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Universidad Tcnica de
Ambato
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Facultad de Ciencia e Ingeniera en
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Alimentos
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Ingeniera de Bioproceso
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Presente y futuro de los biosensores
microbianos electroqumicos
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Integrantes:
Acosta Michael
Bustillos Diana
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Mera Anabel
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Moya Jenny
Palacios Diego
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Fecha: 04/07/2016
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Biosensores microbianos
Son dispositivos analticos que surgen de la combinacin de un microorganismo (m.o.) en
contacto ntimo con un transductor fsico adecuado, en el que se genera una seal medible
proporcional a la concentracin de analito/s. Se pueden clasificar en dos tipos:
- Biosensores de medicin de respiracin: Se basan en la inmovilizacin de
microorganismos aerbicos sobre un electrodo de O 2. Se induce a que el m.o.
metabolice O2 y no sustrato, por lo que, la determinacin de esta especie se la realiza
por medio de la disminucin de la presin parcial del gas (O 2).
- Biosensores de medicin de metabolismo: Son capaces de detectar el metabolito
producido por una reaccin catalizada por el m.o. inmovilizado. inmovilizado.
Utilizando distintos tipos de sensores de gases o de iones, pueden monitorizarse los
Ventajas de los biosensores microbianos:
-

Se emplean microorganismos como elemento de reconocimiento: Los

microorganismos estn presentes en todas partes y son capaces de metabolizar
una variedad de compuestos qumicos.
Se emplean microorganismos como fuente de enzimas intracelulares.
Los microorganismos extremfilos hacen posible la fabricacin de biosensores
menos susceptibles de inhibirse por solutos y ms tolerantes a ambientes de pH
subptimo.
Las clulas microbianas son fcilmente manipulables y tienen mejor viabilidad y
estabilidad en ambientes in vitro.

Tcnicas de inmovilizacin
La inmovilizacin de los microorganismos en los transductores tiene un papel esencial en la
fabricacin de los biosensores microbianos y condiciona su funcionamiento y estabilidad. La
seleccin de la tcnica y/o el soporte de inmovilizacin dependen de la naturaleza del
biomaterial (clulas viables o no viables) y del sustrato y la configuracin del transductor
empleado.
Inmovilizacin covalente: para enzimas y anticuerpos. Las clulas estaran expuestas a
potentes grupos reactivos y a otras condiciones de reaccin severas que comprometen su
viabilidad.
Entrecruzamiento con agente bifuncionales: utiliza reactivos como el glutaraldehdo, se han
empleado con xito para la inmovilizacin de clulas en varios soportes (gelatina, albmina,
clara de huevo). Los reactivos qumicos de entrecruzamiento utilizados frecuentemente,
tambin afectan a la viabilidad celular.
Atrapamiento y adsorcin: para clulas viables. Un enfoque comn consiste en retener las
clulas en las proximidades de la superficie del transductor mediante membranas como las de
dilisis.
Figura 1. Micrografas electrnicas de barrido de Brevibacterium
En el caso de los ammoniagenes
biosensores microbianos
muysulfonato
interesante
atrapadas electroqumicos,
en un polmeroes de
de la
inmovilizacin de los microorganismos
en
polmeros
conductores
electrnicos.
poli(estireno)-polianilina (PSSPANI). Se utiliza un electrodo de platino
sumergido en una disolucin de anilina en presencia del polmero y
del material biolgico, y se procede a su electrodeposicin aplicando
un potencial constante de +1,2 V vs SCE. En dicha figura se aprecian
las clulas adsorbidas sobre la superficie del electrodo de platino a),
Biosensores microbianos electroqumicos
los primeros grnulos de polmero b) y su crecimiento alrededor de

Estos sensores son amperomtricos, se basan en utilizar un potencial fijo entre un

electrodo (con microorganismos) y otro de referencia. Se produce la reduccin u oxidacin
de un producto metablico electroactivo generndose una variacin de corriente que se
relaciona con la concentracin de compuestos de inters.
Una ventaja de estos biosensores es que utilizan microorganismos como microrreactores,
eliminando la necesidad de aislar enzimas individuales. Otra d sus caractersticas es la
amplia sensibilidad.
Un problema que se ha presentado es la poca eficiencia del proceso de transferencia
electrnica del sistema biocatatico microbiano al electrodo. Ante esto ha surgido una
estrategia para identificar analitos generados por los microorganismos, basada en
combinar los microorganismos con mediadores redox que facilitan las reacciones de
transferencia electrnica entre el compuesto en estudio y la superficie del electrodo. Los
microorganismos ms utilizados son Gluconobacter oxydans, Pseudomonas putida y
Pseudomonas fluorescens en combinacin con polmeros de osmio, para la deteccin de
glucosa y fenol. Nuevos desarrollos impulsan el empleo de electrodos de pasta de carbono
con nanotubos de carbono (CNTs).
Figura 1. a) esquema de

En este grupo se incluyen los biosensores conductimtricos (relaciona

concentracin de
oxidacin del sustrato S
analito y cambios de conductividad asociadas a la produccin y consumo
de laespecies
catalizasa por
enzima
inicas durante la actividad metablica)
DH (deshidrogenasa) en
la
membrana
d
un
microorganismo. Mox y
Mred son las formas
redox del mediador. b)
Funcionamiento de un
biosensor
microbiano
para la deteccin de
glucosa.
Fuente:
Campuzano, S. (2011).
Presente y futuro de los

Anlisis
ambiental

Deteccin de nitrobenceno, nitrotoluenos y nitrofenoles

Biosensores
microbianos
(BM)

Geneticamente modificados con actividad organofosforohidrolasa

Detectan txicos organofosforados

BM
electroqumico
s

Deteccin del p-nitrofenol

En
determinacin
de fenol y
derivados

Degradacin de fenol (como fuente de carbono)

Microchips

BM micro-fluidico (toxicidad del agua)

Determinacin
de metales
pesados

Por actividad metablica de bacterias

Se relaciona con la concentracin de fenol

BM de organofosfatos p-nitrofenil sustituidos

Anlisis aguas residuales

Aplicaciones. Anlisis
Ambiental

Biosensor amperomtrico basaso en S. cerevisiae para

determinacion de Cu

Demanda biolgica de oxgeno (DBO)

Desarrollo de biosensores microbianos para evitar el largo tiempo de mtodo DBO 5 y
estimar de forma precisa y rpida del ndice de polucin en aguas industriales y naturales.
Un sistema basado en la eucariota Saccharomyces cerevisiae y un doble medidor de
ferricianuro y menadiona. El ferricianuro transporta electrones desde el centro redox de
enzimas bacterianas reducidas a la superficie del electrodo en presencia de compuestos
orgnicos. La menadiona es un medidor lipofilico que puede penetrar en la membrana
externa de la clula, forma un radical que transfiere el electrn al ferricianuro. El
ferricianuro formado alcanza el electrodo y se reoxida, generando la respuesta
electroqumica.
Un sensor en la escala de L con volumen de 560L y dos electrodos de carbono.
Respuesta electroqumica se genera por cronoamperometra, aplicando potencial de
900mV al electrodo de trabajo durante 3s y tomando la respuesta final del
cronoamperograma como seal analtica. Este biosensor permite determinar DBO en

a) Esquema y b) seccin transversal del biosensor microbiano utilizado para la determinacin

de DBO. PET, polietilentereftalato.

Biosensores para anlisis de alimentos.

BIBLIOGRAFA

Campuzano, S. (2011). Presente y futuro de los biosensores microbianos

electroqumicos. An. Qum. 2011, 107(4), 350357 Recuperado de
https://www.google.com.ec/url?
sa=t&rct=j&q&esrc=s&source=web&cd=6&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwiPt8eJsNb
NAhWF9R4KHYf2BOEQFgg2MAU&url=https%3A%2F%2Fdialnet.unirioja.es
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