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Octubre de 2011
ii
iii
DEDICATORIA
Quiero dedicarle este trabajo a Dios que me ha dado la fortaleza para terminar este proyecto de
investigacin y a mis padres por estar ah cuando ms los necesit.
iv
AGRADECIMIENTOS
Al Ing. Carlos Faneyth por sus valiosas crticas al discutir los resultados de este trabajo.
A mis padres y hermanos por brindarme un hogar clido y ensearme que la perseverancia y el
esfuerzo son el camino para lograr objetivos.
RESUMEN
Estudios epidemiolgicos nacionales e internacionales sealan que las enfermedades crnicas
degenerativas relacionadas con la nutricin constituyen la primera causa de morbimortalidad
de la poblacin en general, estas enfermedades se pueden prevenir con hbitos de vida
saludable como el consumo de alimentos que ayuden a disminuir los factores de riesgo de
estas enfermedades, por ello se dise y formul una barra de cereal con ingredientes
funcionales utilizando un diseo de mezclas Simplex Lattice para determinar el contenido de
avena, nueces y uvas pasas, que en conjunto constituyen 80% del producto y el otro 20% es
miel, utilizado como ingrediente aglutinante. Se optimizaron las variables contenido de
polifenoles, capacidad antioxidante y aceptabilidad sensorial y se obtuvo una regin optima de
formulacin, se incorpor el factor costo de formulacin mediante programacin lineal, y se
obtuvo la siguiente combinacin de ingredientes: 32% de avena, 24% nueces y 24% uvas
pasas, el aporte calrico de la barra es 396 kcal. por 100 gramos, el contenido de protenas y
grasas es de 8,2% y 15%, predominando los cidos grasos poliinsaturados 67% y
monoinsaturados 21%, el contenido de fibra diettica es 7,14 g/100 g. Los beneficios de estos
nutrientes sumado al poder antioxidante que aportan los compuestos fenlicos de los
ingredientes, le confieren al producto un ndice de actividad antioxidante moderado, esto
contribuye a disminuir el riesgo de incidencia y mortalidad de dichas enfermedades. La barra
de cereal tiene una actividad de agua de 0,52 y una vida til, en funcin a la oxidacin de las
grasas, entre 35 y 29 das para un rango de temperatura entre 25 a 30 C, finalmente se
determin la aceptabilidad del producto con un panel de consumidores que sugiere una posible
proyeccin comercial.
Palabras clave: Barra de cereal, alimento funcional, diseo Simplex Lattice, nuez, avena,
miel, enfermedades crnicas degenerativas relacionadas con la nutricin.
vi
NDICE GENERAL
Pg.
APROBACIN DEL JURADO...
ii
DEDICATORIA...
iii
AGRADECIMIENTOS
iv
RESUMEN...
NDICE GENERAL.
vi
NDICE DE TABLAS..
ix
NDICE DE FIGURAS
LISTA DE ABREVIATURAS.
xii
INTRODUCCIN
13
17
17
18
18
21
21
22
1.2.5 Antioxidantes..
22
1.3 Principales
caractersticas
funcionales
de
los
ingredientes
24
1.3.1 Avena..
24
1.3.2 Nueces.
25
26
1.3.4 Miel.
26
1.4 Cuantificacin
de
los
compuestos
fenlicos
por
tcnicas
espectrofotomtricas
26
28
30
vii
CAPTULO II: METODOLOGA...
33
33
36
36
38
38
2.3.1.1
38
2.3.1.2
38
39
40
41
41
41
42
42
42
44
44
44
45
46
46
46
Evaluacin nutricional.
52
52
55
55
55
57
3.2
viii
3.4.3 Efecto de la temperatura en la cintica de oxidacin de las grasas
de la barra..
3.4.4 Clculo del Q10..
58
59
59
60
62
4.1 Conclusiones.
62
4.2 Recomendaciones.
63
REFERENCIAS...
64
ANEXOS..
79
79
81
97
97
98
100
102
104
ix
NDICE DE TABLAS
Pg.
Tabla 2.1 Diseo de diez corridas para tres componentes
35
36
40
43
46
47
48
52
53
56
58
60
61
x
NDICE DE FIGURAS
Pg.
Figura 1.1 Progresin de las enfermedades isqumicas del corazn.
19
20
23
Diseo
de
diez
corrida
para
una
mezcla
de
tres
componentes.
32
34
48
49
51
54
56
57
58
60
79
80
81
95
95
96
xi
Figura 6.8 Imagen de la barra de cereal diseada y formulada
97
97
para
la
evaluacin
de
la
aceptabilidad
con
consumidores.
98
Figura 6.11 Curva estndar del contenido de polifenoles totales del cido
glico..
98
99
de
los
supuestos
de
99
normalidad,
de
los
supuestos
de
100
normalidad,
101
102
103
xii
LISTA DE SMBOLOS Y ABREVIATURAS
ANOVA
Anlisis de varianza
AM
Antes de meridiano
aw
Actividad de agua
Densidad
Grados centgrados
Gramos
kg
Kilogramos
kcal
Kilocaloras
Litro
Ms o menos
Microlitros
Microgramos
mM
Milimolar
mL
Mililitro
mg
Milgramos
Min
Minutos
Molar
nm
Nanmetros
Normalidad
Nmero
ppm
Porcentaje
rpm
Segundos
UA
Unidades de absorbancia
UV
Ultravioleta
ufc
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INTRODUCCIN
Estos productos relativamente nuevos en el mercado han tenido gran aceptacin y son
percibidos como alimentos saludables y en ocasiones se les atribuyen caractersticas
funcionales porque promueven el contenido de nutrientes y aspectos relacionados con la salud
como: alto en fibra, con cidos grasos poliinsaturados, sin colesterol, entre otros. lo cual
influye en la eleccin de los consumidores sin tener en cuenta el contenido de nutrientes cuya
ingesta se desea limitar como: sodio, grasas totales, grasas saturadas y trans, azcares, entre
otros. (Olivera, 2009).
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una funcin fisiolgica del nutriente como en el crecimiento, el desarrollo y las funciones
normales del organismo como tambin las que contribuyen en el contexto de una dieta
saludable a la reduccin del riesgo de una enfermedad o condicin relacionada con la salud.
Hay dos consideraciones que merecen especial atencin, la primera se relaciona con la
diferencia entre el concepto de disminuir un factor de riesgo y prevenirlo. La mayor parte de
las
enfermedades
crnicas
(obesidad,
diabetes,
cncer,
osteoporosis,
enfermedad
cardiovascular, entre otros.) responden a distintos factores entre los cuales se encuentra el
estilo de alimentacin- que incrementan o disminuyen la frecuencia de aparicin de una
enfermedad. Una persona que disminuye el consumo de grasas saturadas, tendr menos riesgo
de padecer una enfermedad coronaria, pero no puede prevenirla especficamente. Por lo tanto,
no podra hablarse de que un alimento funcional o una dieta en particular previenen una
enfermedad sino que disminuyen su riesgo de aparicin.
Los alimentos funcionales ms relevantes y sobre los que recae la evidencia cientfica ms
slida son los probiticos, microorganismos vivos representados fundamentalmente por los
derivados lcteos fermentados, no obstante, se conocen innumerables sustancias con actividad
funcional como la fibra soluble e insoluble, fitosteroles, fitoestrgenos, cidos grasos
monoinsaturados y poliinsaturados, derivados fenlicos, vitaminas y otros fitoqumicos. Estos
compuestos ejercen su actividad en mltiples sistemas, especialmente el gastrointestinal,
cardiovascular e inmunolgico. Se comportan como potenciadores del desarrollo,
moduladores del metabolismo de nutrientes, la expresin gentica, el estrs oxidativo y la
esfera psquica (Silveira et al. 2003).
15
(OMS) para una alimentacin saludable y otras materias primas que puedan mejorar el perfil
nutricional de las barras de cereales diversificando los ingredientes al incorporar frutas y
semillas oleaginosas (Estvez et al. 2000; Cheuquepan et al. 2004; Giacomino et al. 2008). En
principio, la elaboracin de productos de mejor calidad nutricional que los comerciales, es
factible con formulaciones que mejoren la cantidad y calidad de las protenas, incorporen
cidos grasos insaturados y disminuyan el contenido de azcares y grasas. Sin embargo, la
viabilidad de estas formulaciones dirigidas a la poblacin en general, est fuertemente
condicionada por la obtencin de productos con caractersticas sensoriales aceptables, por ello
la evaluacin sensorial constituye una etapa previa condicionante para la formulacin de
nuevos productos de implementacin efectiva a nivel industrial o artesanal. El principal factor
en la eleccin de este tipo de productos es el sabor, siendo preferido el dulce y en ello ha
influido el deseo innato de consumir alimentos dulces, otros factores de inters es que sean
bajos en grasas y aporten energa (Sloan, 1996).
La presente investigacin plantea disear y formular una barra alimenticia con el propsito de
aumentar la oferta de productos que promuevan estilos de alimentacin saludable con
caractersticas potenciales para disminuir la incidencia de las enfermedades cardiovasculares,
utilizando 80% de ingredientes que poseen propiedades funcionales como la avena, nueces y
uvas pasas; cuya evidencia cientfica ha demostrado que son capaces de disminuir los factores
de riesgo de estas enfermedades, y 20% de miel como nico ingrediente aglutinante, sin la
incorporacin de otra fuente de grasas distinta a las nueces.
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Objetivo General
Disear y formular una barra de avena, nueces, uvas pasas y miel; a partir de un diseo
experimental cuya formulacin resulta de la mejor interaccin entre la aceptabilidad,
contenido de polifenoles y capacidad antioxidante.
Objetivos Especficos
17
CAPTULO I
MARCO TERICO
18
oleico (Olivera et al. 2009). Feldman (2001), estudio la asociacin de la dieta y las
enfermedades cardiovasculares (ECV), obteniendo que las grasas saturadas de la dieta
aumentan los factores de riesgo de estas enfermedades, y la investigacin durante ms de
cinco dcadas relaciona las ECV con el colesterol total y las fracciones de lipoprotenas
ms importantes.
La Organizacin Mundial de la Salud ha presentado cifras que indican que ECV, son la
principal causa de muerte en todo el mundo, en el 2005 murieron por esta causa 17,5
millones de personas, esta cifra representa un 30% de todas las muertes registradas en
el mundo; de las cuales 7,6 millones se debieron a enfermedades isqumicas del
corazn y 5,7 millones a las enfermedades cerebrovasculares. De acuerdo con
Alvarado (1994), en Venezuela a mediados de la dcada de los sesenta se produjo un
fenmeno epidemiolgico de gran trascendencia dado que las ECV se convirtieron en
la primera causa de muerte en el pas, seguido de los accidentes de trnsito y tumores
malignos.
Segn el Ministerio del Poder Popular para la Salud en Venezuela las ECV representan
la primera causa de mortalidad en la poblacin adulta. Para el ao 2004, se reportaron
24.281 muertes por esta causa, lo cual representa un porcentaje de 21,9% y una tasa de
mortalidad de 138,4 por 100.000 habitantes.
19
Las ECV son trastornos del sistema circulatorio que incluyen el corazn, los vasos
sanguneos y la sangre. Son de etiologa y localizacin diversa y se clasifican en cuatro
tipos generales, a saber: enfermedades isqumicas de corazn, enfermedades
cerebrovasculares, enfermedades vasculares perifricas y otras enfermedades. Las dos
primeras son las de mayor importancia en magnitud ya que constituyen ms del 60%
de la mortalidad por este tipo de enfermedades. Se manifiestan como fenmenos
agudos ocasionados por la obstruccin de los vasos sanguneos que impide que la
sangre fluya al corazn o el cerebro y termina produciendo la muerte.
20
por dao neuronal irreversible; y las hemorrgicas donde ocurre una extravasacin de
sangre por rotura de algn vaso sanguneo.
Las enfermedades vasculares perifricas afectan a las arterias o las venas que irrigan
las extremidades, y entre las otras ECV destacan las cardiopatas congnitas y la
cardiopata reumtica.
Existen marcadores o factores relacionados con las ECV que se manifiestan antes del
evento cardiovascular, entre ellos se encuentra los parmetros sanguneos, como: el
colesterol total (CT), colesterol ligado a lipoprotenas de baja densidad (LDL),
colesterol ligado a lipoprotenas de alta densidad (HDL), triglicridos, homocistena,
marcadores de inflamacin y otros marcadores de aterosclerosis; presin arterial
sistlica y diastlica, espesor de las arterias y medidas antropomtricas como: peso,
talla y grasa corporal. La progresin de la cardiopata coronaria est relacionada
directamente con la concentracin srica de CT y colesterol LDL, e inversamente con
el colesterol HDL. Valores elevados de colesterol LDL en plasma se asocian
fuertemente con la formacin de lesiones aterosclerticas, lo mismo sucede con la
hipercolesterolemia y con niveles bajos de colesterol HDL, por ello las dietas con un
alto contenido de grasas totales y colesterol son aterognicas para muchas especies
animales, ya que aumentan la concentracin srica o en plasma de los siguientes
factores: CT, colesterol LDL y los triglicridos Corella et al. (2007).
21
1.2.2 Calidad de las grasas en la dieta.
Muchas protenas vegetales son ricas en arginina y pobres en lisina, una dieta rica en
protenas vegetales reduce el riesgo de aterosclerosis por su influencia positiva en el
perfil lipdico y ms recientemente la arginina surge con una nueva importancia, como
precursor del xido ntrico (ON) el cual determina el tono en reposo vascular y
estimula la trombina, el bifosfato de adenosina y la bradicinina, que estn involucrados
en el esfuerzo cortante y la tensin cclica, el ON induce la relajacin de las clulas del
msculo liso, inhibe la adhesin plaquetaria y es antitrombtico (Feldman, 2002).
22
1.2.4 Fibra diettica.
Otra opcin diettica para reducir el colesterol LDL es aumentar el contenido de fibra
soluble, la Asociacin Americana del Corazn recomienda una ingesta de fibra
diettica total de 25 a 30 g/da.
Diversos estudios han revelado una relacin inversa entre el consumo de fibra y el
riesgo de ECV (Fernndez, 2001); el efecto beneficioso se relaciona especialmente con
el consumo de cereales integrales (Jacobs et al. 1998, Liu et al. 1999). Numerosos
estudios indican que la fibra, principalmente la fraccin soluble, tiene un efecto
hipocolesterolmico, reduciendo selectivamente el colesterol LDL en sujetos
normocolesterolmicos y moderadamente hipercolesterolmicos (Brown et al. 1999).
1.2.5 Antioxidantes.
23
El mecanismo extracelular de los antioxidantes, se ha comprobado por la capacidad del
cido ascrbico y el alfatocoferol de inhibir la iniciacin de la peroxidacin lipdica del
colesterol LDL, medida como el retraso en la aparicin de dienos conjugados tras la
adicin de un in metlico catalizador, generalmente cobre (Cu++). En relacin con los
mecanismos intracelulares el alfatocoferol, el cido ascrbico y otros antioxidantes
disminuyen la oxidacin del colesterol LDL ya que aumentan su resistencia intrnseca
a la oxidacin y disminuyen la produccin de especies reactivas de oxgeno (ERO) por
parte de las clulas presentes en la placa de ateroma.
24
mltiples polifenoles han recibido atencin en relacin con el desarrollo de las ECV;
los ms estudiados son los que se encuentran presentes en el vino tinto que contiene
flavonoides, siendo el resveratrol y quercetina las principales molculas con capacidad
antioxidante, ambas capaces de inhibir la oxidacin del colesterol LDL in vitro con
diferentes potencia antioxidante, y adems poseen un efecto antiagregante plaquetario
(Mendivil et al. 2002).
1.3.1 Avena.
Emmons et al. (1999), mencionan que las avenantramidas, el cido cafeico, y el cido
vanlico se correlacionan significativamente con la actividad antioxidante, y el cido
cafeico, y las avenantramidas estn relacionadas con la inhibicin de la oxidacin del
colesterol LDL. Otros estudios han reportado que las avenantramidas pueden suprimir
en clulas endoteliales articas la expresin estimulada de molculas de adhesin
25
intracelulares-1 (ICAM-1), molcula de adhesin a clulas vasculares-1 (VCAM-1), Eselectina y la secrecin estimulada de citoquinas proinflamatorias (IL-6, IL-8 y
protena quimiotctica de monocitos-1). Esto concede a las avenantramidas efectos
antiterognicos y antiinflamatorios que probablemente expliquen cmo la avena puede
reducir el riesgo de ateroesclerosis in vivo (Liu et al. 2004).
1.3.2 Nueces.
Varios estudios han descrito una asociacin negativa entre las concentraciones
plasmticas de vitamina E y la prevalencia de ECV en la poblacin, incluso en grupos
con caractersticas tnicas y perfiles de riesgo diferentes, los principales estudios sobre
vitamina E y las ECV se muestran en el anexo 2. Todos ellos sugieren el empleo de
suplementos de vitamina E para disminuir el riesgo cardiovascular.
26
1.3.3 Uvas pasas.
Poseen diversas estructuras fenlicas del tipo flavonoides, entre las principales se
encuentran los subtipos flavonoles (catequinas y epicatequina) y antocianinas, su
accin biolgica secuestra RL y evita la aglomeracin de las plaquetas; los flavonoides
bloquean la enzima de conversin de angiotensina, que causa aumento de la presin
arterial, previene la gomosidad de las plaquetas; protegen el sistema vascular y
fortalecen los pequeos capilares que llevan oxgeno y otros nutrientes esenciales a
todas las clulas (Kinsella, 1993), adems las uvas pasas incrementan la produccin de
xido ntrico en el endotelio vascular (Manach et al. 2005).
1.3.4 Miel.
Los mtodos para determinar el contenido total de compuestos fenlicos se basan en las
propiedades de xido-reduccin y el funcionamiento de los compuestos fenlicos como
agentes reductores (Huang et al. 2005). El mtodo de Folin-Ciocalteu se utiliza para
determinar el contenido de polifenoles totales en extractos de plantas y jugos (Singleton et
27
al. 1999), es un mtodo colorimtrico basado en la reduccin qumica de un reactivo que
consiste en una mezcla de xidos de tungsteno y molibdeno. Los productos de la reduccin
del xido de metal tienen un color azul que presenta una amplia absorcin de la luz, con un
mximo a 765 nm; la intensidad de absorcin de la luz absorbida a esa longitud de onda es
proporcional a la concentracin de fenoles totales.
La medicin se basa en la cintica del proceso, por ello el tiempo de lectura colorimtrica
es crtico, y la temperatura afecta la reaccin, como se utiliza una sola sustancia el
resultado debe ser reportado como equivalente de respuesta a la concentracin de esa
sustancia, los resultados se deben expresar como equivalentes de cido glico (GAE) por
las unidades utilizadas, miligramos o litro (Wrolstad, 2005).
28
Diversos compuestos fenlicos de los ingredientes de la barra de cereal poseen capacidad
antioxidante, esta variable de estudio es de inters en la formulacin del producto ya que
constituye una evidencia slida para promover el poder antioxidante del producto lo cual
influye positivamente en la prevencin de las ECV.
Cuando una solucin de DPPH se mezcla con una sustancia que puede donar tomos de
hidrgeno, da lugar a una forma reducida con la prdida del color violeta. Para el radical
DPPH representado por Z*, y el donador de molculas por AH, se tiene la primera
reaccin:
Z*+AH=ZH+A*
(1.1)
El mtodo DPPH se puede utilizar para muestras slidas o lquidas, ya que no es especfico
para un componente antioxidante en particular, mide la capacidad antioxidante total de la
29
muestra (Prakash, 2001). Es ampliamente utilizado en aproximadamente 90% de los
estudios antioxidantes, por ser fcil y preciso; incluyendo frutas y hortalizas, plantas
medicinales, cereales y granos, hierbas y especias, t y otras hojas para infusiones.
Sharma et al. 2009; estudiaron el perfil de absorbancia del DPPH en metanol, metanol
tamponado y etanol; obteniendo mayor absorbancia en soluciones de metanol lo que
implica una mayor sensibilidad en relacin con el etanol. La concentracin inicial de la
solucin de DPPH debe presentar valores de absorbancia inferior a 1,0. Es decir, una
concentracin entre 50 y 100 M, ya que por encima de la concentracin indicada puede
generarse un error por la Ley Beer, y por debajo del valor mencionado el color es muy
dbil y limita la lectura en el rango de absorbancia (Scherer y Godoy 2009).
30
%I =
(1.2)
Donde: Abs0 es la absorbancia del blanco, este valor se puede utilizar para confirmar la
estabilidad del sistema de medicin, y Abs1 la absorbancia en presencia del extracto a
diferentes concentraciones.
La mayora de los estudios expresan los resultados con el parmetro EC50 propuesto por
Snchez et al. (1998) definido como la cantidad de antioxidante necesario para disminuir
la concentracin inicial de DPPH en 50%, se calcula grficamente mediante un barrido del
porcentaje de inhibicin en funcin de la concentracin del extracto y se determina por
regresin lineal, Bran-Williams (1995) propuso estudios cinticos para clasificar la
capacidad antioxidante, sin embargo, observ que depende de la concentracin del
antioxidante.
Para determinar la vida til de un alimento deben identificarse las reacciones qumicas o
biolgicas que influyen en la calidad e inocuidad del mismo, considerando la composicin
del alimento y el proceso al que se somete (Caps, 1999). En los alimentos que contienen
grasas predominan las reacciones de oxidacin, la autooxidacin es un fenmeno
espontneo e inevitable que afecta directamente el valor comercial del producto (Silva et
al. 1999), este fenmeno tambin inicia otros cambios en los alimentos que afectan su
calidad nutricional, inocuidad y atributos sensoriales (Shahidi, 1992). Uno de los factores
que influye en la oxidacin de las grasas es la composicin de los cidos grasos que
pueden ser saturados o insaturados, siendo estos ltimos ms susceptibles a la oxidacin, y
pueden presentar una o ms insaturaciones como los denominados cidos grasos
poliinsaturados que poseen menor estabilidad oxidativa (Nawar, 1996).
La oxidacin de los cidos grasos es catalizada por diversos factores principalmente por el
oxgeno (Dziezak, 1986), su accin directa sobre los dobles enlaces de los cidos grasos
31
insaturados produce hidroperxidos y radicales libres que se autopropagan en reacciones
en cadena; cuando se agotan los radicales libres se detiene la produccin de
hidroperxidos y estos reaccionan entre s formando compuestos carbonilos estables
(Badui, 1984). El efecto que se reconoce inmediatamente en la oxidacin de los lpidos
presentes en los alimentos es el desarrollo de olores y sabores indeseables, caracterizados
en su mayora como compuestos carbonlicos de cadena corta formados como resultado de
la descomposicin de los perxidos, la percepcin sensorial de la rancidez depende del
alimento, en aquellos con bajo contenido de humedad se describe como "aceite viejo" o
"sebceo". (Badui, 1984; Fennema, 1989).
Para determinar la rancidez oxidativa de las grasas se mide el valor de perxido, ya que las
primeras etapas de la oxidacin se caracterizan por una gran produccin de perxido, sin
seales sensoriales de deterioro, alcanzando una concentracin mxima que luego
disminuye debido a su descomposicin, y se generan compuestos altamente voltiles
caractersticos de la rancidez oxidativa, por ello la determinacin del valor de perxido en
el estudio de estabilidad de las grasas esta limitado solo a las primeras etapas de la
oxidacin, este mtodo suele combinarse con la evaluacin sensorial de un panel experto,
sin embargo, la evaluacin sensorial no percibe el efecto de las primeras etapas de la
rancidez, ya que la formacin de perxidos no tiene olor; cuando se identifica el olor a
rancio, y dependiendo del umbral de deteccin del panel, la reaccin generalmente ya se
encuentra avanzada.
32
Las nueces constituyen unos de los principales ingredientes de las barras diseadas en este
estudio, poseen un alto contenido de grasas, principalmente cidos grasos poliinsaturados
susceptibles al deterioro oxidativo, lo cual influye en la estabilidad durante el
almacenamiento del producto (Masson et al. 1985; Greve et al. 1992). Otro constituyente
principal de la barra de cereal es la avena, para cereales el valor de perxido mximo
permitido es 20 meq/Kg, diversas investigaciones han utilizado este factor de calidad en
productos derivados de cereales, como el estudio realizado por Escobar et al. (1994) en
barras de cereales donde se realiz el seguimiento del desarrollo de perxidos por un
perodo de 90 das a temperatura ambiente y obtuvieron un aumento significativo en todas
las barras a partir del da 30 de almacenamiento. Estvez et al. (1995) informaron que
durante el almacenamiento a 37 C de barras de cereales con 13% de nueces y aw cercano a
0,62, el valor de perxido fue alrededor de 17 meq/kg, disminuyendo la aceptabilidad.
Similarmente Estvez et al. (1998) indicaron que en barras de cereales con man, que
tenan 7,7% de humedad y un aw de 0,70, el valor de perxido al final del almacenamiento
fue de 16,9 meq/Kg, igualmente con disminucin de la aceptabilidad.
33
CAPTULO II
METODOLOGA
2.1 Diseo de mezclas para la formulacin de las barras de cereal.
En los experimentos con mezclas los factores son los ingredientes y por consiguiente sus
niveles no son independientes, ya que la suma de los factores siempre debe ser 1,0 o 100%,
la experimentacin est sujeta a la siguiente restriccin (Montgomery, 2007).
x
i =1
= 1,0
(2.1)
Se seleccion un diseo Simplex lattice, el cual se utiliza para estudiar el efecto de los
ingredientes sobre las variables de respuesta que se van a evaluar, en este estudio se
tomaron los tres componentes principales del producto: avena, nueces y uvas pasas, que
constituyen el 80% para evaluar el contenido de polifenoles totales, la capacidad
antioxidante y la aceptabilidad global. Sin embargo, este tipo de diseo recibe la crtica
que la mayora de las corridas ocurren en la frontera de la regin y por consiguiente slo
incluye p-1 componentes, por ello la mezcla de tres ingredientes avena (a), nueces (b) y
34
uvas pasas (c), se restringi de la siguiente manera, para garantizar la participacin de los
tres componentes.
0,2 + a + b 0,7
0,2 + a + c 0,7
0,2 +b + c 0,7
(2.2)
a +b +c =1
Snee (1971), recomienda un diseo con diez corridas, como se ilustra en la figura 2.1.
Donde los puntos representan porciones de mezclas y los vrtices a cada ingrediente.
2
10
Figura 2.1. Diseo de diez corrida para una mezcla de tres componentes.
La tabla 2.1 muestra que los tres vrtices representados por los puntos 1, 2 y 3; representa
el 100% de un componente, los tres puntos 4, 5 y 6; representan mezclas binarias (50%) de
cada par de componentes, el punto central 7 representa cantidades iguales de cada
componente, y los tres puntos interiores 8, 9 y 10, representan 66,7% de un componente y
16,7% de cada uno de los otros dos componentes, estos puntos interiores aumentan la
capacidad del modelo para ajustar los datos.
El diseo se gener utilizando el paquete estadstico Design Expert V6. Adems de las
corridas requeridas para ajustar el modelo matemtico de la mezcla, realiz cuatro corridas
35
diferentes adicionales para verificar la falta de ajuste, y rplicas de cuatro de estas corridas
a fin de estimar el error puro.
Nmero de corrida
X1
X2
X3
1/3
1/3
1/3
2/3
1/6
1/6
1/6
2/3
1/6
10
1/6
1/6
2/3
Lineal:
p
E( y ) = i xi
i =1
(2.3)
Cuadrtico:
p
i =1
1< j
1< j
E( y ) = i xi + ij xi x j + ij xi x j
(2.4)
36
Cbico completo:
E( y ) = i xi + ij xi x j + ij xi x j (xi x j ) +
p
i =1
1< j
1< j
i< j<k
x x j xk
ijk i
(2.5)
Cbico especial:
p
i =1
1< j
1< j
E( y ) = i xi + ij xi x j + ij xi x j +
i< j <k
ijk
(2.6)
xi x j x k
Donde, E(y) es el valor esperado de la respuesta, los s son los coeficientes estimados, las
xs son las proporciones de los componentes, y p es el nmero de componentes en la
mezcla.
la respuesta esperada para la mezcla pura xi= 1 y xi= 0 cuando ij. A la porcin i =1
i i
se
le llama porcin de mezcla lineal. Cuando hay curvatura derivada de una mezcla no lineal
entre pares de componentes los parmetros ij representan una mezcla sinrgica o
antagnica (Montgomery, 2006).
OBSERVACIONES
Conforme a los requisitos establecidos para cada producto.
Seleccionar
materia prima
la
37
Uvas pasas: Norma salvadorea para las uvas pasas NSR
67.00.60:99.
Miel: Norma COVENIN 2191-84.
Pesar los
ingredientes
Calentarla miel
45 C por 6 min.
Mezclar los
ingredientes
por 10 minutos a 40 C.
Moldear la
mezclar
Prensar
Cortar
Desmoldar
38
Empacar
Se prepar una solucin de cido glico diluyendo 500 mg de cido glico con 10 mL
de etanol y se llev a un volumen de 100 mL con agua destilada, a partir de esa
solucin se prepararon 5 estndares con las siguientes concentraciones 250, 375, 500,
625 y 750 mg/L.
Para el anlisis se aplic la microescala descrita por Wrolstad, (2005). Se tom 20 L
de cada estndar, muestra y agua en celdas para espectrofotmetro, posteriormente se
aadi 1,58 mL de agua destilada y 100 L de reactivo de Folin a cada celda; se agit
y almacen entre 1 y 8 minutos. Posteriormente a cada celda se le agreg 300 L de
39
carbonato de sodio (Na2CO3) al 20%, se agito e incub por 2 horas a temperatura
ambiente protegido de la luz y se midi la absorbancia a 765 nm.
(2.7)
2.3.2 Capacidad antioxidante in vitro por efecto atrapador (Brand-Williams et al. 1995).
La actividad antioxidante se determin mediante un barrido utilizando el radical 2,2difenil-1-picrilhidrazil radical (DPPH).
40
Previamente se determin el tiempo de reaccin segn lo indicado por Snchez et al.
(1998), se coloc una alcuota de 2 mL de solucin de DPPH al 0,1242 mM y 2 mL del
extracto soluble en una celda espectrofotomtrica, se corri la cintica durante 90
minutos, y el tiempo de reaccin se determin grficamente con la formacin de la
meseta como se muestra en la anexo 5. Posteriormente se determin la capacidad
antioxidante de las muestras por el mtodo descrito por Brand-Williams et al. (1995),
se procedi a distribuir los extractos en celdas espectrofotomtricas y se les aadi la
solucin de DPPH como se presenta en la tabla 2.3.
Tabla 2.3. Volmenes de solucin de DPPH y del extracto para un volumen final de
trabajo de 4 mL.
Volumen del extracto
Volumen de solucin de
(mL)
DPPH (mL)
3.9
0.1
3.0
1.0
2.0
2.0
1.0
3.0
41
2.3.3 Estudio preliminar de la aceptabilidad global.
42
extraccin de la grasa. La identificacin y cuantificacin de los cidos grasos se realiz
de acuerdo al mtodo sealado en la Norma venezolana COVENIN 2281:2002.
Se calcul el ndice de actividad antioxidante (AAI) propuesto por Scherer et al. (2009),
este parmetro toma en cuenta la masa de DPPH y la masa del producto dando lugar a una
constante independiente de la concentracin del radical y del antioxidante. El parmetro
AAI se calcula mediante la siguiente expresin:
AAI= concetracin final de DPPH (g.mL-1)
(2.8)
-1
EC50 (g.mL )
Donde EC50 es la cantidad de antioxidante necesario para disminuir la concentracin
inicial de DPPH en un 50%, en las unidades indicadas.
De acuerdo con la clasificacin de Scherer et al. (2009), los extractos con AAI <0,5 se
considera que poseen una actividad antioxidante baja; entre 0,5 y 1,0 moderada, entre 1,0 y
2,0 fuerte, y > 2,0 muy fuerte.
Se realiz por el mtodo de las isotermas de trabajo que constituye una curva que
indica, en equilibrio y para una determinada temperatura, la cantidad de agua que gana
o pierde un alimento en funcin de la humedad relativa de la atmsfera que lo rodea.
La actividad de agua se determina a partir del contenido de humedad de la muestra en
equilibrio, con soluciones salinas de actividad de agua conocidas usadas como
referencia.
43
El estudio de las isotermas se realiz por el mtodo gravimtrico de registro
discontnuo, se pesaron aproximadamente dos gramos de muestra por triplicado y se
colocaron en cinco desecadores que contenan sales de: cloruro de litio (LiCl), cloruro
de magnesio (MgCl2), nitrato de magnesio (Mg(NO3)2), nitrato de sodio (NaNO2) y
cloruro de sodio (NaCl). Las muestras fueron almacenadas a tres temperaturas 25, 35 y
45 C, hasta que alcanzaron el equilibrio, los valores de humedad relativa en equilibrio
se muestran en la tabla 2.4.
Tabla 2.4. Valores de actividad de agua (aw) de las soluciones de sales saturadas a
diferentes temperaturas.
aw
Sal
25 C
35 C
45 C
LiCl
0,1130
0,1125
0,1116
MgCl2
0,3278
0,3205
0,3110
Mg(NO3)2
0,5289
0,4991
0,4693
NaNO2
0,7452
0,7206
0,6999
NaCl
0,7529
0,7487
0,7452
La humedad de las muestras se determin por el mtodo AOAC 934.01, con estos
datos y conociendo los valores de aw en equilibrio de cada sal se construyeron las
curvas para cada temperatura de estudio y se procedi a realizar el ajuste
correspondiente al modelo de GAB (Guggenheim, Anderson y de Boer) descrito en un
rango de 0,10<aw<0,90 con el mtodo de estimacin Levenverg-Marquardt en el
software estadstico SPSS 17, a continuacin se presenta la ecuacin correspondiente al
modelo seleccionado.
m .c.k .a w
(1 k.a w ).(1 + (c 1).k.a w )
(2.9)
44
Donde:
Xm: es la humedad del producto correspondiente a la situacin en que los puntos de
absorcin primarios estn saturados por molculas de agua.
c: es la constante de Guggenheim, caracterstica del producto y relacionada con el calor
de adsorcin de la monocapa.
k: es un factor de correccin relacionado con el calor de sorcin de la multicapa.
(2.10)
45
2.6.4 Influencia de la temperatura en la oxidacin de las grasas.
(2.11)
Se realiz con un panel de consumidores constituido por 150 personas, con las siguientes
caractersticas: adultos jvenes con edades entre 18 y 25 aos, con un nivel de instruccin
similar (estudiantes universitarios).
46
CAPTULO III
RESULTADOS Y DISCUSIN
3.1 Diseo y formulacin de la barra de cereal.
El diseo con 14 corridas se muestra en la tabla 3.1 junto con las respuestas: contenido de
polifenoles totales, capacidad antioxidante y aceptabilidad.
Corrida
Avena
Nueces
Variables de respuesta
Uvas
Polifenoles totales
pasas
(mg EAG/100g)
Capacidad antioxidante
(Ec50 mg antiox./mg
Aceptabilidad
DPPH)
0,40
0,30
0,30
143,47
14,2
6,9
14
0,35
0,35
0,30
104,77
14,1
7,7
13
0,30
0,40
0,30
155,81
14,3
7,4
12
0,30
0,30
0,40
105,79
14,3
7,2
10
0,33
0,33
0,33
105,64
14,4
8,1
11
0,40
0,30
0,30
146,22
14,2
7,9
0,32
0,32
0,37
147,97
14,1
7,2
0,37
0,32
0,32
134,87
14,2
7,3
0,35
0,35
0,30
106,09
14,4
7,3
10
0,30
0,30
0,40
102,26
14,2
9,1
11
0,32
0,37
0,32
106,52
14,2
8,1
12
0,30
0,35
0,35
117,81
14,1
7,8
13
0,30
0,40
0,30
153,28
14,2
8,2
14
0,35
0,30
0,35
128,14
14,2
8,1
47
Las tablas 3.2 y 3.3, muestran el ajuste de los modelos matemticos, se obtuvo que
tanto los modelos como sus componentes e interaccin son significativos (p<0,05). Se
descompuso el trmino residual en el error puro (puramente aleatorio) y la falta de
ajuste del modelo matemtico; que constituye una prueba de bondad de ajuste para los
modelos de superficie de respuesta (Montgomery, 1991) esta prueba establece si la
diferencia entre los valores observados experimentalmente y los predichos por el
modelo se debe a variaciones puramente aleatorias o a una falta de ajuste significativa
del modelo (Myres et al. 2002), se obtuvo que la falta de ajuste para ambos modelos
no es significativa (p>0,05). Los ANOVA de los modelos matemticos generados por
el programa Design Expert V6. se muestran en el anexo 7.
Tabla 3.2. Anlisis de varianza del diseo de superficie de respuesta para el contenido
de polifenoles totales (mg EAG/100 g).
Trminos
Modelo
Suma de
Grados de
Cuadrados
cuadrados
libertad
medios
3033,73
505,62
419,47
0,0024
461,91
230,95
191,60
0,0052
ab
1964,26
1964,26
1629,60
0,0006
ac
325,67
325,67
270,18
0,0037
bc
93,02
93,02
77,17
0,0127
abc
296,49
196,43
145,98
0,0040
Falta de ajuste
1,54
1,54
1,77
0,4106
Error puro
0,87
0,87
Mezcla lineal
48
Tabla 3.3. Anlisis de varianza del diseo de superficie de respuesta para la capacidad
antioxidante medido en Ec50 (g antioxidante/ g DPPH).
Trminos
Suma de
Grados de
Cuadrados
cuadrados
libertad
medios
Modelo
0,056
0,028
4,22
0,0468
Mezcla lineal
0,056
0,028
4,22
0,0468
Falta de ajuste
0,062
8,816E-003
5,29
0,0994
5,000E-003
1,667E-003
Error puro
(3.1)
49
Se calcul el ptimo matemtico conocido tambin como el punto estacionario
(Vatsala et al. 2001), que representa el punto en la superficie donde la derivada parcial
de la respuesta evaluada es igual a la derivada parcial para cada ingrediente, y todas
ellas igual a cero.
=
=0
1 2
(3.2)
(3.3)
50
Se obtuvo que la capacidad antioxidante no vari para un contenido de polifenoles
totales entre 102,26 y 153,28 (mg EAG/100g), ya que todos los polifenoles no son
antioxidantes, Okawa et al. (2001) mencionan que la capacidad de secuestrar radicales
libres de los compuestos fenlicos est relacionado con la posicin de grupo hidroxilo.
(3.4)
Donde X1: es la cantidad de avena, X2: nueces, X3: uvas pasas y X4: miel; para obtener
1 Kg. de barra de cereal, se sabe que la participacin de la miel es 20% por tanto este
valor pasa a ser una constante, como se muestra a continuacin.
51
= 0,85(US $ kg )1 + 43,00(US $ kg ) 2 + 9,70(US $ kg )3 + 0,547
(3.5)
52
Seguidamente se procedi a calcular los costos de formulacin para tres niveles de
produccin industrial y la reduccin de costos de formulacin esperada en tres perodos
de tiempo, entre la formulacin que corresponde al ptimo matemtico para el contenido
de polifenoles (Frmula 1) y la obtenida por optimizacin de costos (Frmula 2), la tabla
3.4 muestra que efectivamente se logra una reduccin significativa de hasta 2.655 US$
para una produccin de 10 ton/da.
Tabla 3.4. Costos de formulacin estimados para tres niveles de produccin industrial y
la reduccin de costos de formulacin esperada en tres perodos de tiempo.
Produccin
Frmula 1 Frmula 2
ton/da
Mes (*)
Ao (**)
13.763,5
13.498,0
265,5
7.965,0
96.907,5
68.817,5
67.490,0
1.327,5
39.825,0
484.537,5
10
13.7635,0
134.980,0
2.655,0
79.650,0
969.075,0
La tabla 3.5 muestra el aporte de energa y nutrientes para 100 g cuya informacin
permite conocer el perfil nutricional del producto, por racin que proporciona la
cantidad de energa y de nutrientes que aporta el alimento; y en porcentaje de valor
diario (%VD) calculado en base a los valores diarios de referencia de nutrientes (VDR)
y de ingesta diaria recomendada (IDR).
53
Tabla 3.5. Aporte de energa y nutrientes por 100 g, por racin y porcentaje del valor
diario.
Informacin nutricional
por 100 g
%VD (*)
396
127
Carbohidratos (g)
58
19
Protenas (g)
8,2
2,6
15
4,7
grasas saturadas
1,8
0,6
grasas monoinsaturadas
3,1
0,98
**
grasas poliinsaturadas
9,8
3,1
**
7,1
2,3
fibra soluble
2,0
0,6
(**)
fibra insoluble
5,1
1,6
(**)
colesterol (mg)
Fibra diettica (g)
El aporte calrico es de 396 Kcal. por 100 gramos de barra de cereal, este resultado
coincide con los valores reportados por Olivera et al. (2009) para las barras de cereales
comerciales, presentados en el anexo 1, que indica valores entre 258 y 456 Kcal. por
100 gramos con un promedio de 40154.
54
la energa de la dieta de la OMS (2003), que establecen que las grasas deben aportar
entre el 25 y 35 % de las caloras totales, y se obtuvo un valor de 33%, el contenido de
cidos grasos expresados como porcentaje de la grasa total se muestra en la figura 3.4.
80
67
70
60
50
40
30
21
20
12
10
0
AG saturados
AG monoinsaturados
AG Poliinsaturados
Se observa que los cidos grasos poliinsaturados predominaron con un alto porcentaje
(67%), de los cuales el cido linoleico (-6) aport 57%, y el cido linolnico (-3)
10% (anexo 8), sin embargo, estas cifras pueden estar subestimadas debido al mtodo
de extraccin utilizado en la metodologa; de acuerdo con lo indicado por Feldman
(2002) estas estructuras lipdicas disminuyen el colesterol LDL y los triglicridos los
cuales son factores relacionados con las ECV. En orden de importancia siguieron los
cidos grasos monoinsaturados (21%) que tambin pueden tener un efecto reductor del
colesterol total y disminuir el colesterol LDL, y con un menor porcentaje, 12% se
encuentran las grasas saturadas.
55
En general las protenas, los cidos grasos poliinsaturados y monoinsaturados, y la
fibra diettica de la barra de cereal contribuyen a disminuir los factores de riesgo de las
ECV, y muy probablemente el riesgo de incidencia y mortalidad de estas
enfermedades.
3.3 Evaluacin de la capacidad antioxidante de la barra seleccionada.
56
Figura 3.5. Isotermas de trabajo experimental (a) y calculada por el modelo de GAB, a
25, 35 y 45 C (b).
Tabla 3.6. Constantes obtenidas a partir del modelo matemtico de GAB para el
clculo de las isotermas de trabajo, descrito en un rango de 0,10< aw <0,90.
25 C
35 C
45 C
Xm
7,984
3,254
8,355
3,976
5,554
1,073
0,796
1,112
0,924
R2
0,986
0,993
0,994
57
oxidacin de lpidos (Labuza, 1970). De acuerdo al valor de la actividad de agua
sealado y con las caractersticas del producto, cuyo contenido de humedad=10% y
grasas=15%, prevaleciendo las estructuras poliinsaturadas, se propuso utilizar un
material de empaque multilaminado que brinde proteccin contra luz y reduzca la
concentracin de oxgeno en el interior del envase, ya que estos factores aceleran el
desarrollo de la rancidez, por la oxidacin de las grasas (Matz, 1984; Torres, 1989).
Se determin el orden de reaccin (n=0) (Labuza, 1984; Labuza, 1985; Casp, 1999), lo
que significa que la tasa de cambio del factor de calidad permanece constante siempre
que la temperatura y el aw no varen, la prdida de calidad se calcul mediante la
siguiente ecuacin:
dC dt = k
(3.6)
Con los datos obtenidos para el valor de perxidos de las barras de cereal, en funcin
del tiempo y para cada temperatura de estudio, se construy la grfica presentada en la
VP (meqO2/Kg grasa)
figura 3.6.
60
50
40
30
20
25
10
35
45
0
0
20
40
60
80
100
Tiempo (das)
Figura 3.6. Evolucin del valor de perxido en la barra de cereal.
58
Tabla 3.7. Prdida de calidad de las barras para cada temperatura de estudio.
Temperatura (C)
k (das)
25
37
35
18
45
13
59
entre 10 y 25 Kcal/mol para la oxidacin de lpidos, el valor obtenido coincide con el
lmite inferior indicando una alta propensin a la auto oxidacin de los lpidos debido
al contenido de grasas de la barra de cereal, aportado principalmente por los cidos
grasos poliinsaturados de las nueces.
3.4.4 Clculo del Q10.
El Q10 indica el nmero de veces en que se modifica la velocidad de autooxidacin de
las grasas del producto cuando la temperatura vara 10 C, para valores bajos de
temperatura el Q10 es superior a 2, y al aumentar la temperatura este valor se acerca a
2, como en la mayora de las reacciones qumicas.
Con la energa de activacin (Ea), se determin el Q10 mediante la ecuacin 3.6; esta
relacin matemtica depende de la temperatura elegida para su clculo.
log Q10 =
2,189 E a
T (T + 10 )
(3.6)
60
40
t = -1,2022T + 64,751
35
R = 0,9132
30
25
20
15
10
5
0
0
10
20
30
40
50
Temperatura (C)
Figura 3.8. Prediccin de la vida til del producto.
Valor
Media
Moda
Mediana
Desviacin estndar
0,82
61
La barra obtuvo un nivel de aceptabilidad que sugiere una posible proyeccin
comercial, Bower et al. (2000) menciona que el sabor es el principal factor en la
seleccin de las barras de cereales, y los consumidores no estn dispuestos a cambiar
este atributo por los beneficios a la salud que proporcionan los alimentos funcionales.
Para evaluar el efecto de la declaracin de nutrientes y beneficios a la salud del
producto, el panel de consumidores se dividi en dos grupos de acuerdo a lo siguiente:
un grupo denominado A, al cual se les proporcion informacin nutricional y
beneficios a la salud del producto, y otro denominado B a los cuales no se les dio la
informacin. Se realiz un anlisis de varianza para determinar diferencia entre los
grupos, los resultados se presentan en la tabla 3.9.
Tabla 3.9. Anlisis de varianza de un factor para determinar diferencia entre los grupos
A y B.
Origen de las
Suma de
variaciones
cuadrados
Entre grupos
Dentro de los
grupos
Total
cuadrados
2,3787
2,3786
88,7819
148
0,5999
91,1605
149
3,965 0,048
Valor
crtico F
3,905
62
CAPTULO IV
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
4.1 Conclusiones.
Se obtuvo una barra de cereal con 127 Kcal por 32 g, con un aporte de protenas de 8,2 %
origen vegetal, 15% de grasas totales, prevaleciendo los cidos grasos poliinsaturados, un
contenido de fibra diettica de 7,14 g/100 g, y polifenoles con poder antioxidante que en
conjunto le confieren a la barra de cereal propiedades funcionales capaces de disminuir los
factores de riesgo de las enfermedades cardiovasculares.
Con una actividad de agua de 0,52; 10% de humedad y un contenido de grasas de 15%,
principalmente estructuras poliinsaturadas, el producto tiene entre 30 y 35 das vida til para
un rango de temperatura de 25 a 30 C, en funcin de la rancidez expresado como valor de
perxido.
Finalmente se obtuvo que la barras de cereal es aceptable para un panel de 150 consumidores,
con una calificacin de me gusta, se midi el efecto de proporcionar informacin sobre los
alimentos funcionales entre dos grupos, obtenindose diferencia estadsticamente significativa,
lo que confirma que la confianza de los efectos sobre la salud de los alimentos funcionales y la
informacin al respecto juega un papel importante en la eleccin de estos productos.
63
4.2 Recomendaciones.
Definir con criterios ms especficos las caractersticas del panel para evaluar el efecto
sobre las declaraciones de alimentos funcionales y su influencia sobre la aceptabilidad, por
ejemplo, midiendo el nivel de conocimiento del panel sobre estos productos
proporcionndoles cuestionarios.
64
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81
ANEXOS
1. Barras de cereales comerciales.
82
83
2. Estudios clnicos de los ingredientes de la barra cereal y su relacin con las
enfermedades cardiovasculares.
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
Figura 6.7 cidos fenlicos y flavonoides con actividad antioxidante identificados en la miel
usando el mtodo HPLC. Fuente: Krystyna (2009).
99
3. Prototipo de la barra de cereal.
Nombre:
Cdigo de la muestra:
Instrucciones: A continuacin se le presenta una escala, por favor marque con una X sobre la lnea,
dnde se ubica su nivel de agrado.
ACEPTABILIDAD
Ni me gusta ni me disgusta
Me disgusta
Me gusta
Observaciones:
Con que frecuencia consume barras de cereales?
2 o ms veces por semana
Nunca
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
100
---------------------------------------------------------------------------------------------------------Fecha:
Edad:
Gnero:
3,000
2,500
UA
2,000
1,500
1,000
0,500
0,000
0
200
400
600
800
Figura 6.11. Curva estandar del contenido de polifenoles totales del cido glico.
101
0,045
0,04
0,035
UA
0,03
0,025
0,02
0,015
0,01
0,005
0
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Tiempo (min)
%I = 0,0343c - 1,6034
R2 = 0,9969
80
% Inhibicin
70
60
50
40
30
20
10
0
0
500
1000
1500
2000
2500
102
6. Comprobacin de los supuestos de normalidad, homocestacidad e independencia de
los modelos matemticos.
A. Normalidad
B. Homocestacidad
C. Independencia
103
A. Normalidad
B. Homocestacidad
C. Independencia
104
7. ANOVA de los modelos matemticos generados por el programa Design Expert V6.
Figura 6.16. Evaluacin del modelo cbico especial para el contenido de polifenoles
totales.
105
106
8. Perfil de los cidos grasos de las barras de cereal.