INFORME PROPAGACIN SEXUAL

Jos Fernando Acevedo, Francisco Meja, Wylmar Andrs Sierra y Ana Mara Torres
Departamento de Agronoma, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de
Colombia Sede Bogot
Introduccin
La propagacin sexual de las plantas es uno de los mecanismos ms importantes para especies
de plantas angiospermas y gimnospermas, ya que son eventos fundamentales dentro de sus
ciclos de vida determinado por la formacin, dispersin y la germinacin de sus semillas
(Bradford y Nonogaky, 2007). La semilla es la estructura encargada en la propagacin de
nuevas generaciones de plantas, sus estructuras y su fisiologa aseguran la dispersin y la
reserva de alimentos para nutrir el embrin para el desarrollo de plntulas hasta que se
consoliden en organismos auttrofos autosuficientes. Por esta razn, su formacin desde el
proceso de floracin, su dispersin y su germinacin son pasos esenciales para la conservacin
de las especies (Pratap y Kumar, 2011).
Las semillas en general, estn conformadas por una serie de rganos y tejidos, el embrin, es el
resultado de la reproduccin sexual de las plantas y es el resultado de la unin entre el vulo y
el ncleo espermtico del polen, este contiene entonces la informacin gentica para el
desarrollo del nuevo individuo. Luego, el endospermo recubre el embrin y es una reserva
energtica para garantizar el desarrollo inicial de la plntula, finalmente se encuentra la testa, el
tejido exterior de la semilla que brinda proteccin del ambiente (Savage y Metzge, 2006).
Para que una semilla de origen a una nueva planta, es necesario que se lleve a cabo el proceso
de la germinacin. En este proceso, una semilla seca y madura inicia la absorcin de agua
necesaria para activar las protenas y el transporte de sustancias, esta fase se conoce como
imbibicin. Luego se produce la activacin del metabolismo e inicia la sntesis de cidos
nucleicos y protenas, adems ocurre un aumento de procesos enzimticos para empezar a
degradar las reservas energticas del endospermo, por ltimo la radcula rompe la testa de la
semilla finalizando el proceso de germinacin (Herrera, et al 2006).
Adems de las fases que regulan la germinacin, existe una serie de factores fsicos y
fisiolgicos que tambin regulan este proceso. En primer lugar, es necesario que la semilla sea
viable, es decir que contenga una reserva energtica suficiente y tejidos con actividad
enzimtica para el desarrollo metablico de las clulas. Tambin, existen factores externos que
determinan el proceso de germinacin tales como la disponibilidad de agua, la temperatura y la
disponibilidad de luz a diferentes longitudes de onda. Estos factores fsicos junto a otro tipo de
factores pueden interrumpir la dormancia de una semilla y activar su proceso de germinacin.
La dormancia es la capacidad de las semillas de permanecer inactivas bajo condiciones
ambientales no deseadas (Melgarejo, 2010). En este informe se analizarn los resultados de
pruebas de viabilidad, vigor y tcnicas de escarificacin de semillas como mecanismos de
rompimiento de latencia con el fin de conocer las caracteristicas morfologicas y fisiologicas
que determinan el proceso de germinacin de estas estructuras de propagacin.

Objetivos

General
Evaluar diferentes tratamientos en semillas desarrolladas a partir de propagacin sexual en
especies domesticadas y silvestres.
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Especficos
Evaluar el porcentaje de germinacin para determinar la calidad de semillas en especies
como lechuga (Lactuca sativa) y frjol (Phaseolus vulgaris).
Determinar la viabilidad de semillas de maz (Zea mays) y frjol (Phaseolus vulgaris) para
identificar el potencial de establecimiento del material vegetal.
Determinar el vigor de semillas de frijol a partir del mtodo de conductividad elctrica de
la solucin de imbibicin de las semillas.
Evaluar mtodos para romper latencia en especies como orejero (Enterolobium
cyclocarpum) y acacia negra (Acacia mearnsii).
Materiales y Mtodos
Prctica No 1. Germinacin y Viabilidad de semillas
Para realizar las pruebas de germinacin estandarizadas se emplearon semillas de frijol y
lechuga, el mtodo empleado para evaluar las semillas de frijol consisti en colocar 25
semillas en papel peridico humedecido previamente con agua para asegurar la imbibicin
(figura 1), posteriormente se enrollan en este papel y se lleva durante 7 das a una
germinadora con temperaturas entre 24 y 26 oC, procedimiento que se realiz en dos
rplicas. Una vez han pasado los 7 das se cuantifican las plntulas normales, anormales y
se registra el porcentaje de semillas germinadas.

Figura 1. Establecimiento de prueba de germinacin para semillas de frijol.

Para realizar la prueba de germinacin en lechuga, se colocaron 25 semillas en cajas de
petri que tenan en papel humedecido con agua para favorecer la imbibicin, este
procedimiento se realiz en dos rplicas, posteriormente se llevan las cajas de petri a una
germinadora con temperaturas entre 24 y 26 oC, 7 das despus de este procedimiento se
realiza la cuantificacin de semillas germinadas y no germinadas para determinar el
porcentaje de germinacin.

Figura 2. Establecimiento de la prueba de germinacin para semillas de lechuga.

El material vegetal empleado para determinar la viabilidad de semillas fue maz (Zea
mays) y frjol (Phaseolus vulgaris), en ambas especies se colocan en agua hasta cubrir las
semillas totalmente, procedimiento que tarda de 6 a 8 horas, posteriormente se cortan 10
semillas de cada especie con el fin de que quede el embrin expuesto a la tincin con
tetrazolio al 1%, las semillas de cada especie se llevan a una caja de petri con solucin de
tetrazolio y luego son llevadas al 8% por 1 a 2 horas hasta que el embrin se torne de color
rojo. Una vez ha pasado este tiempo se retiran las cajas petri del cuarto oscuro y se realiza
el conteo de semillas viables.
Para realizar la prueba de vigor de semillas se aplic el mtodo de conductividad elctrica,
el material vegetal que se emple fueron semillas de frjol (Phaseolus vulgaris), el
procedimiento consisti en llevar 20 g de semillas a un frasco con 40 ml de agua destilada,
pasados 60 minutos se realiz la medicin de conductividad elctrica en la solucin de las
semillas imbibidas (figura 3), resultados de alta conductividad significa que las semillas
tienen bajo vigor.

Figura 3. Medicin de la conductividad elctrica de la solucin de semillas de frjol

imbibidas.
Prctica No 2. Rompimiento de Latencia: Escarificacin Mecnica

El material vegetal que se emple fueron semillas de orejero (Enterolobium cyclocarpum) y

acacia negra (Acacia mearnsii), el procedimiento de escarificacin mecnica consisti en
desgastar la testa de 25 semillas de cada especie con ayuda de una lija como herramienta
abrasiva, posterior a esto se colocaron las semillas sobre papel peridico humedecido con
agua y se formaron rollos con estos, luego se llevaron al germinador a una temperatura de
25 oC durante 7 das, al pasar este tiempo se registra el porcentaje de plntulas normales,
plntulas anormales y semillas no germinadas. Se realiz una comparacin del efecto de la
escarificacin con semillas no tratadas con este mtodo
Resultados y Discusin
Prctica No 1. Germinacin y Viabilidad de semillas
La calidad de las semillas est en funcin de factores genticos y ambientales, que pueden
favorecer o influir perjudicialmente en la viabilidad y vigor de las semillas de inters
(Alizaga et al., 1994). Al analizar los datos de germinacin obtenidos luego de 7 das en
proceso de imbibicin, se encuentra el que el porcentaje de germinacin para el caso del
frijol (P. vuilgaris) fue de 80%, puesto que de las dos repeticiones realizadas (cada una con
25 semillas), se obtuvieron 40 frijoles con germinacin normal (Figura 4) y 9 con
anormalidades segn la gua Seedling Evaluation handbook adems de 1 semilla que fue
inviable pues no fue posible observar ningn tipo de desarrollo o crecimiento de la radcula
o del hipoctilo, a pesar de mostrar el hinchamiento caracterstico de la imbibicin y que
segn Fernndez (1986) es el primer paso de la etapa de germinacin de esta especie (Tabla
1).
Tabla 1. Resultados prueba de germinacin estndar en frjol luego de 7 das en proceso de
germinacin
Material

Cantidad

Porcentaje

Frijoles normales

40

(40*100)/50 = 80%

Frijoles anormales

(9*100)/50 = 18%

Frijoles inviables

(1*100)/50 = 2%

En trminos generales, se puede observar que ninguna de las muestras evaluadas present
problemas en la emergencia y desarrollo de la radcula, puesto que de las muestras
normales y anormales, todas tuvieron desarrollo de races. Por otra parte, dentro de las
anormalidades encontradas, se destacan en la figura 5 las relacionadas con el desarrollo del
hipoctilo.

Figura 4. Frijoles (P. vulgaris L.) clasificados como con germinacin normal luego de 7
das en proceso de germinacin.
Si bien un 80% de germinacin no puede ser considerado como bajo, si permite inferir que
las semillas al momento de la imbibicin no se encontraban en su etapa de mxima
madurez fisiolgica, factor determinante en la viabilidad de las semillas (Alizaga, 1985) y
que probablemente interfiri en ese 20% de semillas inviables y con desarrollo anormal. No
obstante, al no ser semilla certificada, la probabilidad de que hayan sido expuestas a
condiciones estresantes que afectan su calidad, as como a organismos patgenos que
pueden estar presentes y ocasionar deformaciones y generacin de exudados, tal como se
observa en la figura 5b.

Figura 5. Frijoles (P. vulgaris L.) clasificados como con germinacin anormal luego de 7
das en proceso de germinacin. a) Rompimiento del hipoctilo b) Crecimiento deforme,
con generacin de exudado en el hipoctilo c) Hipoctilo deforme, bifurcado.

Figura 6. Resultados prueba de germinacin estndar en lechuga (L. sativa) luego de 7 das
en proceso de germinacin.
Al cabo de 7 das de germinacin se obtuvo un porcentaje del 8 % por lo que se tom la
decisin de mantener las semillas restantes en incubadora por 8 das ms, tiempo en el cual
se hizo la evaluacin de nuevo y no hubo cambios en los porcentajes de germinacin.
Con respecto a los resultados de la prueba de viabilidad con la solucin de tetrazolio, se
obtuvieron los datos presentados en la tabla 2. Se encontr un porcentaje de viabilidad del
80% para el maz mientras que, por su parte el frijol mostr tan slo una viabilidad del 40%
(Figura 7).
Tabla 2. Resultados prueba de viabilidad mediante la solucin de tetrazolio en maz y
frjol.
Especie

Maz

Frijol

Clasificacin

Cantidad

Porcentaje

Viables

(8*100)/10 = 80%

Medianamente viables

(2*100)/10 = 20%

Inviables

(0*100)/10 = 0%

Viables

(4*100)/10 = 40%

Medianamente viables

(1*100)/10 = 10%

Inviables

(5*100)/10 = 50%

En el maz no se presentaron casos de semillas inviables y en los 2 casos observados de

viabilidad moderada o nula, se identific que era en la zona de la radcula donde no
reaccion el tetrazolio reducindose a formazn con los electrones del proceso respiratorio,
a causa de la falta de clulas activas en esta zona. Esto concuerda con lo reportado por
Gutirrez et al. (2007), en donde evaluaron diferentes variedades de maz mediante esta
prueba y encontraron que la mayora de las semillas medianamente viables, presentaban
ausencia de actividad respiratoria en la regin radicular y esto fue asociado a procesos
activos de envejecimiento de las semillas evaluadas.

Figura 7. Resultados prueba de viabilidad con solucin de tetrazolio en frijol (P. vulgaris
L.) y maz (Z. mays L.) luego de 1 hora en oscuridad.
Para el caso del frijol, se present una condicin de inviabilidad en 5 de las 10 semillas
evaluadas, las cuales eran del Frijol #3. Lo anterior sugiere la baja calidad de estas
semillas, pues porcentajes de viabilidad de 40% da cuenta de procesos degradativos en las
semillas. Si se relaciona los resultados de la prueba de tetrazolio con los obtenidos
mediante la conductividad elctrica (Tabla 3) para semillas de este mismo tipo, estos
constatan condiciones no deseadas de estas semillas, con 110.95 S/cm*g, el frijol # 3 es el
material que presenta la mayor conductividad elctrica frente a las dems variedades
analizadas, como consecuencia de su alta lixiviacin de solutos.
Tabla X. Resultados de vigor en diferentes variedades de frjol

Esto se encuentra reportado en la literatura como un comportamiento propio de la

senescencia de las semillas (AEL, 2012), que es causado por una prdida de permeabilidad
y funcionalidad de las membranas celulares en las primeras fases del envejecimiento.
Gutirrez et al. (2007) encontraron una correlacin inversa y significativa de -0.66 entre la
conductividad elctrica y la viabilidad de las semillas evaluadas, lo que sustenta lo
argumentado anteriormente. De igual forma, estos procesos de envejecimiento y viabilidad
de semillas puede verse influenciado por las dinmicas en la humedad de la semilla,
posibles condiciones de deshidratacin en la semilla pueden impactar negativamente en la
calidad de semillas (Ratajezak y Holubowicz, 2008).
Prctica No 2. Rompimiento de Latencia: Escarificacin Mecnica
Al cabo de 7 de das de incubacin se hizo la evaluacin de los tratamiento de A. mearnsii y
se determin que no hubo germinacin en el tratamiento control (sin escarificacin),
adems en el tratamiento con escarificacin se obtuvo un porcentaje de germinacin del
76% (Fig.7). Los valores de germinacin encontrados son mayores a los reportados por
Semicol, el cual reporta valores de germinacin entre un rango de 50 - 70% para semillas
escarificadas (2008)

Figura 7. Prueba de germinacin de semillas de A. mearnsii al cabo de 7 das. A. Semillas

sin escarificacin B. Semillas escarificadas.
En el caso de semilla de E. cyclocarpum al cabo de 7 das en incubadora se obtuvo un
porcentaje de germinacin del 4% en el tratamiento sin escarificacin y del 92% en semilla
escarificada, en contraste con el rango de germinacin reportado por el productor para esta
especie estn en un rango entre 50 -80% en semilla escarificada (Semicol, 2008).

Figura 8. Prueba de germinacin de semillas de E. cyclocarpum al cabo de 7 das. A.

Semillas sin escarificacin B. Semillas escarificadas.
Se ha encontrado que en Acacia mansa (Sesbania punicea) el mejor tratamiento pre
germinacin es el lijado de la testa con un porcentaje de germinacin del 85%, respecto al
uso de Agua ebullendo y tratamiento con HCl (Tapia et al, 2014). Tambin se han evaluado
otros mtodos de escarificacin en Acacia bilmekii, encontrando que no haba diferencias
significativas en la germinacin cuando se emplean mtodos escarificacin qumica o fsica
e inmersin en agua a 70% obteniendo porcentajes de germinacin mayores al 90%
(Martnez y Garca, s.f.)
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Conclusiones
El proceso de escarificacin mecnica permite mejorar los porcentajes de germinacin en
A. mearnsii y E. cyclocarpum respecto a los tratamientos control en un 80%.
La evaluacin con tetrazolio es una herramienta que permite la evaluacin en periodos
cortos de tiempo de la viabilidad de la semilla en Zea mays y Phaseolus vulgaris.

Literatura Citada
Alizaga, R. 1985. Efecto de la temperatura de secado y del contenido de humedad durante
el almacenamiento sobre la calidad de la semilla de frijol. Agronoma Costarricense. 9(2):
165-170.
Alizaga, R., Mello, V., Dos Santos, D., Irigon, D. 1994. Evaluacin del vigor de semilla de
Phaseolus vulgaris y su relacin con la emergencia en el campo. Agronoma Costarricense.
18(2): 227- 234.
Asociacin Espaola de Leguminosas (AEL). 2012. V Seminario de Judia. IV Jornadas de
la AEL. Pontevedra, Espaa. 7pp.
Bradford, J., Nonogaky, H. 2007. Seed development, dormancy and germination. Blackwell
publishing, oxford, UK, 307 pp.

Fernndez, F. 1986. Etapas de desarrollo de la planta de frijol comn (Phaseolus vulgaris

L.). Centro Internacional de Agricultura Tropical. Cali, Colombia. 44pp.
Gutirrez, F., Virgen, J., Arellano, J. 2007. Germinacin y crecimiento inicial de semillas de
maz con envejecimiento natural. Agronoma Mesoamericana. 18(2): 163-170.
Herrera, J., Aligaza, R., Guevara, E., Jimnez, V. 2006. Germinacin y Crecimiento de la
Planta. Editorial Universidad de Costa Rica. San Jos Costa Rica. Pp 18-20.
Martnez, S y Garca, J. (s.f.). Efecto de cuatro tratamientos pregerminativos en semillas de
Acacia bilimekii. En: http://www.utm.mx/temas/temas-docs/n0855.pdf. Consultado: Junio
de 2016.
Melgarejo, L. 2010. Experimentos en Fisiologa Vegetal. Laboratorio de fisiologa y
bioqumica vegetal. Departamento de biologa. Universidad Nacional de Colombia. Pp 7-9.
Pratap, A., Kumar, J. 2011. Biology and breeding of food legumes. Seed Dormancy and
Viability. CPI Group. London. Pp 276.
Ratajezak, K. y Holubowics, R. 2008. Effect of common bean (Phaseolus vulgaris L.) seed
viability on drying dynamics, Folia Horticulturae 20(2): 85-92.
Savage, F., Metzge, L. 2006. Seed dormancy and the control of germination. New
Phytologist. Pp 501-523.
Semicol.
2008.
Portafolio
de
productos
y
servicios.
En:
Semicol,
http://www.semicol.co/descargas/Semicol_Catalogo_2008.pdf. Consultado: Junio de 2016.
Tapia, A., Romero, A., Luque, V., Gervasoni., Aybar ,S., Lobo-Furque, A y Gmez. 2014.
Diferentes tcnicas de escarificacin en la germinacin de semillas de semillas de
Sesbanica punicea.Revista de Agronoma noroeste argentina. 34(2), 54 - 55.