexprience montre que
celles-ci valent respectivement 35 rpm pour lhlice TT150 et 40 rpm pour lhlice TT125.
Ces rsultats sont trs loigns de ceux calculs prcdemment. Ceci provient des hypothses
faites. Premirement, la thorie de Stockes sapplique normalement pour un fluide stagnant,
ce qui nest pas le cas prsent. Les particules sont charges positivement et leurs interactions
ne sont pas prises en compte dans le modle. Enfin, les valeurs des vitesses ascensionnelles
calcules ont du tre extrapoles des mesures P.I.V. et rien ne garantit que lcoulement soit
semblable celui mesur par P.I.V. pour des vitesses aussi faibles que 12 rpm.
Une autre mthodologie a du tre trouve. Celle-ci repose sur ltude paramtrique ralise
par Corpstein & al. [COR94]. Celui-ci a mis au point, sur base dune tude exprimentale avec
une hlice similaire lhlice TT, une relation empirique reliant la vitesse de rotation qui
Page 121

maintient une suspension complte aux proprits de la phase solide et liquide, la
concentration de solide et la gomtrie de la cuve et de lagitateur selon :
N maitien en
suspension
complte
= k . s
.v lim
l
0.28
D
. f ( X ). f
T
O k dpend du type dagitateur et vaut 23 pour des agitateurs du type hlice TT ;

vlim est la vitesse de chute des particules de taille moyenne ici pris gale 0.00098 m/s ;
f ( X ) est un coefficient qui tient compte de la concentration en particules et vaut 0.62
pour la concentration en Cytodex1TM de cette tude;

D
f est un coefficient qui tient compte du rapport de la taille de lhlice et du diamtre
T
de la cuve, il vaut respectivement 0,87 et 0,75 pour lhlice TT125 et TT150.
Cette corrlation donne comme rsultats les valeurs de 34.5 rpm et 40.3 rpm pour lhlice
TT150 et lhlice TT125 respectivement. Ces valeurs sont trs proches de celles obtenues
exprimentalement ; ce qui valide lutilisation de ce modle dans les tudes futures. En effet,
le passage dune chelle lautre est ralis aisment par lajout dun facteur supplmentaire
n
T
T
dans la corrlation o
est le rapport des diamtres des cuves et n est un coefficient
T0
T0
qui varie entre 0.5 et 1 selon la valeur moyenne de la vitesse limite de chute des particules.
Lors de la culture cellulaire, les cellules peuvent crotre sur plusieurs billes de Cytodex1TM et
former des grappes de billes. En imaginant quen moyenne lensemble de la suspension est
form de grappes de deux billes et en prenant ds lors une vitesse limite de 0.002 m/s, les
vitesses de rotation minimales qui maintiennent une suspension complte deviennent, daprs
le modle, 42.2 rpm et 49.2 rpm. Ainsi, une majoration de 10 rpm par rapport aux vitesses
mesures exprimentalement devra tre prise en compte afin dassurer au cours de la culture
cellulaire une suspension complte et une surface disponible maximale.
Page 122
Conclusions
Page 123
Conclusions
Synthse des rsultats obtenus
Le travail ralis dans ce mmoire est ltude de lhydrodynamique et du mlange dans un

bioracteur de 20 litres utilis pour la culture de cellules animales sur microporteurs. Les
rsultats obtenus serviront aux chercheurs de G.S.K. BIO. qui procdent actuellement la
monte en chelle partir dun bioracteur de 20 litres pour atteindre une chelle industrielle
de plusieurs mtres cubes. Ds lors, un grand nombre de paramtres sont imposs par ceux-ci
tels
que
mobiles(
le
type
de
mobile
dagitation
(hlice
TT),
le
diamtre
des
d
d
H
Y 1
= 0.4 et = 0.5 ), la gomtrie de la cuve ( = 1 et = ), la vitesse de rotation
D
D
D
D 3
(50 120 rpm), le nombre de contre-pales et leur largeur (2 et
b
= 0.1 ). Les mthodes
D
exprimentales utilises pour tudier lhydrodynamique et le mlange sont les mthodes

P.I.V. et P.L.I.F. Elles permettent daccder respectivement au champ de vitesses et au champ
de concentrations dans un plan vertical de la cuve clair par un laser. Ces mthodes tant
optiques, la cuve et le fluide quelle contient doivent tre transparents. Le milieu de culture
ntant pas transparent en raison notamment de la prsence de microporteurs en suspension,
les mesures ne peuvent pas tre directement ralises sur celui-ci. Ds lors, un fluide
transparent au mme comportement rhologique que le milieu de culture en prsence des
microporteurs doit tre trouv. Cependant, la dtermination de la courbe de viscosit du
milieu en fonction du cisaillement ncessite un appareillage spcifique capable de maintenir
les microporteurs en suspension pendant toute la dure de la mesure. Cet appareillage ntant
disponible ni lUniversit de Lige, ni chez G.S.K BIO., nous ne disposions daucune
information fiable relative au comportement rhologique du milieu de culture. Nous avons
donc dcid dadopter une approche pragmatique qui consiste raliser une tude
paramtrique au cours de laquelle les mesures P.I.V. et P.L.I.F. sont ralises dans une
solutions Newtoniennes composes deau et de glycrine et donc la viscosit varie entre 3 cP
et 31 cP.
Notons que le but de ce travail nest pas de suggrer une stratgie globale de scale-up. En
effet, nous navons quune vue fractionne du problme ; nous navons aucune information
sur laration du bioracteur et sur les proprits physiologiques des cellules (contraintes
maximales tolres, laps de temps maximal au cours duquel les cellules supportent une
Page 124
Conclusions
concentration non optimale en une substance sans changer de mtabolisme). Ds lors, le but
de ce travail est de raliser une tude paramtrique au cours de laquelle nous avons fait varier
les diffrents paramtres intervenant dans le nombre de Reynolds :
Cinq viscosits ont t testes : 3.15 cP, 9.96 cP, 15.26 cP, 24.60 cP et 31.06 cP ;
Cinq vitesses de rotation ont t testes : 50rpm, 67.5rpm, 85rpm, 102.5rpm, 120rpm;
Deux diamtres de mobiles ont t tests : 125 mm (
d
d
= 0.4 ) et 150 mm ( = 0.5 ).
D
D
Ces deux diamtres ont t compars mme vitesse de rotation, mme vitesse en
bout de pales et mme puissance dissipe.
Ces deux dernires comparaisons
permettent respectivement dtre dans des situations mme niveau de cisaillement

maximum et mme niveau de microcisaillement.
Linfluence de la position de la contre-pale par rapport au plan clair par le laser a galement
t tudie.
Les rsultats de cette tude sont lvolution des grandeurs globales et des grandeurs
locales en fonction des paramtres cits ci-dessus. Ces rsultats donnent des informations
cls qui aideront les chercheurs de G.S.K. BIO. affiner leur stratgie de scale-up.
Grce aux mesures P.I.V., nous avons accd au champ de vitesses dans le plan clair par le
laser. Nous avons constat quil existait une structure dcoulement commune dans toutes les
conditions testes. Elle est constitue dune zone djection lextrmit de la pale du mobile
et de deux boucles de recirculation situe de part et dautre de cette zone. Les principales
diffrences sont :
La diminution de langle djection, form par la direction du flux la sortie de la pale

avec la verticale, lorsque la viscosit diminue et la vitesse de rotation augmente ;
La formation dune boucle de circulation tournant dans le sens contraire des aiguilles
dune montre dans la partie suprieure de la cuve lorsque la vitesse de rotation
diminue et lorsque la viscosit augmente ;
Laugmentation des normes des vitesses dans lensemble du plan clair par le laser
lorsque la viscosit diminue, la vitesse de rotation augmente et le diamtre du mobile
augmente.
Lensemble de ces phnomnes sexplique sur base de considrations nergtiques lorsque

nous mettons en balance lnergie cintique fournie par le mobile au fluide et les forces de
Page 125
Conclusions
frottement sexerant entre particules de fluide voisines et se dplaant des vitesses
diffrentes.
Nous avons galement constat que la position de la contre-pale vis--vis du plan clair par
le laser avait une trs lgre influence sur la structure de lcoulement mais suffisamment
faible pour que lhypothse dun coulement symtrique autour de laxe de lagitateur et
identique dans tous les plans passant par cet axe soit valable.
A partir de ce champ de vitesses, nous avons calcul les grandeurs globales qui sont
gnralement utilises pour caractriser une opration de mlange :
Le dbit et le nombre de pompage ;
Le dbit et le nombre de circulation ;
La puissance globale dissipe et le nombre de puissance ;
Le temps de mlange.
Le dbit et le nombre de pompage et le dbit et le nombre de circulation sont les

grandeurs globales qui caractrisent la circulation du fluide dans la cuve. Nous avons
constat que les dbits de pompage et de circulation augmentent avec la vitesse de rotation,
diminuent lgrement avec la viscosit, augmentent avec le diamtre du mobile mme
vitesse de rotation et mme vitesse en bout de pale. Par contre, mme puissance dissipe,
soit ils augmentent soit ils diminuent. Dans chaque cas, les volutions observes sont
expliques sur base du champ de vitesses et de la taille de la section sur laquelle ces vitesses
sont intgres.
Afin davoir une vue complte, il tait plus judicieux de regarder lvolution des nombres de
pompage et de circulation en fonction du Reynolds que den tudier leffet spar de ses
diffrentes composantes. Ils augmentent progressivement avec le nombre de Reynolds jusqu
atteindre une valeur constante en rgime turbulent. Les valeurs constantes obtenues ont t
compares celles trouves dans la littrature [MAV96 ] [BAUD97] [AUB01] [ROUa]. Nous
obtenons des valeurs lgrement infrieures ce qui montre que la gomtrie et en particulier le
nombre de contre-pales a un effet sur les valeurs des nombres de pompage et de circulation.
De plus, nous avons dcouvert que les valeurs transmises par le fabricant (Mixel) ne sont
valables que pour des hlices de tailles consquentes. Pour des hlices de taille infrieure
200 mm de diamtre, il faut considrer les nombres de pompage et de circulation de lhlice
TTP.
Page 126
Conclusions
La puissance globale dissipe a t calcule partir du couple mcanique fourni par le

moteur. La puissance dissipe augmente avec la viscosit, la vitesse de rotation et la taille du
mobile. Comme pour les nombres de pompage et de circulation, le nombre de puissance,
obtenu partir de la puissance globale dissipe, est tudi en fonction du nombre de
Reynolds. Nous avons observ une dcroissance du nombre de puissance en fonction du
nombre de Reynolds jusqu lobtention dune valeur constante en rgime turbulent. La valeur
constante du nombre de puissance a t compare celle obtenue dans la littrature et les
mmes conclusions que celles des nombres de pompage et de circulation ont t tires. Grce
au concept de Metzner et Otto, nous avons dtermin que la suspension de microporteurs
avait une viscosit apparente lgrement infrieure 3.15 cP. Enfin connaissant les dbits de
pompage et les puissances globales dissipes, nous avons pu dterminer la hauteur thorique
quivalente des mobiles et caractriser leur action de pompage par rapport leur action de
turbulence dans les diffrentes conditions testes.
Le temps de mlange a t calcul partir des mesures P.L.I.F. Il est dfini comme le temps
ncessaire pour atteindre une concentration uniforme dans la cuve suite une injection de
traceur. Diffrentes mthodes numriques ont t testes afin de dterminer le temps de
mlange mais aucune de celles-ci ne donnait de rsultats satisfaisants. Une mthode visuelle
avec un critre strict a donc t choisie. Deux points dinjection ont t tudis : le premier
est situ juste sous la surface du liquide, le second au niveau de lagitateur sur la paroi latrale
du bioracteur. Comme attendu au vu des mesures P.I.V. qui montrent des vitesses plus
leves et plus dispersantes (gradients de vitesses plus marqus) dans la zone basse, les temps
de mlange obtenus pour le point bas sont 1.2 fois 2.5 fois plus faibles que ceux obtenus
pour le point haut. De mme, le temps de mlange diminue avec la vitesse de rotation et le
diamtre du mobile et augmente avec la viscosit. Dans la littrature [ROUb], le temps de
mlange est reli au nombre de Reynolds et la vitesse de rotation par la relation :
N . tM = k ' Re x . Les paramtres x et k ont t dtermins par ajustement sur nos expriences.
Cette relation tant valable pour des systmes gomtriquement semblables, elle pourra ds
lors tre utilise lors du scale-up pour estimer les temps de mlange.
Page 127
Conclusions
De par lchelle laquelle elles sont ralises, les mesures P.I.V. et P.L.I.F. nous ont
galement permis daccder des grandeurs locales, ainsi qu leur distribution spatiotemporelle au sein de la cuve :
La rpartition du cisaillement dans le plan clair par le laser ;
La rpartition de la dissipation de lnergie dans le plan clair par le laser.
Le cisaillement a t obtenu partir des mesures P.I.V. et du calcul du gradient de la

composantes Ux de la vitesse dans la direction y (dudy) et de la composante Uy de la vitesse
dans la direction x (dvdx). Une grandeur appele surpercis a t dfinie comme la somme
des valeurs absolues de dudy et dvdx. Ce paramtre a t utilis comme un indicateur du
cisaillement rsultant des composantes dans les deux directions. Comme attendu, les valeurs
de cisaillement sont importantes la priphrie de la zone djection de la pale et au niveau de
la paroi. Nous avons observ que laugmentation de la viscosit diminuait les valeurs
maximales de dudy, augmentait les valeurs maximales de dvdx et ne modifiait pas la gamme
de valeurs obtenues pour supercis . Par contre elle augmente les contraintes puisque cellesci sont dfinies comme le produit de la valeur de supercis et de la viscosit.
Laugmentation de la vitesse de rotation largit la gamme de valeurs de dudy, dvdx et
supercis . A mme vitesse en bout de pale, les deux mobiles donnent les mmes
cisaillements maxima ce qui dmontre exprimentalement que la vitesse en bout de pale est
effectivement relie au cisaillement maximum.
Ltude de la rpartition de la dissipation de lnergie a montr que celle-ci est importante

dans la zone djection. Etant donn que la dissipation de lnergie est dfinie comme la
vitesse laquelle lnergie cintique du fluide est transforme irrversiblement en chaleur par
les frottements visqueux, il est logique que sa gamme de valeurs dans le plan clair par le
laser slargisse avec laugmentation de la viscosit et de la vitesse de rotation du mobile. A
mme puissance dissipe, une mme gamme de valeurs de dissipation dnergie est observe
pour les deux hlices. Or la dissipation de lnergie tant relie au microcisaillement, ce
rsultat exprimental confirme que la puissance dissipe globalement est relie au
microcisaillement.
De mme, de ces deux tudes nous avons observ, qu mme microcisaillement, lhlice
TT150 produit un cisaillement maximum plus lev que lhlice TT125. Par contre, pour un
Page 128
Conclusions
mme cisaillement maximum, lhlice TT125 cre un microcisaillement plus intense que
lhlice TT150.
Sur base des mesures P.I.V. et P.L.I.F., un modle compartiment dcrivant ltat de
macromlange au sein du bioracteur a t propos. La cuve agite est reprsente par un
rseau de 9 cuves parfaitement mlanges disposes en srie. La structure du modle ainsi
que ses paramtres (les dbits dchange entre les zones) ont t dduits de la structure de
lcoulement obtenu par P.I.V. Les courbes de lvolution de la concentration en traceurs en
fonction du temps pour chaque compartiment obtenu par le modle ont t compares avec
celles obtenues exprimentalement. La correspondance nest pas parfaite car certains
paramtres du modle tels que les dbits dus au mouvement de rotation du fluide autour de
laxe du mobile ne sont pas mesurs par P.I.V., ils sont ds lors estims. De toutes manires,
les modles compartiments, bien que sduisants, sont intimement lis la structure globale
de lcoulement et donc une chelle gomtrique donne. Ils ne sont pas suffisamment
relis aux paramtres qui rgissent lcoulement lchelle locale que pour pouvoir tre
extrapols dune chelle lautre lors du scale-up.
Enfin, un des points cruciaux de lopration de mlange est le maintien en suspension
complte des microporteurs afin que lentiret de la surface soit disponible pour la culture
cellulaire. La premire approche qui a t envisage tait de dterminer la vitesse de rotation
du mobile qui permet lgalisation de la vitesse de chute des particules la vitesse
ascensionnelle du fluide. Pour calculer la vitesse de chute, la distribution de la taille des
microporteurs a d tre dtermine. Celle-ci a t mesure par diverses mthodes. Parmi les
techniques testes seule une a conduit des rsultats exploitables. Il sagit de lanalyse
dimages qui a permis de montrer que la distribution de taille a une valeur moyenne en
volume (248 m) suprieure celle annonce par le fabricant (190 m). Les vitesses de chute
ont t dtermines par le modle de Stockes amlior par lquation de Zaki qui tient compte
de linteraction des particules durant leur chute. Les vitesses ascensionnelles ont t
extrapoles partir des mesures P.I.V. Afin de valider les rsultats obtenus, 20 L de la
suspension de microporteurs ont t placs dans la cuve. Une gamme de vitesses allant de 12
rpm 50 rpm a t teste et le comportement de la suspension a t film. Les vitesses de
rotation obtenues exprimentalement et qui permettent de maintenir une suspension complte
ne correspondent pas celles obtenues par le modle de Stockes. Cette divergence provient
des hypothses faites. Par contre, les valeurs obtenues partir de la corrlation rsultant de
Page 129
Conclusions
ltude paramtrique ralise par Corpstein & al. [COR94] correspondent celles obtenues
exprimentalement. Cette corrlation pourra ds lors tre utilise lors du scale-up.
Retombes positives des rsultats obtenus dans cette

tude sur le processus de scale-up
Comme indiqu dans lintroduction, la premire tape dun processus de scale-up est la
dtermination du but de lopration de mlange et la mise en vidence des grandeurs
caractristiques importantes telles que les dbits de pompage, la puissance dissipe, le
cisaillement maximum et le microcisaillement. Ces grandeurs sont gnralement dtermines
partir de corrlations empiriques dans lesquelles apparaissent les caractristiques du systme
telle que le diamtre du mobile et sa vitesse de rotation et des nombres adimensionnels, tels
que le nombre de pompage, le nombre de circulation et le nombre de puissance. Ces nombres
ne sont donns dans la littrature que pour un rgime turbulent tabli dans lequel ils sont
constants. Ils peuvent galement tre influencs par la gomtrie du systme comme par
exemple le nombre de contre-pale (2 dans cette tude, 3 ou 4 dans la littrature).
Nous nous affranchissons de ces deux problmes dans cette tude puisque les nombres de
pompage, de circulation et de puissance sont dtermins pour la gomtrie spcifique du
bioracteur. Ils sont galement calculs dans la zone transitoire o ils varient avec le nombre
de Reynolds. Cet ensemble de rsultats permet de partir sur des bases fiables au niveau du
processus de scale-up.
Par ailleurs, lhydrodynamique et le mlange ne sont pas compltement caractriss par des
grandeurs globales telles que le dbit de pompage, le dbit de circulation, la puissance
globalement dissipe et le temps de mlange ; ils doivent tre complts par les grandeurs
locales tels que la rpartition du cisaillement et de la dissipation de lnergie dans la cuve.
Ltude ralise dans ce travail permet de caractriser ces rpartitions de manire qualitative
et dobserver comment celles-ci voluent avec la vitesse de rotation, la viscosit et le diamtre
du mobile.
Que ce soit pour les grandeurs globales ou pour les grandeurs locales, les
diamtres des mobiles ont t compars mme niveau de cisaillement maximum (mme
vitesse en bout de pale) et mme niveau de microcisaillement (mme puissance dissipe).
Lorsque les chercheurs de chez G.S.K. BIO. auront dtermins lequel de ces cisaillements est
le plus critique pour la culture cellulaire, les rsultats tirs de cette tude paramtrique les
Page 130
Conclusions
aideront faire un choix entre un rapport
d
d
= 0.4 (TT125) et = 0.5 (TT150) lors du
D
D
processus de scale-up.
Un troisime point auquel cette tude apporte une rponse est le temps de mlange obtenu par
linjection dun traceur fluorescent. Cette mesure intresse les chercheurs de G.S.K. BIO. car
ils sont confronts une situation similaire lorsquils rgulent, par exemple, le pH par
injection dacide ou de base lors de leurs cultures cellulaires. Dune part, il est utile de savoir
si linjection se rpartit dans la cuve ou si elle reste confine lendroit o elle est injecte.
Dautre part, la valeur du temps de mlange pourra tre compare la dure durant laquelle
les cellules supportent un pH diffrent du pH optimal sans changer de mtabolisme. Sur base
des rsultats obtenus, les paramtres x et k de lquation suivante, qui est classiquement
trouve dans la littrature, N . tM = k ' Re x ont t ajusts. Cette quation est valable pour des
systmes gomtriquement semblables et pourra ds lors tre utilise lors du scale-up.
Enfin, cette tude donne galement des rsultats intressants au niveau de la caractrisation de
la vitesse de rotation minimale qui maintient les microporteurs en suspension complte. En
effet, le modle empirique tabli par Corpstein & al rend trs bien compte des rsultats
exprimentaux obtenus. De plus ce modle comprend un facteur qui permet de raliser des
extrapolations dune chelle lautre. Ds lors les vitesses de rotation minimales lors du
processus de scale-up peuvent tre calcules aisment.
Limitations des rsultats obtenus et perspectives

futures
Les objectifs qui ont t prsents dans lintroduction ont t globalement atteints malgr une
grosse panne de linstallation qui a retard le dbut des mesures P.I.V. et P.L.I.F de prs dun
mois. Nanmoins, le sujet tudi dans ce travail est un domaine trs vaste dans lequel de
nombreuses tudes peuvent encore tre ralises et faire lobjet dune thse. Certains rsultats
pourraient galement tre affins moyennant le matriel ncessaire. Passons en revue ces
diffrents points.
Page 131
Conclusions
Premirement, le concept de Metzner et Otto ainsi que la courbe de la viscosit de la
suspension des microporteurs en fonction du cisaillement ont montr que cette suspension a
une viscosit de 0.83 cP. En prsence de cellules dans le milieu de culture, cette viscosit
monte 1.15 cP. Il serait ds lors intressant de raliser les mesures P.I.V. et P.L.I.F. pour
cette dernire viscosit et den tirer les grandeurs globales et locales comme cela a t fait
dans ce travail.
Deuximement, nous avons attribu la diffrence entre les nombres de pompage, de

circulation et de puissance, que nous obtenons par rapport ceux de la littrature, a une
gomtrie de la cuve diffrente et en particulier au nombre diffrent de contre-pales. Il serait
intressant de vrifier cette hypothse en ralisant une srie de mesures P.I.V. et du couple
dans une cuve comprenant 3 ou 4 contre-pales.
Le principal problme des mesures P.I.V. est que cette mthode ne donne accs aux
composantes de la vitesse que dans le plan clair par le laser. Or pour un calcul complet du
cisaillement appliqu une particule de fluide, la troisime composante de la vitesse doit tre
connue ainsi que les gradients situs hors du plan clair par le laser. Ds lors les rsultats que
nous avons obtenus, ne permettent que de caractriser le cisaillement de manire qualitative
en reprant les zones haut cisaillement. La 3-D P.I.V. permettrait de lever ce problme et
ds lors de donner une rponse plus quantitative sur le niveau de cisaillement appliqu une
particule de fluide et par extension une cellule de la culture. Cela ne sera possible que
lorsque linstallation actuelle sera complte pour faire de la 3-D P.I.V.
De mme, lhypothse dune turbulence isotrope ralise lors du calcul de la dissipation de

lnergie pourra tre leve lorsque nous aurons accs la troisime composante de la vitesse
et des gradients situs hors du plan du laser. Un deuxime problme est li lchelle
laquelle la dissipation de lnergie est calcule. La rsolution de la camra (2.66 mm dans
cette tude) est nettement suprieure lchelle de Kolmogorov au niveau de laquelle prend
part la dissipation de lnergie. Lchelle de Kolmogorov dpend du point dans le plan o
nous nous plaons. Elle sera trs petite dans la zone proche de lagitateur (50 m), un peu
plus importante dans le reste de la cuve (1 mm). Suivant le rapport de la rsolution de la
camra sur lchelle de Kolmogorov, la valeur de la dissipation de lnergie calcule
reprsentera un pourcentage de la valeur relle. Ce pourcentage nest pas connu prcisment
nanmoins il diminue lorsque le rapport de la rsolution de la camra sur lchelle de
Page 132
Conclusions
Kolmogorov augmente. Une mthode pour augmenter la rsolution des mesures P.I.V. et se
rapprocher de lchelle de Kolmogorov est de rduire la taille de la zone observe par la
camra. Ainsi les mesures seraient ralises dans une srie de petites zones. La rpartition de
la dissipation de lnergie dans lentiret de la cuve serait obtenue en remettant bout bout
ces diffrentes zones. Nanmoins cette mthodologie ncessiterait normment de temps et ne
serait intressante que si le microcisaillement savre tre un lment cl du processus de
scale-up.
Lors de la dtermination du temps de mlange, faute de mthodes numriques qui

fonctionnent et faute de temps disponible pour en mettre au point de nouvelles, nous avons
opts par dfaut pour une mthode visuelle base sur un critre stricte. Les rsultats obtenus
semblent corrects mais ils dpendent nanmoins de la subjectivit de lobservateur. Le
principal facteur qui explique la difficult de trouver une mthode numrique adquate est le
bruit qui affecte les mesures. En effet, lorsquon sapproche dune concentration uniforme au
sein de la cuve, la variance introduite par la variation de lnergie du laser dun pulse lautre
est du mme ordre de grandeur que celle correspondant de faibles variations de
concentration entre filets de fluide voisins. Un energy pulse meter qui est une cellule
photolectrique mesurant chaque pulse lnergie du laser permettrait de corriger chaque
image et ds lors dliminer les variations de variance introduites par les variations de
lnergie du laser. Cela ne sera possible que lorsque linstallation actuelle sera complte par
cette cellule photolectrique.
Le modle compartiment dvelopp dans ce travail, comme tout modle compartiment,

prsente la limitation de ne pas tre extrapolable dune chelle lautre lors du processus de
scale-up car ceux-ci ne sont pas suffisamment reli lcoulement pour que cette
extrapolation ait un sens.
En fait, ce modle nest quune premire approche de la
modlisation du mlange dans le bioracteur. Un modle nettement plus complexe, bas sur
les phnomnes hydrodynamiques sera dvelopp dans le cadre dun doctorat. Il sera bas sur
le suivi lagrangien dune particule de fluide en rsolvant le bilan de forces qui sappliquent
sur celle-ci. Ce modle sera extrapolable dautres chelles et donnera des rponses sur le
temps quune particule de fluide et, par extension, quune cellule passe en un point du
racteur, sur l histoire des contraintes et des gradients de concentration quelle subit, etc.
Page 133
Conclusions
Enfin, puisque les outils ont t dvelopps dans le cadre de ce travail, il est tout fait
envisageable de recommencer la mme tude pour dautres mobiles mais pour la viscosit
unique de 1.15 cP cite ci-dessus. Les diffrents mobiles pourraient tre compars sur base
des grandeurs globales et des grandeurs locales quils induisent. Un choix pourra alors tre
ralis, non plus sur base de corrlations empiriques comme cela a t fait pour lhlice TT,
mais plutt sur les grandeurs mesures pour la gomtrie spcifique du systme tudi.
Page 134
Bibliographie
Page 135
Bibliographie
ARTICLES
[BAUD97] BAUDOU C., 1997. Agitation par des Systmes Axiaux Simples ou Multi-Etages.
Obtention de LHydrdinamique par Vlocimtrie Laser Effet Doppler, Ph.D. Thesis, INP, Toulouse,
France
[COR94] CORPSTEIN R.R., FASANO J.B. & MYERS K.J., 1994. The high-efficiency road to liquidsolid agitation, Chemical Engineering, vol. 101, pp. 139-145.
[HAU03] HAUT B., BEN AMOR H., COULON L., JACQUET A & HALLOIN V., 2003.
Hydrodynamics and mass transfer in a Couette-Taylor bioreactor for the culture of animal cells,
Chemical Engineering Science, vol. 58, pp. 777-784.
[HOL64] HOLMES D. B., VONCKEN R. M. & DEKKER J.A., 1964. Fluid flow in turbine-stirred,
baffled tanks-I. Circulation time, Chemical Engineering Science, vol.19, pp.201-208.
[MAV96] MAVROS P. & BERTRAND J., 1996. Determination of 3-D Flow Fields in Agitated
Vessels by Laser Doppler Velocimetry : Effect of Impeller Type and Liquid Viscosity on Liquid Flow
Patterns, Trabs IChemE, vol. 74A, pp.658-668
[PII00] PIIRTO M., ELORANTA H & SAARENRINNE P., 2000. Interactive Software For
Turbulence Analysis From PIV Vector Data, 10th International Symposium on Applications of Laser
Techniques to Fluid Mechanics, Lisbon.
[TEI02] TEIPEL U., 2002. Problems in Characterizing Transparent Particles by Laser Light
Diffraction Spectrometry, Chemical Engineering Technology vol. 25, pp.13-21.
OUVRAGES
[EKA91] EKATO, 1991. Handbook of Mixing Technology: General Theory, Selection Criteria,
Application, EKATO, 85 pp.
[LEV62] LEVENSPIEL O.,1962. Chemical reaction engineering, edition John Wiley and Sons, inc,
second edition, pp.253-325.
[RAO99] RAO A. M., 1999. Rheology of fluid and semi-solid floods : Principles and applications,
Chapman & Hall Food Science Book, Aspen Publication, Gaithersburg, Maryland, 433 p.
OUVRAGES NON PUBLIS
[MAR07] MARCHOT P., 2007. Cours dAspects nergtiques des oprations physiques unitaires
partie mlange. Notes de cours, Universit de Lige, Facult des Sciences appliques, Dpartement de
Chimie Applique, indit.
Page 136
Bibliographie
[PEE06] PEETERS L., 2006. Caractrisation du mlange et proposition de critres de monte en
chelle pour une application de culture cellulaire sur microporteurs en cuve agite. Mmoire de fin
dtude, Universit de Lige, Indit.
[VER05] VERDIN E., 2005. Etude de linfluence des proprits rhologiques de la phase liquide sur
le mlange dans une cuve agite par Particle Image Velocimetry . Mmoire de fin dtude,
Universit de Lige, Indit.
MODE DEMPLOI
[PIVGuide] DANTEC DYNAMICS A/S, 2002. Flowmanager software and introduction to P.I.V.
instrumentation, 308 pp.
[PLIFGuide] DANTEC DYNAMICS A/S,2002. Planar LIF software- Liquid Application, 54 pp.
SITES INTERNET
[ALL] ALLEN T. s.d., tudes de structure Granulomtrie. (http://www.techniquesingenieur.fr/dossier/granulometrie/P1040_10_1988), consult le 10 mars 2007
[AUB01] AUBIN J., MAVROS P., FLETCHER D. F., XUEREB C. & BERTRAND J., 2001. Effect
of axial agitator configuration (up-pumping, down-pumping, reverse rotation) on flow patterns
generated in stirred vessels, (http://www.atypon-link.com/ICE/doi/abs/10.1205/02638760152721046),
consult le 15 fvrier 2007.
[BAL] BALDI S., HANN D. & YIANNESKIS M. s.d. On the measurement of turbulence energy
dissipation in stirred vessels with PIV techniques, (http://in3.dem.ist.utl.pt/lxlaser
2002/papers/paper_11_2.pdf), consult le 25 fvrier 2007.
[BLA] BLAZY P., JDID E & BERSILLON J.-L. Decantation - Aspects thoriques,
(http://www.techniques-ingenieur.fr/dossier/decantation_aspects_theoriques/J3450), consult le 20
avril 2007.
[DEL] DELAPLACE G. & GUERIN R. s.d. Mlange des produits pteaux Caractristiques dun
(http://www.techniques-ingenieur.fr/dossier/melange_des_produits_p_acirc_
systme
agit,
teux_caracteristiques_d_un_systeme_agite/F3350), consult le 1 aot 2006.
[KLI03] KLING K. & MEWES D. 2003. Quantitative Measurement of Micro- and Macromixing in
Stirred Vessels using Planar Laser Induced Fluorescence,
(http://portal.acm.org/citation.cfm?id=1235788), consult le 7 octobre 2006.
[ROUa] ROUSTAN M., s.d. Agitation. Mlange - Caractristiques des mobiles d'agitation.
(http://www.techniques-ingenieur.fr/dossier/agitation_melange_caracteristiques_des_mobiles_
d_agitation/J3802), consult le 10 septembre 2006.
[ROUb] ROUSTAN M., PHARAMOND J.-C. & LINE A. s.d. Agitation, Mlange Concepts
thoriques de base. (http://www.techniques-ingenieur.fr/affichage/DispIntro.asp?nGcmID =J3800),
consult le 1 aot 2006.
[SCH] SCHER J. s.d. Rhologie, texture et texturation des produits alimentaires,
(http://www.techniques-ingenieur.fr/dossier/rheologie_texture_et_texturation_des_produits_
alimentaires/F3300), consult le 1 aot 2006.
Page 137
Annexes
Annexes
Page 138
Annexes
Annexe 1 : Signification des paramtres utiliss dans le traitement

des images P.I.V.
Le traitement suivant a t appliqu dans chaque configuration :
1. Cross-corrlation : Fentre dinterrogation de 32X32 pixels
Window function : Gaussian : k=1.19

Overlapping : 50% horizontalement et verticalement
Filtre : Low-Pass Gaussian : k=5
2. Application dun masque qui limine du traitement la zone situe hors de la cuve ainsi
que la zone o se trouve lagitateur.
3. Validation des vecteurs obtenus par la mthode :
Moving average validation : Taille de la fentre 3X3 pixels

Nombre ditrations : 3
Facteur dacceptance : 0. 06
4. Calcul du champ de vitesses moyen en ne tenant compte que des vecteurs valids.
La Cross-corrlation
La fentre dinterrogation contient aXb pixels o a et b peuvent tre diffrents. Dans le cas
tudi, lcoulement ntant pas prdominant dans une direction particulire, a et b sont pris
gaux et valent 32 pixels. Le choix de 32 pixels parmi diffrentes possibilits (16X16,
64X64, 128X128) est dict par le souhait davoir un nombre de vecteurs par image important
(1280) tout en limitant les temps de calculs.
La Window function limine les particules fantmes et les corrlations fantmes cres aux
frontires de la fentre dinterrogation par le traitement dans le domaine de Fourier. Le niveau
de gris des pixels compris dans la fentre dinterrogation est multipli par le coefficient
W(m,n) :
2
1 2 2m 2

2
n
W (m, n) = exp
+
k M N
O M et N sont la largeur et la hauteur de la fentre dinterrogation,

(m,n) est la position du pixel dans la fentre dinterrogation, (0,0) tant situ au centre,
k est le coefficient sur lequel un choix est possible. La valeur 1.19 a t ajuste
exprimentalement en testant diffrentes valeurs. Cette valeur permet de tenir compte de
85% de la fentre dinterrogation en largeur et hauteur.
Page 139
Annexes
Puisquune partie de la fentre dinterrogation nest pas prise en compte, un overlapping de
50% horizontalement et verticalement est impos. Cela permet de quadrupler le nombre de
vecteurs car lespacement entre deux vecteurs passe de 32 pixels 16 pixels. Nanmoins la
rsolution est inchange car les vecteurs supplmentaires doivent tre vus comme une
interpolation sur base des images brutes.
Un filtre est appliqu afin dliminer le bruit provenant de la rflexion de la lumire sur les
parois environnantes. Ce filtre, comme prsent dans la figure 10 de la partie appareils et
mthodes , fonctionne dans le domaine de Fourier. Il multiplie les coefficients de Fourier par
W(u,v) suivant la valeur de u et de v qui sont les coordonnes dans le domaine de Fourier.
W(u,v) = 0 pour (u,v)=(0,0)

u + v
W(u,v) = exp k 2
dans les autres cas
U .V
O U, V reprsente la taille dune fentre dinterrogation dans le domaine des frquences de

Fourier. Le choix de k=5 parmi les valeurs k=3, k=4 et k=5 est celui qui donne les meilleurs
rsultats exprimentaux au niveau du faible nombre de vecteurs aberrants.
La moving average validation

Cette mthode est base sur le fait que le champ de vitesses volue doucement et que ds lors
un vecteur sera accept ou rejet sur base dune comparaison de sa direction et de sa norme
avec ses voisins directs. Dans un premier temps, un vecteur v(x,y) reprsentant la moyenne
des vecteurs voisins est tout dabord calcul. Il est ensuite compar au vecteur v(x,y). Un
vecteur est accept si la relation suivante est vrifie.
(v(x,y) x -v(x,y) x )+(v(x,y) y -v(x,y) y ) k
o k = * max (v(x,y) x -v(x,y) x )+(v(x,y) y -v(x,y) y )
est le facteur dacceptance. Ds lors la diffrence entre le vecteur v(x,y) et le vecteur moyen
v(x,y) est premirement calcule en chaque point (x,y). La valeur maximale est trouve et
multiplie par le facteur ici ajust exprimentalement 0,06. Ensuite la validation est
applique en chaque point selon le critre cit ci-dessus. Pour une meilleure limination des
vecteurs aberrants le processus est rpt. Dans le cas tudi, trois itrations sont suffisantes.
Page 140
Annexes
Annexe 2 : Routine Matlab : reprsentation des champs de

vitesses.
% fichier contenant la norme des vecteurs vitesses partir de flowmanager
clear all
close all
nlig=79;
load
C:\MATLAB701\work\glycerinepivTT125\normeTT125glycerine25pc2cpzb850000.txt
A=normeTT125glycerine25pc2cpzb850000;
X=A(:,1);
Y=A(:,2);
Vprime=A(:,3);
XX=X(1:nlig);
YY=Y(1:nlig:end);
% on balaie tous les X pour un Y donn
VVprime=(reshape(Vprime,[max(size(XX)),max(size(YY))]))';
% on fabrique
une matrice XX x YY et puis on tilde pour que les XX aient une
signification normale
figure
contourf(XX,YY,VVprime,100),caxis ([0 2000*1e-4]),colorbar, shading flat;
title('solution de glycrine viscosit 3.15 cp helice TT 125 85 rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
% fichier contenant les vecteurs vitesses partir de flowmanager
nlig=79;
load
C:\MATLAB701\work\glycerinepivTT125\moyTT125glycerine25pc2cpzb850000.txt
B=moyTT125glycerine25pc2cpzb850000;
X=B(:,1);
Y=B(:,2);
U=B(:,3);
V=B(:,4);
XX=X(1:nlig);
YY=Y(1:nlig:end);
UU=(reshape(U,[max(size(XX)),max(size(YY))]))';
VV=(reshape(V,[max(size(XX)),max(size(YY))]))';
quiver(XX(1:2:end),YY(1:2:end),UU(1:2:end,1:2:end),VV(1:2:end,1:2:end),3,'m
')
hold on
saveas(gcf,'D:\effet de la viscoTT125\TT125glycerine25pc2cpzb85','tif')
Page 141
Annexes
Annexe 3 : Routine Matlab : Calcul des dbits de pompage et de

circulation.
clear all
% Dbit de Pompage :
load C:\MATLAB701\work\glycerinepivTT125\moyTT125eauzb500000.txt
B =moyTT125eauzb500000 ;
ml=2880;
th=2902;
as=2868;
vv=2800;
dn=3117;
r0p=160.95*1e-3;
r0c=160.95*1e-3;
mlth=th-ml+1;
asth=th-as+1;
nlig=79;
xp = B(ml:1:th,1)*1e-3;
yp = B(ml:1:th,4);
% m
rpg = abs(xp(1:1:mlth,1)-r0p);
rpgflipped = flipud(rpg);
ypg = yp(1:1:mlth,1);
zpg = ypg.*rpg;
zpgflipped = flipud(zpg);
Qpg = pi*trapz(rpgflipped,zpgflipped)*3600;
% m/s
% m/s
% m/h
Qp = 2*Qpg
% dbit de circulation :
B =moyTT125eauzb500000 ;
xc1 = B(as:1:th,1)*1e-3;
yc1 = B(as:1:th,4);
rc1g = abs(xc1(1:1:asth,1)-r0c);
rc1gflipped = flipud(rc1g);
yc1g = yc1(1:1:asth,1);
zc1g = yc1g.*rc1g;
zc1gflipped = flipud(zc1g);
Qc1g = pi*trapz(rc1gflipped,zc1gflipped)*3600;
Qc1 = 2*Qc1g
% m
% m/s
% m/s
% m/h
Page 142
Annexes
Annexe 4 : Routine Matlab : Rpartition des cisaillement dans le

plan clair par le laser.
clear all
close all
format long
% fichier contenant les composantes des vecteurs vitesses partir de
flowmanager
nlig=79;
load
Au=moyTT125glycerine25pc2cpzb850000;
Xu=Au(:,1);
Yu=Au(:,2);
Vu=Au(:,3);
Vv=Au(:,4);
XXu=Xu(1:nlig);
YYu=Yu(1:nlig:end);
h=(Xu(2)-Xu(1))*1e-3;
VVu=(reshape(Vu,[max(size(XXu)),max(size(YYu))]))'; % on fabrique une
matrice XX x YY et puis on tilde pour que les XX aient une signif. normale
VVv=(reshape(Vv,[max(size(XXu)),max(size(YYu))]))'; % on fabrique une
matrice XX x YY et puis on tilde pour que les XX aient une signif. normale
% Calcul des drives du/dx et du/dy,
[dudx,dudy]=gradient(VVu,h);
% Calcul des drives dv/dx et dv/dy,
[dvdx,dvdy]=gradient(VVv,h);
dudy=abs(dudy);
dvdx=abs(dvdx);
% Correction des drives dans la zone la priphrie et dans le masque
i=1; %numro de la ligne
j=1; %numro de la colonne
[n_lin,n_col]=size(VVu);
while i <= n_lin
while j <= n_col
if j>1 & j<n_col & VVv(i,j-1)== 0
dvdx(i,j)=abs((VVv(i,j+1)-VVv(i,j))/h);
elseif j<n_col & j>1 & VVv(i,j+1)==0
dvdx(i,j)=abs((VVv(i,j-1)-VVv(i,j))/h);
elseif i>1 & i<n_lin & VVu(i-1,j)==0
dudy(i,j)=abs((VVu(i+1,j)-VVu(i,j))/h);
elseif i>1 & i<n_lin & VVu(i+1,j)==0
dudy(i,j)=abs((VVu(i-1,j)-VVu(i,j))/h);
end
if VVu(i,j) == 0
Page 143
Annexes
dudy(i,j)=0;
dvdx(i,j)=0;
else
end
j=j+1;
end
i=i+1;
j=1;
end
vis=0.00315;
supercis=dudy+dvdx;
tosuper=vis*supercis;
clear VVu VVv Xu Yu Vu Vv XXu XXv Au
load
C:\MATLAB701\work\glycerinepivTT125\moyTT125glycerine25pc2cpzh850000.txt
Au=moyTT125glycerine25pc2cpzh850000;
Xu=Au(:,1);
Yu=Au(:,2);
Vu=Au(:,3);
Vv=Au(:,4);
XXu=Xu(1:nlig);
YYu=Yu(1:nlig:end);
h=(Xu(2)-Xu(1))*1e-3;
VVu=(reshape(Vu,[max(size(XXu)),max(size(YYu))]))';
VVv=(reshape(Vv,[max(size(XXu)),max(size(YYu))]))';
[dudx2,dudy2]=gradient(VVu,h);
[dvdx2,dvdy2]=gradient(VVv,h);
dudy2=abs(dudy2);
dvdx2=abs(dvdx2);
% Corrections des drives dans la zone la priphrie et dans le masque
i=1;
j=1;
[n_lin,n_col]=size(VVu);
while i <= n_lin
while j <= n_col
if j>1 & j<n_col & VVv(i,j-1)== 0
dvdx2(i,j)=abs((VVv(i,j+1)-VVv(i,j))/h);
elseif j<n_col & j>1 & VVv(i,j+1)==0
dvdx2(i,j)=abs((VVv(i,j-1)-VVv(i,j))/h);
elseif i>1 & i<n_lin & VVu(i-1,j)==0
dudy2(i,j)=abs((VVu(i+1,j)-VVu(i,j))/h);
elseif i>1 & i<n_lin & VVu(i+1,j)==0
dudy2(i,j)=abs((VVu(i-1,j)-VVu(i,j))/h);
end
if VVu(i,j) == 0
Page 144
Annexes
dudy2(i,j)=0;
dvdx2(i,j)=0;
else
end
j=j+1;
end
i=i+1;
j=1;
end
supercis2=dudy2+dvdx2;
tosuper2=vis*supercis2;
figure
contourf(XXu,YYu,dudy,30),caxis ([0 8]), colorbar, shading flat;
title('du/dy:Cisaillement de la composante u selon la direction y, solution
de glycerine de 24.60cp, TT125, 85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
quiver(XXu(1:2:end),YYu(1:2:end),VVu(1:2:end,1:2:end),VVv(1:2:end,1:2:end),
2,'m')
hold on
saveas(gcf,'C:\MATLAB701\work\cisaillement TT125\effet
visco\dudyvecteurcomplet\TT125glycerine25pc2cpzh85dudy','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,dvdx,30), caxis ([0 10]),colorbar, shading flat;
title('dv/dx:Cisaillement de la composante v selon la direction x, solution
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
hold on
visco\dvdxvecteurcomplet\TT125glycerine25pc2cpzh85dudy','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,supercis,30),caxis ([0 165*1e-1]), colorbar, shading flat;
title('du/dy+dv/dx: somme des cisaillement, solution de glycerine de
24.60cp, TT125, 85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
visco\supercis\TT125glycerine25pc2cpzh85supercis','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,tosuper,30),caxis ([0 50*1e-2]), colorbar, shading flat;
title(' somme des contraintes, solution de glycerine de 3.15cp, TT125,
85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
Page 145
Annexes
2,'m')
visco\t0super\TT125glycerine25pc2cpzh85tosuper','tif')
clear VVu VVv Xu Yu Vu Vv XXu XXv Au
figure
contourf(XXu,YYu,dudy2,30),caxis ([0 8]), colorbar, shading flat;
title('du/dy:Cisaillement de la composante u selon la direction y, solution
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
hold on
visco\dudyvecteurcomplet\TT125glycerine25pc2cpzh85dudy','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,dvdx2,30), caxis ([0 10]),colorbar, shading flat;
title('dv/dx:Cisaillement de la composante v selon la direction x, solution
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
hold on
visco\dvdxvecteurcomplet\TT125glycerine25pc2cpzh85dudy','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,supercis2,30),caxis ([0 165*1e-1]), colorbar, shading
flat;
title('du/dy+dv/dx: somme des cisaillement, solution de glycerine de
24.60cp, TT125, 85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
visco\supercis\TT125glycerine25pc2cpzh85supercis','tif')
figure
contourf(XXu,YYu,tosuper2,30),caxis ([0 50*1e-2]), colorbar, shading flat;
title(' somme des contraintes, solution de glycerine de 3.15cp, TT125,
85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
2,'m')
visco\t0super\TT125glycerine25pc2cpzh85tosuper','tif')
% Calcul des distributions
Page 146
Annexes
dudy2=dudy2(19:63,1:79);
dudy2=reshape(dudy2,1,3555);
dudy=reshape(dudy,1,4977);
dudy3=[dudy,dudy2];
dudy3=nonzeros(dudy3);
dvdx2=dvdx2(19:63,1:79);
dvdx2=reshape(dvdx2,1,3555);
dvdx=reshape(dvdx,1,4977);
dvdx3=[dvdx,dvdx2];
dvdx3=nonzeros(dvdx3);
supercis2=supercis2(19:63,1:79);
supercis2=reshape(supercis2,1,3555);
supercis=reshape(supercis,1,4977);
supercis3=[supercis,supercis2];
supercis3=nonzeros(supercis3);
int1=(0.1:0.2:10);
int2=(0.1:0.2:12);
int3=(0.25:0.5:20);
figure
hist(dudy3,int1)
title('rpartition de dudy, solution de glycerine de 3.15 cp, TT125, 85
rpm')
xlabel('dudy (s-1)')
ylabel('nombre de zones d interrogation')
saveas(gcf,'D:\cisaillementTT125\effetvisco\histogramme\TT125glycerine25pc2
cpzh85dudy','tif')
figure
hist(dvdx3,int2)
title('rpartition de dvdx, solution de glycerine de 3.15 cp, TT125, 85
rpm')
xlabel('dvdx (s-1)')
cpzh85dvdx','tif')
figure
hist(supercis3,int3)
title('rpartition du cisaillement totale dudy+dvdx, solution de glycerine
de 3.15 cp, TT125, 85 rpm')
xlabel('dudy+dvdx (s-1)')
cpzh85supercis','tif')
Page 147
Annexes
Annexe 5 : Routine Matlab : Rpartition de la dissipation de

lnergie dans le plan clair par le laser
% fichier permettant de calculer la dissipation de l'energie :
% chargement des fichiers contenant les fluctuations de vitesse de
% flowmanager:
clear all
close all
format long
'creation des matrices'
adresse=['C:\MATLAB701\work\dissipationnrjTT150\'];
nlig=79;
nombredimage=133;
colonne=79;
ligne=63;
rho=1200;
mu=0.03106;
nu=mu/rho;
VVub(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
VVut(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
VVvb(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
VVvt(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dudyb(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dudyt(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dudxb(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dudxt(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dvdxb(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dvdxt(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dvdyb(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
dvdyt(1:ligne,1:colonne,1:nombredimage)=0;
%ouverture des fichiers
for k=1:1:nombredimage
if k<10
fichierb=['instTT150glycerine72pc29cpzb85000' num2str(k) '.txt'];
fichiert=['instTT150glycerine72pc29cpzh85000' num2str(k) '.txt'];
fileb=[adresse fichierb];
filet=[adresse fichiert];
Aub=dlmread(fileb);
Aut=dlmread(filet);
Xub=Aub(:,1);
Xut=Aut(:,1);
Yub=Aub(:,2);
Yut=Aut(:,2);
Vub=Aub(:,3);
Vut=Aut(:,3);
Vvb=Aub(:,4);
Vvt=Aut(:,4);
XXub=Xub(1:nlig);
XXut=Xut(1:nlig);
YYub=Yub(1:nlig:end);
YYut=Yut(1:nlig:end);
Page 148
Annexes
VVub(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vub,[max(size(XXub)),max(size(YYub))]))
VVut(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vut,[max(size(XXut)),max(size(YYut))]))'
VVvb(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vvb,[max(size(XXub)),max(size(YYub))]))'
VVvt(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vvt,[max(size(XXut)),max(size(YYut))]))'
clear Aub Aut Xub Xut Yub Yut Vub Vut Vvb Vvt XXub XXut YYub YYut fichierb
fichiert fileb filet
elseif k<100
Aub=dlmread(fileb);
Aut=dlmread(filet);
Xub=Aub(:,1);
Xut=Aut(:,1);
Yub=Aub(:,2);
Yut=Aut(:,2);
Vub=Aub(:,3);
Vut=Aut(:,3);
Vvb=Aub(:,4);
Vvt=Aut(:,4);
XXub=Xub(1:nlig);
XXut=Xut(1:nlig);
VVub(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vub,[max(size(XXub)),max(size(YYub))]))'
else
Aub=dlmread(fileb);
Aut=dlmread(filet);
Xub=Aub(:,1);
Xut=Aut(:,1);
Yub=Aub(:,2);
Yut=Aut(:,2);
Vub=Aub(:,3);
Vut=Aut(:,3);
Vvb=Aub(:,4);
Vvt=Aut(:,4);
XXub=Xub(1:nlig);
XXut=Xut(1:nlig);
VVub(1:ligne,1:colonne,k)=(reshape(Vub,[max(size(XXub)),max(size(YYub))]))'
Page 149
Annexes
end
end
fichierb=['instTT150glycerine72pc29cpzb850001.txt'];
fichiert=['instTT150glycerine72pc29cpzh850001.txt'];
Aub=dlmread(fileb);
Aut=dlmread(filet);
Xub=Aub(:,1);
Xut=Aut(:,1);
Yub=Aub(:,2);
Yut=Aut(:,2);
Vub=Aub(:,3);
Vut=Aut(:,3);
Vvb=Aub(:,4);
Vvt=Aut(:,4);
XXub=Xub(1:nlig);
XXut=Xut(1:nlig);
ht=(Xut(2)-Xut(1))*1e-3;
hb=(Xub(2)-Xub(1))*1e-3;
'calculdesgradients'
[dudxt,dudyt]=gradient(VVut,ht);
[dudxb,dudyb]=gradient(VVub,hb);
[dvdxt,dvdyt]=gradient(VVvt,ht);
[dvdxb,dvdyb]=gradient(VVvb,hb);
load
Bub=moyTT150glycerine72pc29cpzb850000;
Buvb=Bub(:,3);
BBuvb=(reshape(Buvb,[max(size(XXub)),max(size(YYub))]))';
load
C:\MATLAB701\work\glycerinepivTT150\moyTT150glycerine72pc29cpzh850000.txt
But=moyTT150glycerine72pc29cpzh850000;
Buvt=But(:,3);
BBuvt=(reshape(Buvt,[max(size(XXut)),max(size(YYut))]))';
%correction des gradients
for k=1:1:nombredimage
i=1; %numro de la ligne
j=1;
while i <= ligne
while j <= colonne
if j>1 & j<colonne & BBuvb(i,j-1)== 0
dvdxb(i,j,k)=((VVvb(i,j+1,k)-VVvb(i,j,k))/hb);
Page 150
Annexes
dudxb(i,j,k)=((VVub(i,j+1,k)-VVub(i,j,k))/hb);
elseif j<colonne & j>1 & BBuvb(i,j+1)==0
dvdxb(i,j,k)=((VVvb(i,j-1,k)-VVvb(i,j,k))/hb);
dudxb(i,j,k)=((VVub(i,j-1,k)-VVub(i,j,k))/hb);
elseif i>1 & i<ligne & BBuvb(i-1,j)==0
dudyb(i,j,k)=((VVub(i+1,j,k)-VVub(i,j,k))/hb);
dvdyb(i,j,k)=((VVvb(i+1,j,k)-VVvb(i,j,k))/hb);
elseif i>1 & i<ligne & BBuvb(i+1,j)==0
dudyb(i,j,k)=((VVub(i-1,j,k)-VVub(i,j,k))/hb);
dvdyb(i,j,k)=((VVvb(i-1,j,k)-VVvb(i,j,k))/hb);
end
if j>1 & j<colonne & BBuvt(i,j-1)== 0

dvdxt(i,j,k)=((VVvt(i,j+1,k)-VVvt(i,j,k))/ht);
dudxt(i,j,k)=((VVut(i,j+1,k)-VVut(i,j,k))/ht);
elseif j<colonne & j>1 & BBuvt(i,j+1)==0
dvdxt(i,j,k)=((VVvt(i,j-1,k)-VVvt(i,j,k))/ht);
dudxt(i,j,k)=((VVut(i,j-1,k)-VVut(i,j,k))/ht);
elseif i>1 & i<ligne & BBuvt(i-1,j)==0
dudyt(i,j,k)=((VVut(i+1,j,k)-VVut(i,j,k))/ht);
dvdyt(i,j,k)=((VVvt(i+1,j,k)-VVvt(i,j,k))/ht);
elseif i>1 & i<ligne & BBuvt(i+1,j)==0
dudyt(i,j,k)=((VVut(i-1,j,k)-VVut(i,j,k))/ht);
dvdyt(i,j,k)=((VVvt(i-1,j,k)-VVvt(i,j,k))/ht);
end
if BBuvb(i,j) == 0
dudyb(i,j,k)=0;
dudxb(i,j,k)=0;
dvdxb(i,j,k)=0;
dvdyb(i,j,k)=0;
else
end
if BBuvt(i,j) == 0
dudyt(i,j,k)=0;
dudxt(i,j,k)=0;
dvdxt(i,j,k)=0;
dvdyt(i,j,k)=0;
else
end
j=j+1;
end
i=i+1;
j=1;
end
end
clear VVub VVvb VVut VVub
' calcul des moyennes'

moyennecarredudyb=sum(dudyb.*dudyb,3)/nombredimage;
moyennecarredvdxb=sum(dvdxb.*dvdxb,3)/nombredimage;
moyennecarredudxb=sum(dudxb.*dudxb,3)/nombredimage;
moyennecarredvdyb=sum(dvdyb.*dvdyb,3)/nombredimage;
moyennecarrevuvvb=sum(dudyb.*dvdxb,3)/nombredimage;
Page 151
Annexes
moyennecarredudyt=sum(dudyt.*dudyt,3)/nombredimage;
moyennecarredvdxt=sum(dvdxt.*dvdxt,3)/nombredimage;
moyennecarredudxt=sum(dudxt.*dudxt,3)/nombredimage;
moyennecarredvdyt=sum(dvdyt.*dvdyt,3)/nombredimage;
moyennecarrevuvvt=sum(dudyt.*dvdxt,3)/nombredimage;
clear dudyb dudyt dudxt dudxb dvdxb dvdxt dvdyb dvdyt
' calcul de epsilon'
epsilonb=nu*((2*moyennecarredudxb)+(2*moyennecarredvdyb)+(3*moyennecarredud
yb)+(3*moyennecarredvdxb)+(2*moyennecarrevuvvb));
epsilont=nu*((2*moyennecarredudxt)+(2*moyennecarredvdyt)+(3*moyennecarredud
yt)+(3*moyennecarredvdxt)+(2*moyennecarrevuvvt));
clear moyennecarredudyb moyennecarredvdxb moyennecarredudxb
moyennecarredvdyb moyennecarrevuvvb moyennecarredudyt moyennecarredvdxt
moyennecarredudxt moyennecarredvdyt moyennecarrevuvvt
%affichage des figures
figure
contourf(XXub,YYub,epsilonb,510), caxis ([0 0.025]), colorbar, shading
flat;
title('taux de dissipation de l nergie turbulente solution de glycerine
de 31.06 cp, TT150, 85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
saveas(gcf,'C:\MATLAB701\work\graphdissipationnrjTT150\effetvisco\figure\TT
150glycerine72pc29cpzb85','tif')
figure
contourf(XXut,YYut,epsilont,510), caxis ([0 0.025]), colorbar, shading
flat;
title('taux de dissipation de l nergie turbulente solution de glycerine
de 31.06 cp, TT150, 85rpm')
xlabel('X (mm)')
ylabel('Z (mm)')
hold on
saveas(gcf,'C:\MATLAB701\work\graphdissipationnrjTT150\effetvisco\figure\TT
150glycerine72pc29cpzh85','tif')
%calcul de la repartition
epsilont2=epsilont(19:63,1:79);
epsilont3=reshape(epsilont2,1,3555);
epsilonb2=reshape(epsilonb,1,4977);
epsilon2=[epsilont3,epsilonb2];
epsilon3=nonzeros(epsilon2);
x=(0.00005:0.0001:0.025);
figure
hist(epsilon3,x);
title('repartition de la dissipation de l nergie turbulente
glycerine de 31.06 cp, TT150, 85rpm')
solution de
Page 152
Annexes
xlabel('valeur de la dissipation de l nergie turbulente')
ylabel('nombre de zone d interrogation')
saveas(gcf,'C:\MATLAB701\work\graphdissipationnrjTT150\effetvisco\histogram
me\TT150glycerine72pc29cp85','tif')
Annexe 6 : Routine Matlab : Calcul des coefficients de la courbe

de calibration en chaque point pour les mesures P.L.I.F. et calcul
de lvolution de la variance au cours du temps
clear all;
format long;
nconc=26;
% Nombre de concentration.
nref=8;% Nombre d'images pour chaque concentration.
nimage=200;
% Nombre d'image analyser.
X=1024;
Y=1280;
r=1;
% Coefficient de rduction des images;
adresse='C:\Program Files\MATLAB\R2006b\work\PLIFglycerine25pc2cpimage\';
% Masque 1 : Choix de 5 zones masques
M=masque (adresse, 'calibrationglycerine25pc2cp5150000.tif', r);
figure, imshow(M);
saveas(gcf,'masque.tif');
M=reshape(M,(1024/r)*(1280/r),1) ;
a=find(M==0);
Em=size(a,1);
%Cration des champs moyens de calibration'
T(1:X/r,1:Y/r)=0;
% T contiendra les images moyennes pour chaque
concentration.
TT(1:Em,1:nconc)=0;
R(1:X,1:Y)=0;
% R permettra de stoquer temporairement les images de
rfrence.
RR(1:X/r,1:Y/r,1:nref)=0;
conc(1:nconc)=0;
for j=1:nconc
RR(1:X/r,1:Y/r,1:nref)=0; % RR permettra d'additionner les niveaux de
gris des images de rfrence (R).
if j==1
fichier=['calibrationglycerine25pc2cp15000' int2str(i) '.tif'];
conc(j)=1.5;
concstr='_1_5';
elseif j==2
conc(j)=3.5;
concstr='_3_5';
elseif j==3
conc(j)=5.5;
concstr='_5_5';
elseif j==4
conc(j)=7.5;
Page 153
Annexes
concstr='_7_5';
elseif j==5
conc(j)=9.5;
concstr='_9_5';
elseif j==6
fichier=['calibrationglycerine25pc2cp115000' int2str(i)
'.tif'];
conc(j)=11.5;
concstr='_11_5';
elseif j==7
'.tif'];
conc(j)=13.5;
concstr='_13_5';
elseif j==8
'.tif'];
conc(j)=15.5;
concstr='_15_5';
elseif j==9
'.tif'];
conc(j)=17.5;
concstr='_17_5';
elseif j==10
'.tif'];
conc(j)=19.5;
concstr='_19_5';
elseif j==11
'.tif'];
conc(j)=21.5;
concstr='_21_5';
elseif j==12
'.tif'];
conc(j)=23.5;
concstr='_23_5';
elseif j==13
'.tif'];
conc(j)=25.5;
concstr='_25_5';
elseif j==14
'.tif'];
conc(j)=27.5;
concstr='_27_5';
elseif j==15
'.tif'];
conc(j)=29.5;
concstr='_29_5';
elseif j==16
'.tif'];
conc(j)=31.5;
concstr='_31_5';
elseif j==17
Page 154
Annexes
'.tif'];
conc(j)=33.5;
concstr='_33_5';
elseif j==18
'.tif'];
conc(j)=35.5;
concstr='_35_5';
elseif j==19
'.tif'];
conc(j)=37.5;
concstr='_37_5';
elseif j==20
'.tif'];
conc(j)=39.5;
concstr='_39_5';
elseif j==21
'.tif'];
conc(j)=41.5;
concstr='_41_5';
elseif j==22
'.tif'];
conc(j)=43.5;
concstr='_43_5';
elseif j==23
'.tif'];
conc(j)=45.5;
concstr='_45_5';
elseif j==24
'.tif'];
conc(j)=47.5;
concstr='_47_5';
elseif j==25
'.tif'];
conc(j)=49.5;
concstr='_49_5';
elseif j==26
'.tif'];
conc(j)=51.5;
concstr='_51_5';
end
for i=1:nref
file=[adresse fichier];
R=imread(file);
R=double(R); % pour convertir en matlab
red = @(x) mean(mean(x)); % apparement commande qui sert pour la
rduction
if r>1, R=blkproc(R,[r r],red); end % pour augmenter la taille
d'un pixel
RR(:,:,i)=R;
clear R
Page 155
Annexes
end
T=sum(RR,3)/nref;
T=reshape(T,(1280:r)*(1024/r),1);
TT(:,j)=T(a);
%
TTT=uint16(T(:,:,j)); % uint16(S) converts T to a matrix of unsigned
16-bit integers
%
file=[adresse 'ref' num2str(concstr) '.tif'];
%
imwrite(TTT,file);
% Les images moyennes sont stockes.
clear RR TTT T;
end
% Calibration
P(1:Em,1:2)=0;
MO=mean(mean(TT));
SD=std(std(TT,1),1);
TT=(TT-MO)./SD; % La normalisation des niveaux de gris est ncessaire au
bon fonctionnement de polyfit.
concbis=repmat(conc,Em,1);
% P(1:Em,:)=calibration(TT(1:Em,:),nconc,conc,a);
% A VERIFIER QUE CA
MARCHE
for k=1:Em
P(k,:)=polyfit(TT(k,:),concbis(k,:),1);
end
save P P
La matrice P (size(a,1) x 2) contient donc les coefficients A [P(:,1)] et B
[P(:,2)]
des droites de calibration pour chaque pixel, tel que :
Concentration = A * niveau de gris + B
load P
s=125;
t=50;
u=2;
if u==1, uu='eh'; end
if u==2, uu='eb'; end
v=1;
name=['TT' num2str(s) 'glycerine25pc2cp' num2str(t) uu num2str(v)]
% Calcul de l'cart type
CC(1:Em)=0;
VAR(nimage)=0;
for j=1:nimage
if j<10
fichier=[name '000' num2str(j) '.tif'];
elseif j<100
else
end
file=[adresse fichier];
C=imread(file);
Page 156
Annexes
C=double(C);
if r>1, C=blkproc(C,[r r],red); end
C=reshape(C,(1280/r)*(1024/r),1);
CC=C(a);
CC(:)=P(:,1).*((CC(:)-MO)./SD)+P(:,2);
VAR(j)=var(CC,1);
ECART(j)=sqrt(VAR(j));
clear C CC;
end
% % Graphique
%
figure;
x(1:nimage)=(1*0.25:0.25:nimage*0.25);
plot(x,VAR);
title(['Variance - Nombre d''image = ' num2str(nimage)]);
xlabel('Temps [s]');
ylabel('Variance');
saveas(gcf,['var_' name '.tif']);
figure;
x(1:nimage)=(1*0.25:0.25:nimage*0.25);
plot(x,ECART);
title(['Ecart type - Nombre d''image = ' num2str(nimage)]);
ylabel('Ecart type [g/l]');
saveas(gcf,['ecart_' name '.tif']);
Annexe 7 : Routine Matlab : Modle de mlange compartiment

% La routine qui appelle la fonction
clear all
C0=[41;7.5;7.5 ;7.5 ;7.5 ;7.5 ;7.5 ;7.5 ;7.5]
t0=0
tf=75
[t,c]=ode23('cuves_eq',[t0:1:tf],C0);
for x=1:9
if x==1 || x==4 || x==7
subplot(3,3,x+1);
elseif x==2 || x==5 || x==8
subplot(3,3,x-1);
else
subplot(3,3,x);
end
plot(t,c(:,x),'k');
ylabel('Concentration [g/l]');
title(['Compartiment ' num2str(x)]);
end
% la function:
function dCB=cuves_eq(t,C)
Page 157
Annexes
global Y
CT1=C(1);
CT2=C(2);
CT3=C(3);
CM1=C(4);
CM2=C(5);
CM3=C(6);
CB1=C(7);
CB2=C(8);
CB3=C(9);
X=[0.1307 ;0.1256 ;2.9237 ;1.3214 ;0.5603
.1206 ;0 ;5.3034 ;0.15 ;0.23 ;0.09];
;0 ;2.0914 ;0 ;0.5693 ;3.221 ;1
% volume des cuves

% contrainte= somme des volumes = volume total
H=0.128;
R=0.1548;
d=0.305;
Vcalotte=pi/3*H^2*(3*R-H);
% hauteur calotte sphrique

% rayon de courbure de la calotte sphrique
% diamtre de la cuve
Vtot=20e-3;
% volume total de liquide
hliq_cyl=(Vtot-Vcalotte)*4/(pi*d^2);
d_centr=0.125;
h_top=hliq_cyl/2;
h_med=hliq_cyl-h_top;
% diamtre zone centrale

% hauteur zone haute
% hauteur zone milieu
h_bot_cyl=(R^2-(d_centr/2)^2)^(1/2)-(R-H);
h_bot_cal=H-h_bot_cyl;
VT1=pi*d_centr^2/4*h_top;
VT2=(pi*d^2/4*h_top-VT1)/2;
VT3=VT2;
VM1=pi*d_centr^2/4*h_med;
VM2=(pi*d^2/4*h_med-VM1)/2;
VM3=VM2;
VB1=pi*d_centr^2/4*h_bot_cyl+pi/3*h_bot_cal^2*(3*R-h_bot_cal);
VB2=(Vcalotte-VB1)/2;
VB3=VB2;
debTR=X(15)/3600;
rotation zone haute
debMR=X(16)/3600;
zone milieu
debBR=X(17)/3600;
zone basse
debPTdown= (X(1)+X(4)+X(7)-X(3))/3600;
%dbit axial priphrique descendant zone haute
debPTup= X(1)/3600;
montant
debPBdown=X(4)/3600;
priphrique descendant zone basse
%dbit d la
%
%
%dbit axial
Page 158
Annexes
debPBup=X(3)/3600;
montant
debTin=X(5)/3600;
zone haute
debTout=(X(5)-X(1)+X(1)+X(4)+X(7)-X(3))/3600;
sortant
%dbit radial entrant
debBout=X(10)/3600;
debBin=(X(10)+X(4)-X(3))/3600;
zone basse
%
sortant
%dbit radial entrant
debCTdown= (2*X(5)-2*(X(5)-X(1)+X(1)+X(4)+X(7)-X(3)))/3600;
%dbit axial central
descendant zone haute
debCTup=
0
;
%
montant
debCBdown= (2*X(10)-2*(X(10)+X(4)-X(3)))/3600;
axial central
descendant zone basse
debCBup=
0 ;
montant
%dbit
%
debMin= (((2*X(10)-2*(X(10)+X(4)-X(3)))-(2*X(5)-2*(X(5)X(1)+X(1)+X(4)+X(7)-X(3))))/2)/3600;
entrant zone milieu
debMout=0 ;
%
%dbit radial
sortant
dCT1=1/VT1*( debTin
*( CT2+CT3) -2*debTout*CT1 ...
-debCTdown* CT1
+ debCTup*CM1);
dCT2=1/VT2*(-debTin
* CT2
+
+debTR
*( CT3-CT2)
-debPTdown* CT2
+
debTout*CT1
dCT3=1/VT3*(-debTin
* CT3
+
+debTR
*(-CT3+CT2)
-debPTdown* CT3
+
debTout*CT1
...
...
debPTup*CM2);
...
...
debPTup*CM3);
dCM1=1/VM1*( debMin
*( CM2+CM3) -2*debMout*CM1 ...
+debCTdown* CT1
- debCTup*CM1 ...
-debCBdown* CM1
+ debCBup*CB1);
dCM2=1/VM2*(-debMin
*
+debMR
*(
+debPTdown*
-debPBdown*
CM2
+
CM3-CM2)
CT2
CM2
+
debMout*CM1
dCM3=1/VM3*(-debMin
* CM3
+
+debMR
*(-CM3+CM2)
+debPTdown* CT3
-debPBdown* CM3
+
debMout*CM1
dCB1=1/VB1*( debBin
debPTup*CM2
debPBup*CB2);
debPTup*CM3
debPBup*CB3);
*( CB2+CB3) -2*debBout*CB1
...
...
...
...
...
...
...
Page 159
Annexes
+debCBdown*
CM1
debCBup*CB1);
dCB2=1/VB2*(-debBin
* CB2
+
+debBR
*( CB3-CB2)
+debPBdown* CM2
-
debBout*CB1
dCB3=1/VB3*(-debBin
* CB3
+
+debBR
*(-CB3+CB2)
+debPBdown* CM3
-
debBout*CB1
...
...
debPBup*CB2);
...
...
debPBup*CB3);
dCB=[dCT1;dCT2;dCT3;dCM1;dCM2;dCM3;dCB1;dCB2;dCB3];
Page 160

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Universit de Lige

Facult des sciences appliques

Etude du mlange par P.I.V. et P.L.I.F.

Travail de fin dtudes prsent par

Je remercie galement la Socit GlaxoSmithKline Biologicals et plus particulirement

Je tiens prsenter ma reconnaissance Mesdames Domique TOYE et Emeline VERDIN

Ma gratitude sadresse galement Monsieur le Professeur Christian GRANFILS pour son

Table des matires

Table des matires

Hydrodynamique au sein dune cuve agite.................................................................24

Lcoulement laminaire ( Re < 10 40 )........................................................24

Lcoulement transitoire ( 10 40 < Re < 10 000 100 000 ) .......................25

Lcoulement turbulent (10 000 100 000 < Re )........................................25

Les mobiles dagitation ................................................................................27

Les paramtres globaux du mlange ....................................................................30

La puissance volumique dissipe .................................................................30

Le dbit de pompage et le dbit de circulation .............................................33

Mlange et temps de mlange ......................................................................35

Les rgimes dcoulement ....................................................................................24

Paramtres locaux du mlange .............................................................................36

La suspension des particules dans une cuve agite ......................................................40

Chapitre II Matriels et mthodes .........................................................................................43

Cuve agite ...................................................................................................................44

Mobile dagitation : Hlice TT de Mixel..............................................................46

Mesures P.I.V. ..............................................................................................................46

La corrlation croise ...........................................................................................49

Traitement des images ..........................................................................................53

Mesures P.L.I.F. ...........................................................................................................56

Thorie la base de cette mthode .......................................................................56

Application de cette mthode ltude du mlange.............................................57

Table des matires

Dispositif exprimental complmentaire..............................................................57

Les microporteurs .........................................................................................................58

Fluide utilis lors des mesures P.I.V. et P.L.I.F. ..........................................................62

Chapitre III Rsultats obtenus par la mthode P.I.V. ............................................................64

Description qualitative de lcoulement dans le plan du laser .............................65

Influence de la viscosit sur la structure de lcoulement ....................................67

Influence de la vitesse de rotation sur la structure de lcoulement .....................68

Influence de la contre-pale sur la structure de lcoulement ................................68

Effet du diamtre du mobile sur la structure de lcoulement..............................69

Dbit et nombre de pompage, dbit et nombre de circulation......................................73

Evolution de la puissance et du nombre de puissance avec le Reynolds..............78

Puissance dissipe dans 20L de Cytodex1TM et concept de Metzner et Otto .......82

Hauteur quivalente dune pompe ........................................................................83

Rpartition du cisaillement dans le plan clair par le laser.........................................86

Explication gnrale des rpartitions du cisaillement ..........................................87

Influence de la viscosit de la solution sur la rpartition du cisaillement ...........89

Influence de la vitesse de rotation du mobile sur la rpartition du cisaillement ..90

Influence de la taille du mobile sur la rpartition du cisaillement........................90

Influence de la position de la contre-pale sur la rpartition du cisaillement ........91

Rpartition de la dissipation de lnergie .....................................................................93

Description de la rpartition de la dissipation de lnergie .................................94

Effet de la viscosit sur la dissipation de lnergie ..............................................96

Effet de la vitesse de rotation du mobile sur la dissipation de lnergie ..............96

Effet de la contre-pale sur la dissipation de lnergie...........................................96

Table des matires

Effet du diamtre du mobile sur la dissipation de lnergie .................................96

Rsultats obtenus par la mthode P.L.I.F. .........................................................99

Le temps de mlange ..................................................................................................100

Traitement des images ........................................................................................101

Influence du point dinjection.....................................................................105

Influence du Reynolds ................................................................................105

Modle compartiment de mlange............................................................................108