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pdf se
encuentra ms informacin si algo llega hacer falta
Este fue un resumen que hice de lo que podemos necesitar para desarrollar el punto 2
Descripcin de las bacterias fijadoras de nitrgeno:
Producen enzimas que toman el nitrgeno en su forma gaseosa de la atmsfera, y con
los azcares que obtienen de la planta fijan el nitrgeno dentro de la biomasa
bacteriana. Si las bacterias satisfacen sus necesidades de nitrgeno, entonces el
nitrgeno pasa a la planta y pueden observarse niveles elevados de protena en la
planta. Este nitrgeno elevado no se libera al suelo hasta que muere parte de la
planta, o se exuda al suelo en la rizsfera.
Zona del pas: Colombia, Cesar, Valledupar, condiciones ambientales similares donde
se podran hallar
Posible sitio de sustraccin de la bacteria
Tipo de suelo: Suelo de pastos
-Recuperacin, aislamiento e identificacin de una bacteria fijadora de nitrgeno
asociada a plantas leguminosas.
Informacin que nos puede servir para diagrama de flujo:
Para identificar, o saber si las bacterias fijadoras de nitrgeno simbiticas estn
presentes, se puede hacer mediante el mtodo de bioanalisis que est ligado a los
ecosistemas en donde las legumbres son especies de plantas normales.
Determinacin de bacterias simbiticas fijadoras de N2
Para la evaluacin de la capacidad de nodulacin de las potenciales cepas de
Rhizobium se utiliz Phaseolus vulgaris como planta indicadora, bajo el protocolo
descrito por Ferrara (1993). Para esto, se esteriliz la superficie de las semillas de P.
vulgaris con etanol 85% por 2min, NaHClO al 5,25% por 15min, seguidos de 3 y 10
enjuagues, respectivamente, con agua desmineralizada estril. Posteriormente se
prepararon suspensiones bacterianas con los aislamientos rizosfricos promisorios
que crecieron en el medio ELMARC formando las caractersticas colonias rosadas del
genero Rhizobium, y que tambin presentaron el mayor crecimiento y halo de
disolucin en el medio de ELMARC-HA.
Bsqueda de bacterias fijadoras de nitrgeno
Recoger pequeas cantidades de tierra de por lo menos cinco sitios de un mismo
lugar, mezclar en un envase, cultivar semillas de leguminosas en cinco vasijas
diferentes, cada una de las cuales tendr una proporcin diferente de tierra de muestra
y tierra de abono estril, contar el nmero de ndulos por centmetro de raz, este
nmero deber aumentar a medida que aumentan las cantidades de tierra del lugar.
Aislamiento de bacteria Rhizobium
1. Seleccionar una planta, de preferencia una leguminosa para obtener los ndulos
de sus races.
2. Escoger una raz que tenga los ndulos y lavarlo con agua de la llave para eliminar
la mayor cantidad de suelo.
3. Desprender cuidadosamente el ndulo de la raz y colocarlo en una caja petri
4. Colocar en dos cajas petri alcohol y en otra caja agua destilada

5. Con ayuda de una pinza flamearla en el mechero para esterilizarla, coger el ndulo
y colocarlo en la caja con agua y dejarlo por 1 minuto. Repetir el procedimiento en
las otras dos cajas con alcohol.
6. Colocar el ndulo en otra caja y machacarlo con un estilete o un hisopo hasta
obtener un lquido de color rosado.
7. Inocular un 1ml del lquido obtenido en una caja de agar manitol con extracto de
levadura y con ayuda de una asa sembrar por estras.
8. Igual procedimiento hacer en la caja con agar manitol sin extracto de levadura.

9. Invertir las cajas e incubar a temperatura ambiente de 3 a 4 das