UNIDAD 2

ESTRUCTURA MICROBIANA

2.2 PARED CELULAR

LAS BACTERIAS TIENEN PARED CELULAR?

Cmo est compuesta?
Qu tan rgida es?
Para qu la necesitan?
Son iguales a las de los vegetales?
Es igual en todas las bacterias?

2.2 Pared celular: estructura, composicin

qumica y funcin de las paredes celulares
de Eukarya, Archaea y Bacteria. Clulas
carentes de pared celular naturales e
inducidas.

Muchos grupos microbianos comparten estructuras

semejantes, lo que nos permite imaginar que son esenciales
para su viabilidad, tal es el caso de la Pared celular.

La PARED CELULAR permite a las bacterias, algas y hongos

tener formas rgidas caractersticas.

Las bacterias tienen

formas bsicas
esfricas, cilndricas y
curvas caractersticas
debido a la presencia
de su Pared Celular

LA PARED CELULAR BACTERIANA

Es una estructura compleja, semirgida, responsable de la
forma de la bacteria. La pared celular rodea la frgil
membrana citoplasmtica protegiendo el interior celular
de los cambios en el medio ambiente.
La mayora de los procariotes poseen pared celular
La principal funcin de la pared celular es prevenir la
ruptura de las clulas cuando su presin interna es mayor
que la de su exterior, esto ocurre cuando la bacteria se
encuentra en medios hipotnicos.

La pared celular mantiene la

forma de la clula bacteriana ,
s fuese eliminada, el
microorganismo se convertira
en una burbuja amorfa .
Sirve de anclaje a los flagelos ,
y distintos receptores estn
localizados en ella.
La interaccin de la pared
celular con el ambiente
externo de la clula bacteriana
determina su supervivencia.

Pptidoglucano o Murena

Saco de murena
asilado de E. coli
y visualizado con
microscopa
electrnica.

El disacrido del pptidoglicano (murena) esta compuesto por:

N-acetilglucosamina (NAG) y
el cido N-acetilmurmico(NAM)

GLUCOSA + N-ACETILO

GLUCOSA + N-ACETILO +
AC. OXIPROPANOICO

Enlace glucosdico (1>4)

Estos 2 carbohidratos se enlazan por uniones glucosdicas (1>4)

formando una cadena de 10 a 65 azcares, que constituyen la
porcin glucosdica de la pared celular

Las cadenas de NAM-NAG son unidas por pequeos pptidos

que constituyen la porcin peptdica de la pared celular.

La parte peptdica del pptidoglucano en general, esta constituida

por cuatro aminocidos unidos al cido acetilmurmico.
Los aminocidos que con mayor frecuencia son encontrados en
ste pptido son : D-Alanina, L-Alanina , cido D- Glutmico y/o
D-Lisina bien Ac. Diaminopimlico. Este hecho es nico pues los
aminocidos que se encuentran generalmente en otras protenas
son todos de la forma L.
Los aminocidos se unen para formar una estructura repetida
llamada el pptido del glicano, constitudo por 4 5 a.a

El cido
Diaminopimlico
(DAP) no ha sido
encontrado en
Arqueas ni en
Eucariontes

Enlaces en la pared
Gram positivas

Gram negativas

Se conocen ms de
100 tipos distintos de
pptidoglicano, su
variacin ms
importante se refiere
al nmero de puentes
peptdicos y al tipo de
aminocidos
presentes.

PPTIDOGLUCANO en Escherichia coli.

PPTIDOGLUCANO en Staphylococcus aureus.

SNTESIS DE PARED CELULAR

Ensamblaje
de la pared
celular
El ensamblaje de las
subunidades de la pared
celular ocurre en el lado
citoslico de la MI. Los
precursores de azcares
UDP-activados son
montados sobre un
portador poli-isoprenoide
(BACTOPRENOL), estos
forman el Lpido II (b), que
entonces es transportado a
travs de la MI por un
mecanismo desconocido.

Nature Reviews Drug Discovery 5, 321-323 (April 2006)

uridina

http://www.scielo.br/img/revistas/qn/v31n2/a33fig01.gif

Ensamblaje de la Pared Celular

PBPs

Autolisinas: Cortan
previamente los enlaces
glicosdicos y peptdicos
para que se intercalen
nuevas subunidades

PBPs: Penicillin Binding Proteins

Transglicosilasas y transpeptidasas
Nature Reviews Microbiology 6, 28-40 (January 2008)

Growth of the bacterium requires

continuous remodelling of the
peptidoglycan envelope. Bacteria,
therefore, also possess a series of
autolytic enzymes, such as
glycosidases, peptidases and
amidases, that selectively
cleave the molecular meshwork and
thereby facilitate the insertion of
additional cell-wall material.

http://pharmaxchange.info/press/2011/03/animation-of-synthesis-of-peptidoglycan-layer/

Ensamblaje de la Pared Celular

Gram positivas

Gram negativas

Antibiticos que afectan la sntesis de pared celular

PARED CELULAR EN BACTERIAS GRAM POSITIVAS

Debido a que la pared celular de las bacterias Gram (+) estan
constitudas por una capa gruesa de pptidoglicano son ms
sensibles a la accin de la penicilina, lisozima y sus derivados, ya
que estos antibiticos inhiben la formacin de los enlaces peptdicos
intracatenarios del pptidoglicano y glucosdicos entre NAM y NAG.

Las bacterias G(+) y G( - )muestran diferencias estructurales

muy importantes.en su pared celular:

Membrana
externa

Espacio

Peptidoglicano

periplsmico
Membrana
citoplasmtica

Gram Positivas

Gram Negativas

TINCIN DE GRAM

Hans Christian J.
Gram, 1853-1938

El cristal-violeta con el Yodo forma un complejo insoluble. El etanol en Gram +

deshidrata porque tienen una pared celular (PC) muy gruesa con varias capas de
pptidoglucano y se cierran los poros de la PC lo que impide la salida del
complejo cristal violeta-yodo.
En Gram - el alcohol penetra rpidamente la membrana externa que es rica en
lpidos y el complejo se extrae fcilmente.

Gram positivas

Staphylococcus aureus

Bacillus anthracis

Algunos de estos cidos que contienen glicerol se asocian a los

lpidos de la membrana, tomando el nombre de cidos
lipoteicicos.

Algunos microorganismos como Bacillus, tienen cidos

teicurnicos como parte de la estructura de su pared celular
cuando crecen en medios con bajas concentraciones de fosfatos.
Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)

Muchos patgenos Gram + presentan tipos especiales de glicopolmeros

(CGW) en su pared celular adems de los cidos teicicos

Glicopolmeros
de Pared Celular
(CWGs)
Mantenimiento de las
envolturas.
Interacciones
MicroorganismoHospedero.
Existe una gran variedad.
Son altamente
antignicos.
Son usados como
marcadores.
Nature Reviews Microbiology 6, 276-287 (April 2008)

cidos teicoicos y otros

componentes.
cidos teicoicos
cidos teicurnicos

Polisacridos neutros

cidos lipoteicoicos
(LTA)

Polmeros de ribitol fosfato o glicerol fosfato.

Polisacridos cidos conteniendo cido
urnico (N-acetilgalactosamina y acido Dglucornico). Bacillus subtilis en medios
pobres de fosfato.
Son particularmente importantes en la
clasificacin de estreptococos y
estafilococos (ejemplo en grupos A, B y C
de estreptococos).
Asociados a la protena M de Streptococcus
pyogenes

Gram negativas

Neisseria meningitidis

Enterobacter cloacae

PARED CELULAR EN BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

La membrana externa de
la pared de Gram
negativos no solamente
esta compuesta por
fosfolpidos, contiene
adems el
LIPOPOLISACRIDO
(LPS), lipoprotenas,
porinas y otros
receptores.

Ms 50%

Entre 10 y 20%

DIFERENCIAS ENTRE BACTERIAS GRAM (+) y Gram (-)

Caracterstica

Gram
Positivas

Gram
Negativas

Grueso de la pared

20-80 nm

10 nm

Nmero de membranas

Contenido de lpidos y
lipoprotenas

0-3%

58%

Contenido de protenas

0%

9%

Lipopolisacrido

13%

Sensibles a penicilina

- (Poco)

Sensibles a lisozima

- (Poco)

Espacio periplsmico (periplasma)

Es el espacio que se
encuentra entre las dos
membranas en las
bacterias Gram
negativas, comprende
del 20-40% del total del
volumen celular, este
periplasma tiene
embebido la capa de
murena y una solucin
densa de protenas que
facilitan la nutricin e
inhibicin de algunas
sustancia txicas.

Protenas del periplasma

Protenas de unin:
-Aminocidos (arginina, leucina)
-Azcares (galactosa, glucosa,
arabinosa)
-Vitaminas (tiamina, Vitamina B12)
-Iones (fosfato, sulfato)
Enzimas degradativas:
-Varias fosfatasas
-Proteasas
-Endonucleasa I
-Macromolculas
Enzimas destoxificantes:
--lactamasas
-Enzimas fosforilantes de
aminoglucsidos

PROTENAS DEL ESPACIO PERIPLSMICO

Tipo de
enzima

Ejemplos

Funcin

Enzimas
hidrolticas

Fosfatasas

Degradantes, compuestos que contienen

fosfato

Proteasas

Degradantes protenas y pptidos.

Endonucleasas

Degradantes cidos nucleicos.

Azcares, aminocidos,
iones, vitaminas

Protenas de acoplamiento para el

transporte a travs de la membrana.

Protenas de quimiotaxis

Percepcin del medio ambiente y el cambio

de comportamiento de la clula en respuesta
a un estmulo.

-lactamasas

Degradantes, la penicilina y compuestos

relacionados antes de que tengan contacto
con la clula.

Protenas
de unin a:
Quimioreceptores
Enzimas
desintoxicantes

Funciones del periplasma

Osmorregulacin:
El periplasma tiene una
osmolaridad igual que el
interior, lo cual es
regulado por que existe
un gradiente osmtico
con el exterior, por medio
de la formacin de altas
concentraciones de
oligosacridos derivados
de membrana (8-10
unidades de glucosa
enlazados y sustituidos
con glicerol-fosfato).

Transporte de molculas:

Micobacterias

Mycobacterium tuberculosis

Micobacterias

Mycobacterium tuberculosis

Diversidad de las estructuras de

superficie en arqueobacterias

Nature Reviews
Microbiology 9,
414-426, 2011

Arqueobacterias

Nature Reviews Microbiology 9, 414-426, 2011

PARED CELULAR EN ARQUEAS

Algunas especies de Arqueas carecen de pseudopptidoglicano y estn
cubiertas por polisacridos, glicoprotenas protenas.
La forma ms comn de pared de las Arqueas es la capa S paracristalina,
que est compuesta de protenas o lipoprotenas dispuestas en simetra
hexagonal. Esta estructura se encuentra en Arqueas como los halfilos
extremos, metangenos y los hipertermfilos.
Sus funciones son idnticas a las de Eubacterias y son resistentes a
penicilina y lisozima.

Capa S de Aquaspirillum
serpens de simetra
hexagonal

Capa cristalina S
Se encuentra principalmente en arqueobacterias
y en algunas bacterias.

Hipertermfilas

Mesfilas

Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)

Pseudomurena

N- acetilglucosamina y cido
N-acetiltalosaminurnico.
Enlaces 1-3.
Resistente a la lisozima y a la
penicilina.
Descrita en los
Methanobacteriales y en el
gnero Methanopyrus.

Clulas sin Pared Celular

Micoplasmas

Mycoplasma pneumoniae

Protozoarios

Amoeba

Clulas sin Pared Celular

Protoplastos las clulas bacterianas a
las que se ha desprovisto totalmente
de pared celular.
Esferoplastos son aquellas clulas
bacterianas que poseen restos de
pared.
Gram-positivas, la desorganizacin
total de su pared, por lo que se
obtienen protoplastos.
Gram-negativas, quedan restos de
membrana externa y de
peptidoglucano atrapados en ella, por
lo que se obtienen esferoplastos.

En ambos casos,
protoplastos y
esferoplastos pueden
revertir a la forma normal
eliminando el tratamiento.

Clulas sin Pared Celular

Obtencin. Existen dos posibles mtodos alternativos:
Por destruccin del entramado del PG mediante enzimas lticas
(lisozima, peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas,
previamente hay que desorganizar la membrana externa para
hacerla permeable a estas enzimas. Ello se logra usando el
quelante EDTA y/o sometiendo las clulas a bajas temperaturas.

Clulas sin Pared Celular

Por inhibicin de la
formacin de nuevo PG
en las clulas en
crecimiento, tratndolas
p. ej., con penicilina. Si se
parte de un mutante
auxtrofo para un
componente del PG
basta hacer crecer a la
bacteria en un medio
carente de dicho
componente.

FORMAS L
nFormas

L naturales:
nCarentes totalmente (o casi) de PC que algunas
bacterias generan espontneamente en medios a
base de suero (que son hipertnicos)
nEjemplo: Streptobacillus moniliformis
nColonias en forma de huevo frito

nFormas

L inducidas: Tratamiento con penicilina en

medio hipertnico
nL inestables: tratamiento breve; revierten PC
nL estables: tratamiento prolongado; no revierten PC

PARED CELULAR EN
HONGOS

Constituda por quitina( Polmero

de N-acetil-glucosamina), algunas
especies poseen microfibrillas de
celulosa y otras presentan
polmeros como mananos,
galactanos quitosano

Quitina

La Quitina tambin esta presente en el exoesqueleto de los arcnidos,

crustceos e insectos

Quitosano

La Quitina se desacetila para transformarse en Quitosano y Quitano

PARED CELULAR DE ALGAS

Celulosa

Formada por molculas de glucosa unidas por enlaces 1-4

LOS PROTOZOARIOS NO TIENEN PARED CELULAR

Pared Celular
Bacterias

Micobacteria

Pptidoglucano
(N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico)
cidos Teicoicos y Lipoteicoiocos en Gram positivas
Pptidoglucano
(N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico)
Acidos Miclicos

Arqueas

Pseudopeptidoglucano
(N- acetilglucosamina y cido N-acetiltalosaminuronico)
Polisacridos, glicoprotenas o protenas (Glucosa, cido
glucornico, galactosamina, acetato, SO4-)
Capa cristalina S
Protena o glicoprotena

Hongos

Principalmente Quitina

Algas
Protozoarios

Principalmente Celulosa
No tienen pared