Enzimas y vitaminas

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TEMA N 5.- ENZIMAS Y VITAMINAS

INTRODUCCIN

En los seres vivos se producen continuamente infinidad de reacciones qumicas que,

para que se realicen con normalidad, es necesario que ocurran de una manera ordenada y
rpida.
Existen unos compuestos, llamados biocatalizadores, que son los encargados de
llevar a cabo dichas reacciones. Los biocatalizadores son las enzimas, las vitaminas y las
hormonas. Dichas sustancias intervienen en las reacciones biolgicas regulndolas de manera
significativa. En algunos casos su actuacin se realiza sin que dichas sustancias se
modifiquen, enzimas, en otros sufren pequeas modificaciones, vitaminas y hormonas.
En este tema trataremos exclusivamente sobre las enzimas y las vitaminas, ya que
las hormonas no son objeto de estudio en este curso.
1.- ENZIMAS
Constituyen la clase de protenas ms amplia y ms altamente especializada. Catalizan
los millares de reacciones qumicas que, colectivamente, constituyen el metabolismo
intermediario de las clulas. Gran parte de la historia de la bioqumica es la historia de la
investigacin enzimtica.
La actividad de las enzimas fue ya reconocida en los estudios iniciales de la digestin
en el estmago, durante el perodo de 1780 a 1825.
En 1860 L. Pasteur fue el primero en hablar de las enzimas ya que descubri que el
proceso de fermentacin alcohlica se realizaba gracias a la actuacin de unos compuestos a
los que llam fermentos en referencia a la accin que ejercan. Pasteur postul que dichos
fermentos se hallaban ligados con la estructura y la vida de las clulas de levadura.
Posteriormente esta misma accin se describi tambin en diversos rganos y tejidos,
y en 1877 Friedrich Wilhem Khne propuso el nombre actual de enzimas para designar a
estas sustancias.
En 1897 E. Bchner consigui aislar, a partir de las clulas de levadura, esos
fermentos descubiertos por Pasteur. Puso de manifiesto que estas importantes enzimas
podan actuar independientemente de la estructura celular.
En 1926 J. B. Sumner asla, en forma cristalina, una enzima, llamada ureasa, que
interviene en la degradacin de la urea. Sumner sugiere que todas las enzimas eran protenas.
En 1930 J. Northrop asla e identifica varias enzimas digestivas, pepsina, tripsina y
quimiotripsina, estableciendo firmemente la naturaleza proteica de las enzimas.
A partir de esa fecha se han aislado multitud de enzimas y en la actualidad se conoce
un nmero enorme de ellas.
2.- PROPIEDADES GENERALES DE LAS ENZIMAS
Catalizan reacciones qumicas que, de otra manera, no se produciran o lo haran de
forma muy lenta. Este proceso de catlisis lo efectan sin alterar el punto de equilibrio de
dichas reacciones. Se les considera como verdaderos catalizadores ya que no se consumen ni
se alteran, de modo permanente, durante la catlisis.

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Todas las enzimas son protenas de

conformacin globular y, por esta razn, van
a presentar las caractersticas de stas. En
este sentido las enzimas pueden cristalizar o
pueden verse alteradas por los cambios de
pH, temperatura, etc.
Existen
enzimas
que
estn
constituidas exclusivamente por una o varias
cadenas
peptdicas,
son
estrictamente
proteicas,
pero
la
mayora
son
heteroprotenas y reciben el nombre de
holoenzimas. En su constitucin coexisten
una
fraccin
proteica
denominada
apoenzima y otra no proteica, denominada
cofactor. El cofactor, en sentido estricto, es
un simple catin metlico. Cuando el
cofactor es una molcula orgnica
compleja recibe el nombre de coenzima, y
cuando la coenzima est estrechamente
ligada a la apoenzima se le da el nombre de
grupo prosttico (figura 5.1).
Figura 5.1.- Estructura de una holoenzima.

3.- NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

Durante algn tiempo, para nombrar a las enzima se aada la terminacin -asa- al
nombre del sustrato sobre el que actuaba (urea, ureasa). Con el paso del tiempo y al ir
descubrindose un nmero elevado de enzimas se hizo necesario establecer una clasificacin
sistemtica. Para ello se crea la I. E. C. (Comisin Internacional de las Enzimas), que las
clasifican en 6 clases (figura 5.2).
CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS
Clase

Nombre

xido-reductasas

II

Transferasas

III

Hidrolasas

IV

Liasas

Isomerasas

VI

Ligasas

Tipo de reaccin que catalizan

Reacciones de xido-reduccin
Transferencia de grupos funcionales
Reacciones de hidrlisis
Rotura o soldadura de compuestos sin que intervenga el agua
Reacciones de isomerizacin
Formacin de enlaces por hidrlisis del ATP

Figura 5.2.- Clasificacin de las enzimas segn la I. E. C.

3.1.- Clase I. xido-reductasas

En esta clase se agrupan todas las enzimas que intervienen en reacciones de
transferencia electrnica, en las que un compuesto gana electrones y otro los pierde. A su vez
se subdividen en:
3.1.1.- Oxidasas o reductasas. Que intervienen transfiriendo electrones desde un
dador electrnico (el agente reductor) a un aceptor electrnico (el agente oxidante). Son
enzimas que llevan a cabo reacciones de xido-reduccin. Ejemplo la reaccin de la figura 5.4.

Enzimas y vitaminas

2+

Cit b Fe

3+

+ Cit c Fe

89

3+

Cit b Fe

2+

+ Cit c Fe

Figura 5.4.- Reaccin de xido-reduccin de la cadena respiratoria.

3.1.2.- Deshidrogenasas. Son enzimas oxidantes que separan tomos de hidrgeno

+
+
+
del sustrato y que suelen actuar ligadas al NAD , NADP y FAD , (coenzimas de carcter
vitamnico). Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la figura 5.3.

COOH
I
CH2
+
I
+ FAD
CH2
I
COOH

COOH
I
CH
II
CH
I
COOH

Succinato
deshidrogenasa

A. succnico

FADH2

A. fumrico

Figura 5.3.- Reaccin de deshidrogenacin catalizada por la Succinato deshidrogenasa.

3.2.- Clase II. Transferasas

Catalizan reacciones en las que se transfiere un grupo funcional, distintos del
hidrgeno, desde un sustrato a otro. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la figura 5.5.

Glucosa + ATP

Glucosa-6-fosfato + ADP

Glucoquinasa

Figura 5.5.- Se transfiere un resto fosfato desde el ATP hasta la glucosa.

3.3.- Clase III. Hidrolasas

Catalizan reacciones de hidrlisis, es decir, de ruptura de algn tipo de enlace
+
introduciendo grupos OH e H . Actan ligadas al agua. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin
de la figura 5.6.

NH2 - CO - NH2

H2O

CO2 + 2NH3

Ureasa

Figura 5.6.- Reaccin de hidrlisis de la urea.

Dependiendo del tipo de enlace que rompan, las enzimas hidrolticas reciben distintos
nombres: Esterasas, si rompen enlaces de tipo ster; glucosidasas, si rompen enlaces
glucosdicos; peptidasas, si rompen enlaces peptdicos; lipasas, si rompen molculas lipdicas,
etc..
3.4.- Clase IV. Liasas
Catalizan reacciones de ruptura o de formacin de compuestos sin que intervenga el
agua. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la figura 5.7.

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COOH
I
CH2
I
CO
I
CH3

CO2

Acetoacetato
descarboxilasa

cido acetoactico

CH3
I
CO
I
CH3
Acetona

Figura 5.7.- Rotura de un sustrato por accin de una liasa.

3.5.- Clase V. Isomerasas

Catalizan reacciones en las que se produce una reconstruccin espacial de un
compuesto sin que cambie su frmula emprica. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la
figura 5.8.

Gliceraldehdo-3-fosfato

Dihidroxiacetona-fosfato

Triosa fosfato isomerasa

Figura 5.8.- Transformacin de un compuesto en otro sin que cambie su frmula emprica.

3.6.- Clase VI. Ligasas

Catalizan reacciones en las que se forman o rompen compuestos gracias a la energa
liberada al romperse una molcula de ATP. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la figura
5.9.

COOH
I
CH2
I
CH2
I
CH-NH2
I
COOH
cido
glutmico

NH3

ATP

ADP + Pi

Glutamina
sintetasa

Amonaco

CO-NH2
I
CH2
I
CH2
I
CH-NH2
I
COOH
Glutamina

Figura 5.9.- La energa utilizada en la reaccin es la que se desprende al romper la molcula de ATP. Uno de los
tomos de hidrgeno del amonaco junto con el OH del grupo carboxilo del A. glutmico, forman agua que se utiliza
para hidrolizar la molcula de ATP que desprender energa necesaria para unir el grupo NH2 al grupo CO terminal
del . glutmico.

4.- MECANISMO DE ACCIN ENZIMTICA

4.1.- Energa libre de activacin
Una reaccin qumica en la que un compuesto A se transforma en un producto P,
ocurre porque, en un momento determinado, cierta fraccin de las molculas del compuesto A
adquieren un estado de transicin, llamado estado activado, en el que es muy probable que se

Enzimas y vitaminas

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formen o se rompan enlaces para originar el producto P. Dicho estado activado se encuentra
en la cima de una barrera de energa que separa al sustrato A del producto P.

Entendemos por energa libre de activacin, G (el smbolo se emplea para

representar el proceso de activacin), la cantidad de energa necesaria para llevar todas las
molculas de un mol de una sustancia, a una temperatura determinada, hasta el estado de
transicin, en la cima de la barrera de activacin. La energa libre de activacin se expresa en
Kcal/mol. En la figura 5.10, se muestran los diagramas de energa para una reaccin no
catalizada y catalizada enzimticamente.

Figura 5.10.- Diagrama de energa para una reaccin qumica no catalizada y catalizada.

Hay dos mtodos generales mediante los cuales puede acelerarse la velocidad de una
reaccin qumica. El primero consiste en aumentar la temperatura, lo que provoca un
incremento del movimiento trmico y de la energa que, a su vez, induce a un mayor nmero de
molculas para que alcancen el estado de activacin, acelerando, de este modo, la velocidad
de la reaccin. En este sentido, se ha comprobado que, en muchas reacciones, la velocidad se
duplica por cada 10C de aumento en la temperatura. El segundo mtodo consiste en aumentar
la velocidad de la reaccin adicionando un catalizador que se combina con los reaccionantes
de modo transitorio, producindose, como consecuencia de esa unin, un estado de transicin
de menor energa de activacin que el correspondiente a la reaccin no catalizada. Los
catalizadores, pues, aceleran las reacciones qumicas porque disminuyen la energa de
activacin. Cuando la reaccin termina se recupera el catalizador libre. En la tabla de la figura
5.11, se muestra la energa de activacin para la descomposicin del perxido de hidrgeno en
ausencia o presencia de un catalizador.

Enzimas y vitaminas

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Condiciones

G Kcal/mol

Sin catalizar

18

Catalizada con platino coloidal

13

Catalizada por catalasa

Figura 5.11.- Energa libre de activacin para la descomposicin del perxido

de hidrgeno a 20C. La catalasa acelera la velocidad ms de 10 veces.

4.2.- Cintica enzimtica

El rasgo caracterstico de estos procesos es el efecto de saturacin de la enzima por el
sustrato. Ese efecto ocurre porque la cantidad de sustrato es mucho mayor que la cantidad de
enzima, de manera que llega un momento, en el curso de la reaccin, en que todas las
molculas de la enzima estn unidas al sustrato por lo que dicha enzima est saturada.
En la figura 5.12, se muestra una grfica en la que se observa el efecto de la
concentracin de sustrato sobre la velocidad de una reaccin catalizada enzimticamente. En
dicha reaccin se observan tres tramos claramente diferenciados. En el primero la velocidad
aumenta proporcionalmente a la concentracin de sustrato, en este tramo la reaccin es de
primer orden. En el segundo tramo se observa que, a medida que la concentracin se sustrato
aumenta, el aumento de velocidad deja de ser proporcional a dicha concentracin, en este
caso la reaccin es de orden mixto. En el tercer tramo la concentracin de sustrato aumenta
pero la velocidad se mantiene constante, cuando ocurre esto la reaccin ha alcanzado su
velocidad mxima (Vmax) y se comporta como una reaccin de orden cero, se dice entonces
que la enzima se halla saturada por el sustrato. Definimos velocidad mxima como aquella que
tiene la reaccin cuando todas las molculas de la enzima estn unidas al sustrato, es decir,
cuando la enzima est saturada por el sustrato.
La concentracin de sustrato, para cual la velocidad de la reaccin es la mitad de la
velocidad mxima, recibe el nombre de KM o constante de Michaelis-Menten.

Figura 5.12.- Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de una reaccin catalizada enzimticamente.

El efecto de saturacin de la enzima por el sustrato condujo a dos investigadores,

Brown y Henry, a formular la hiptesis de que la enzima y el sustrato reaccionan

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reversiblemente, para formar un complejo enzima-sustrato, como etapa esencial de la reaccin

catalizada. En 1913 otros dos investigadores, Michaelis y Menten, desarrollaron una teora
general sobre la cintica enzimtica que es fundamental para el anlisis cuantitativo de todos
los aspectos de la dicha cintica. Esta supone que una enzima se une con un sustrato para
formar un complejo enzima-sustrato y que este se rompe dando enzima libre ms un producto.
La reaccin total podemos representarla como la suma de cuatro reacciones, cada una de las
cuales presenta una constante de equilibrio (figura 5.13). Las constantes de equilibrio se
denominan K1, K2, K-1, K-2 y son las constantes de la velocidad de esas reacciones.
K1
E + S

K2

ES E + P
K-1

K-2

Figura 5.13.- Esquema general de una reaccin enzimtica.

A partir de la reaccin anterior se desarrolla la teora de la cintica enzimtica de

Michaelis y Menten.
Llamamos [E] a la concentracin de enzima libre, [ES] a la concentracin del complejo
enzima-sustrato, [ET] a la concentracin de enzima total y [S] a la concentracin de sustrato.
Esta ltima es mucho mayor que la de la enzima, es decir que en cualquier momento la
cantidad de sustrato unida a la enzima es despreciable con respecto a la que no lo est.
Suponemos que el proceso ocurre en su totalidad y tenemos en cuenta que la K-2 es
despreciable porque la energa final del sistema es mucho menor que la energa inicial y
porque el producto sirve de sustrato para otras reacciones coordinadas con esta y, por lo tanto,
va a ser transformado rpidamente por lo que la reaccin inversa, E + P ES, no va a
realizarse.
En la reaccin anterior la velocidad de formacin Vf del complejo enzima-sustrato viene
dada por la siguiente expresin:
Vf = K1 [E] [S]

[1], como

[E] = [ET] - [ES]

[2], si sustituimos tenemos

Vf = K1 ([ET] - [ES]) [S] [3]

Por otro lado, la velocidad a la que se destruye el complejo enzima-sustrato Vd vendr
dada por la siguiente expresin:
Vd = (K-1+K2) [ES]

[4]

Cuando la reaccin est en equilibrio, las velocidades de formacin y de destruccin,

del complejo enzima-sustrato, sern iguales:
Vf Vd, es decir
K1 ([ET] - [ES]) [S] = (K-1+K2) [ES]

[5]

Si ordenamos los trminos obtenemos:

KM =

K-1 + K2
([ET] - [ES]) [S]
=
K1
[ES]

[6]

El resultado es la constante Michaelis-Menten, KM, que relaciona globalmente a las

tres constantes de velocidad de esa reaccin.
Si en la ecuacin anterior despejamos la [ES] obtenemos:

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Enzimas y vitaminas

KM [ES] = [ET] [S] - [ES] [S]

KM [ES] + [S] [ES] = [ET] [S]
[ES] (KM + [S]) = [ET] [S]
[ET] [S]
[ES] =
KM + [S]

[7]

La velocidad inicial de formacin de los productos ser proporcional a la velocidad de

ruptura del complejo enzima-sustrato:
Vi = K2 [ES]

[8]

Si, en esta ecuacin, sustituimos el valor de la concentracin de enzima-sustrato de la

ecuacin [7] obtenemos:
[ET] [S]
Vi = K2
[9]
KM + [S]
La velocidad mxima se alcanzar cuando se sature la enzima por el sustrato, es decir,
cuando todas las molculas de la enzima estn unidas al sustrato, por lo que la velocidad
mxima ser:
Vmax = K2 [ET]

[10]

Si sustituimos en la frmula de la velocidad inicial de la ecuacin [9] obtenemos la

ecuacin de Michaelis-Menten (figura 5.14).

Vmax [S]
Vi =
KM + [S]

[11]

Figura 5.14.- Ecuacin de Michaelis-Menten.

La ecuacin de Michaelis-Menten, es la ecuacin de la velocidad para una reaccin de

un slo sustrato, catalizada enzimticamente. Dicha ecuacin relaciona la velocidad inicial, la
velocidad mxima y la concentracin de sustrato por medio de la KM.
Cuando la velocidad inicial sea la mitad de la velocidad mxima, la constante de
Michaelis-Menten ser igual a la concentracin de sustrato.
Vmax
Vi = ;
2

sustituimos en la ecuacin [11] y queda:

Vmax [S]
Vmax
= ; resolvemos y..
2
KM + [S]
KM + [S] = 2 [S]

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KM = [S]
La KM nos va a indicar la afinidad que tiene la enzima por el sustrato, de forma que
si la KM es baja la afinidad ser alta y viceversa.
La ecuacin de Michaelis-Menten es poco til si queremos determinar la velocidad
mxima de una reaccin ya que sta nunca se va a alcanzar. Por la misma razn es difcil
determinar la KM. Para evitar esto, Lineweaver y Burk transformaron la ecuacin de
Michaelis-Menten utilizando los inversos de ambos trminos, consiguiendo, de esta manera,
una ecuacin similar a la de una recta. Al representar grficamente dicha ecuacin se pueden
hallar los valores de la velocidad mxima y la KM.
1
KM + [S]
=
V
Vmax [S]
Resolvemos y nos queda la ecuacin de Lineweaver-Burk (figura 5.15); ecuacin
matemtica explcita del tipo y = ax + b, cuya representacin se muestra en la figura 5.16.

1
KM
1
1
= +
V
Vmax [S]
Vmax
Figura 5.15.- Ecuacin de Lineweaver-Burk.

Figura 5.16.- Representacin grfica de la ecuacin de Lineweaver-Burk.

En 1894 E. Fisher propuso un mecanismo de accin de las enzimas que es conocido

como el mecanismo llave-cerradura. Estudios sobre la especificidad de las enzimas muestran
que las molculas de sustrato reflejan en general, por el principio de complementaridad, la
estructura del centro activo de la enzima. El sustrato posee un enlace qumico susceptible
que puede ser atacado por la enzima y, generalmente, posee otro grupo especfico por el cual

Enzimas y vitaminas

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realiza su unin al centro activo de la enzima. Este ltimo grupo es el grupo determinante de
la posicin. Por otro lado la enzima, en su centro activo, posee un centro orientador y un
centro cataltico. Cuando se forma el complejo enzima-sustrato el centro orientador se une
con el grupo determinante de la posicin del sustrato y permite que el centro cataltico
ataque al enlace susceptible (figura 5.17).
Enzima

Sustrato

Centro orientador

Grupo determinante de la posicin

Centro cataltico

Enlace susceptible

Figura 5.17.- Complementaridad entre enzima y sustrato.

El acoplamiento entre la enzima y el sustrato es tan especfico como el de una llave y

su cerradura (Figura 5.18).

Figura 5.18.- Mecanismo llave-cerradura.

Sin embargo, realmente el centro activo, aunque de antemano posee una cierta
complementariedad con el centro reactivo del sustrato, slo se adapta totalmente a l al
ponerse en contacto. El proceso sera comparable a como se adapta un guante de ltex de
cirujano a la mano. El guante vaco tiene una forma parecida a la de la mano, pero no la forma
exacta de la mano de la persona que va a usarlo, la cual se adquiere una vez puesto en la
mano.
Esta complementariedad entre el centro activo de la enzima y el centro reactivo del
sustrato determina la especificidad de la enzima, ya que la actividad de la enzima slo ser
posible cuando el sustrato se pueda unir con ella y lo haga con una orientacin ptima para
que se produzca la accin cataltica.
4.3.- Factores que influyen en la velocidad de las reacciones enzimticas
La accin de las enzimas en las reacciones catalizadas por ellas est influida por la
actuacin de distintos factores que afectan a las relaciones entre enzima y sustrato, as como a
las condiciones del medio en el que se desarrollan (pH y temperatura).
La velocidad de una reaccin enzimtica vara al variar la concentracin de la enzima y
del sustrato, y es modificada por las condiciones del medio.

Enzimas y vitaminas

4.3.1.- Influencia de
concentracin de la enzima

97

la

La actividad de una enzima

es directamente proporcional a su
concentracin, siempre que exista
cantidad suficiente de sustrato. La
velocidad de la reaccin, por tanto,
aumenta conforme aumenta la
concentracin de la enzima (figura
5.19).
Figura 5.19.- Grfica en la que se
aprecia una variacin de la velocidad de la
reaccin proporcional al aumento de la
concentracin de enzima.

Cuando lo que se modifica es la concentracin de sustrato, la actividad de la enzima

crece hasta alcanzar un valor mximo, a partir del cual la velocidad de la reaccin no vara
aunque siga aumentando la concentracin de sustrato, ya que se produce un efecto de
saturacin de la enzima por el sustrato. El nmero de molculas de enzima siempre va a ser
menor que el nmero de molculas de sustrato, por lo que llegar un momento, en el curso de
la reaccin, en que todas las molculas de la enzima estn unidas al sustrato, ese momento
representar la velocidad mxima. Este fenmeno se conoce como inhibicin por sustrato.
Como las reacciones enzimticas son reacciones de equilibrio, una elevada
concentracin de producto va a producir un efecto de reduccin de la actividad de la enzima, es
lo que se conoce como inhibicin por producto.
4.3.2.- Influencia de la temperatura
Las enzimas por el hecho de
ser protenas van a actuar en funcin
de la temperatura, de manera que
presentan una temperatura mnima,
por debajo de la cual no muestran
actividad; una temperatura ptima, a
la cual la actividad es mxima, y una
temperatura mxima por encima de
la cual tampoco muestran actividad ya
que se produce la denominada
desnaturalizacin que conlleva la
desorganizacin de los centros
activos y la prdida de funcionalidad
(figura 5.20).
Figura 5.20.- Grfica en la que se
representa la variacin de la velocidad de una
reaccin en funcin de la variacin de la
temperatura.

Como se observa en la grfica, la temperatura ptima est ms prxima a la

temperatura mxima.
Sabemos que un aumento de temperatura produce una elevacin de la velocidad de
las reacciones qumicas, y las reacciones enzimticas no son una excepcin. Por otro lado son
protenas que se desnaturalizan a temperaturas altas.
La temperatura ptima de cada enzima resultar de la conjugacin de ambos factores,
y eso vara segn los organismos. En la especie humana, la temperatura ptima suele ser la
temperatura corporal.

Enzimas y vitaminas

98

4.3.3.- Influencia del pH

Igualmente existe un pH
mnimo, por debajo del cual la
enzima no muestra actividad; un pH
ptimo, al cual la actividad es
mxima; y un pH mximo, por
encima del cual tambin se produce
la desnaturalizacin. En este caso,
nos saldr una grfica similar a la de
la variacin de la temperatura, pero
debemos tener en cuenta que el pH
ptimo
es
prcticamente
el
intermedio entre el pH mnimo y el
pH mximo (figura 5.21).
Figura 5.21.- Grfica en laque se representa la
variacin de la velocidad de una reaccin en
funcin de la variacin del pH.

5.- ENZIMAS ALOSTRICAS

La mayor parte de las enzimas no actan individualmente sino que lo hacen en
cadenas secuenciales que se conocen como sistemas multienzimticos, en los que el
producto de una reaccin sirve como sustrato para la siguiente. En la mayor parte de estos
sistemas la enzima que regula la primera reaccin acta como regulador de la velocidad de
todo el sistema y recibe el nombre de enzima alostrica. Normalmente la enzima alostrica
de un sistema multienzimtico es inhibida por el producto final de dicho sistema, de forma
que cuando ese producto final sobrepasa una concentracin, llamada crtica, se une a la
enzima alostrica impidiendo que esta realice su funcin, con lo que paraliza todo el sistema
multienzimtico. Este fenmeno se conoce como retroinhibicin o inhibicin feed-back. El
ejemplo clsico es la secuencia multienzimtica que cataliza la transformacin de L-Treonina
en L-Isoleucina (figura 5.22).

L-Treonina
E1
-oxobutrico
E2
-acetohidroxibutrico
E3
,-Dihidroxi,-metil valerinico
E4
-oxo--metil valerinico
E5
L-Isoleucina
E1 : Treonin desaminasa.
Es la enzima alostrica de esta secuencia
multienzimtica

Figura 5.22.- Retroinhibicin de la formacin de isoleucina a partir de treonina.

Las enzimas alostricas, generalmente, son de elevado peso molecular y estn

constituidas por varias subunidades. En sus estructuras existen centros de unin especficos
para el sustrato normal y otros especficos para el regulador, a estos ltimos se les denomina
centros alostricos. Cuando el centro alostrico est vaco, la enzima acta con su
velocidad cataltica normal, pero cuando dicho centro est ocupado por el regulador, la enzima

Enzimas y vitaminas

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modifica su velocidad, aumentndola o disminuyndola, dependiendo de que el regulador sea

un inhibidor o un efector respectivamente.
La velocidad de una enzima alostrica puede modificarse por dos motivos diferentes. El
primero consiste en que se produzca un cambio de la velocidad mxima sin que haya cambio
de la KM, en este caso la afinidad de la enzima por el sustrato no se modifica, ya que la afinidad
depende de la KM. El segundo consiste en que se modifique la KM sin que se modifique la
velocidad mxima de la reaccin, en este caso si se modifica la afinidad de la enzima por el
sustrato.
6.- INHIBICIN ENZIMTICA
Las enzimas pueden verse inhibidas o envenenadas por la accin de ciertos
compuestos qumicos especficos que reciben el nombre de inhibidores. La inhibicin puede
ser:
6.1.- Inhibicin irreversible
Ocurre cuando el inhibidor se une covalentemente con la enzima de manera que se
modifica, de un modo permanente, un grupo funcional necesario para la catlisis. Esta
modificacin conlleva la inactivacin funcional de la molcula enzimtica, es decir el
inhibidor provoca una alteracin estructural de la enzima.
6.2.- Inhibicin reversible.
Puede ocurrir que el inhibidor se una a la enzima inactivndola temporalmente. Se
produce, en este caso, una inactivacin funcional sin que se altere la estructura de la enzima,
de modo que, cuando el inhibidor se separe de ella, esta quedar de nuevo libre para realizar
su funcin cataltica.
Este tipo de inhibicin se lleva a cabo por tres mecanismos diferentes que reciben
respectivamente los nombres de inhibicin competitiva, acompetitiva y no competitiva.
Estos tres mecanismos de inhibicin pueden distinguirse experimentalmente por los efectos
que produce el inhibidor sobre la cintica de la reaccin, cintica que puede analizarse
mediante la ecuacin de la velocidad enzimtica, propuesta por Michaelis-Menten, y la
representacin grfica de esta, propuesta por Lineweaver-Burk.
6.2.1.- Inhibicin competitiva
La caracterstica bsica de este tipo de inhibicin es que el inhibidor puede unirse a la
enzima libre de tal modo que compite con el sustrato normal por unirse al centro activo. Un
inhibidor competitivo reacciona reversiblemente con la enzima para formar el complejo enzimainhibidor, anlogo al complejo enzima-sustrato. La molcula del inhibidor no resulta
qumicamente alterada por la enzima.
E + I EI
Siguiendo el esquema de Michaelis y Menten podemos definir la constante del
inhibidor KI de la siguiente manera
[E][I]
KI =
[EI]
La inhibicin competitiva se reconoce experimentalmente con facilidad, debido a que el
porcentaje de inhibicin, para una concentracin de inhibidor constante, disminuye al
incrementarse la concentracin de sustrato
La presencia de un inhibidor competitivo aumenta la KM de la reaccin, es decir
provoca que sean necesarias concentraciones de sustrato superiores para que se alcance la

Enzimas y vitaminas

100

Vmax (figura 5.23). El ejemplo clsico de este tipo de inhibicin lo constituye la inhibicin de la
enzima succinato deshidrogenasa por accin del malonato o del oxalacetato (figura 5.24).

Figura 5.23.- Inhibicin competitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia de inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia de inhibidor. Obsrvese que en ambos casos la Vmax permanece
constante, lo que vara es la KM.

A
COO
I
CH2
I

Succinato
deshidrogenasa

CH2
I
COO
Succinato
B

COO
I
CH
II

CH
I
COO
Fumarato

COO
I
CH2
II
CO
I
COO

COO
I
CH2
I
COO
Malonato

Oxalacetato

Figura 5.24.- a) Reaccin de la Succinato deshidrogenasa. b) Inhibidores competitivos de dicha enzima.

Obsrvese el parecido estructural de los inhibidores oxalacetato y malonato con el sustrato normal de la reaccin. Al
igual que el succinato ambos inhibidores presentan dos grupos carboxilos terminales.

Enzimas y vitaminas

101

6.2.2.- Inhibicin acompetitiva

En este tipo de inhibicin el inhibidor no se combina con la enzima libre ni afecta a su
reaccin con el sustrato normal, sino que se combina con el complejo enzima-sustrato para
formar un complejo inactivo enzima-sustrato-inhibidor, el cual no experimenta su
transformacin posterior en el producto natural de la reaccin.
ES + I

ESI

La constante del inhibidor es, por tanto:

[ES] [I]
KI =
[ESI]
La caracterstica de este tipo de inhibicin es que se modifican KM y Vmax, pero sin que
se modifique la pendiente de la ecuacin, al aumentar la [I] (figura 5.25).
Este tipo de inhibicin es poco frecuente en las reacciones de un slo sustrato, pero es
bastante corriente en las reacciones con dos sustratos. Como puede observarse en la figura
5.25, al aumentar la concentracin del inhibidor, la Vmax decrece.

Figura 5.25.- Inhibicin acompetitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia del inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia del inhibidor.

6.2.3.- Inhibicin no competitiva

Un inhibidor no competitivo puede combinarse con la enzima libre o bien con el
complejo enzima-sustrato, interfiriendo con la accin de ambos. Los inhibidores no competitivos
se unen a un centro del enzima distinto del centro activo, a menudo para deformar a la enzima,
de modo que no pueda formarse el complejo enzima-sustrato a su velocidad normal, y que una
vez formado no se descomponga a su velocidad habitual para liberar los productos de
reaccin.

Enzimas y vitaminas

102

El tipo ms normal es la inhibicin producida por reactivos que pueden combinarse

libremente con algn grupo funcional, situado fuera del centro activo de la enzima, que sea
esencial para mantener la conformacin tridimensional de la enzima, dicha conformacin es la
que permite la existencia del centro cataltico.
En este tipo de inhibicin se modifica la Vmax sin que se modifique la KM al aumentar la
[I] (figura 5.26).

Figura 5.26.- Inhibicin no competitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia del inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia del inhibidor.

Un ejemplo lo constituye la accin del cido iodoactico. Se ha encontrado que ese

inhibidor reacciona con un grupo -SH, esencial, de la enzima gliceraldehdo-fosfatodeshidrogenasa, que designaremos por E, y produce una forma cataltica inactiva (figura 5.27)
E -SH

Forma activa

ICH2COOH

E - S - CH2COOH

. iodoactico

IH

Forma inactiva

Figura 5.27.- Inhibicin de la Gliceraldehdo-P-deshidrogenasa, por accin del cido iodoactico

Los efectos inhibidores comparados de estos tres tipos de inhibicin, sobre la

representacin grfica de Lineweaver-Burk, se muestran en la tabla de la figura 5.28.
Tipos

Parmetros

KM

KM/Vmax

Vmax

Competitiva

Modifica

Modifica

No modifica

Acompetitiva

Modifica

No modifica

Modifica

No competitiva

No modifica

Modifica

Modifica

Figura 5.28.- Efectos inhibidores comparados.

Enzimas y vitaminas

103

7.- VITAMINAS
Los animales necesitan disponer de dos tipos de principios nutritivos, de carcter
orgnico y de carcter inorgnico.
Los primeros se necesitan en cantidades grandes y son imprescindibles para cubrir sus
necesidades energticas y para ser utilizados como fuente de carbono. Tambin se precisan
aminocidos, necesarios para la sntesis de protenas y de otros compuestos nitrogenados.
Los segundos son necesarios para el adecuado crecimiento, funcionamiento y
reproduccin de los animales, a este grupo se les conoce como vitaminas y se diferencian del
primer grupo en que se necesitan en muy pequeas cantidades, si bien su falta produce
trastornos fisiolgicos que se conocen como enfermedades nutritivas carenciales y que son
fcilmente previsibles y curables con la administracin del principio ausente. Este tipo de
enfermedades se conocen desde hace ms de 200 aos.
Un ejemplo es el escorbuto, enfermedad que atacaba, fundamentalmente, a los
marineros ya que en su dieta no figuraban las frutas frescas ni las hortalizas. Esta enfermedad
comenz a curarse cuando los mdicos de la armada britnica descubrieron que desapareca
suministrando zumo de lima en la dieta. Despus se descubri que era producida por la falta de
vitamina C, cido ascrbico, aislada por primera vez en 1930.
Para que un compuesto sea considerado vitamina, para una especie determinada, no
debe poder sintetizarse en su metabolismo, por lo que deben obtenerse a partir de los
alimentos, a veces como provitaminas, es decir, molculas que el metabolismo transforma
posteriormente en vitaminas. Existen algunas excepciones como la vitamina C, que es
necesaria en los humanos pero es sintetizada por la mayora de los animales a partir de la
glucosa.
Las vitaminas son sustancias lbiles, ya que se alteran con mucha facilidad por los
cambios de temperatura y por los almacenamientos prolongados.
Actualmente se define vitamina como toda sustancia vital, necesaria en trazas para
la funcin celular normal, que hay que tomar, previamente elaborada, en la dieta
alimenticia.
La palabra vitamina se debe a que la primera de ellas que se identific fue la vitamina
B1 denominada tiamina, en cuya composicin aparece un grupo funcional amino.
Aunque la mayora de ellas no llevan grupos amino, el nombre se ha conservado
genricamente.
En la actualidad se conocen todas las vitaminas y se sabe tambin que realizan
funciones como componentes de las enzimas y coenzimas, funciones que debern ser
encuadradas dentro de los procesos catalticos de las clulas.
8.- CLASIFICACIN DE LAS VITAMINAS
8.1.- Vitaminas hidrosolubles
Reciben este nombre por ser solubles en agua y, por lo tanto, en los lquidos
corporales. Presentan una elevada capacidad de difusin.
Su exceso no provoca trastornos ya que se disuelven en la sangre, la cual las
transporta hasta el rin, donde son filtradas y eliminadas por la orina. Slo causan problemas
por defecto.
Las principales, as como sus funciones en el metabolismo, se recogen en la tabla de la
figura 5.29.

Enzimas y vitaminas

104

Vit.

FORMA ACTIVA

TIPO DE REACCIN

Pirofosfato de tiamina (TPP)

Descarboxilaciones

Flavn mononucletido (FMN+)

+
Flavn adenn dinucletido (FAD )

xido-reducciones

HIDROSOLUBLES
Tiamina
B1
Riboflavina
B2

PP

Nicotn adenn dinucletido (NAD )

Nicotn adenn dinucletido fosfato
+
(NADP )

xido-reducciones

cido pantotnico

Coenzima-A

Transferencia de acilos (*)

Fosfato de piridoxol

Transferencia de aminos

Biocitina

Transferencia de CO2

Desoxi adenosil cobalamina

Transferencia de alquilos (**)

cido ascrbico

Hidroxilaciones

Niacina

W
Piridoxol
B6
Biotina
H
Cobalamina
B12
cido ascrbico
C
Figura 5.29.- Principales vitaminas hidrosolubles. (*) - CH3 - COO-. (**) - CH (NH2) - COO-.

8.2.- Vitaminas liposolubles

Reciben este nombre por ser solubles en lpidos e insolubles en agua. Causan
problemas por defecto y por exceso ya que, al ser insolubles, se acumulan en los tejidos de los
seres vivos
Las principales, as como sus funciones, se recogen en la tabla de la figura 5.30.
Vit. LIPOSOLUBLES

PROCESO EN EL QUE ACTAN

Vit. A

Ciclo visual

Vit. D

Transporte y regulacin del Ca

Vit. E

Antioxidante. Procesos de fertilidad

Vit. K

Sntesis de protrombina

2+

Figura 5.30.- Principales vitaminas liposolubles.

______________________________

EJERCICIOS PROPUESTOS EN LAS PRUEBAS DE ACCESO (P.A.U.)

ENZIMAS Y VITAMINAS

1.- Defina enzima, centro activo, coenzima, inhibidor y catlisis. [2]. (2004)
2.- Describa el proceso de catlisis enzimtica [15]. (2001)

Enzimas y vitaminas

105

3.- Defina qu es una enzima [04]. Explique la influencia del pH [08] y de la temperatura [08] sobre la
actividad enzimtica. (2004, 2006).
4.- La catalasa es una enzima que transforma el perxido de hidrgeno en oxgeno y agua. Si en un tubo
de ensayo introducimos catalasa y le aadimos agua oxigenada se produce la emisin de burbujas de
oxgeno. Si al mismo tubo de ensayo se le aaden unas gotas de acido clorhdrico se interrumpe la
emisin. Proponga una explicacin razonada para este hecho [1].
5.- En un ensayo enzimtico se produjo, accidentalmente, una elevacin brusca de la temperatura y se
detuvo la actividad enzimtica. Al bajar la temperatura se recupero la actividad enzimtica. Explique
razonadamente este hecho. [1]. (2004).
6.- En una reaccin qumica en la que una sustancia A se transforma en una sustancia B, se liberan 10
kcal/mol de sustrato. Cunta energa se liberara se la reaccin estuviese catalizada por una enzima?
[1]. Razone la respuesta. (2003, 2005, 2006)
7.- En relacin con la figura adjunta, conteste
las siguientes cuestiones:
a) Qu representa la grfica? [02]. Describa el
comportamiento de ambas enzimas [08].
b) La enzima A cataliza la transformacin del
sustrato X en el producto Y. La enzima B cataliza
la transformacin del sustrato X en el producto Z.
Cul de los dos productos se formar en mayor
cantidad a 40 C? [05]. Y a 70 C? [05].
Razone ambas respuestas. (2005).

8.- Para preparar yogur casero se mezcla bien una cantidad de leche con un poco de yogur y se
mantiene a 35-40 C durante unas ocho horas. Qu pasara si por error se mantuviera la mezcla ocho
horas a 0 C? [03]. Obtendramos yogur si empleamos leche previamente esterilizada? [04]. Y si se
esteriliza el yogur antes de aadirlo a la leche? [03]. Razone las respuestas. (2006).
9.- Al investigar el efecto de la temperatura sobre la velocidad de una reaccin enzimtica se obtuvo la
siguiente tabla:
Temperatura en C
Velocidad (mg producto/segundo)

10
05

15
09

20
14

25
20

30
27

35
33

40
37

45
36

50
23

55
09

60
00

Proponga una explicacin razonada de los resultados registrados en la misma [1]. (2006).
10.- Al medir, a una determinada temperatura y pH, la actividad de una reaccin enzimtica nos
encontramos que durante la situacin fisiolgica A, esta actividad vale 250 moles x min-1 x mg protena-1,
mientras que durante la situacin fisiolgica B vale el doble midindola a la misma temperatura y pH.
Explique las posibles razones que han podido ocasionar este cambio y justifique la respuesta [1]. (2001).
11.- Explique cul es la funcin de las enzimas [06] y qu se entiende por apoenzima [03], coenzima
[03] y centro activo [03]. (2001)

106

Enzimas y vitaminas

12.- La ingestin de metanol (HCH2OH) es muy peligrosa porque el metanol, aunque en s mismo no es
txico, experimenta dentro del organismo una transformacin enzimtica. La intoxicacin por metanol
puede combatirse haciendo que la persona afectada tome mucho etanol (CH3CH2OH), una sustancia
parecida al metanol. Indique una posible causa del efecto protector que el etanol ejerce sobre la
intoxicacin por metanol [1]. (2001)
13.- La grfica muestra la actividad de tres enzimas, pepsina, fosfatasa alcalina y papana, con respecto
a las variaciones de pH.. A la vista de la
grfica, conteste las siguientes cuestiones:
a) Explique qu representa esta grfica
(03). Indique los valores aproximados de pH
para los cuales dos enzimas tienen la
misma velocidad de reaccin (04). Para
valores de mxima acidez, cul es el
enzima con mayor actividad cataltica?.
(03).
b) Si el pH de la sangre fuera de 75, indique
qu enzimas podran presentar actividad
cataltica en el plasma sanguneo (04).
Explique el comportamiento de cada enzima
en funcin del pH (06). (2002).
14.- A la vista de la grfica, conteste las
siguientes cuestiones: (la grfica
representa la velocidad de una reaccin
enzimtica con respecto a la
concentracin de sustrato)
a) Explique qu representa esta grfica
(05). Por qu la velocidad de la reaccin
aumenta al principio de la curva, al
aumentar la concentracin de sustrato?
(05).
b) Por qu la velocidad de la reaccin
permanece prcticamente constante a
partir de una determinada concentracin
de sustrato? (05). Qu ocurrir si
aumenta la concentracin de enzima? (05). (2002)
15.- Enumere tres factores que influyan en la actividad enzimtica [03]. Explique detalladamente dos de
ellos [12]. (2003, 2006 y 2008) En el 2006 y 2008 modifica las puntuaciones parciales, adjudicando
[06] y [14] respectivamente.
16.- Defina: enzima, centro activo, coenzima, inhibidor y energa de activacin (2). (2007).
17.- Explique razonadamente cmo afectan la temperatura, el pH y la concentracin de sustrato a la
actividad de las enzimas (15). Describa los tipos de inhibicin enzimtica (05). (2007).
18.- En algunas ocasiones, cuando se almacenan patatas en condiciones de humedad, la parte del
tubrculo que ha estado en contacto con el agua presenta cierto sabor dulce. Explique razonadamente el
hecho describiendo el proceso bioqumico que podra haber ocurrido [1]. (2002).

Enzimas y vitaminas

19.- La grfica adjunta representa la

evolucin de la actividad de cuatro
enzimas cuando se las somete a
valores diferentes de pH. En relacin
con ella, conteste las siguientes
cuestiones:
a) Compare e interprete de forma
razonada el trazado de las distintas
curvas de actividad [1].
b) Explique la diferencia existente entre
los ptimos de actividad de la tripsina y
de la pepsina teniendo en cuenta que
una acta en el estmago y otra en el
intestino [05]. Cmo influye el pH en
la actividad enzimtica de la papana?.
Razone la respuesta [05]. (2003).
20.- En la siguiente curva se representa una
cintica enzimtica mostrando la velocidad de
reaccin respecto a la cantidad de sustrato, con
una concentracin de enzima constante. De
qu manera se vera afectada la curva si se
introdujese ms cantidad de enzima en el punto
indicado por la flecha? [05]. Y si
introdujramos un inhibidor irreversible en el
punto marcado con una X? [05]. Razone las
respuestas. (2008).
21.- En relacin con la
figura adjunta en la que se
representa un enzima, su
sustrato y dos inhibidores,
conteste las siguientes
cuestiones:
a).- Describa qu ocurre en
los procesos A y B [1].
b).- Realice un dibujo y
describa qu ocurrira en
una reaccin con el enzima
en presencia de su sustrato
y del inhibidor 2 [05].
Indique qu ocurre en el
proceso A si se produce un
cambio brusco en el pH o en
la temperatura [05]. (2008).
______________________________

107