UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE DA BAHIA

Campus Edgard Santos

Farmcia 2016.1
Disciplina: Processos Bioqumicos I

Relatrio de avaliao da velocidade da reao da catalase em diferentes condies.

Barreiras - BA, Setembro de 2016

1

Relatrio de avaliao da velocidade da reao da catalase em diferentes condies.

Trabalho apresentado disciplina de Processos

Bioqumicos I, no III semestre do curso de
farmcia da Universidade Federal

do Oeste

da Bahia - Campus Edgard Santos, com

requisito parcial de avaliao.
Profa. Rafael Simes.

Barreiras- Ba, Setembro de 2016

Sumrio
INTRODUO.......................................................................................................... 4
MATERIAIS E MTODOS............................................................................................ 5
Reagentes............................................................................................................... 5
Meterias................................................................................................................. 5
Mtodos................................................................................................................. 5
RESULTADOS E DISCUSSES..................................................................................... 7
CONCLUSO.......................................................................................................... 11
REFERNCIAS:....................................................................................................... 12

INTRODUO

Enzimas so substancias orgnicas de natureza proteica com atividade cataltica. As

enzimas apresentam preferncia por seus substratos assim como para o tipo de reao sobre
esse substrato, controlando tambm as reaes reversveis e irreversveis. (Introduo ao
estudo das enzimas; aula 10, pag 195 a 215).
Em geral os substratos de uma determinada reao empregam uma energia de
ativao, que simplificado pelo nvel de energia para reagir.
As enzimas vo catalisar suas reaes nas condies do ambiente celular. Estas por sua
vez so capazes de acelerar a velocidade das reaes dependendo do meio que estejam
expostas (no ambiente celular), ou seja, a ao enzimtica esta sujeita a uma serie de fatores
sendo os mais especficos a temperatura com variao entre 37C e pH de 7,4 (sendo este
valor referido ao plasma sanguneo). (Introduo ao estudo das enzimas; aula 10, pag 197).
A teoria de Michaelis e Menten sobre as reaes catalisadas por enzimas considera a
formao de reao reversvel atravs de um complexo (ES) sendo formado pela enzima (E) e
o substrato (S). Essa mesma teoria permite estabelecer a constante de Michaelis e Menten,
sendo o inverso dela a equao de Lineweaver-Burk.
Assim tm-se o principio estudado em laboratrio pela decomposio da gua
oxigenada em gua e oxignio, segundo a reao:
H2O2

catalise

H2O + O2

MATERIAIS E MTODOS

Reagentes

Soluo de perxido de hidrognio (H2O2) a 4%

4

gua de alface (300 ml)

Soluo de albumina
gua destilada

Meterias

Tubos de ensaios
Galerias
Pipetas
Peras
Bequer
Elemayear

Mtodos

Preparou-se duas galeria com 6 tubos de ensaio cada, sendo estes numerados de 1 a 6
em cada galeria. No Experimento 1 em que avaliamos o efeito da concentrao da enzima na
velocidade da reao, foram colocados 1 ml perxido de oxignio (substrato), 6 gotas de
albumina em cada um dos tubos e as seguintes quantidades de gua destilada e gua de alface
(enzima) nos respectivos tubos:
Tabela 1. Volume de gua destilada e Enzima (gua de alface) nos respectivos tubos.

Tubo
1
2
3
4
5
6

H2O Destilada (mL)

5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
--

gua de Alface (mL)

-1,0
2,0
3,0
4,0
5,0

No experimento 2 que avaliamos o efeito da concentrao do substrato na velocidade

da rao, colocamos 6 gotas de albumina, 5 mL de gua de alface (enzima), perxido de
hidrognio (substrato) e gua destilada na seguinte quantidade em cada um dos tubos:
Tabela 2. Quantidade de gua destilada e Substrato (perxido de hidrognio) nos respectivos tubos.

Tubo
1
2
3
4

H2O Destilada (mL)

2,0
1,6
1,2
0,8

H2O2 (mL)
-0,4
0,8
1,2
5

5
6

0,4
--

1,6
2,0

Em todos os tubos as substncias foram adicionada na seguindo a mesma ordem,

primeiro perxido de hidrognio (H2O2), exceto no tubo1 do experimento 5.2, em seguida a
gua destilada, exceto no tubo 6 dos dois experimentos e logo depois a albumina e por ltimo
gua de alface exceto no tubo 1 do experimento 5.1.
A gua de alface foi adicionada no tubo e em seguida homogeneizou os reagentes do
cada tubo por uma nica inverso com os tubos tampados. Esperamos um intervalo de 1
minuto para adicionarmos a enzima no prximo tubo, passados 1 minuto adicionou-se a gua
de alface e homogeneizou o tubo seguinte, o mesmo foi feito para o restante dos tubos em
cada uma dos experimentos, sempre com um intervalo de 1 minuto entre a adio da gua de
alface no prximo tubo.
Feito isto, aguardamos 10 minutos para que a reao acontecesse. A reao
decomposio do perxido de hidrognio pela catalase causa efervescncia gerando uma
coluna de espuma, essa coluna de espuma pode ser medida e usada para quantificar a
velocidade da reao. Ento medimos a altura da espuma em cada um dos tubos no final dos
10 minutos e anotamos os resultados. Ambos os experimentos tivera como finalidade avaliar
a atividade da catalase no consumo do perxido de hidrognio, relacionando as variveis da
concentrao de enzima no experimento 1 e no experimento 2 variando a concentrao do
substrato.

RESULTADOS E DISCUSSES

Tubo

H2O2 ml

1
2
3
4
5
6

1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

gua
(ml)
5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
--

Dest.

Albumina (gota)
6
6
6
6
6
6

gua

de Resultados

alface (ml)
-1,0
2,0
3,0
4,0
5,0

(mm de espuma)
-4
8
9
9
12

Tabela 3 - Efeito da Concentrao da Enzima.

Aps todo processo de preparao do procedimento experimental, adicionou-se a

catalase (gua de Alface) a mistura, e observou-se o resultado.
A velocidade da reao foi baseada na quantidade de espuma produzida em cada tubo.
Olhando-se para cada um destes pode-se observar que com a mesma quantidade de substrato e
variando somente a concentrao de enzima em cada um deles, tem-se diretamente
proporcional a maior quantidade de espuma medida que se aumenta a concentrao da
enzima.
Assim temos que a quantidade de catalase aumenta a velocidade da reao at que
alcance da faixa tima de funcionamento da enzima. A quantidade de espuma continua a ser
produzia at que o substrato seja consumido, assim cessando a reao.

A partir da tabela acima foi gerado o seguinte grfico:

Grfico 1 - Efeito da concentrao de enzima na velocidade.

Concentrao
Enzima
14
12

f(x) = 2.17x - 0.6

R = 0.9

10

Linear ()
Linear ()

8
6
4
2
0
0

Tabela 4 - Efeito da concentrao de substrato na velocidade da reao.

Tubo

H2O2 ml

1
2
3
4
5
6

-0,4
0,8
1,2
1,6
2,0

gua
(ml)
2,0
1,6
1,2
0,8
0,4
--

Dest.

Albumina (gota)
6
6
6
6
6
6

gua

de Resultados

alface (ml)
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0

(mm de espuma)
0
20
28
37
44
35

Assim como feito no procedimento acima, toda a observao feita por determinado
tempo.
Mantendo-se a concentrao da enzima constante e variando de maneira crescente a
concentrao de substrato, tem-se um aumento da velocidade da reao demonstrado na
medida em espuma.
8

O aumento da velocidade da reao proporcional ao aumento da concentrao de

substrato.
A partir da tabela foi gerado o seguinte grfico:
Grfico 2 - Efeito da concentrao do substrato.

Concentrao
Substrato
0.06
f(x) = 0.02x + 0.01
R = 0.83

0.05
0.04

Linear ()
Linear ()

0.03
0.02
0.01
0
0

Tubo
1
2
3
4
5

0.5

H2O2 ml
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

gua
(ml)
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0

1.5

Dest.

2.5

Temperatura
Albumina (gota) (C)
6
6
6
6
6

0
37
45
60
100

gua

de

alface (ml)
5,0
5,0
5,0
5,0
5,0

Resultados
(mm
espuma)
5
10
10
15
1

Tabela 5 - Efeito da variao da temperatura na velocidade da reao.

A variao de temperatura tambm mais um dos parmetros que influenciam na

velocidade de reao enzima- substrato. medida que se aumenta temperatura do sistema,
mantendo constante a concentrao de substrato e da enzima, tem-se o aumento da velocidade
at os 60C, aps essa temperatura cessa-se a reao.
9

A partir da tabela foi gerado o seguinte grfico:

Grfico 3 - Efeito da temperatura.

Efeito da
Temperatura
16
14
12

f(x) = - 0x^2 + 0.33x + 4.32

R = 0.82

10

Polynomial ()

8
6
4
2
0
0

20

40

60

80

100

120

Tabela 6 - Efeito da variao do pH na velocidade da reao.

Tubo
1
2
3
4
5
6
7

H2O (Dest.)

Tampes

(ml)

(pH) | (mL) (gota)

(gota)

2,0
-----2,0

-4,0
6,0
7,0
8,0
10,0
--

------2

2,0
2,0
2,0
2,0
2,0

H2SO4

2
-------

NaOH

H2O de
Alface (mL)
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0
3,0

ALB.

H2O2

(gota)

(mL)

6
6
6
6
6
6
6

1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0

Resultad
0,0
0,0
20,0
22,0
12
10
0,0

Geralmente cada tipo de enzima, tem uma zona de pH na qual esta funciona de forma
a exercer sua funo mxima.
Na tabela tem-se a demonstrao da velocidade da reao de determinada enzima,
medida que o pH aumenta tendendo a basicidade.

10

Pode-se com esse experimento observar que alteraes como, alta concentrao de
substrato, enzimas, variaes de temperatura e mesmo de pH alteram consideravelmente a
velocidade da reao de enzimas.
A partir da tabela foi gerado o seguinte grfico:
Grfico 4 - Efeito do pH.

Efeito do pH
25
20
15

Polynomial ()

f(x) = - 0.28x^2 + 4.23x - 1.22

R = 0.57

10
5
0
0

10

12

CONCLUSO
Concluindo o experimento, podemos observar o grande poder cataltico das enzimas.
Elas possuem a capacidade de aumentar a velocidade de uma reao sem serem consumidas
funcionando como catalisadores que necessitam de menos energia para a reao. Alm disso,
11

conseguimos entender os fatores que influenciam na atividade enzimtica como, pH,

concentrao de substrato e temperatura. Relacionar o experimento com a teoria estudada em
sala de aula foi o maior aprendizado que conseguimos adquirir, pois a realizao prtica
daquilo que vimos em sala possibilita maior fixao do contedo e entusiasmo no processo de
aprendizagem da disciplina de Processos Bioqumicos I.

REFERNCIAS:
1. FIORUCCI, Antonio Rogrio; SOARES, Mrlon Hebert Flora Barbosa; CAVALHEIRO,

12

der Tadeu Gomes; O Conceito de Soluo Tampo, Qumica Nova na Escola, n 13, maio
2001

PERUZZO, Francisco Miragaia (Tito); CANTO, Eduardo Leite; Qumica na Abordagem do

Cotidiano, Ed. Moderna, vol.1, So Paulo/SP- 1998.

13