Microbiologia Celular

2 parte

Microrganismos eucariotas
Estrutura e funo na clula do
tipo eucaritico

Algumas microalgas famosas

- Papel ecolgico: fitoplankton; base das cadeias alimentares aquticas e marinhas; oxigenao do Ambiente
Responsveis por eutrofizao (algal blooms) de compartimentos ambientais aquticos e marinhos;
algumas espcies sntetizam toxinas (envenenamento das guas para peixes; humanos)
- Biotecnologia: produo de carotenides.

Algal bloom

Diatomceas
(Maior parte do fitoplankton nos oceanos;
indicadores da qualidade da gua - presena de poluio?;
Formas variadas - paredes duras constituidas por slica)
Terra de diatomceas
Depsitos de paredes de diatomceas
mortas, em sedimentos aquticos;
aplicao como fertilizantes,
como abrasivos em detergentes,
na remoo de pinturas e leos;
como agente filtrante.
(In J. Black, Microbiology: fundamentals and applications, J Wiley & Sons, 2005)

Diatomceas

Intoxicao por
cido domico

Alguns fungos famosos

Saccharomyces cerevisiae
Levedura do po; levedura da cerveja e do vinho;
modelo de clula eucaritica
Gmula
(percursora da
clula-filha)

Cogumelos
(solo; decompositores;
aplicao alimentar;
alguns venenosos)

Levedura - Fungo unicelular; ~ 10-15 m)

Fungo filamentoso (ou, bolor)
(microrganismos terrestres, decompositores, alguns so produtores de antibiticos;
outros tm aplicao alimentar; alguns causam doenas (micoses))
Penicillium sp.

(In Brock Biology of Microorganisms, 10th edition, Prentice Hall)

Alguns protozorios famosos

- Papel ecolgico: predadores de bactrias; decomposio de matria orgnica no Ambiente;
- Parasitas de animais; agentes de doenas intestinais, atravs da ingesto de gua contaminada,
(Giardia sp; Cryptosporidium sp), de malria (Plasmodium sp), de toxoplasmose (Toxoplasma sp), etc.

Cryptosporidium parvum

Paramecium sp.
(protozorio ciliado; habitat aqutico;
parasita de animais) ~ 50 m

Giardia
lamblia
(In Brock Biology of Microorganisms, 10th edition, Prentice Hall)

Amoeba
(habitat aqutico; parasita de
animais;
Ingesto de bactrias ou partculas
orgnicas por fagocitose)

(In Pery, Staley, Lory, Microbial Life, Sinauer (ed))

Plasmodium falciparum
e a malria

SCHEMATIC VIEW OF AN EUKARYOTIC CELL

Although all eukaryotic cells contain a nucleus,

not all organelles or other structures shown are present in all eukaryotic microbial cells.

Parede celular

Cobertura rgida

Composio varivel
Em muitos casos, componentes principais so polissacridos:
Microalgas - celulose e pectina
Fungos quitina, celulose, e glucanos
Excepo:
Diatomcas silica

Quitina polissacrido insolvel composto por unidades de N-acetilglucosamina

Pensa-se que a quitina tenha potencial para substituir futuramente alguns produtos de plstico
(vantagem: os plsticos tem uma meia-vida muito longa (acima de 300 anos), enquanto a
quitina biodegradvel)
e possa ser utilizado na construo civil como material de extrema resistncia a presso.
At ao momento ainda no foi possvel a sntese in vitro.

Locomoo
Microalga Dunaliella

flagelos

Protozorio Paramecium

Cilios (s., cilium)

5-20 m (comprimento)
Funcionam como remos
Flagelos (s., flagellum)
100-200 m (comprimento)
Movimento ondulante

Tm origem em microtbulos

Simbiose entre trmites e protozorios e dinoflagelados

Mastotermes darwiniensis

Mixotricha paradoxa

 Ncleo

poros

uma estrutura rodeada por uma

membrana e que alberga o genoma
da clula
(vrios cromossomas);
- o centro de controlo da clula;
Tem 5 a 7 m.

Microfotografia
electrnica de clula
de levedura.

Membrana nuclear
constituda por um par de estruturas
membranares (uma membrana
externa e outra interna) que delimitam
o ncleo
atravessada por poros nucleares
Estes poros permitem a troca selectiva
e regulada de molculas entre o
interior e o exterior do ncleo.

Existe continuidade entre a

membrana externa do ncleo
e o retculo endoplasmtico
(imagem obtida por microscopia
electrnica de transmisso)
GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Nuclolo

1 nuclolo / ncleo

No est rodeado por nenhuma membrana

o local onde se fabricam os ribossomas

Sntese e processamento de RNA
ribossmico (rRNA)
Montagem do rRNA e protenas
ribossomais para formar os ribossomas

Ribossomas

Tamanho 80S
subunidades 60S + 40S

Podem estar associados ao reticulo endoplasmtico rugoso ou

livres no citoplasma

So estruturas complexas constitudas por protenas e RNA

o local onde se realiza a sntese de protenas

>

Reticulo Endoplasmtico (RE)

Endoplasmic reticulum (ER)

uma rede irregular de tubulos e sacos (cisterna) envolvidos

por uma membrana e que se estende desde a membrana
nuclear ao citoplasma.
o maior organelo das clulas eucariticas
(10% do volume total)
FUNES DO RE
Sntese e/ou transporte de protenas, lpidos, e
outros materiais dentro da clula e para a
membrana plasmtica (ex. Protenas membranares e
protenas que so excretadas ou tm como destino os
endossomas / lisossomas)
Local de sntese de membranas lipdicas
Sntese de constituintes dos lisossomas

Existem dois tipos de reticulo

endoplasmtico (RE)

RE rugoso (rough ER)

RE liso (smooth ER))

Contm ribossomas ligados na sua face externa

- No contm ribossomas

Envolvido no processamento e transporte de

protenas que vo ser localizadas na membrana

- Sntese de lpidos componentes

plasmtica (ex. Glicoprotenas, Proteinas

transmebranares; protenas envolvidas no transporte
de solutos) ou so destinadas aos lisossomas ou
excretadas para fora da clula
(ex. Enzimas extracelulares)

das membranas biolgicas

(P.ex. Fosfolpidos, esterides
como o caso de colesterol (clulas
animais) e ergosterol (clulas
de fungos)).

Overview of protein sorting (synthesis and fate of eukaryotic proteins)

(ER ribosomes)

Signal sequence
(amino terminus of
polipeptide chain)

Folding and assembly

of multiple subunit
proteins

Cytosol

(assisted by molecular
chaperones)

Cell exterior
GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Vesicular transport from the ER to the Golgi apparatus

Membrane proteins
(destination: membranes)

Lumen proteins
(destination:
secretory vesicles;
lysossomes)

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Cytosol

Protein sorting and export from the Golgi apparatus

through the secretory pathway
GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Constitutive secretion
(continuous; unregulated)
or
regulated secretion
(in response to
environmental signals;
specific proteins)

Proteins (as well as lipids and

polysaccharides) are sorted
into the trans Golgi and
transported into
different type of
transport vesicles
to be transported to
their final destination

Digestive protens
of lysossomes
(e.g. Vaculoes in
yeast cells)

Secretion of proteins
out of the cells
Proteins can be carried out
to the plasma membrane

Complexo de Golgi
um complexo de membranas distinto do RE mas que funciona
coordenadamente com o RE.
uma fbrica onde protenas e lpidos recebidos do RE so
processados (frequentemente modificados qumicamente) e
transportados aos seus locais de destino (e.g. membrana
plasmtica, endossomas, lisossomas, exterior da clula)

Outras processos realizados no Complexo de Golgi

Glicosilao de protenas
(ex. Modificao e sntese da poro hidrato de Carbono
em glicoprotenas; fosforilao de protenas destinadas
aos lisossomas, etc.)

Sntese de esfingomielina e glicolpidos

Sntese de hemicelulose e pectina em plantas

Endossomes

Endocytosis

Formation of lysossomes

Lysossomes and endocytosis

- Pinocitose vs.Fagocitose
Fig. 4.10. (Prescott et al.,
Microbiology, 5th ed)

- Autofagia
- Hidrolases cidas / lisossomas

Endocitose e
exocitose

Lisossomas
. Vesculas membranares
. Contm hidrolases (enzimas hidrolticas ou digestivas;
sintetizadas no RE e processadas e empacotadas pelo
complexo de Golgi); estas s funcionam a pH cido
pH mantido cido atravs de uma bomba de protes
(sistema de transporte activo primrio)
. Encontrados em diversos microrganismos
(protozorios, fungos e algumas algas)
e em clulas animais e vegetais
. Digesto intracelular de macromolculas e organelos
no funcionais (p.ex. reciclagem de molculas turnover)
. Digesto de agregados moleculares, bactrias, etc.
(endocitose)

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

O Citoplasma, o citoesqueleto e
os movimentos celulares
Citoesqueleto
Rde de microfilamentos (4-7 nm), microtubulos (25 nm), e
filamentos intermdios (8-10 nm) contido no citoplasma
Funes:

. forma da clula,
. organizao do citoplasma,
. transporte interno de organelos e
protenas no citoplasma;
. movimento celular

Sistema de microfilamentos numa

clula eucaritica (marcao com
anticorpos)
Prescott, Harley & Klein, Microbiology, th edition,Mc GrawHill, 2002

Estrutura e organizao dos filamentos de actina ou microfilamentos

Componente principal: actina

Assembly and structure of actin filaments

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Envolvidos em:
- Movimento celular
- Modificao da forma das
clulas

(p.ex. Locomoo de
amibas)
80 m

6 seg.

Microtbulos
Cilindros cos e rigidos

Microtubule structure

Constituinte principal:

tubulina
Transporte intracelular de
substncias
Movimento intracelular de
organelos
Forma da clula

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

Organizao intracelular dos microtbulos

Os microtbulos esto
ancorados nos centrossomas
Em interfase:
Microtbulos servem de trilhos para
o transporte de organelos
(p.ex. dos vesculos envolvidos quer na
secreco de protenas quer na endocitose)

Durante a mitose:
(diviso celular)

Os dois centrossomas separam-se e

os microtbulos formam o fuso mittico,
assegurando a separao equitativa dos
cromossomas pelas duas clulas-filha.
Em muitos fungos e alguns protozorios e
algas, o envelope nuclear permanece intacto
durante a mitose.
GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

(Phylogenetically
related to
mitochondria)

Bacteria

Archaea

Eukarya

(Phylogenetically
related to
chloroplasts)

Universal ancestor
(adaptado de Prescott, Harley, Klein, Microbiology, 5th ed.)

TEORIA ENDOSSIMBITICA

Mitocndria

Ribossomas

Membrana
interna

Membrana
externa

Matriz da mitocndria:
- DNA (molcula circular fechada)
- Ribossomas (70S)

. .

- Enzimas (envolvidas na -oxidao de

cidos gordos a Acetil-CoA e no ciclo
TCA)

. .. .

FUNO: Produo de energia

Rreaces do ciclo dos cidos tricarboxlicos (ciclo

TCA) oxidao de Acetil-CoA a CO2, com formao de
NADH e FADH2.

Gerao de ATP (transporte electrnico e

fosforilao oxidativa) na membrana interna.

A sua formao necessita de protenas produzidas

no citoplasma e outras produzidas na prpria
mitocndria

Presente em clulas de protozorios, fungos, e em

organismos superiores.

Membrana interna
(fosforilao oxidativa e
sntese de ATP)

Prescott, Harley & Klein, Microbiology, 5th edition,Mc GrawHill, 2002

Cloroplasto

MATRIZ (estroma)
contm:

FUNO: Produo de energia

- DNA (molcula circular fechada)

- Ribossomas (70S)

Encontra-se em microalgas
(alm de algas superiores e plantas)

o local onde se realiza a fotossntese

- Enzimas envolvidas nas reaces da

fase escura da fotossntese
(ciclo de Calvin)
Ex. - enzima RubisCO (ribulose
biphosphate carboxylase);
biossntese de glucose
- Membranas tilacides

Membrana tilacides (grana)

reaces luminosas da fotossntese:
- captao de luz para gerar energia na
forma de ATP e NADPH, e
- formao de O2.

Prescott, Harley & Klein, Microbiology,

th edition,Mc GrawHill, 2002

Hydrogenosomes
in

several microbial eukaryotes

that lack mitochondria and
are anaerobic

(e.g. The protozoa Giardia;

the flagellate parasite Trichomonas;
several ciliated protozoa that inhabit the
rumen of ruminant animals or anoxic
muds and sediments)
Major biochemical reactions:
Oxidation of pyruvate

to yield
ATP, and
H2 + CO2 + acetate
(Fermentation)

Some contain H2-consuming

methanogenic bacteria as
endosymbionts

Peroxissomas

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

So pequenos organelos rodeados por uma membrana, localizados no

citoplasma
Existem em protozorios, leveduras e algumas bactrias, em grande parte
das clulas animais e em numerosas clulas vegetais (algumas clulas podem
conter ~500 peroxissomas)

Contm enzimas (principalmente, oxidases e catalases) envolvidas em vrias

reaces metablicas.

Funes dos peroxissomas

Metabolismo energtico
Ex. oxidao de cidos gordos, cido rico, aminocidos, ou purinas
(fontes de energia)

P. ex. -oxidao de cidos gordos (at Acetil-CoA)

cido gordo saturado

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007

cido gordo insaturado

Algumas notas

Lisossomas e endocitose
Endocitose entrada na clula de macromolculas ou clulas vindas do exterior,
atravs da formao de vesculas com origem na membrana plasmtica.
Dois tipos:
- Fagocitose: ingesto de molculas de grande dimenso ou mesmo clulas inteiras
- Pinocitose: ingesto de pores do liquido circundante com as molculas de solutos.

ACO CONJUNTA permite, por exemplo:

Aquisio de nutrientes (p.ex. de macromolculas e/ou bactrias por

protozorios fagocitose; de factores de crescimento, hormonas, ferro em diversos
tipos de clulas - pinocitose)

Digesto de macromolculas e organelos no funcionais

(nos vacolos autofgicos; reciclagem normal dos constituintes celulares; remoo
de cell debris aps a morte das clulas)

Defesa do hospedeiro infectado (p.ex. na destruio

de bactrias invasoras pelos glbulos brancos do sangue em clulas animais)

Funes dos peroxissomas

Realizam reaces de oxidao de diversos compostos intracelulares, que so acompanhadas
pela formao de perxido de hidrognio (H2O2). O perxido de hidrognio txico, sendo
decomposto pela enzima catalase.
Alguns desses compostos so: cidos gordos , cido rico, aminocidos, purinas;

. Por exemplo, as reaces de -oxidao de cidos gordos a Acetil-CoA (uma forma

importante

de obteno de energia metablica para muitos organismos) ocorre maioritariamente em

peroxissomas, em muitas leveduras e em clulas de plantas.
Em clulas animais, os peroxissomas participam na absoro e digesto de gorduras e esto
tambm envolvidos na sntese de lpidos e na sntese de colesterol (p.ex. abundantes nas clulas do
fgado e rins eucariotas superiores)

GM Cooper, RE Hausman, The Cell- a molecular approach, 4th ed, 2007