ANLISIS POR CROMATOGRAFIA DE CAPA DELGADA (CDD) DEL

ACEITE ESENCIAL DE CEREZA Y LIMN

I. INTRODUCCIN
La mayora de los alimentos deben su sabor y olor a sustancias qumicas que se
encuentran presentes en el orden de partes por milln. En la naturaleza, algunas especies
evolucionaron con niveles muchos mayores de estas sustancias qumicas que otras. Con
el descubrimiento de la destilacin, se hizo posible separar del material botnico estas
sustancias o sus mezclas, dando lugar al nacimiento de los aceites esenciales como
producto comercial. Los aceites esenciales son las fracciones lquidas voltiles,
generalmente destilables por arrastre con vapor de agua, que contienen las sustancias
responsables del aroma de las plantas y que son importantes en la industria cosmtica
(perfumes y aromatizantes), de alimentos (condimentos y saborizantes) y farmacutica
(saborizantes). Los aceites esenciales se clasifican en base a diferentes criterios:
consistencia, origen y naturaleza qumica de los componentes mayoritarios. Se define
umbral de reconocimiento (UR) al valor mnimo de un estmulo sensorial que permite la
identificacin de la sensacin percibida1. Los datos relativos al UR permiten
comparaciones de la intensidad o potencia de las sustancias olorosas. Las UR dependen
de la tensin de vapor de los compuestos, la temperatura y la composicin del medio.
En agua a 20 C para el limoneno la CU es de 0,01 ppm y para el linalol es de 0,006
ppm. Para tener una referencia, el etanol tiene en las mismas condiciones una UR de
100 ppm.
La cromatografa de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar molculas
relativamente pequeas. En la biologa celular se utiliza frecuentemente para separar
azcares simples, lpidos, aminocidos, nucletidos, metabolitos, y ocasionalmente para
separar cadenas cortas de polipptidos y cidos nucleicos. Al igual que otras
cromatografas, consiste de una fase estacionaria y una fase mvil y el principio es el
mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase
mvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase
estacionaria.
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de
silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie slida (una placa de vidrio,
aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puede ser rgida o flexible. El tipo de
fase estacionaria que se utilice en un experimento depender del tipo de molculas que
se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase
estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgnico o una
mezcla de ambos.

II.

OBJETIVOS
Desarrollar en forma prctica el anlisis por cromatografa de capa delgada (CCD)
finalidad de separar pigmentos de los aceites esenciales.
Distinguir y clasificar los diferentes metabolitos secundarios presentes en el tejido
vegetal por medio del anlisis de CCD del aceite esencial de cereza y limn.

III.

REFENCIAS BIBLIOGRAFICAS

ACEITE ESENCIAL DE LIMN

Anualmente se producen aproximadamente 3.600 toneladas de aceite esencial de limn.

En el mundo, el aceite esencial de limn ocupa el segundo lugar luego de la naranja
dulce. Entre los mayores productores se encuentran Argentina, Estados Unidos e Italia;
otros productores de menor importancia son Brasil, Costa de Marfil, Grecia, Espaa,
Israel, Australia, Per, Guinea, Indonesia, Venezuela y Chile. En nuestro pas las zonas
productoras son: Tucumn, Corrientes, Entre Ros, Misiones y Salta.
La produccin de este producto considerado GRAS (Generally Recognized as Safe), se
destina, segn la demanda, al oeste de Europa (40 %), a los Estados Unidos (35 %) y a
Japn (8 %). La cscara del limn contiene 0,4 % de aceite, se encuentra en sacos de
forma ovalada en el pericarpio o en la porcin coloreada de la cscara, y acta como
barrera txica natural contra varios microorganismos e insectos.
La mayor produccin de aceite esencial de limn se realiza por prensado en fro; de
menor calidad y ms econmicos, son los destilados de aceites esenciales usados para la
produccin de aceites libres de terpenos. Una pequea parte de aceite de jugo de limn
es producido durante la concentracin del jugo.
Existen diferencias que responden al terreno, clima y mtodos de produccin. En el
limn, el tenor de aceite se incrementa con la maduracin del mismo y decrece justo
despus de los perodos de lluvia. Los frutos blandos generalmente dan menores
rendimientos que los firmes, esto es debido a que en los blandos, la ruptura de los sacos
contenedores de aceite es ineficiente.
Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de hasta ms de 100
componentes que pueden tener la siguiente naturaleza qumica:
Compuestos alifticos de bajo peso molecular (alcanos, alcoholes, aldehdos,
cetonas, steres y cidos.
Monoterpenos
Sesquiterpenos
Fenilpropanos
El aceite de limn, contiene aproximadamente 2% de sustancias no voltiles en su
mayora en la forma de Coumarince, alrededor de 18 alcoholes, 16 aldehdos, 11 steres,

3 cetonas, 4 cidos, y 23 hidrocarburos. Los componentes mayoritarios del aceite

esencial obtenido por prensado de la cscara son:

- 63 % limoneno (Monoterpeno monocclico)

- 12 % beta-pineno (Monoterpeno Bicclico)
- 9 % gama-terpineno (Monoterpeno monocclico)
Otros componentes cualitativamente importantes son:
- 1,5 % geranial (aldehido)
- 1,0 % neral (limn) (aldehido)
- neril acetato (frutal, floral, rosa)
- 0,4 % geranil acetato (frutal, floral, rosa)
- 0,2 % citronelal (fuerte, ctrico, verde)
- 0,2 % linalol (brillante, lavanda) (monoterpeno aciclico)
- 0,1 % nonanal (fuerte).
Los hidrocarburos de terpenos, los cuales constituyen la mayor parte del aceite son
insolubles en agua y susceptibles a oxidaciones. Para producir un aceite estable y
soluble se llevan a cabo operaciones de extraccin, concentracin y deterpenizacin.
ACEITE ESENCIAL DE CEREZO
Contiene grandes cantidades de cido oleico y linoleico. Fuente importante de Vitamina
C, B y bioflavonodes, rica en minerales: hierro, potasio y calcio. Remineralizante,
desintoxicante, antiinflamatoria y depurativa

IV.

MATERIALES

Aceite esencial: cereza, limn.

Hexano
Acetato de etilo
Solucin de Vainillina 1%
Solucin de cido Sulfrico 5%
Placas cromatograficas
Cmara cromatogrfica
Tubos capilares
Agua destilada.
Balanza analtica.
Papel filtro.

V.

PROCEDIMIENTO
1. Desarrollar la CCD en un sistema exano- acetato de etilo, relacin 8:2
2. El desarrollo d ela CCD debe alcanzar aproximadamente 8 cm el recorrido en la
placa.

3. Luego del desarrollo secar la placa al aie y observar el resultado; asi mismo
hacer el revelado con vainillina y cido sulfrico.
a) Solucin etanlica de cido sulfrico al 5%
b) Solucin etanolica de vainillina a l %
4. Aspersar primero con reactivo a) y luego con b) enseguida calentar la placa a
80C y observamos las coloraciones.

Coloraciones comunes en aceites esenciales son: azul, verde, rojo, marrn, etc.

5. En el informe adjuntar
cromatografas desarrolladas.

las

placas

6. Investigue de acuerdo a las coloraciones y la

informacin bibliogrfica que tipo de
sustancias podran ser.

VI.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

CEREZA
SISITEMA DE MESCLA 8:2 - (3ml)
2.4 ml de hexano
0.6 ml acetato de etilo
hPlaca = 8.5 cm
Colores: azul, verde, morado, marrn, rojo,
rosado y celeste

RF=

Distancia recorrida de la substancia

distancia recorrida por el disolvente
RF= 0, No hay recorrido
LIMN

SISITEMA DE MESCLA 8:2 - (3ml)

2.4 ml de hexano
1.6 ml acetato de etilo
hPlaca = 8.56 cm
Colores: azul, morado, verde, amarillo,
marrn, rojo

RF=

Distancia recorrida de la substancia

distancia recorrida por el disolvente
RF= 0, No hay recorrido.

Los aceites esenciales son mezclas naturales muy complejas que pueden contener cerca
de 20 a 60 diferentes componentes. Las esencias naturales estn principalmente
compuestas por alcoholes, esteres, fenoles, aldehdos, cetonas, cidos e hidrocarburos,
al igual que pequeas cantidades de otras funciones qumicas. Por ejemplo, el limoneno,
un monoterpeno hidrocarbonado, es el componente ms abundante en el aceite esencial
de la cascara de naranja con un
76.7%, seguido por el linalool un monoterpeno oxigenado 3.1%. El 1.8-cineol
(73.3%) es el principal componente del aceite esencial de eucalipto, los compuestos
principales del aceite esencial de las hojas de Lippia alba [16] son el
carvona (25%), limoneno (22%) y citral (21%). El geranial (38.7%), neral (24.5%) y el
limoneno (5.8%) son los compuestos principales del aceite esencial de las hojas de
cidrn (Lippia citriodora). Generalmente, estos componentes mayoritarios determinan
las propiedades biolgicas de los aceites esenciales. Algunos de estos componentes no
parecen presentar algn inters odorfico e incluso son la causa de la desestabilizacin y
problema de disolucin de los aceites esenciales.
Los componentes de los aceites esenciales constituyen principalmente dos grupos de
distinto origen biosinttico. El principal grupo est compuesto por terpenos y
terpenoides y el otro por aromticos y compuestos alifticos, todos caracterizados por
bajo peso molecular.
RECONOCIMIENTO DE MONOTERPENOS POR CCD

VII.

RECOMENDACIONES

Durante la prctica de laboratorio dad se puede inferir que el proceso de la mescla

qumica analizada disuelta y que al colocar una gota de la misma sobre sobre la placa,
se observaron resultados como una pigmentacin azul, morado, amarillo, marrn, rojo,
adems se presenci un color verde en la cromatografa el cual era clorofila de la cual es
un pigmento accesorio presente en vegetales y otras clulas fotosintticas complejas;
absorbe luz de una longitud de onda diferente y transfiere la energa a la clorofila, que
es encarga de transformarla en energa qumica y est compuesta principalmente por
carbono, hidrogeno y una molcula de magnesio. Se puede inferir que se realiz de
manera incorrecta la prctica de laboratorio ya que no se obtuvo el recorrido de los
metabolitos, obtenindose as una interferencia de colores.
VIII. CONCLUSION
En la prctica de laboratorio se culmin sin xito y sin los resultados obtenidos
evidentes de la tcnica de separacin descrita en este informe, en donde la separacin se
da por migracin diferencial, es decir la fase mvil (el eluyente) arrastra a las
substancias menos polares y aquellas ms polares quedan retenida. En este caso no se
observ desplazamiento porque se contaba con un aceite esencial puro o de buena
calidad, slo coloraciones (presencia de metabolitos secundarios).

IX.

BIBLIOGRAFA
ASHURT, P. R. Cap. 1. Essential oils by John Wright en Food Flavorings,
Aspen, 1999.
BELITZ, H., y GROSCH, Sustancias aromticas: Concentracin umbral en
Qumica de los alimentos, Zaragoza, Acribia, 1985. 2da edicin. Cap. 5.
FENNEMA, O. Quimica de los Alimentos. Zaragoza. Acribia, 1993
GUENTHER, E. The essential oils. New York, Van Nostrand, 1948. Vols. 1-6.