UNIVERSIDAD ANDRES BELLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR BIO-035

GUA N 4: COMPONENTES QUMICOS DE
LA CLULA

INTRODUCCIN
Las clulas son estructuras increblemente complejas y diversas, capaces de autorreplicarse
y de realizar una amplia variedad de funciones especializadas en los organismos
multicelulares.
En trminos generales, las clulas se componen de agua, iones inorgnicos (sales minerales)
y molculas orgnicas que contienen carbono. Tanto el agua como las sales minerales son
muy importantes en el funcionamiento celular, sin embargo, son los compuestos orgnicos
de la clula los que dan caractersticas nicas.
Hidratos de carbono, protenas, lpidos y cidos nucleicos son los cuatro tipos principales de
molculas orgnicas que se encuentran en la clula, y cumplen en ella roles tanto
estructurales como funcionales. Las clulas obedecen a las mismas leyes fsicas y qumicas
que determinan el comportamiento de los sistemas no vivos y su qumica bsica puede ser
entendida en trminos de las estructuras y funciones de estas cuatro clases de molculas
orgnicas.

Objetivo General del laboratorio:

Reconocer la presencia de molculas orgnicas e inorgnicas en diferentes soluciones
utilizando mtodos especficos de deteccin.
HIDRATOS DE CARBONO o GLCIDOS (dulce). Como su nombre lo indica, se
componen de carbono, hidrgeno y oxgeno. Los carbohidratos ms simples son los
monosacridos. Todos ellos contienen grupos hidroxilo, as como grupos aldehdos o cetos.
Estos azcares simples se polimerizan (se agrupan en molculas ms complejas, formando
cadenas), a travs de reacciones de deshidrogenacin para formar oligosacridos (2-6
molculas de monosacridos) o polisacridos
(cientos o
miles de
molculas de
monosacridos). El enlace formado en esta
reaccin se conoce como enlace glucosdico, y
se establece entre el carbono del grupo hidroxilo
de una unidad y el carbono del grupo aldehdo o
ceto de otra unidad.
Los glcidos estn presentes en la totalidad de las clulas, a veces libres interviniendo en
procesos qumicos celulares, o constituyendo macromolculas como por ejemplo, celulosa,
almidn y ARN. Los polisacridos juegan papeles importantes como molculas de
almacenamiento de energa, y tambin son componentes estructurales de la superficie
celular. Los oligosacridos se unen comnmente a protenas o lpidos, dando origen a las
glicoprotenas y glicolpidos. Estos son parte importante de las membranas y participan en
los
procesos
de
reconocimiento
celular
e
interaccin
entre
clulas.

PROTENAS. Estn constituidas por carbono, oxgeno, hidrgeno y nitrgeno; y adems

la mayora contiene azufre y algunas, fsforo, hierro, zinc o cobre. Se forman
por
monmeros llamados aminocidos, que se unen entre s por medio del enlace peptdico
dando origen a cadenas polipeptdicas de largo variable. Este enlace covalente se forma
entre el grupo cido carboxlico (-COOH) de un aminocido y el grupo amino (-NH2) del
siguiente mediante la eliminacin de una molcula de agua. Las interacciones hidrofbicas
y covalentes, como los puentes de azufre (S-S), que se establecen entre los aminocidos que
forman la cadena polipeptdica de la protena determinan diferentes niveles de estructura,
los cuales contribuyen al plegamiento y a que adopten su conformacin final caracterstica.
Por tanto la prdida de esta conformacin puede llevar a la prdida de la funcin que una
protena realiza.

En la clula, las protenas realizan importantes funciones; proveen rigidez estructural

(colgeno, queratina), controlan la permeabilidad de las membranas (protenas
transmembranales), regulan las concentraciones de los metabolitos (insulina, glucagn),
reconocen y se unen a otras biomolculas en forma covalente (protenas de reconocimiento),
participan en el transporte y movimiento celular (hemoglobina, miosina y actina), se
encargan de la defensa del organismo frente a patgenos (inmunoglobulinas), etc.
El grupo de protenas ms especializado es el de las ENZIMAS, las cuales son protenas
con funcin catalizadora, es decir, se encargan de acelerar la velocidad de las reacciones
qumicas. Las enzimas son molculas formadas por una o varias cadenas polipeptdicas y se
caracterizan por adoptar una conformacin tridimensional particular que permite la
formacin del sitio activo, lugar en el cual se une el sustrato y en donde se lleva a cabo la
reaccin.
LPIDOS. Son molculas insolubles o escasamente solubles en agua, debido a que una gran
parte de ellos es hidrofbica. Esta parte hidrofbica slo contiene carbono e hidrgeno.
Los lpidos proveen una importante forma de almacenamiento de energa, son los principales
constituyentes de las membranas,
y son importantes en los procesos
procesos de sealizacin celular,
tanto como hormonas esteroidales
como
molculas
mensajeras.

CIDOS NUCLEICOS. Almacenan y transmiten la informacin gentica de todos los

organismos vivos. E x i s t e n 2 tipos de cidos nucleicos, el cido ribonucleico o ARN y el
cido desoxirribonucleico o ADN. Ambos tipos estn formados por polmeros.de
nucletidos (ribonucletidos en el caso de ARN y desoxirribonucletidos en el caso de
ADN) unidos por enlaces fosfodister. Ambos tipos se diferencian en el azcar que
contienen en sus nucletidos (ribosa en el ARN y desoxirribosa en el ADN), y en que el
ARN se presenta como una molcula de una sola hebra, mientras que el ADN es de doble
hebra. La funcin general de los cidos nucleicos es permitir el flujo de la informacin
gentica contenida por una clula a otra clula hija, y utilizar esta informacin para la
expresin gnica.
La molcula de ADN se conoce como la molcula de la herencia y almacena la informacin
gentica en los genes que codificarn para protenas y ARN. El ARN participa
principalmente en transformar la informacin contenida en el ADN a molculas funcionales
como lo son las protenas.
El ARN se presenta principalmente en tres formas que cumplen distintas funciones: el ARN
mensajero que transporta la informacin contenida en un gen hasta el citoplasma; el ARN
ribosomal que forma parte estructural y cataltica de los ribosomas los cuales traducen la
informacin contenida en los ARN mensajeros a protenas; y el ARN de transferencia que
participa como molcula adaptadora para transformar la informacin desde el ARN
mensajero a protena.

SALES MINERALES. Son molculas inorgnicas que se encuentran formando parte de los
seres vivos y, aunque se encuentran en pequeas cantidades en comparacin a las
biomolculas, tienen funciones muy importantes en las reacciones metablicas, en la
regulacin de stas o como constituyentes celulares. Las sales ms abundantes en los seres
vivos son los cloruros, los fosfatos y los carbonatos de calcio, sodio, potasio y magnesio. La
funcin que las sales minerales desempean en el organismo depende del estado fsico en
que se encuentren, ya sea como sales precipitadas, donde forman parte de endoesqueletos
de vertebrados (fosfatos y carbonatos), de conchas de moluscos y dientes (carbonatos) y de
estructuras de sostn en plantas como las gramneas (slice); o como sales disueltas,
formando parte de todos los plasmas intra e intercelulares, disociadas en forma de iones
como los cloruros (Cl-), fosfatos (PO4-3), etc.
Las sales disueltas tienen numerosas funciones, pero la ms importante es la funcin
homeosttica o el mantenimiento constante del medio celular interno. Tambin participan en
la regulacin de la presin osmtica determinando la concentracin de la disolucin.

ACTIVIDADES PRCTICAS
ACTIVIDAD N1: RECONOCIMIENTO DE HIDRATOS DE CARBONO
A) Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Somogyi:
Los monosacridos y algunos disacridos, en medio alcalino y en caliente, presentan una
capacidad reductora que permite su reconocimiento en distintos tipos de muestras, entre
ellas los lquidos biolgicos como la orina y la leche.
La reaccin de Somogyi permite la deteccin rpida de azcares basada en la capacidad
de los monosacridos para reducir algunas molculas, entre ellas los hidrxidos
metlicos.
Los componentes del reactivo de Somogyi son sulfato de cobre (CuSO4), hidrxido de
sodio (NaOH) que reaccionan para formar hidrxido de cobre (Cu(OH)2). La precipitacin
de este hidrxido se evita agregando a la solucin tartrato doble de sodio y potasio,
obtenindose una solucin de color azul intenso. Calentando el reactivo de Somogyi en
presencia de un hidrato de carbono reductor como la glucosa, aparece un precipitado rojo
ladrillo correspondiente a xido cuproso (Cu2O).
Para comparar la capacidad reductora de distintas muestras que contienen mono y
polisacridos, se realizar la reaccin de Somogyi en distintas soluciones. Esto permitir
identificar la presencia y el tipo de hidrato de carbono que se encuentra en las distintas
soluciones que se entregarn en el laboratorio.
Segn las siguientes instrucciones realice un esquema de trabajo que le permita seguir
claramente las acciones a realizar. Repita este proceso en cada uno de los experimentos
siguientes.
Procedimientos y Observaciones
Prepare 5 tubos de ensayo colocndolos en una gradilla. Rotule cada uno de los
tubos de tal modo que pueda recordar claramente con qu muestra est trabajando.
Agregue a cada uno de los tubos 1 ml de Somogyi y luego agregue 1 ml de cada
una de las siguientes muestras segn el siguiente esquema:
Tubo
1
2
3
4
5

Muestra
Agua destilada
Solucin glucosa 1%
Solucin almidn 1%
Leche
Solucin NaCl 1%

Reaccin (+) o (-)

Observaciones

Agitar bien cada uno de los tubos, colocarlos en una gradilla y llevarlos al bao
termoregulado. Dejar reaccionar a 90C por 3 minutos (anote la temperatura del
bao).
Una vez transcurrido el tiempo deje enfriar y observe si aparece algn precipitado
suspendido en solucin. Cul es el color y la cantidad relativa del precipitado en
cada uno de los tubos?
Interprete los resultados investigando la composicin de las muestras en estudio.

 Revise la estructura qumica de los monosacridos. A qu caracterstica se debe su

capacidad reductora?
B) Identificacin de polisacridos mediante la prueba del Lugol:
El reactivo Lugol est formado por una mezcla de yoduro de potasio (KI) con una solucin
de yodo (I2) y posee una coloracin marrn-rojiza muy caracterstica. La prueba del Lugol
permite la identificacin de polisacridos como el almidn en muestras de distinto origen:
soluciones, slidos y muestras de origen vegetal como semillas y tubrculos.
Al interactuar el I2 con el almidn se produce una coloracin azul-violeta caracterstica que
se explica porque el yodo queda atrapado entre dos tipos distintos de cadenas que
conforman la estructura qumica del almidn: las cadenas de amilosa, sin ramificaciones,
que producen el color azul intenso y las cadenas ramificadas de amilopectina, que al unirse
al yodo produce la coloracin violeta.
Los productos de hidrlisis del almidn producen una coloracin marrn-rojiza y si son de
muy bajo peso molecular no forman productos coloreados.
Procedimientos y Observaciones
De manera similar al experimento anterior, compararemos la capacidad de distintas muestras
representativas de mono y polisacridos para reaccionar con el Lugol.
Prepare 5 tubos de ensayo con 1 ml de cada una de las muestras segn el mismo
esquema del experimento anterior.
Agregue a cada uno de los tubos 1 gota de solucin de Lugol diluda y agite.
Observe el color producido en cada uno de los tubos. Interprete los resultados
obtenidos segn su conocimiento de la estructura de mono y polisacridos.

ACTIVIDAD N 2: RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

Identificacin de protenas mediante la prueba de Biuret:
Las protenas son macromolculas formadas por polmeros de aminocidos unidos mediante
enlaces peptdicos. Esta caracterstica estructural permite su identificacin en solucin
mediante distintos mtodos, entre los que destaca la utilizacin del reactivo de Biuret. ste
se utiliza para realizar un anlisis cuantitativo mediante mediciones de espectrofotometra o
un anlisis cualitativo mediante cambios en la coloracin de la reaccin. El reactivo de
Biuret est formado por sulfato de cobre (CuSO4) y tartrato doble de sodio y potasio
(C4H4 KNaO6* 4H2O) en medio alcalino. El Cu+2 reacciona con los grupos amino (>NH)
del enlace peptdico de las protenas, formando un enlace coordinado con 4 tomos de
nitrgeno. Este enlace coordinado es responsable de la coloracin azul-violeta caracterstica
del
mtodo
al
reaccionar
las
protenas
con
el
reactivo.

Procedimientos y Observaciones
Rotular 5 tubos de ensayo y colocar en cada uno de ellos 1 ml de cada una de las
siguientes muestras:
Tubo
1
2
3
4
5

Muestra
Agua destilada
Solucin glicina 1%
Clara de huevo
Leche
Solucin NaCl 1%

Reaccin (+) o (-)

Observaciones

Agregar a cada tubo 1 ml del reactivo de Biuret y agitar.

Observar la variacin de color en los tubos.

Cmo explica la diferencia de intensidades en los tubos que presentaron una reaccin
positiva? Interprete los resultados obtenidos investigando la composicin de las
muestras en estudio.

ACTIVIDAD N 3: RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

Solubilidad:
Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se forman
pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria pues
desaparece en reposo, debido a la reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que por
su menor densidad se sita sobre la capa de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en
los llamados disolventes orgnicos, como el ter, benceno, xilol, cloroformo, etc.
Procedimientos y Observaciones
Tomar dos tubos de ensayo y poner en uno de ellos 1 ml de agua y en el otro tubo 1
ml de ter.
Aadir a cada tubo 1ml de aceite y agitar fuertemente. Observar la formacin de
gotitas o micelas y dejar en reposo en la gradilla. Observe la reaccin.
Tubo

Muestra

Agua + Aceite

ter + Aceite

Observaciones

ACTIVIDAD N4: RECONOCIMIENTO DE SALES MINERALES

Procedimientos y Observaciones
Preparar una gradilla con dos tubos de ensayo. En cada tubo agregar 1 ml de Cloruro
de Calcio. Numerar los tubos con 1 y 2.
A) Identificacin de Cloruros
Al tubo 1 aadir 1 ml de solucin de Nitrato de Plata al 1%.
Observar la formacin de un precipitado blanco y fino.
B) Identificacin de Calcio
Al tubo 2 aadir 1 ml de solucin de Oxalato de Amonio al 1%.
Observar la formacin de un precipitado blanco y grueso.
Tubo

Muestra

Nitrato de Plata

Oxalato de Amonio

Observaciones

ACTIVIDAD N5: RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS

Determinacin de la presencia de Catalasa:
La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales y
vegetales. La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el
metabolismo celular, se forma una molcula txica llamada perxido de hidrgeno o H2O2
(agua oxigenada). Esta enzima descompone el H2O2 en agua y oxgeno, disminuyendo la
toxicidad celular.
La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:
2H2O2
2H2O + O2
Catalasa
Procedimientos y Observaciones
Activacin de la enzima
Colocar en un tubo de ensayo un trozo pequeo de hgado
de pollo.
Aadir 1 ml de Agua Oxigenada.
Observar y registrar resultados.
Inactivacin de la enzima
Colocar en un tubo de ensayo un trozo pequeo de hgado
de pollo.
Aadir 1 ml de agua para hervir la muestra.
Hervir a 90C durante 30 minutos para cocer el hgado.
Despus de este tiempo, desechar el agua sobrenadante.
Aadir 1 ml de Agua Oxigenada.
Observar y registrar resultados.

BIBLIOGRAFA
De Robertis, Eduardo D. P.1913. Biologa celular y molecular. 5a. ed. Buenos Aires:
Panamericana, c2005.
Alberts, Bruce. 1938. Introduccin a la biologa celular. Barcelona: Omega, c1999.
Materiales Laboratorio. Componentes Qumicos de la Clula
Materiales por grupo (3 alumnos por grupo)
Reactivos y Material Biolgico
Fehling A = 10 ml
Fehling B = 10 ml
Lugol = 15 ml (para todo el curso, con gotario)
Glucosa 1% = 10 ml
Almidn 1% = 30 ml
NaCl 1% = 15 ml
NaOH 20% = 15 ml
CuSO4 1% = 5 ml
Glicina 1% = 5 ml
Nitrato de Plata 1% = 10 ml (para todo el curso, con gotario)
Oxalato de Amonio 1% = 10 ml (para todo el curso, con gotario)
Cloruro de Calcio 1% = 3 ml
ter = 5 ml
Acido Actico = 20 ml (para todo el curso, con gotario)
Agua Oxigenada = 15 ml
Alcohol 96 a 0C = 50 ml
Agua destilada = 50 ml
NaCl 2M = 50 ml
SDS (detergente lquido) = 15 ml (para todo el curso)
Aceite Vegetal = 3 ml
Clara de Huevo = 5 ml
Leche = 1 litro (para todo el curso)
Hgado de Pollo fresco y trozado = 3 (para todo el curso)
Material de Vidrio por grupo
30 tubos de ensayo.
2 gradillas
1 mortero de cermica
1 trozo de gaza para filtrar
3 vasos pp de 100 ml
1 vaso pp 500 ml

1 embudo
1 probeta 100 ml
1 varilla de vidrio
3 gotarios
3 pipetas graduadas 1 ml
2 pipetas graduadas de 5 ml
3 pipeta graduada de 10 ml 1
matraz Erlenmeyer 500 ml 1
matraz Erlenmeyer 250 ml 1
piceta con agua destilada 1
mechero (trpode y rejilla) 1
pinza madera para tubo
1 lpiz rotulador.
1 cooler con hielo por mesn de trabajo