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MEDICION DEL CICLO CELULAR

Existen diversas tcnicas experimentales para determinar el anlisis cronolgico cuantitativo del
ciclo celular.
Indice mittico: Proporcin de clulas en cualquier fase de la mitosis dentro de la poblacin
celular analizada. De los datos obtenidos se calcula la duracin relativa de la mitosis y de la
interfase, siempre y cuando la poblacin celular este en equilibrio dinmico.
Indice de fase: Proporcin de clulas en profase, metafase, anafase o telofase dentro de la
poblacin de clulas analizadas.
Indice mittico parcial: calculado como la media de los valores obtenidos en observaciones
realizadas en diversos intervalos de tiempo.
Mtodos de sincronizacin de los cultivos celulares
Para estudiar la divisin celular se puede utilizar la sincronizacin de los cultivos celulares ya
sea mediante seleccin de la sincronizacin o por induccin de la sincrona.
Seleccin de la sincrona: Se selecciona las clulas en un estadio determinado y se establece un
subcultivo sincronizado a partir de ellas. Un mtodo de seleccin puede ser la separacin de las
clulas por su tamao mediante centrifugacin o la menor adhesin de las clulas en mitosis a la
superficie interna del frasco de cultivo. El inconveniente de esta tcnica es el pequeo nmero
de clulas con las que se inicia el subcultivo.
Induccin de la sincrona: Se basa en detener el ciclo celular en una fase determinada por
ejemplo metafase si se utiliza colchicina o al principio de S si se utiliza un inhibidor de la
sntesis de ADN (timidina, hidroxiurea).
El inconveniente de este mtodo radica en los posibles efectos secundarios sobre el
comportamiento y fisiologa celular.
Marcacin con Timidina tritiada: Este mtodo est basado en la capacidad que tienen las
clulas de incorporar un marcador de ADN solamente durante el periodo S.
La tcnica consiste en dar un pulso corto de timina tritiada a un cultivo asincrnico en las que
hay clulas en los periodos G1, S, G2 y M (mitosis), marcndose solo aquellas clulas que se
encuentran en S.
Una vez terminado el tratamiento se incuba las clulas en un medio y se toman muestras a
intervalos regulares para observar la proporcin de clulas en mitosis que aparecen marcadas.

VARIACION EN EL CICLO CELULAR


El ciclo de divisin celular que incluye dos procesos citolgicos independientes aunque
normalmente sincronizados: la cariocinesis o mitosis y la citocinesis. Sin embargo tales
procesos pueden sufrir modificaciones tanto por mecanismos naturales como artificiales.
Endorreduplicacin
Se llama endorreduplicacin a la ocurrencia de dos o ms rondas sucesivas de replicacin
cromosmica sin pasar por ningn periodo mittico intermedio. Si al pasar por el periodo S los
cromosomas no entran en mitosis sino que vuelven a pasar por S, cada cromosoma tendr cuatro
cromtidas, ocho en caso de repetirse la anomala y as sucesivamente.

Un caso extremo de endorreduplicacin es la politenia que da lugar a los cromosomas


gigantes o cromosomas politnicos encontrados en los cromosomas gigantes de las glndulas
salivales y en otros tejidos de gran actividad metablica de los dpteros y de otros insectos. El
grado de politenia varia de una especie a otra y de un tejido a otro, en los casos extremos se han
hallado en los cromosomas entre 500 a 16.000 cromtidas.

Duplocromosomas
Despus de dos rondas sucesivas de replicacin la clula entra en mitosis, los duplocromosomas
se pueden observar en metafase con sus cuatro cromtidas aparentemente unidas por el
centrmero como si fuera un haz.
Los duplocromosomas estn formados por dos cromosomas que no estn unidos por el
centrmero, sino que son entrecruzamientos de la cromatina de los brazos. Conforme progresa
la condensacin cromosmica en metafase disminuye el nmero de entrecruzamientos quedando
sueltos en anafase.
Las consecuencias de los duplocromosomas es la duplicacin del nmero cromosmico que
pasa de 2n a 4n.

Haplocromosomas
Es el fenmeno contrario a la endorreduplicacin, tiene lugar al terminar la telofase mittica y
los cromosomas que estn en estado de una cromtida, vuelven a entra en otra mitosis sin pasar
previamente por la duplicacin. Los cromosomas al llegar a metafase aparecen con una
cromtida y reciben el nombre de haplocromosomas.
Endomitosis
En la mitosis de la clula eucaritica se produce la desaparicin de la membrana nuclear al
finalizar la profase. Si por causas naturales de citodiferenciacin o por tratarse la clula con
algunos productos qumicos no desaparece la membrana nuclear en profase continuando el
proceso mittico en el interior de la envoltura nuclear, sin que se produzca despus la
citocinesis, producindose como consecuencia la duplicacin de la clula pasando de 2n a 4n.

Husos multipolares
El tratamiento de clulas animales con mercaptoetanol influye en la migracin de los centrolos
dando lugar a husos multipolares. En vegetales se logran efecto semejante tratndolos con el
insecticida hexaclorociclohexano.
Las consecuencias de la formacin de husos multipolares es el reparto desequilibrado de las
cromtidas a los distintos polos dando lugar a ncleos hijos con dotaciones cromosmicas
distintas.
C-mitosis
Los tratamientos que impiden la formacin o promueven la disgregacin de los microtbulos
afectan el movimiento anafsico de los cromosomas. Por ejemplo el tratamiento con colchicina
que bloquea la formacin de los microtbulos (husos acromticos) impide la migracin de las
cromtidas hermana s hacia los polos de la clula. La mitosis que se produce se llama C-mitosis
y como consecuencia se duplica el nmero cromosmico pasando de 2n a 4n.
A-mitosis

La anoxia (privacin de oxigeno) impide la migracin de las cromtidas hacia los polos en
anafase por falta de energa. Se trata de un proceso reversible ya que al suministrar oxigeno se
continua la anafase interrumpida.