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ANTI-D
(ANTIRho)
Monoclon
al IgM +
SORO
ANTI-D
(ANTIRho)
Monoclon
al IgM +
7-
ANTI-D (ANTI-Rho)
Para testes em lmina, tubo e deteco de Dfraco
ARMAZENAMENTO
O reagente deve ser estocado entre 2-8C. No congelar ou expor o produto
temperaturas elevadas.
INTRODUO
As expresses Rh positivo ou Rh negativo so baseadas na
presena ou ausncia do antgeno D (RH1) nas hemcias. De acordo
com Mollinson(1) aproximadamente 15% dos caucasianos no tm o
antgeno D e so normalmente estimulados pelo D(+) a produzir
Anti-D na gravidez ou transfuso sangunea. Isto pode causar a
Doena Hemoltica do Recm-nascido ou severa reao hemoltica
transfusional.
CUIDADOS E PRECAUES
No utilizar o produto aps a data de vencimento
No reutilizar os frascos vazios.
O reagente contm azida sdica que pode reagir com cobre e chumbo dos
encanamentos formando sais explosivos. No descarte, diluir com grande
quantidade de gua para impedir a formao destes compostos.
Os materiais de origem biolgica devem se considerados como pontecialmente
infectantes. Devem ser estabelecidos mtodos adequados para manuseio e
descarte equivalentes aos utilizados no descarte das amostras.
Tcnica em Tubo:
1Preparar uma suspenso a 3 5% das hemcias a serem testadas, em
soluo fisiolgica 0,85%,
2Colocar uma gota do Soro Anti-D Ebram em um tubo devidamente
identificado. Em um segundo tubo (controle negativo) colocar uma gota do
reagente Controle Rh Ebram
3Acrescentar uma gota da suspenso nos tubos do soro Anti D e no tubo do
Controle Rh Ebram. Misture bem o contedo
4Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm ( 900 1000g) ou 1 minuto a
1000 rpm (100 125g)
5Examinar a ausncia de hemlise e ressuspender o boto de hemcias,
agitando delicadamente o tubo, observando a presena ou no de
aglutinao.
6Graduar e registrar os resultados
7Se o teste for negativo ou duvidoso proceder a realizao de teste para D
fraco a partir do item 4 da tcnica para deteco de antgeno D fraco.
Obs: A calibrao adequada das centrfugas so imprescindvel para a garantia da
qualidade dos resultados.
Tcnica para deteco de antgeno Dfraco .
1Preparar uma suspenso a 3 5% das hemcias a serem testadas, em
soluo fisiolgica 0,85%,
2Colocar uma gota do Soro Anti-D Ebram em um tubo devidamente
identificado. Em um segundo tubo (controle negativo) colocar uma gota do
reagente Controle Rh Ebram
3Acrescentar uma gota da suspenso nos tubos do soro Anti D e no tubo do
Controle Rh Ebram. Misture bem o contedo
4Incubar os tubos por 15 minutos 37C
5Lavar as hemcias dos tubos 3 vezes com soluo fisiolgica 0,85% e aps
a ltima lavagem remover completamente a salina
6Adicionar 2 gotas do Soro Anti-Humano Ebram para cada tubo. Misturar bem.
7Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm ( 900 1000g) ou 1 minuto a
1000 rpm (100 125g)
8Examinar a ausncia de hemlise e ressuspender o boto de hemcias,
agitando delicadamente o tubo, observando a presena ou no de
aglutinao.
9Graduar e registrar os resultados.
+
-
Controle
Rh
-
+ ou -
Anti-D
LIMITAES DO TESTE
Pesquisa do
Fator Rh
Antgeno D fraco
No testado
Positivo
+
Positivo
Negativo
Teste invlido Analisar se o procedimento
realizado est de acordo com as instrues
A reatividade das hemcias humanas D positivas podem variar bastante. Certos indivduos D positivo
possuem pequena quantidade de stios D de tal forma que no sero evidenciados pelas tcnicas
de classificao utilizando reagentes Anti-D Monoclonais. Assim, certos reagentes Anti-D no
detectam um antgeno D de baixa expresso de alguns indivduos. O reagente de origem
monoclonal IgG + IgM tem precisamente a propriedade de melhora a deteco destes antgenos
D de baixa expresso. Fentipos D muito fracos tais como D parciais, particularmente os de
categorias IV e VI podem, eventualmente, no ser detectados pela tcnica direta.
As hemcias com teste de antiglobulina direta positiva tero a pesquisa das formas fracas do
antgeno D prejudicada. Tratando-se de sangue de doador, o mesmo no dever ser utilizado para
fins transfusionais.
Resultados falso-positivo ou reaes fracamente positivas podem ocorrer com amostras de sangue de
subgrupos A e B ou aps estocagem prolongada.
Variveis relativas ao procedimento tcnico, tais como: tcnica, suspenses muito concentradas ou
diludas, centrifugaes ou incubaes inadequadas, amostra e salina contaminadas ou vidraria
suja podem causar falsas reaes positivas ou negativas
GARANTIA
Este produto garantido pela Ebram Produtos Laboratoriais Ltda se conservado na temperatura
recomendada, utilizado durante o prazo de validade e seguindo recomendaes do rtulo e
dessa instruo de uso.
REFERNCIAS
1. Widmann F.K. ed Technical Manual 9th Edition Washington D.C. American Association of Blood
Banks 1985 Chapter 8.
2. Race R.R. and Sanger R. Blood Groups in Man 6th Editioon Oxford Blackwlell Scientific
Publications 1975.
3. Issitt P.D. Applied Blood Group Serology 3rd Edition Montgomery Scientific publicantions Miami,
Florida USA 1985.
4. Walker Rh, ed.Technical manual. 11th editin. Bethesda: AABB, 1993.
5. Mollison PL. Blood Transfusion in clinical medicine. 7th ediditon. Oxforf: Blackwell Scientific, 1983.
6. Guidelines for the Blood Transfusion Servie H.M.S.O.
Tcnica em Tubo:
1Preparar uma suspenso a 3 5% das hemcias a serem testadas,
em soluo fisiolgica 0,85%,
2Colocar uma gota do Soro Anti-D Ebram em um tubo devidamente
identificado. Em um segundo tubo (controle negativo) colocar uma
gota do reagente Controle Rh Ebram
3Acrescentar uma gota da suspenso nos tubos do soro Anti D e no
tubo do Controle Rh Ebram. Misture bem o contedo
4Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm ( 900 1000g) ou 1 minuto a
1000 rpm (100 125g)
5Examinar a ausncia de hemlise e ressuspender o boto de
hemcias, agitando delicadamente o tubo, observando a presena
ou no de aglutinao.
6Graduar e registrar os resultados
7Se o teste for negativo ou duvidoso proceder a realizao de teste
para D fraco a partir do item 4 da tcnica para deteco de antgeno
D fraco.
Obs: A calibrao adequada das centrfugas so imprescindvel para a garantia
da qualidade dos resultados.
Tcnica para deteco de antgeno Dfraco .
1Preparar uma suspenso a 3 5% das hemcias a serem testadas,
em soluo fisiolgica 0,85%,
2Colocar uma gota do Soro Anti-D Ebram em um tubo devidamente
identificado. Em um segundo tubo (controle negativo) colocar uma
gota do reagente Controle Rh Ebram
3Acrescentar uma gota da suspenso nos tubos do soro Anti D e no
tubo do Controle Rh Ebram. Misture bem o contedo
4Incubar os tubos por 15 minutos 37C
5Lavar as hemcias dos tubos 3 vezes com soluo fisiolgica 0,85% e
aps a ltima lavagem remover completamente a salina
6Adicionar 2 gotas do Soro Anti-Humano Ebram para cada tubo.
Misturar bem.
7Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm ( 900 1000g) ou 1 minuto a
1000 rpm (100 125g)
8Examinar a ausncia de hemlise e ressuspender o boto de
hemcias, agitando delicadamente o tubo, observando a presena
ou no de aglutinao.
9Graduar e registrar os resultados.
+
-
Controle
Rh
-
+ ou -
Anti-D
Pesquisa do
Fator Rh
Antgeno D fraco
No testado
Positivo
+
Positivo
Negativo
Teste invlido Analisar se o procedimento
realizado est de acordo com as instrues
LIMITAES DO TESTE
A reatividade das hemcias humanas D positivas podem variar bastante. Certos indivduos D
positivo possuem pequena quantidade de stios D de tal forma que no sero evidenciados
pelas tcnicas de classificao utilizando reagentes Anti-D Monoclonais. Assim, certos
reagentes Anti-D no detectam um antgeno D de baixa expresso de alguns indivduos. O
reagente de origem monoclonal IgG + IgM tem precisamente a propriedade de melhora a
deteco destes antgenos D de baixa expresso. Fentipos D muito fracos tais como D
parciais, particularmente os de
categorias IV e VI podem, eventualmente, no ser
detectados pela tcnica direta.
As hemcias com teste de antiglobulina direta positiva tero a pesquisa das formas fracas do
antgeno D prejudicada. Tratando-se de sangue de doador, o mesmo no dever ser
utilizado para fins transfusionais.
Resultados falso-positivo ou reaes fracamente positivas podem ocorrer com amostras de
sangue de subgrupos A e B ou aps estocagem prolongada.
Variveis relativas ao procedimento tcnico, tais como: tcnica, suspenses muito
concentradas ou diludas, centrifugaes ou incubaes inadequadas, amostra e salina
contaminadas ou vidraria suja podem causar falsas reaes positivas ou negativas
GARANTIA
Este produto garantido pela Ebram Produtos Laboratoriais Ltda se conservado na
temperatura recomendada, utilizado durante o prazo de validade e seguindo
recomendaes do rtulo e dessa instruo de uso.
REFERNCIAS
1. Widmann F.K. ed Technical Manual 9th Edition Washington D.C. American Association of
Blood Banks 1985 Chapter 8.
2. Race R.R. and Sanger R. Blood Groups in Man 6th Editioon Oxford Blackwlell
Scientific Publications 1975.
3. Issitt P.D. Applied Blood Group Serology 3rd Edition Montgomery Scientific publicantions
Miami, Florida USA 1985.
4. Walker Rh, ed.Technical manual. 11th editin. Bethesda: AABB, 1993.
5. Mollison PL. Blood Transfusion in clinical medicine. 7th ediditon. Oxforf: Blackwell Scientific,
1983.
6. Guidelines for the Blood Transfusion Servie H.M.S.O.
ed. Mar/15
ed. Mar/15