04773403001V2

ALP2S

Alkaline phosphatase acc. to IFCC Gen.2

Indica los sistemas cobas c adecuados para el reactivo
Informacin de pedido
Alkaline phosphatase acc. to IFCC Gen.2
4 x 50 tests
Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 x 3 mL, para los EE.UU.)
Precinorm U plus (10 x 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, para los EE.UU.)
Precipath U plus (10 x 3 mL)
Precipath U plus (10 x 3 mL, para los EE.UU.)
Precinorm U (20 x 5 mL)
Precipath U (20 x 5 mL)
Chimeneas
Chimeneas (para los EE.UU.)

Ref. 04657373 190

Ref. 10759350 190
Ref. 10759350 360
Ref. 12149435 122
Ref. 12149435 160
Ref. 12149443 122
Ref. 12149443 160
Ref. 10171743 122
Ref. 10171778 122
Ref. 11930630 001
Ref. 11930630 001

Sistemas cobas c
cobas c 111

ALP2S: ACN 158

Cdigo 401
Cdigo 401
Cdigo 300
Cdigo 300
Cdigo 301
Cdigo 301
Cdigo 300
Cdigo 301

Espaol

Contacto telefnico internacional: +49-621-7590, EE.UU.: +1-800-428-2336

Funcin
Test in vitro para la determinacin cuantitativa de la fosfatasa alcalina en
suero y plasma humanos con los sistemas Roche/Hitachi cobas c 111.

Preparacin de los reactivos

Los reactivos estn listos para usar.
Antes del uso, colocar una chimenea en R1.
El frasco de reactivo abierto R1 absorbe CO2 atmosfrico, con lo cual la
estabilidad de la calibracin se reduce. Por eso, el presente estuche de
reactivos requiere chimeneas para reducir la absorcin de CO2. Las chimeneas
se colocan directamente en el frasco de reactivo apropiado. Las chimeneas
pueden usarse varias veces con los frascos de reactivo del mismo estuche.

Generalidades1,2,3,4,5,6
La fosfatasa alcalina srica consta de cuatro genotipos estructurales: el
tipo de origen heptico, seo y renal, el tipo intestinal, el tipo placentario
y la variante de las clulas germinales. La fosfatasa alcalina se halla
en los osteoblastos, los hepatocitos, los riones, el bazo, la placenta,
la prstata, los leucocitos y en el intestino delgado. El tipo de origen
heptico, seo y renal es de particular importancia.
Se registran valores elevados de fosfatasa alcalina en todas las formas
de la colestasis, especialmente en la ictericia obstructiva. Su actividad
tambin est elevada en enfermedades del esqueleto como la enfermedad
de Paget, el hiperparatiroidismo, la raquitis, la osteomalacia y en fracturas y
tumores malignos. En nios y adolescentes se observa a veces un fuerte
aumento de la actividad de la fosfatasa alcalina, pues cuando el crecimiento
seo se acelera, la actividad de los osteoblastos aumenta.
El mtodo de determinacin fue descrito primeramente por King y Armstrong,
modificado por Ohmori, Bessey, Lowry y Brock y mejorado por Hausamen
y cols. En 1983, la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC)
recomend un mtodo estandarizado para la determinacin de la fosfatasa
alcalina usando una concentracin de sustrato ptima y empleando como
tampn el 2-amino-2-metil-1-propanol completado por los cationes magnesio y
cinc. El presente ensayo se basa en esta recomendacin aunque fue mejorado
en cuanto a la estabilidad y el desempeo. EL presente ensayo ha sido
estandarizado frente a la formulacin de referencia de la IFCC mencionada.
Principio del test6
Test colorimtrico segn un mtodo estandarizado
En presencia de iones de magnesio y de cinc, las fosfatasas desdoblan
el p-nitrofenilfosfato a fosfato y p-nitrofenol.
p-nitrofenilfosfato + H2O

ALP

ALP2S
Sin abrir, a 2-8C:
Abierto y refrigerado en el analizador:

Reactivos - Soluciones de trabajo

R1 2-Amino-2-metil-1-propanol: 1,724 mol/L, pH 10,5 (30C); acetato
de magnesio: 3,83 mmol/L; sulfato de zinc: 0,766 mmol/L; cido
N-(2-hidroxietil) etilendiaminotriactico: 3,83 mmol/L
SR p-nitrofenilfosfato: 132,8 mmol/L; pH 8,5 (30C); conservantes
Medidas de precaucin y advertencias
Destinado al uso diagnstico in vitro.
Observe las medidas de precaucin usuales para la manipulacin de reactivos.
Eliminar los residuos segn las normas locales vigentes.
Ficha de datos de seguridad a la disposicin del usuario
profesional que la solicite.
Xi
R 36/38 Irrita los ojos y la piel.
S 24/25 Evtese el contacto con los ojos y la piel.

Ver la fecha de
caducidad del reactivo
10 das

Obtencin y preparacin de las muestras

Emplear nicamente tubos o recipientes adecuados para
recoger y preparar las muestras.
Slo se han analizado y encontrado aptas las muestras aqu mencionadas.
Suero.
Plasma con heparina de litio.
El tipo de muestras al que se hace referencia fue analizado en una seleccin de
los tubos de recoleccin de muestras que se comercializaban en el momento
de efectuar el anlisis, sin emplear la totalidad de los tubos existentes ni los
productos de todos los fabricantes. Los sistemas de recoleccin de muestras
de diversos fabricantes pueden contener materiales diferentes que, en ciertos
casos, pueden afectar los resultados analticos. Si las muestras se procesan
en tubos primarios, atngase a las instrucciones del fabricante.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el ensayo.
Estabilidad:7

fosfato+ p-nitrofenol

El p-nitrofenol liberado es directamente proporcional a la actividad cataltica

de la ALP. Se determina midiendo el aumento de la absorbancia.

2007-08, V 2 Espaol

Conservacin y estabilidad

7 das a 15-25C
7 das a 2-8C
2 meses a (-15) - (-25)C

Material suministrado
Consultar la seccin "Reactivos Contenido y concentraciones"
en cuanto a los reactivos suministrados.
Material requerido (no suministrado)
Consulte la seccin Informacin de pedido.
Agua desionizada
Equipo de laboratorio usual
Ejecucin del test
Para garantizar el desempeo ptimo del test, observe las instrucciones
de la presente metdica referidas al analizador empleado. Consulte
el manual del operador apropiado para obtener las instrucciones
de ensayo especficas del analizador.
Roche no se responsabiliza del desempeo de las aplicaciones no validadas
por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su definicin.
1/3

Sistemas cobas c

ALP2S

Alkaline phosphatase acc. to IFCC Gen.2

Aplicacin para suero y plasma
Definicin del test para el analizador cobas c 111
Absorbancia
Medicin
Clc. de la absorbancia
Cintica
Incremento
Direccin de la reaccin
Longitud de onda A/B
409/659 nm
Clc. primero/ltimo
20/34
Unidad
U/L
Modo de reaccin
R1-S-SR

Pasos de lavado adicionales

Ningn ensayo presenta interferencias conocidas que hagan
necesarios pasos de lavado adicionales.
Intervalo de medicin
3-1.200 U/L (0,05-20,0 kat/L)

Parmetros de pipeteo
R1
Muestra
SR
Volumen total

75
2,75
17
140,75

L
L
L
L

Diluyente (H2O)
16 L
20 L
10 L

Calibracin
Calibradores

Modo de calibracin
Intervalo de calibracin

Calibrator f.a.s.
El instrumento emplea automticamente
agua desionizada como calibrador cero
Regresin lineal
- cada lote
- cada 5 das
- y si lo fuera necesario segn los
procedimientos de control de calidad.

Trazabilidad: El presente mtodo ha sido estandarizado frente a la formulacin

original de la IFCC empleando pipetas calibradas junto con un fotmetro manual
obteniendo valores absolutos y la absortividad especfica de sustratos.6
Control de calidad
Para el control de la calidad, emplear los controles indicados en
la seccin Informacin de pedido.
Asimismo puede emplearse otro material de control apropiado.
Los intervalos y lmites del control deben adaptarse a los requerimientos
particulares de cada laboratorio. Los valores obtenidos deben
situarse dentro de los lmites establecidos.
Cada laboratorio debera establecer medidas correctivas a seguir en
caso de que los valores se siten fuera de los lmites.
Clculo
El analizador cobas c 111 calcula automticamente la concentracin
del analito de cada muestra.
Factor de conversin: U/L x 0,0167 = kat/L
Limitaciones del anlisis - interferencias8
Criterio: Recuperacin dentro de 10% del valor inicial con una actividad
de la fosfatasa alcalina de 129 U/L (2,15 kat/L).
Ictericia: Sin interferencias significativas hasta un ndice I de 60 para
la bilirrubina conjugada y no conjugada (concentracin de la bilirrubina
conjugada y no conjugada: aprox. 1.026 mol/L 60 mg/dL).
Hemlisis: Sin interferencias significativas hasta un ndice H de 250
(concentracin de hemoglobina: aprox. 155 mol/L 250 mg/dL).
Lipemia (Intralipid): Sin interferencias significativas hasta un ndice L
de 2.000. No existe una correlacin concluyente entre el ndice L (que
corresponde a la turbidez) y la concentracin de triglicridos.
Frmacos: En una serie de frmacos comunes testados no
se encontraron interferencias.9
En casos muy raros se han registrado resultados errneos
de test debido a la gammapata, particularmente del tipo IgM
(macroglobulinemia de Waldenstrm).
Con fines diagnsticos, los resultados obtenidos con el test siempre
deben evaluarse junto a la anamnesis del paciente, los exmenes
clnicos y los resultados de otros anlisis.
Sistemas cobas c

Determinar las muestras con actividades mayores a travs de

la funcin de repeticin del ciclo.
En este caso las muestras se diluyen de 1:5 y los resultados se
multiplican automticamente por el factor 5.
Lmite inferior de deteccin
3 U/L (0,05 kat/L)
El lmite inferior de deteccin representa la concentracin mnima medible
de analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor situado
a tres desviaciones estndar por encima del estndar ms bajo.
Valores tericos
(Medidos a 37C)
Adultos10
Hombres (n = 221)
Mujeres (n = 229)
Valores de consenso11
Hombres
Mujeres
Niosa
de 1 da de edad
de 2-5 das de edad
de 6 das a 6 meses de edad
de 7 meses a 1 ao
de 1-3 aos de edad
de 4-6 aos de edad
de 7-12 aos de edad
de 13-17 aos de edad (f)
de 13-17 aos de edad (m)

40-129 U/L
35-104 U/L

(0,67-2,15 kat/L)
(0,58-1,74 kat/L)

40-130 U/L
35-105 U/L

(0,67-2,17 kat/L)
(0,58-1,76 kat/L)

<250
<231
<449
<462
<281
<269
<300
<187
<390

U/L
U/L
U/L
U/L
U/L
U/L
U/L
U/L
U/L

(<4,17 kat/L)
(<3,84 kat/L)
(<7,49 kat/L)
(<7,69 kat/L)
(<4,67 kat/L)
(<4,48 kat/L)
(<5,00 kat/L)
(<3,11 kat/L)
(<6,51 kat/L)

Cada laboratorio debera comprobar si los intervalos de referencia

pueden aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario,
establecer sus propios valores.

a) Calculado a partir de intervalos de referencia publicados para el mtodo ALP opt. (DGKC)12
empleando un factor de 0,417 derivado de una comparacin de mtodos.

Datos especficos de desempeo del test

A continuacin, se indican los datos reresentativos de desempeo
obtenidos en los analizadores. Los resultados de cada laboratorio
en particular pueden diferir de estos valores.
Precisin
La reproducibilidad ha sido determinada empleando muestras humanas y
controles segn un protocolo interno (intraensayo n=21, total n= 30).
Se han obtenido los siguientes resultados:
En la serie

VM
U/L (kat/L)
87,5 (1,46)
229 (3,82)
43,1 (0,72)
190 (3,17)

DE
U/L (kat/L)
0,4 (0,01)
2 (0,03)
0,3 (0,01)
2 (0,03)

CV
%
0,5
0,7
0,6
1,2

Precinorm U
Precipath U

VM
U/L (kat/L)
90,0 (1,50)
229 (3,82)

DE
U/L (kat/L)
0,9 (0,02)
2 (0,03)

CV
%
1,0
0,8

Suero humano 3
Suero humano 4

53,2 (0,89)
195 (3,24)

0,4 (0,01)
2 (0,03)

0,8
0,9

Precinorm U
Precipath U
Suero humano 1
Suero humano 2
Total

2/3

2007-08, V 2 Espaol

04773403001V2

ALP2S

Alkaline phosphatase acc. to IFCC Gen.2

Comparacin de mtodo
Se han comparado los valores de fofatasa alcalina en muestras de suero y
plasma humanos obtenidos con un analizador cobas c 111 (y) con los obtenidos
con el reactivo correspondiente en un analizador COBAS INTEGRA 400 (x).
Cant. de muestras (n) = 74
Regresin lineal
Passing/Bablok13
y = 0,997x - 1,124 U/L
y = 1,008x - 2,207 U/L
= 0,974
r = 1,000
Las actividades de las muestras se encontraron entre 32 y 828 U/L
(0,534-13,8 kat/L).
Referencias bibliogrficas
1. Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und
Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag, 1995.
2. King EJ, Armstrong AR. Can Med Assoc J 1934;31:376.
3. Ohmori Y. Enzymologia 1937;4:217.
4. Bessey OAH et al. J Biol Chem 1946;164:321.
5. Hausamen TU et al. Clin Chim Acta 1967;15:241.
6. Tietz NW et al. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21:731-748.
7. Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations.
WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2.
8. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences
in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-474.
9. Report on the Symposium Drug effects in clinical chemistry methods,
Breuer J, Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
10. Abicht K et al. Multicenter evaluation of new GGT and ALP reagents
with new reference standardization and determination of 37C reference
intervals. Clin Chem Lab Med 2001;39(Suppl.):S346[abstract].
11. Thomas L, Mller M, Schumann G, Weidemann G et al. Consensus
of DGKL and VDGH for interim reference intervals on enzymes
in serum. J Lab Med 2005;29:301-308.
12. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent Reference Limits of Several
Enzymes in Plasma at Different Measuring Temperatures.
Klin Lab 1992;38:555-561.
13. Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method
Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.

La barra del margen indica cambios o suplementos significativos.

2007 Roche Diagnostics

Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim

2007-08, V 2 Espaol

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Sistemas cobas c