UNIVERSIDAD MILITAR NUEVA GRANADA

LABORATORIO DE BIOLOGIA

Presentado a: Edwin Ramrez

Presentado por:
Diego Alejandro Cifuentes Alarcn
Fecha: 14 de septiembre de 2016

Introduccin
En este informe de laboratorio se tendr en cuenta la velocidad de difusin entre la
mezcla de molculas teniendo en cuenta la temperatura vs el tiempo, la difusin es
un proceso por el cual un grupo concentrado de molculas gradualmente se vuelve
menos concentrado, mediante la mezcla con las molculas cercanas o simplemente
al moverse a una zona de menor concentracin (K.Prieto 2014) El proceso de
difusin se ve afectado por la temperatura de la misma manera que la mayora de las
reacciones. Por otra parte, las molculas de toda clase de sustancias, siempre se
encuentran en movimiento. La principal diferencia entre los tres estados de la materia
(slido, lquido y gas) es la libertad de movimiento de las molculas en cada caso (E.
Rivadeneira 2009), este aspecto es el que determina la velocidad de difusin. De lo
anterior podemos decir que cuando el medio en el que se difunde una sustancia es
ms largo, le velocidad con la cual se distribuirn las partculas ser ms lento, esto
puede modificarse acortando el medio o manipulando la temperatura. Algunas
sustancias pasan al interior o al exterior de las clulas y se mueven dentro de stas
mediante la difusin simple, proceso fsico basado en el movimiento al azar. A
temperaturas mayores al cero absoluto, todos los tomos y molculas tienen energa

cintica o de movimiento. Aunque el movimiento de las partculas individuales es

indirecto e impredecible, es posible hacer predicciones acerca del comportamiento de
grupos de partculas. Si stas no estn distribuidas de manera uniforme, entonces
existen dos regiones, una con alta concentracin de partculas y otra con baja esta
diferencia de concentracin a otro es llamado un gradiente de concentracin. Si
hablamos de la membrana celular sabemos que los lpidos y las protenas son los
componentes esenciales de las mismas, los lpidos ms abundantes en la membrana
son los fosfolpidos, los fosfolpidos de la membrana se componen de dos partes
esenciales un cabeza hidrfila y una cola hidrofbica, cabe decir que algunas
protenas de la membrana tambin comparten dicha caracterstica lo que permite a la
membrana transportar ya sea de afuera a adentro o de adentro hacia afuera
diferentes solutos o sustancias.Todos los materiales que entran a la clula o salen de
ella, deben de hacerlo a travs dela membrana celular, la clula no puede funcionar
apropiadamente y permanecer viva a menos que su membrana regule este paso de
materiales. Las membranas celulares son selectivas y la entrada o salida depende del
tamao de las molculas, espacios intermoleculares, la carga elctrica y la
concentracin. (E.Rivandeira 2009)
en cuenta los efectos del pH y de la temperatura sobre la actividad enzimtica de la
catalasa. La catalasa es una enzima que descompone y cataliza la produccin de
perxido de hidrogeno en el cuerpo, la catalasa rompe rpidamente este producto
que es altamente daino para las clulas en agua y oxgeno. De lo anterior podemos
decir que el pH est muy relacionado con la actividad enzimtica pues este influye en
la velocidad de las reacciones. De igual forma, la temperatura afecta la actividad
enzimtica pues al aumentar la temperatura existe mayor probabilidad que una
reaccin enzimtica se lleve a cabo. De acuerdo con Pea, 2004 cuando la

temperatura llega a un valor variable segn la enzima tratada, esta se puede

desnaturalizar y la velocidad de la reaccin puede disminuir.
Segn estudios realizados por M Dolores de la universidad de Oviedo(2004) las
enzimas son biocatalizadores. Son las sustancias que contribuyen a efectuar los
cambios qumicos que ocurren en las materias vivientes, son catalizadores orgnicos,
los cuales buscan una ruta alterna ms rpida para llevar a cabo la reaccin sin
intervenir en ella; es decir, no reaccionan con ninguna de las sustancias participantes
sino que se conserva intacto hasta el final.
Actualmente, algunos detergentes utilizan enzimas para quitar las manchas
producidas

en

la

ropa,

derrames

de

algunos alimentos

sustancias.

Ocurren procesos parecidos en diferentes organismos que usan enzimas, incluido el

nuestro. Muchas enzimas son producidas por el propio cuerpo y actan sobre las
sustancias que llegan a l.
Sin embargo, hay factores que afectan la velocidad de las reacciones, estos factores
son la Temperatura, la concentracin enzimtica, la concentracin de sustratos y el
pH. Las enzimas son esenciales en nuestro cuerpo pues estas catalizan algunas
sustancias. (N.A, 2004) Entre estas la catalasa, pero variables como el pH y la
temperatura afectan la catalizacin hecha por la catalasa y pueden disminuir o
aumentar la velocidad de reaccin de la enzima sobre los sustratos o sustancias
como el perxido de hidrogeno.
Objetivo General: Comprobar la reaccin sobre el perxido de hidrogeno por accin
de la enzima catalasa presente en tejidos animales y vegetales determinando los
productos de reaccin
Objetivos especficos: Observar a que PH y temperatura acta de mejor manera y o
tiene mayor actividad la enzima catalasa.
Comprender el concepto de actividad enzimtica.
Observar si las clulas de las muestras sometidas al perxido de hidrogeno tienen la
misma cantidad de catalasa.

Comprender el concepto de desnaturalizacin de las enzimas.

Variables
Variables independientes: PH y Temperatura
Variables dependientes: Actividad enzimtica de la Catalasa
Control de Variables controladas: PH, Temperatura y tiempo
Para controlar el tiempo se hizo uso de un cronometro, este se accionaba cada vez
que las muestras se sometan al perxido de hidrogeno.
Para mantener controlada la temperatura se hizo uso de un termmetro el cual marcaba
la
temperatura del agua en el que se incubo la enzima catalasa del hgado distintas
temperaturas.
Otro dato controlado fue la masa de las muestras para eso se hizo uso de una balanza
digital marca vernier, se pesaron las muestras y se obtuvo una cantidad de 1 g por cada
una.
Metodologa y Materiales:
Determinacin de la cantidad de catalasa en diferentes tejidos:
Para determinar ello se numeraron 6 tubos de ensayo en las cuales se colocaron 2 ml de
perxido de hidrogeno medidos con un gotero, luego de esto se pesaron en una balanza
digital 1g de hgado, manzana, cebolla, carne y papa, al ser pesados se macero cada una
de las muestras en un mortero adicionando 3ml de agua, despus con un gotero se
adiciono el macerado a cada uno de los tubos de ensayo numerados con perxido de
hidrogeno luego se esper un minuto para que tuviera efecto la reaccin y posteriormente
se midi la espuma que se form por la reaccin con una regla en mm.
Efecto o influencia de la temperatura en la actividad enzimtica:
Para determinar la influencia de la temperatura en la actividad enzimtica de la catalasa
se macero un trocito de hgado (0.5 cm cbicos) en 3ml de agua, posteriormente la
maceracin se agreg a 4 tubos de ensayo numerados 1A,2A,3A,4A. Por otra parte en
otros 4 tubos de ensayo numerados como 1B,2B,3B,4B se agreg 2ml de perxido de
hidrogeno, posteriormente los 8 tubos se incubaron en 4 diferentes temperaturas, con
Hielo 0C, ambiente 18C, 75C, agua en ebullicin 100C y luego de 5 minutos de
incubacin se coloc el perxido de hidrogeno en los tubos de ensayo que contenan el
hgado macerado, luego de eso se midi la espuma que surgi por la reaccin.
Efecto del PH en la actividad enzimtica:
Para observar el efecto del PH en la actividad enzimtica de la catalasa se macero un
trocito de hgado (0.5 cm cbicos) en 3ml de agua como en el proceso anterior,
posteriormente la maceracin se agreg a 4 tubos de ensayo numerados 1,2,3,4 y se les
agrego a cada uno 2ml de PH distinto, se esper 5 minutos para que los tubos cogieran la
temperatura ambiente y se agreg 1ml de perxido de Hidrogeno a cada tubo a los que
despus se midi la espuma producida por las reacciones.

Resultados y Datos brutos

Tabla #1 Actividad de la catalasa en distintos tejidos

Numero de tubo de

Muestra de tejido

de

Repeticiones

ensayo
1

Numero

Agua

Hgado

Manzana

Cebolla

Carne

Papa

Capa

de

espuma en mm

53

48

2,5

Tabla #2 influencia de la temperatura en la actividad enzimtica

Numero de tubo de
ensayo

Temperatura C

Numero
Repeticiones

de

Capa

de

espuma en mm

1
0
2
Ambiente
3
70
4
100

75

70

40

43

Generacin de Hiptesis segn los datos obtenidos

Hipotesis 1: EL tejido de la muestra de hgado tiene ms catalasa que los dems
tejidos
Hipotesis Nula 1: Los tejidos tienen la misma cantidad de catalasa.
Hipotesis 2: La temperatura afecta la actividad enzimtica de la catalasa.
Hipotesis Nula 2: La temperatura no afecta la actividad enzimtica de la catalasa.
Hipotesis 3: El PH afecta la rapidez en que la catalasa acta y afecta su actividad
enzimtica.
Hipotesis Nula 3: El PH no afecta la rapidez en la que acta la catalasa y no
afecta su actividad enzimtica
Tabla #3 Efecto del PH en la actividad enzimtica

Numero de tubo de

PH

Repeticiones

ensayo
1
4
2

Numero

de

Capa

de

espuma en mm

15

17

25

25

6
3
8
4
10

20

19

23

21

Eliminacin de sustancias o reactivos (solo si es necesario)

Al final del experimento se eliminaron las maceraciones de los tejidos y el perxido

de hidrogeno, el perxido se hecho en un garrafn con el fin de no contaminar el
recurso hdrico.

PROCESAMIENTO DE DATOS
A continuacin, se muestran las grficas de los datos obtenidos durante la prctica
para observar su relacin.
Grafica #1 Cantidad de catalasa presente en diferentes tejidos

Cantidad de catalasa presente en distintos tejidos

60
50
40

Grosor espuma en mm

30
20
10
0

Agua

Higado Manzana Cebolla

Repeticion 1

Repeticion 2

Carne

Papa

Efecto de la temperatura en la actividad enzimatica

120
100
80
Temperatura en C

60
40
20
0

10

20

30

40

50

60

70

80

Grosor espuma en mm

G
rafica #2 efecto de la temperatura en la actividad enzimtica

Efecto del PH en la actividad enzimatica de la catalasa

30
25
20

Grosor espuma en mm

15
10
5
0

PH 4
Repeticion 1

PH 6

PH 8

PH 10

Repeticin 2

G
rafica #3 efecto del PH en la actividad enzimtica de la catalasa.

Resolucin preguntas
1.1 La funcin del tubo 1 es demostrar que el perxido de hidrogeno y el agua no
tiene reaccin pues el agua no contiene clulas las cuales produzcan la
enzima catalasa.
1.2 La muestra que muestra mayor actividad enzimtica es la de hgado esto se
demuestra debido a que el hgado es un rgano cuya funcin es desintoxicar
el cuerpo y como la catalasa es una enzima que acta frente a agentes txicos
y oxidantes como el perxido de hidrogeno, es por ello que acta de manera
ms rpida puesto que los tejidos del hgado contienen mayor cantidad de
clulas productoras de catalasa.
2.1 La catalasa es una enzima y por lo tanto la temperatura juega un papel
fundamental en su actividad, cabe decir que las enzimas son protenas y por lo
tanto al aumentar o disminuir mucho su temperatura estas se pueden
desnaturalizar lo que responde a la pregunta efectivamente la catalasa es sensible
a la temperatura.
2.2 La temperatura optima de funcionamiento de la catalasa es la temperatura
ambiente

2.3 La hiptesis 2 se acepta pues los resultados demuestran que la temperatura

efectivamente afecta la actividad enzimtica de la catalasa y por lo tanto se
rechaza la hiptesis nula 2 y se puede concluir que la catalasa es sensible a los
cambios de temperatura.
3.1En todos los rangos estuvo activa, pero tuvo una mayor actividad desde el PH
6 hasta el PH 10
3.2 Presenta mayor actividad en el PH 6
3.4 Se acepta la hiptesis 3 puesto que los resultados demostraron que el PH
afecta la velocidad de reaccin y la actividad enzimtica de la catalasa por lo tanto
la hiptesis nula 3 se rechaza.
Discusin de Resultados
Segn los datos obtenidos en las tablas anteriores el hgado contiene mayor
cantidad de Catalasa a los dems tejidos esto puede deberse a que el hgado es
un rgano que elimina las toxinas por lo tanto las clulas de dicho rgano
contienen mayor cantidad de catalasa pues esta elimina las toxinas como el
perxido de hidrogeno producto de la respiracin.
Los datos tambin nos muestran que existe una relacin inversamente
proporcional entre la temperatura y la actividad enzimtica de la catalasa pues a
menor temperatura hubo una mayor actividad mientras que a mayor temperatura
la actividad disminuyo sustancialmente.
Los datos adems muestran que el PH influye en la rapidez en la que acta la
catalasa cabe decir que los datos arrojan que el PH ptimo de la catalasa es el PH
6 un PH acido tendiendo a neutro.
Los resultados obtenidos pueden ser comparados con los de C.Sanchez 2013 que
hace un procedimiento en el que somete la catalasa de la papa a procesos que
inactivan la actividad de la enzima, para ello somete la papa a distintas
temperaturas y a cido clorhdrico, para observar la accin de la catalasa uso
agua oxigenada y demostr que la catalasa de la papa tiene una mayor actividad
en un PH 6 este se logr sometiendo la papa al cido clorhdrico, cabe decir que
aunque tambin someti la papa a distintas temperaturas la catalasa de esta tuvo
un comportamiento distinto al del hgado mostrado en nuestro experimento pues
esta tuvo mayor actividad a una mayor temperatura mientras que la catalasa del
hgado tuvo mayor actividad en temperaturas menores, esto puede deberse a que
la catalasa del hgado no inhibe la actividad enzimtica en temperaturas bajas
pero en temperaturas muy altas pierde su velocidad de reaccin debido a que esta
se desnaturaliza y los resultados demuestran ello. Otro aspecto que hace diferir
los resultados es que la catalasa de hgado es de origen animal y la de la papa de
origen vegetal lo que es causante de dichas diferencias. Aunque en los dos
experimentos los resultados son distintos se puede afirmar que en ambos se llega

a una conclusin y es que la temperatura afecta la velocidad de reaccin de la

enzima y as mismo el PH.
Conclusiones:
La temperatura es un factor que determina el funcionamiento y o la actividad de la
enzima catalasa pues esta puede acelerar o retrasar el proceso
La enzima catalasa funciona de mejor manera a temperatura ambiente y o a 0C y
en un PH 6 tendiendo a neutro.
El hgado tiene una mayor actividad enzimtica que los dems tejidos
La desnaturalizacin de la enzima catalasa comienza desde los 100C
Cada enzima tiene su temperatura optima y o PH ptimo para alcanzar una mayor
actividad

Referencias:
1.Libro
Campbell.W Biology Exploring Life 2006. Pearson Prentice Hall
2.Pagina web
Sanchez.C Activacin y desnaturalizacin de la enzima catalasa 2003 San Carlos
de Aragon
3.Libro
Dolores.M Cinetica Enzimtica 2001. Universidad de Oviedo. Editorial sevillana.
4. Libro
Pea.A Cinetica Enzimatica 2004 Bioquimica.Universidad Autonoma de Mexico.
Editorial limusa.