EQUIPO 4

CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Problema 1
Se coloca una mezcla de los compuestos 1 al 6 formando una mancha a 2.0cm
a la derecha y 2.0 cm por encima del borde inferior izquierdo de una placa
para cromatogafa
de capa fina. Se permite que el Cromatograma se
desarrolle en el disolvente A, hasta que el frente del disolvente llega a una
distancia de 12.0cm del borde inferior de la placa. Despus de esta operacin
se observan 2 manchas, una a 4.5 cm y la otra a 10cm del borde inferior del
placa. Tras dejar secar la placa se gira 90 en sentido contrario a las manecillas
del reloj y se corre el Cromatograma en el disolvente B hasta que el frente del
disolvente se encuentre a 12cm del borde sumergido de la placa. La primer
mancha de izquierda a derecha se separa en 4 manchas: a 2.7,5.1,6.5 y 9.9
cm del borde inferior; la segunda manca se separ en dos, a los 4.7 y 10.6 m
del borde inferior, Dibuje la apariencia de la placa (a escala aproximada)
despus de la primera etapa y despus de la segunda etapa de la separacin, y
calcule los valores de Rf de cada mach en cada etapa.

En el disolvente A
Primera banda:

Rf =

4.5
=0.375
12

banda:

Rf =

Segunda

10
=0.83
12

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Primer macha sus cuatro manchas:

1)Rf=2.7/12=.225
2)Rf=5.1/12=.425
3)Rf=6.5/12=.541
4)Rf=9.9/12=.825
Segunda mancha con dos manchas:
1)Rf=4.7/12=.391
2)Rf=10,6/12=.883

Problema 2.
Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos
manchas con las siguientes caractersticas (distancia de migracin desde el
origen x y dimetro de la mancha w).
xA = 49 mm wA = 2.0 mm
xB = 33 mm wB = 2.5 mm
El frente de la fase mvil fue de 61 mm, desde el inicio. Calcule los valores de
Rf para los compuestos A y B.

Rf =

49 mm
33 mm
=0.8032 Rf =
=0.5409
61 mm
61mm

Problema 3.
Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos
manchas con las siguientes caractersticas (distancia de migracin x y dimetro
de la mancha w).
xA = 27 mm wA = 2.0 mm
xB = 33 mm wB = 2.5 mm
El frente de la fase mvil fue de 60 mm, desde el inicio.
a) Calcule el factor de retardo Rf, la eficiencia N, y la altura equivalente de un
plato terico HETP para cada compuesto.

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

b) Calcule la resolucin entre los compuestos A y B

c) Establezca la relacin entre el factor de selectividad y el Rf de los dos
compuestos. Calcule su valor numrico
a)

Rfa=

27 mm+1 mm
33 mm+ 1.25 mm
=0.433 Rfb=
=0.5708
60 mm
60 mm

N=16

Tr
L
H=
w
N

N=16

Tr 2
Tr 2
=0.8711 N=16
=0.834
2.0 mm
2.5 mm

Ha=

b)

Rs=

60
60
=68.878 Hb=
=71.935
0.8711
0.834

Tr 1Tr 2
0.57080.466
Rs=
=0 .0465
wb prom
2.25

Problema 4.
La siguiente figura representa los resultados de una placa de CCF en fase
normal (fase mvil: hexano: acetona, 80:20). Los compuestos tienen las
estructuras A, B, y C.

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

a) Indique en el registro, a cuales picos corresponden los compuestos A, B,

y C.
El primer pico a la izquierda corresponde al compuesto C, el segundo a
B y el de
la derecha es A
b)

Cul debera ser el orden de elucin de estos compuestos si se

examinaran por columna de HPLC utilizando los mismos tipos de fases
mvil y estacionaria? El orden de elucin seria: A, B, C.
c) Cul debera ser el orden de elucin de estos compuestos si se
examinaran por columna de HPLC conteniendo una fase de tipo RP-18,
con una mezcla binaria de acetonitrilo: metanol (80:20) como eluente?
El orden de elucin debera ser: C, B, A.
d) Calcule Rf y HETP para el compuesto que migra ms rpidamente sobre
la placa

HETP=

Lomgitud de lacolumna
Numeto de etapas de equilibrio

RfA=

3.2
=0.524
6.1

Problema 5. Para conocer la presencia de trimetoprima y sulfametoxazol en

diferentes productos farmacuticos se emplea la tcnica de capa fina. Se utiliza
una Cromatoplaca de slica gel con indicador. Como fase mvil Mezcla de
cloroformometanol- hidrxido de amonio. Despus de realizar el tratamiento
adecuado a las muestras y estndares e identificarlos como:

se aplic a la placa de gel de slice cromatogrfica, 10 l de las soluciones A y

B de la preparacin de referencia y 10 l de la preparacin de la muestra. Se
dej correr la fase mvil hasta 12 cm arriba de la lnea de aplicacin. Al retirar

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

la cromatoplaca de la cmara, se marc el frente de la fase mvil, se sec con

aire seco, localizando las bandas por observacin bajo luz ultravioleta de onda
corta, rociando con la solucin reveladora y obtuvimos lo siguiente:

a) Determinar la identidad de trimetoprima y Sulfametozaxol en cada

producto segn su Rf.
-La muestra 1 de Pfizer presenta Sulfametazol.
-La muestra 2 de Collins presenta Trimetoprima y
Sulfametozaxol.
- La muestra 3 PiSA presenta solo impurezas.
-La muestra 4 Liferpal presenta Trimetoprima.

b) Identificar los compuestos relacionados de cada producto: NOTA:

Cualquier mancha obtenida con la preparacin de la muestra diferente
de la mancha principal, con valores Rf de aproximadamente de 0.6 a
0.7, corresponderan a las impurezas de Sulfametoxazol. De 0.8 a 0.9 a
las impurezas de trimetoprima y las que sean inferiores a 0.5 se
consideran excipientes.
-La muestra 1 de Pfizer contiene un Rf similar al STD de Sulfametazol
,presenta impurezas del mismo frmaco y se detecta excipientes menor de 5.
-La muestra 2 Collins tiene un Rf similar al STD deSulfametazol y trimetoprima
e impurezas de trimetoprima no manifiesta excipientes.
-La muestra 3 PiSA tiene un Rf similar al de impurezas de sulfametoxazol y
trimetoprima y manifiesta una cantidad de excipiente.

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

-La muestra 4 Liferpal tiene un Rf presentando Trimetoprima e impurezas de

sulfametoxazol tambin se detecta presencia de excipiente.

c) De acuerdo a lo obtenido segn criterios de a) y b), cul sera el

mejor producto (*)? Collins por que se acerca ms a los valores STD de
Trimetoprima y Sulfametoxazol contiene menos impurezas.

Problema 6.
Con un CG y una columna de relleno de 40 cm se obtuvieron los siguientes
datos:
Compuesto
Aire
Metilciclohexano
Metilciclohexeno

tR [min]
1.9
10.0
10.9
13.4

W1/2 [min]
0.76
0.82
1.06

Calcular:
a) El nmero de platos tericos promedio
para la columna.
a) N =

16

tR
W

( )

10.0 2
=2270.08
0.76

( )

NA =

16

NB =

10.9 2
16
=2827.12
0.82

( )

b) La altura del plato promedio

b) H

L
N

H=

40 cm
=0.0156
2551.37

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

16

NC =

13.4
=2556.92
1.06

( )

= 2551.37
Problema 7.
En una columna de 122 cm de longitud y a una temperatura de 160C se
obtuvieron los siguientes tiempos de retencin en minutos: pico del aire 0.90,
heptano 1.22 y octano 1.43. El ancho en la base de los picos fue de 0.14 min
para el heptano y de 0.20 min para el octano.
a) Calcular la retencin relativa y la resolucin para estos picos.
b) Qu longitud debera tener la columna para obtener una resolucin de 1.5?

(Trb )Tm
2(trbtra)
Rs=
Wb+Wa
( Tra )Tm

a)

b)

(1.43 )0.90
2 (1.431.22 )
=1.6562 Rs=
=1.2352
0.200.14
( 122 )0.90

TrBTrA
tR 2
L
R=
N=16
H=
W prom
W
N

( )

Wprom=

1.431.22
1.325 2
=0.14 N=16
=1433.16
1.5
0.14

N=16
L = (N)(H)
L = (0.12002)
L = 172.08 cm

1.22 2
= 1215.02
0.14

( )

1.43 2
N=16
=
0.20

( )

(1433.16)
817.96

= 1016.49

H=

122
=0.12002
1016.49

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Problema 8
Considerando una columna con una altura de plato de 1.5 mm y con nmero de platos de
333, por la que fluye el gas portador a un caudal de 3 ml/min, y sabiendo que el volumen
muerto es de 1.0 ml:
a.- Cules son el tiempo de retencin y el volumen de retencin cuando k es 1, 2 ,5 y
10?
b.- Cul sera la anchura en la base de los picos a cada uno de los valores anteriores de
k?

Problema 9.
Calcular a) el factor de capacidad o de retencin k, y b) la resolucin Rs, de los siguientes
analitos en un sistema cromatogrfico por HPLC, con los datos que figuran en la siguiente
tabla:

to= 1.12 min

c) Indicar si los picos cromatogrficos de los componentes de la muestra estn bien
resueltos; d) calcular el nmero de platos tericos efectivos para el 1-naftol.

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

a)

(1.721.12)
=0.5357
1.12

k=

(7.341.12)
=5.5535
1.12

k=

(7.701.12)
=5.875
1.12

k=

(5.521.12)
=3.9285
1.12

A
W B+ W

2(t RBt RA )
Rs =

Rs =

2(5.521.72)
=0.6 .7078
( 0.65+ 0.483)

Rs =

2(7.707.34)
=0.455
(1.083+0.5)

d)

PROBLEMARIO DE

Rt
(
M)
tM
k =

k=

b)

Qumica Analtica III

N=16 (

N=16 (

Rs =

2(7.345.52)
=3.165
(0.5+0.65)

tR 2
)
W

7.34 2
) =3448.04
0.5

Problema 10.
En un cromatograma, los tiempos de retencin de los picos A, B y C, donde A es una
sustancia no retenida, son 0.84, 10.60 y 11.08 minutos, respectivamente.
a) Calcular los tiempos de retencin corregidos y los factores de capacidad para B y C.

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

b) Sabiendo que los anchos de banda en la base para B y C son 1.21 y 2.10 segundos
respectivamente, calcular la resolucin entre estos dos picos.
Sustancia
No retenida
B
C

TR (min)
0.84
10.60
11.08

W (seg)
------------------------------------1.21
2.10

t ' R =t Rt M
Para B

t ' R =10.600.84=9.76 min

Para C

t ' R =11.080.84=10.24 min

k'=

t 'R
t 'M

Para B
'

k=

Para C

9.76 min
10.24 min
'
=8.92min k =
=12.19 min
0.84 min
0.84 min

A
W B+ W

2(t RBt RA )
Rs =

Para B y C

Rs =

2(11.0810.60)
=17.45
(0.035+ 0.020)

Problema 11.
En una columna tubular abierta de paredes recubiertas de 15 m de longitud y 0.25 mm de
dimetro interno, el gas portador circula a un caudal de 3 ml/min. Sabiendo que los
tiempos de retencin para el heptanoato de metilo y para el octanoato de metilo son de 60
y 89 s respectivamente, y que el nmero de platos tericos de la columna es de 3000,
calcular:
a) El tiempo muerto (suponer despreciable el espesor de la fase estacionaria)
b) El factor de capacidad o de retencin

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

c) La anchura en la base de cada compuesto

d) La resolucin entre picos e indicar si estn resueltos hasta lnea base
L= 15 m
Diametro= 0.25 mm
F=3 mL/min

Heptanoato de metilo t R=60 seg

Octanoatode metilo t R=89 seg
N=3000

F=(u 0)( r 2)
3

u0=

F
3 cm /min
6,111.55cm
=
=
2
2
min
( r ) (3.1416 )( 0.0125 cm )
u0 6,111.55 cm/min
=
=4.074 min=14.73 seg
L
1500 cm

t M=

t
( Rt M )
tM
k =

Para Heptanoato

k=

Para Octanoato

(6014.73)
=3.073
14.73

W=
c

W=

tR

N
16

k=

60
=4.38
3000
16

89
=6.50
3000
16

(8914.73)
=5.042
14.73

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

A
W B+ W

2(t RBt RA )
Rs =

PROBLEMARIO DE

2(8960)
=5.33
6.5+ 4.38

Problema 12.
Los datos de la tabla se obtuvieron a partir de un cromatograma de una
muestra con tres componentes:

Con estos datos, sabiendo que el caudal de fase mvil fue de 1.0 ml/min y
teniendo en cuenta que el cromatograma no es ideal, calcular:
a) Volumen muerto de la columna y factor de retencin de A. Qu indica el
resultado obtenido?

Vm=

k=

trtM
tM

k=

2.81
=1.8
1

k (Vs)
k

b) Ancho en la base de los picos.

N
16
w=
Tr

13204
21897
30115
16
16
16
w=
=10.25 w=
=6.49 w=
=6.48
2.8
5.7
6.7
c) Resolucin entre los picos de Ay B y entre los picos de B y C.

R=

2(TrbTra)
wa+wb

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

R=

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

2(5.72.8)
2(6.75.7)
=0.3465 R=
=0.1542
6.49+10.25
6.48+6.49

d) Qu eficacia mnima se requiere para que un cuarto componente,

D, con tiempo de retencin de 4.5 min salga resuelto, al menos
aceptablemente de B (Rs=1).
Problema 13.
Utilizando el Cromatograma calcule:

a El factor de retencin para cada pico

k 1=

k 4=

3.8
4.5.8
5.8.8
=2.75 k 2=
=4.625 k 3=
=6.25
.8
.8
.8

7.8
8.4.8
=7.75 k 5=
=9.5
.8
.8

b El factor de selectividad para los picos 3 y 4

(trb)tM
( tra )tM

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

(7 )0.8
=1.24
(5.8 )0.8

El nmero de platos tericos para el pico nmero 3 empleando el

valor de W

N=5.545

tr
( w .5 )

N=5.545

5.8
=24.73
d) La resolucin entre
( 1.3 )

los picos 1 y 2

R=

2(TrbTra)
wb+wa

R=

2( 4.53)
=1.36
1.2+1

Problema 14.

Solucin:
Pico 1
N= 16

TR
w

( )

N=1393.77

N=16

2.8
.3

( )

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Resolucin pico 3 y 4
R=

2( TRbTRa)
Wb+ Wa

R=

2( 6.46.1)
.3+.3

R= 1

III. METODOS DE CUANTIFICACIN EMPLEADOS EN CROMATOGRAFA

Problema 15.
Se separ una mezcla con teofilina y materiales relacionados por HPLC
empleando THF 1%, Acetronitrilo 20%, H3PO4 0.1% y el resto de agua. Se
identificaron sus componentes mediante loa tiempos de retencin. Empleando las
mismas condiciones de la separacin, al inyectar una mezcla estndar y una
muestra problema con teofilna, se presentaron los siguientes datos:

Calcular el % de cada componente de las muestra.

uL
ml
uL
Teobromina=3578941 x
=14390.5951
2487
ml
10

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Teofilina=2113847

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

20uL/ml
=1648.5451uL/ml
25645

uL
ml
uL
B hidroxilpropil teofilina=1654872
=12405.3373
1334
ml
10

Cafena=22456

20 uL/ml
=307.8273uL /ml
1459

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Teobromina=14390.5951

Suma Total=28752.3048uL /m

Teofilina=1648.5451
ml

B hidroxi =12405.3373

Cafena=307.8273

uL
ml

Qumica Analtica III

uL
100
28752.3048

uL
ml

uL
ml

100
uL
28752.3048
ml

100
uL
28752.3048
ml

=50.05

=5.73

100
28752.3048

uL
ml

PROBLEMARIO DE

uL
ml

=43.14

=1.07

Problema 16.
Se desea conocer la composicin porcentual de contaminantes presentes en el
aire de una zona de la ciudad. Para ello, se muestra adecuadamente el aire y
somete a anlisis cromatogrfico; se obtiene lo siguiente:

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Suponiendo que los compuestos de la tabla son los nicos contaminantes del aire
de la muestra y adems que el detector presenta igual sensibilidad para todos los
componentes Cul es la composicin porcentual de los contaminates?

tr es mi factor de respuesta
39540/3.1= 12754.83
19320/3.9= 4953.84
62220/ 5.5=11312.72
59300/6.8= 8720.58
722770/ 8.7=45141.37
18200/11.6=1568.96
= 186622.07 U.A.

17050/ 18.30= 931.69

19030/ 22.3 = 853.36

% sulfuro de hidrgeno

12754.83
186622.

(100)

% carbonil sulfuro

4953.84
186622.

(100)

=2.65%

11312.72
186622.

(100)

=6.06%

% dimetil sulfuro

8720.58
186622.

(100)

=4.67%

% disulfuro de carbono

100384.72 (100)
186622.

=53.8%

% bromo cloro metano

45141.37
186622.

=24.2%

% metil mercapto

(100)

=6.9%

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

% 1,4- difluorobenceno

1568.96
186622.

(100)

=0.84%

% clorobenceno

931.69
186622.

(100)

=4.99x10-3%

% 4-bromo fluorobenceno 853.36

186622.

(100)

=4.57x10-3%

Problema 17.
La buprenafina es un derivado de la tebana que produce efectos tpicos de
agonistas opioides mu de larga duracin y potentes efectos antagonistas. Una
enfermera prepara 5 mL. de solucin de buprenofina y procedi a administrar 3
mL. al paciente que pesa 81 kg. Los 2 mL. restantes fueron guardados en
refrigeracin para utilizarlos al da siguiente. Sin embargo el paciente muri a las
pocas horas, y ahora la enfermera presenta cargos legales por negligencia
mdica.
Para resolver este delicado asunto, se prepar un estndar pesando 11.8 mg. de
estndar de clorhidrato de buprenorfina puro, exactamente pesado y transferido a
un matraz volumtrico de 25 mL. se aadieron 20 mL.de fase mvil, se disolvi y
se llev a volumen con fase mvil. Luego se tom 3 mL. de esta solucin y se
llev a 100 mL. con fase mvil. Los 2 mL. de solucin preparada por la enfermera
se pasaron a un matraz volumtrico de 50 mL. y se llevaron a volumen con fase
mvil. Se inyecto por separado 20 microlitros de la preparacin del estndar y de
la preparacin de la muestra al cromatgrafo HPLC.
Para la solucin estndar se obtuvo un rea de 60325 U.A. para el pico de
buprenorfina.
Por otra parte para la muestra preparada, el rea del pico de buprenorfina fue de
54477 U.A.
a) Cul es la concentracin (en mg. de buprenorfina/ mL) de la solucin
preparada por la enfermera.
Pesos moleculares son 467.65 y 504.11 para la buprenorfina y el clorhidrato
de buprenorfina respectivamente.
b) Si la dosis mxima permitida de este medicamento es de 10 g/ kg de
peso, Se excedi esta dosis?

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

Buprenorfina 5 ml.

2 ml.

PROBLEMARIO DE

inyeccin: 20 l.
A= 54477 U.A.
50 ml.

Estndar 11.8 mg. clorhidrato de buprenorfina

Inyeccin= 20 l
20 ml.

3 ml.

A= 60325 U.A.

100

11.8 mg clorhid.

3ml.

20ml.

100 ml.

FRASTD= conc. STD

0.0177 mg clorhid.

20 l inyeccin

ml.

x 20 l.

5.86x10-9 mg clorhid./ U.A.

60325 U.A.

CONC.prob.= (FRASTD) (rea prob.) = 5.86x10-9 mg clorhid. X 54477 U.A.=

U.A
Buprenorf a)
na.
-4
100
3.19x10
mg clorhid.
mg

20 l.

= 3.5x10-4 mg
clorhid.

1000 l.

3.54X10-4 mg clorhid.

rea STD

1 ml.

100
l

50 ml.

1 ml.

.= 0.1479 mg buprenorfina/ ml.

5 ml.

1
mol

3.19x10-4
mg clorhid./ U.A.

1g

504.11 g clorh. 1000 mg

467.65 g
1 mol

1
g

= ..

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

b)
0.1479 mg. buprenorfina

1000 g buprenorfina

1 ml.

1 mg

3 ml.
81 kg.

5.47 g
buprenorfina/ kg.
Peso

Por lo tanto no se excedi la dosis

Problema 18.
Para determinar la cantidad de cocana presente en una grapa decomisada a
un sujeto, se prepar primero un estndar pesando 0.050g de cocana pura y
diluyendo hasta 100 mL en un solvente apropiado (HCl diluido). Se tomaron 5
mL de esta solucin, se diluyeron nuevamente hasta 50 mL y se inyectaron 20
L de esta ltima dilucin al cromatgrafo, obtenindose un rea de 9705 UA.
Posteriormente se prepar la muestra pesando 605 mg de cocana decomisada
y diluyendo a 100 mL. Se tomaron 10 mL de esta solucin y se llevaron a 100
mL, luego se tomaron 10 mL de esta solucin y se llevaron nuevamente a 100
mL. Al inyectar 20 L de la ltima dilucin al cromatgrafo se obtuvo un rea
de 6130 UA para el pico de cocana. Cul es el porcentaje de pureza en la
grapa decomisada?

STD Cocaina

( 0.050 g ) ( 5 mL ) ( 5 x 105 ) ( 1mL)

3
x 20 L=1 x 10 g
3
( 100 mL )( 50 mL )( 1 mL )(1 x 10 mL)
3

FRA STD =

1 x 10 g
=1.0303 x 107 g /U . A .
9705U . A .

Concentracin Del Problema = (1.0303x10-7) (3065 U.A.) = 3.15x10-4 g

( 3.15 x 104 g ) ( 100 mL ) (100 mL)(100 mL)

( 0.010 mL )( 10 mL )( 10 mL ) (605 g)
(0.5219) (100) = 52.19%

= 0.5219

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Problema 19.
Una muestra se analiza por cromatografa de lquidos con la fnalidad de
cuantifcar los componentes que la forman. Despus de inyectar una serie de
estndares se encontraron los siguientes compuestos en la muestra:

% Analito 1

( 654 ) (100)
3066

= 21.3307%

( 533 )( 100)
3066

= 17.3842%

( 205 ) (100)
3066

=6.6862%

% Analito 4 =

( 268 ) (100)
3066

= 8.7410%

% Analito 5 =

( 918 ) (100)
3066

= 29.9412%

( 488 ) (100)
3066

=15.9165 %

% Analito 2 =

% Analito 3 =

% Analito 6 =

Problema 20.
Para realizar un anlisis de drogas, se parte de 3mL de orina, se somete a una extraccin en fase slida,
se eluye con un disolvente orgnico, se lleva a sequedad y finalmente se redisuelve en 0.5 mL de
metanol y se aade dionina hasta una concentracin final de 10mg/L. Se inyecta 1[L de esta disolucin

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

en un cromatgrafo de gases con detector de nitrgeno-fsforo. Los datos obtenidos se encuentran en la

tabla de muestras.

Se hace un calibrado preparando una mezcla de estndares de cocana, cafena y su patrn interno
dionna. Se inyecta 1[L en el cromatgrafo de gases y se obtienen los resultados que se muestran en la
tabla de calibrado. Los promedios de las recuperaciones obtenidas son 82% para cafena y 92% para
cocana. Calcular la concentracin en mg/L y los mg por 100mL de estas drogas en la orina.

Cafena

FRA Ca=

FRA D =

FRR=

5
=2.05104 x 106 ppm/ UA
2437783

10
=6.5669 x 106 ppm/UA
1522794

2.05104 x 106
=0.3123
6.5669 x 106

Concentracin de lacafena=( 0.3123 ) ( 1736698 )

( 100 ) x

10
( 1578336
)=3.4363 ppm

( 3.436382 ppm )=4.1906 ppm

mg
0.5 mL
x
( 4.1906
)
( 3 x 10 L )=0.6984
1000mL
3

mg
0.5 mL
x(
x 100 mL=0.06984
( 4.1906
)
1000mL
3 mL )

mg cafena /L orina

mg cafena/100 mL orina

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Cocana

FRA Co=

FRA D =

FRR=

5
=5.9162 x 106 ppm/UA
845129

10
=6.5669 x 106 ppm/UA
1522794

5.9162 x 106
=0.9009
6.5669 x 106

Concentracin de lacocana= ( 0.9009 )( 435122 )

( 100 ) x

10
( 1578336
)=2.4836 ppm

( 2.483692 ppm )=2.6996 ppm

mg
0.5 mL
x
=0.4499
( 2.6996
)
(
1000 mL
3 x 10 L )
3

mg
0.5 mL
x
x 100 mL=0.04499
( 2.6996
1000 mL ) ( 3 mL )

mg cocana /L orina

mg cocana/100 mL orina

Problema 21.
Se obtuvieron los siguientes datos por cromatografa de gases con una columna cromatogrfica de 1.25
m

Calcular:
a) El factor de capacidad o retencin para cada amina

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA
'

k I=
'

k P=

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

4.590.395
=10.6202
0.395
4.910.395
=11.4304
0.395

b) El factor de selectividad
4.910.395
=
=1.0763
4.590.395

c) El nmero de platos y la altura de plato para la n-propilamina

4.91 2
N P =16
=2643.3596
0.382

H P=

1.25
=47288 x 104 m
2643.3596

d) La resolucin entre las dos aminas

4.914.59
R=
=0.8568
0.5 ( 0.382+0.365 )

e) La longitud de la columna necesaria para conseguir una resolucin de 1.5 y el tiempo necesario para
que se eluya la n-propilamina suponiendo la misma velocidad lineal de flujo
4.59 2
N P =2643.3596
N I =16
=2530.2278
0.365

Promedio de N =

5173.5874
=2586.7937
2

( R s )1 N 1
N 1 ( R s )2 50.8605 (1.5 )
=
N 2=

=89.0415
0.8568
( R s )2 N 2
( R s )1
N 2=7928.3887
H=

1.25
4
=4.8322 x 10 m
2586.7937

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

L=7928.3887 ( 4.8322 x 104 )=3.8311 m

f)

Si se utiliza isopropilamina como patrn interno en una concentracin de 1 mg/L y en un

cromatograma de una muestra se obtienen reas de 23220 para la isopropilamina y de 35421 para
la n-propilamina, cul ser la concentracin de n-propilamina en dicha muestra?
1
FRA i=
=4.9407 x 105 ppm/UA
20240

FRA p=

FRR=

2.5
=6.1683 x 105 ppm /UA
40530

6.1683 x 105
=1.2485
4.9407 x 105

Concentracin del problema=( 1.2485 ) ( 35421 )

Ismero
o-Xileno
m-Xileno
p-Xileno

1
( 23220
)=1.9045 ppm(mg /L)

rea/0.5 uL
1200
1300
1150

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

540

UA0.5 uL
uL100
=0.225uL 0.225
=45
1200 UA
0.5 uL

450

UA0.5 uL
uL100
=0.173 uL 0.173
=34.6
1300 UA
0.5uL

240

UA0.5 uL
uL100
=0.104 uL 0.104
=20
1150 UA
0.5 uL

PROBLEMARIO DE

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Tomate Fresco
FRA std=

50 ug / ml
=6.59E-3 ug UA /ml
7587 UA

Conc . Prob .= 6.59E-3ug

UA
( 23205 UA )=152.92 ug/ml
ml

6 ml
=917.51ug /g
( 152.92ug
)(
1 ml
1g )

Polvo de Tomate

Conc . Prob .= 6.59E-3ug

UA
ug
( 14163 UA )=93.33
ml
ml

ug 6 ml
=560 ug/ g
( 93.33
1ml )( 1 g )

( 302mlng )=15 ng /ml

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

Muestra
Componente
Serotonina
N-Metil-Serotonina

Concentracin (ng/ml)
x
15 ng/ml

rea
2573832
171981

Estndar interno
Componente
Serotonina
N-Metil-Serotonina

FRA std=

Concentracin (ng)
5 ng
5 ng

rea
3088598
3095672

5 ng
5 ng
=1.61E-6 ng FRA prob.=
=1.61E-6 ng
3095672
3088598
ng
1.61E-6 ng
ml
FRR=
=1Conc . prob.=( 1 )( 2573832 )
=224.48 ng /ml
1.61E-6 ng
171981

( )
15

(224.48 ngml ) ( 2 ml)=448.96 ng en la muestra

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

Qumica Analtica III

PROBLEMARIO DE

6 ng
=17.14 ug /Kg
.35 Kg

FRA std=

133ug
48 ug
=2.85E-4 ug FRA prob .=
=1.313E-4 ug
465461
365463

EQUIPO 4
CROMATOGRAFIA

FRR=

Qumica Analtica III

1.313E-4 ug
=0.4595 Conc . prob .=( 0.4595 ) ( 12157 )
2.85E-4 ug

Acetona=

PROBLEMARIO DE

ug
Kg
= 1.1ug /Kg
86532

17.14

10 uL/ml
uL
20 uL/ml
=160429.4049
Etanol=
=19309.6286uL /ml
2134
ml
23455

Agua=

10 uL/ml
20 uL/ml
=475361.3675 uL/ml Xileno=
=777.1153 uL/ml
234
312

Acetona=160429.4049

Suma Total=665877.5164 uL/ml

Etanol=19309.6286uL/ml

Agua=475361.3675uL/ml

Xileno=777.1153 uL/ml

100
uL
665877.5164
ml
100

665877.5164

uL
ml

uL
ml

100
uL
665877.5164
ml

=71.38

=0.11

mg
ml
mg
FRA=
=1.54E-9
32357
ml
5E-5

Conc . prob .=( 1.54E-9 mg /ml ) ( 37515 )=5.79E-5 mg /ml

100
uL
665877.5164
ml

=2.9

=24.09

mg 500 ml 500 ml
( 5.79E-5
)( 0.5 ml )( 1.0312 g )=28.07 mg/ g
1 ml

( 28.07g mg )( 1.032 g)=29.95 mg /1.0312 g

29.95 mg

100
=2.8
( 1031.2
mg )

mg
=0.696 mg/ml
( 17.4
25 ml )

Conc . std .=

Conc . 0 hrs .=45389

mg/ml
( 0.69641284
)=0.765 mg/ml

41284 rea

Conc .12 hrs .=42093

mg/ml
( 0.69641284
)=0.7096 mg/ml

Conc .24 hrs .=39840

mg/ml
( 0.69641284
)=0.671 mg/ml

Conc .36 hrs .=36927

0 hrs=

24 hrs=0.671 mg /ml

0.765 mg
l
m

mg/ml
( 0.69641284
)=0.622 mg/ml

100
100
=109.9 12 hrs=0.7096 mg/ml
=101.9
mg
mg
0.696
0.696
ml
ml

100
100
=96.4 36 hrs0.622 mg /ml
=89.36
mg
mg
0.696
0.696
ml
ml

Problema 29. Calcular la concentracin de Ciprofloxacino, Benzocana e

Hidrocortisona en la muestra, en g/100 mL y reportar si est dentro o fuera de
especificaciones.
-Concentracin del estndar de ciprofloxacino
CCM 331.34 g Ciprof . 5 mL
2mL
=1.6487 x 10
( 12mg
)(
)(
)(
25 mL
385.84 g CCM
50 mL 50 mL )

mg/mL

-Concentracin de benzocana
2 mL
=0.016 mg/mL
( 2050 mg
)(
mL 50 mL )
-Concentracin de hidrocortisona
2 mL
=8 x 10
( 1050 mg
mL )( 50 mL )

mg/mL

-Estndar externo
Pic
o

Sustancia

CCM

2
3

Hidrocortison
a
Benzocana

rea

608
8
562
0
7115

rea
muestr
a

Concentraci
n

FRA=

5836

1.6487x10-3

2.7069x10

1.5797x10-

-7

1.4234x10

8.5987x10-

-6

2.2487x10

0.0154

6041
6876

8x10

-3

0.016

C
A

C=(FRA)
(A

-6

1. Clorhidrato de ciprofloxacino
1.5797 x 103

mg 50 mL
mL 2 mL

mg
=1.9746 x 10
)( 1002 mLmL )=1.9746 mL

g / mL

1.9746 x 10 g (
g
100 )=0.1974
mL
100 mL
Especificaciones: 0.180 a 0.220 g/100mL. Por lo tanto, s cumple.

2. Hidrocortisona
3

8.5987 x 10 mg 50 mL 100 mL 10.7483 mg

=
=0.01074 g/mL
mL
2 mL
2 mL
mL

)(

0.01074 g
1.0748 g
( 100 )=
mL
100 mL
Especificaciones: 0.900 a 1.200 g/100mL. Por lo tanto, s cumple.

3. Benzocana
0.0154 mg 50 mL 100 mL 19.25 mg 0.0192 g
=
=
mL
2 mL
2mL
mL
mL

)(

0.0192 g
1.925 g
( 100 )=
mL
100 mL
Especificaciones: 1.800 a 2.200 g/100mL. Por lo tanto, s cumple.

SE ENCUENTRA DENTRO DE LAS ESPECIFICACIONES

Composicin porcentual
= 0.1974 g/100 mL + 1.0748 g/100mL + 1.925 g/100mL
= 3.1972 = 100%
1. Clorhidrato de ciprofloxacino

mg/mL

3.1972

0.1974

100%

3.1972

1.0748

100%

3.1972

1.925

100%

6.1678
%

33.62
%

2. Hidrocortisona

3. Benzocana

60.21
%

Problema 30. En un laboratorio de control de calidad se quiere poner a punto un

mtodo de anlisis por HPLC en una fase inversa de una mezcla de dos
compuestos A y B. se sabe que, en columna de octadecil slice de 25 cm de
longitud y utilizando una fase mvil de metanol-agua, los tiempos de retencin son
6.25 y 7.10 min respectivamente, el tiempo muerto es 1.4 min y la resolucin es
1.05.
a) Cul debe ser la longitud de la columna para conseguir una resolucin
de 1.5
b) Calcular los factores de retencin de A y B. sern diferentes en la nueva
columna.
Muestra
1

A mg/L
2.0

BK=

K=

trtm
tm

B mg/L
2.0

K=

7.101.4 min
=4.071
1.4 min

K promedio = 3.76785

P.I. mg/L
1.0

rea A
25542

6.251.4 min
=3.464
1.4 min

rea B
36216

rea pi
13320

t R2
t R1

7.11.4
6.251.4

= 1.1753

N 1
R=
4

Ka
( )( 1+ Kprome
)

N 1.17531
4 (

1.05=
L
=N
H

1.5=

1.1753

4.071
)( 1+3.76785
)=N=1087.4

25
1087.4

= 0.023 cm/ plato REAL

N 1.17531
4

1.1753

4.071
)( 1+3.76785
)=N=2219.1863=N platos

TEORICO

L=H* N = 2219.1863 (0.023 cm/ plato) = 51.04 cm

a) 51.04 cm

Problema 31. Para conocer el contenido de hesperidina en aguacate de la

variedad Hass se realiz un anlisis por HPLC. Para ello, se pesaron 15 mg pulpa
seca de aguacate de la variedad Hass y se adicionaron 100 microlitros de una
solucin de 250 microgramos/mL de catequina como sustancia de referencia; se
complet el volumen a 2 mL; de esta solucin, se tomaron 200 microlitros, y se
ajust el volumen a 500 microlitros, para despus inyectar al HPLC,
producindose reas de 513 y 1985 para catequina y hesperidina,
respectivamente; aparte, se prepar un estndar pesando 7 mg de catequina y 5
mg de hesperidina, se afor a 100 mL con metanol:acetonitrilo, y sta solucin se
diluy 20 veces. Despus de inyectar al HPLC, se reportaron reas de 1351 y
1002 para catequina y hesperidina, respectivamente Cuntos miligramos de
hesperidina estn presentes en un kilogramo de pulpa seca en esa variedad de
aguacate?
Mtodo estndar interno
STD= Catequina

Analito de inters= Hesperidina

Conc. STD Catequina y Hesperidina
7 mgCatequina 1 V
3.5 x 103 mgCatequina
=
100 mL
20 V
mL

( )

5 mg Hesperidina 1 V
2.5 x 103 mg Hesperidina
=
100 mL
20 V
mL

( )

2.5 X 103 mg hesperidina /mL

1002
FRR=
=0.9630
3.5 X 103 mgcatequina /mL
1351
CONCprob= (0.9630)(1985)(0.25 mg/513)=0.9316 mg hesperidina/mL
1 x 106 mg 310,533.33 mghesperidina
=
1 kg pulpa
kg pulpa
0.9316 mghesperidina 0.5 mL
2 mL
(
)(
)
mL
0.2 mL 15 mg pulpa

Problema 32.
La determinacin de herbicidas e insecticidas clorados en alimentos, agua potable,
suelo, etc. pueden ser determinados empleando cromatografa de gases con un
detector de captura de electrones. El 4,4-DDT fue determinado en una muestra de
5.0 gr del suelo de una granja donde se emple el insecticida, la muestra se
coloca dentro de un extractor y se reflujarn 50 ml de hexano para extraer el
plaguicida durante 1 hr. A 1.0 mL del extracto se le aade 1.0 ml de una solucin
de Adrin (0.001microgramos/ml), de esta solucin se inyecta 1.0 [L en el
cromatgrafo y las reas resultantes para cada insecticida fueron de: 4, 4'-DDT=
13454 y Adrin= 2335682. Una mezcla estndar comercial que contiene 100 pg/ml
de Adrin y 400 pg/ml de4,4'-DDT fue inyectada en el mismo cromatgrafo

empleando las mismas condiciones que para la extraccin, para esta solucin se
reporta una rea de 1273 para el Aldrin y 23455 para el 4,4'-DDT. Calcule la
concentracin del DDT en la muestra de suelo (en pg/gr de suelo).
Mtodo estndar interno
STD= ADRIN
Analito de inters= 4,4-DDT
400 pg DDT
23,455 UA
FRR=
=0.2170
100 pg ADRIN
1273 UA
CONCprob= (0.2170)(13,474 UA)(0.001 microgramos ADRIN/mL/2,335,689 UA)=
1.25X10-3 microgramos DDT/mL
1.25 x 103 microgramos DDT
1000 pg
mL
1 microgramo

mL
pg DDT
)( 550g suelo
)= 12.5g suelo

Problema 33. Al analizar un licor por cromatografa de gases se obtuvieron los

siguientes datos:
No. STD
Conc. De
Metanol(%vol)
rea de
unidades
arbitrarias

1
0.01

2
0.05

3
0.08

4
0.10

Muestra
?

235

1173

1884

2360

824

Las condiciones de medicin se conservaron constantes (Temperaturas,

sensibilidad del detector, flujo del gas acarreador, etc.) Es importante considerar
que el volumen de los estndares fue constante y bien medido, pero en la muestra
fue inyectado el doble del volumen usual. Cul es la concentracin de metanol en
el licor problema en % vol?
Regresion Lineal
R=0.9999942 segura
824=0.035 % vol Metanol
Problema 34. Para calcular el factor de respuesta en un anlisis cromatogrfico,
se realizaron tres determinaciones con cantidades diferentes de un analito A y de
un estndar interno EI, obtenindose los siguientes resultados.
Muestra

A, mg/l

rea A u.a.

Ei, mg/l

rea Ei u.a.

1
2
3

0.200
0.100
0.200

25532
11830
24110

0.100
0.100
0.200

13320
12320
25150

Una vez establecido dicho factor de respuesta, se analiz por triplicado una
muestra que contiene el analito A y se aadieron 0.1000 mg/l del estndar interno
a cada una de las alcuotas, obtenindose los siguientes datos:
Muestra
4
5
6

rea de A u.a.
21010
21315
21240

rea de EI, u.a.

11201
11500
11425

Calcular la concentracin de A en mg/l

EI:
FRA1 =

CT
AT =

= 8.11 x 10-6

FRA3 =

0.100 mg/l
= 7.50 x 10-6
13320

mg/l
ua

FRA2

0.100 mg/l
12320

mg/l
ua

0.200 mg/l
= 7.45 x 10-6
25150

mg/l
ua

STD:
FRA1 =

10

-6

0.200 mg/l
= 7.8 x 10-6
25532

mg/l
ua

mg/l
ua

FRA3 =

0.200 mg/l
= 8.29 x 10-6
24110

mg/l
ua

FRR1 =

7.8 x 106
7.50 x 106 = 1.044

mg/l
ua

FRR2 =

8.45 x 106
8.11 x 106 = 1.041

mg/l
ua

FRR3 =

8.29 x 106
7.45 x 106 = 1.042

mg/l
ua

FRA2

0.100 mg/l
= 8.45 x
11830

Muestra

FRA=

C4 = (1.044) (21010ua) (

0.1mg/l

= 0.1958 mg/l
11201

C5 = (1.041) (21315ua) (

0.1mg/l

= 0.1929 mg/l
11500

C6 = (1.042) (21240ua) (

0.1mg/l

= 0.1937 mg/l
11425

55 ppm
=1.69E-3 ppm Conc . prob.=( 1.69E-3 ppm ) ( 8626 )=14.58 ppm
32525
mg 10 ml
50 ml
1.76 mg de cafena
=
( 14.58
)(
)(
)
1000 ml 5 ml 0.8265 g
1 g de cafe

=3066
( 654 )

100
( 3066
)=21.33 c . Lctico

( 533 )

100
( 3066
)=17.38 c . Actico

( 205 )

100
( 3066
)=6.68 c .C t r ico

( 268 )

100
( 3066
)=8.74 c . Fumri co

( 918 )

100
( 3066
)=29.94 c . Succnic o

( 488 )

100
( 3066
)=15.91 c . Frmico

Piridoxina=

mg 98.7 mg 0.1036 mg
=
( 10.5
100 ml )( 100 mg )
ml

mg 9 1 .6 mg 0.1996 mg
=
( 21.8
100 ml )( 100 mg )
ml

Tiamin a=

mg
ml
mg
=1.08E-5
9524.5
ml

0.1036
FRA P .=

mg
ml
mg
FRA T .=
=4.37 E5
4563.8
ml
0.1996

mg
( 3954.1 )=0.973 m g/ml
ml

mg
( 4736.9 )=0.2071 mg/ml
ml

Conc . prob . P .= 1.08E-5

Conc . prob .T .= 4.37E-5

Piridoxina=

mg 100 ml 10 ml
48.65 m g
(2 ml)=
( 0.973
)(
)(
)
1ml
10 ml 4 ml
2 ml

mg 100 ml 10 ml
103.9mg
(2 ml)=
( 0.2071
1ml )( 10 ml )( 4 ml )
2 ml

Tiamina=

ng
ml
mg
FRA=
=0.0386
5180
ml
200

Conc . prob .= 0.0386

mg
( 7444 )=287.33 n g /ml
ml

ng
1ug
0.25 ml 0.071 u g
=
de plasma
( 287.33
)(
)(
1 ml
1000 ng
1ml )
1 ml