Problemas de Espectroscopia UV

Laboratorio de tcnicas analticas instrumentales
Problemas de espectroscopia UV-visible//Fluorescencia
Aspectos bsicos de la ley de Beer
Enuncie la ley de Lambert-Beer, explique sus limitaciones qumicas e instrumentales, y defina

claramente absorbancia y transmitancia
Problema 1
Con los datos que se proporcionan, calcule las cantidades omitidas
Compuesto
A
B
C
Abs
0,345
0,176
3,70.104
5,20.104
b (cm)
2,0
1,0
Conc.
4,25.10-4 M
1,20 ppm (PM= 375)
2,26.10-4 M
Problema 2
Una solucin tiene una transmitancia de 0,10 a una cierta ,
a) determine su absorbancia
b) si su concentracin es de 0.020 g/l, su masa molecular de 100 y su transmitancia fue medida
en celdas de 1,0 cm, determine su absortividad y su absortividad molar.
c) Calcule la transmitancia para una solucin que tenga la mitad de concentracin pero se mida
en cubetas de 5.0 cm.
Respuesta: A= 1; = 5000 cm-1 M-1; T=0,32%
Problema 3
Una solucin de una sustancia pura B (peso molecular 180.00) de concentracin 1.43 10-4M
tiene una absorbancia de 0,572. Una solucin obtenida a partir de 0,1358g de un preparado
farmacutico, que contiene a la sustancia B, en 1,0L de agua presenta una transmitancia de
0,362. Ambas medidas se han realizado a 284nm y en cubetas de 1.00cm de paso ptico.
Calcular el %B de la muestra
Respuesta: 14,6% m/m
Problema 4
Una solucin 15 g/mL de un compuesto de masa molecular 280 g/mol absorbe el 65% de la
radiacin incidente, a una longitud de onda caracterstica de dicho compuesto. Si la longitud
del camino ptico es de 2 cm, determine la absortividad molar dicho compuesto.
Respuesta: =4,3 103 cm-1 M-1

Problema 5
La adenina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los cidos nucleicos
(ADN y ARN) y tiene una absortividad molar de 13,100 L/cm*mol, a una longitud de onda de
263 nm. Calcule la concentracin molar de una solucin de adenina, que presenta un
porcentaje de transmitancia del 75% cuando 2 mL de la solucin, son colocados en una celda
de 1 cm.
Respuesta: 9,54 x10-6 M.
Problema 6
Una solucin 1,28 x 10-4 M de permanganato de potasio tiene una transmitancia de 0,5 a una
longitud de onda de 525 nm usando una celda de 1cm. a) Determine la absorbancia de la
solucin. b) Si la concentracin es el doble, cul ser la absorbancia y la transmitancia?
Respuesta a) A=0,301; b) A=0,602; T=0,25.
Problema 7
Una solucin de 10,0 mg/L de hidrocloruro de procana tiene una absorbancia de 0,65 a 290
nm. Cul es la concentracin de una solucin que tiene una absorbancia de 0,93? Calcule la
absortividad molar del hidrocloruro de procana a 290 nm, si su masa molecular es de 272,8
g/mol. Asuma un camino ptico de un centmetro (1,00 cm).
Respuesta = 1,77 104 cm-1 M-1; C=5,24 10-5 M
Problema 8
La transmitancia T (a 520 nm) de una solucin de KMnO4 (5 ppm), es de 27 % usando una celda
de 1,00 cm.
a) Calcule la absorbancia de la solucin.
b) Calcule la absorbancia y el porcentaje de transmitancia de una solucin que contiene 3,2
ppm de KMnO4.
c) Si 0,10 g de un acero es disuelto, oxidado a MnO4- y diluido en 100,0 mL y la absorbancia de
la solucin es de 0,52. Cul es la masa de manganeso en la muestra original?
d) Determine la absortividad molar del KMnO4.
Respuestas a) A= 0,569 b) A= 0,364 T= 0,43 c) m= 0,16 mg d) = 1,80 104 cm-1 M-1
Anlisis de muestras
Explique los diferentes mtodos de calibracin. Estndares internos y externos. Mtodo de

adiciones estndar. Estndar interno

Problema 9
La vitamina D2 (calciferol/C28H44O), tiene una absorcin mxima a 264 nm en alcohol y obedece
la ley de Beer en un amplio rango de concentraciones con una absortividad molar de = 18,200
L/mol*cm. Qu rango de concentraciones expresada en g/L, puede ser usado para el anlisis,
s se quiere medir absorbancias entre 0,40 y 0,90? Asuma que b = 1,0 cm.
Respuesta: entre 2,2 10-5 y 4,9 10-5 M; 8,7 10-3 y 0,02 g/L
Problema 10
1,0 g de acero es disuelto en cido ntrico y el manganeso presente, es oxidado a
permanganato con periodato de potasio. La solucin es llevada a 250,0 mL y se encontr que
tena una absorbancia 1,5 veces ms grande que la de una solucin estndar de permanganato
de potasio 0,001 M. Calcule el % de Mn en el acero.
Respuesta: 2,1%.
Problema 11
La concentracin de una especie se determina por el mtodo de sobreagregado. La solucin de
concentracin desconocida da un valor de absorbancia de 0,251. A 10mL de esa solucin se
aaden 5mL de una solucin patrn de concentracin 1,00.10-2M. La absorbancia de esta
solucin result 0,483. Calcule la concentracin de la solucin original.
Respuesta: C= 2,6.10-3M
Problema 12
Un volumen de 5 mL de una solucin de KMnO4 de concentracin desconocida dio una seal
de absorbancia de 0,318. A esta solucin se le aadieron 2 mL de una solucin patrn de
KMnO4 de 5 ppm, y la absorbancia medida a la misma longitud de onda es de 0,356. Calcule la
concentracin de KMnO4 en la solucin desconocida. (Mtodo de adiciones estndar)
Respuesta: 3,5 ppm.
Problema 13
En la determinacin de Cu en una solucin acidificada con cido sulfrico, se transfirieron 5 mL
de la solucin en una celda de 1,0 cm de camino ptico y se observ, a la longitud de onda de
mxima absorcin, transmitancia de 0,753. Al aadir a la celda 1,00 mL de una solucin
estndar se sulfato cprico 0,010 M (con los 5 mL de muestra an presentes) se observ una
transmitancia de 0,625. Determine la concentracin de in cprico en la muestra original.
Respuesta: C= 2,0 10-3 M
Problema 14
La determinacin de hierro en una muestra de agua residual se lleva a cabo mediante una
tcnica instrumental aplicando el mtodo de calibracin de adiciones estndar. Para ello, se
transfieren a matraces de 50.0mL cinco alcuotas de 10.0mL de la muestra problema, a los que

se adicionan 0.00, 5.00, 10.0, 15.0 y 20.0mL, respectivamente, de una solucin de hierro de
10.0ppm. Las disoluciones resultantes, tras su enrase al volumen final de 50.0mL, originan las
siguientes medidas de la seal analtica:
Vsol. Fe aadido [mL]

0.00
5.00
10.0
15.0
20.0
Absorbancia
0.215
0.424
0.625
0.836
1.040
a. Determine grficamente la concentracin de hierro en la muestra de agua.

b. efecte el clculo analtico por regresin de cuadrados mnimos
Respuesta: C= 5,23 ppm
Problema 15
La concentracin mxima del herbicida 3-aminotriazol (M= 84) presente en alimentos es 0.05
ppm. Dicho compuesto se determina mediante una reaccin colorimtrica (Mtodo de
Galoux). A partir de 3-aminotriazol puro (comercial) se construy la siguiente curva de
calibracin empleando una celda de 1 cm:
Abs
C (ppm)
0,02
0,05
0,04
0,10
0,06
0,15
0,08
0,20
0,10
0,25
0,15
0,38
Determinar la absortividad y concentracin molar de 3-aminotriazol en un alimento sabiendo

que la absorbancia es igual a 0.047.
Respuesta: C= 1,4 10-6 M; = 3,33 104 M
Problema 16
La cafena (C8H10O2N4.H2O) posee una absorbancia de 0,510 a 272 nm y 1 cm de paso ptico en
una solucin de concentracin de 1 mg/100 mL. Una muestra de 2.5 g de caf soluble se diluye
con agua a 500 mL. Se toman 250 mL se aaden 25.0 mL de H2SO4 0.1 N y se diluye a 500 mL.
Se mide la absorbancia a 272 nm resultando ser 0,415. Calcular los gramos de cafena por Kg
de caf soluble que tiene muestra muestra.
Respuesta: 3.3 g/Kg
Problema 17
Una muestra de 5,12 g de un pesticida que contiene cobre, se descompuso mediante digestin
hmeda y a continuacin se diluy hasta 200.0 mL en un matraz aforado. El anlisis se
complet tratando las alcuotas de esta solucin como se indica, llevando a 100 ml finales con
agua y midiendo la absorbancia del complejo:

V de muestra
tomado, mL
50.0
50.0
Volmenes de reactivo utilizados (ml)

+2
3.82 ppm Cu
Ligando
H2O
0.00
4.00
20.0
20.0
30.0
26.0
A 545 nm (cubetas
de 1.00 cm)
0.512
0.844
Calcule el porcentaje de cobre en la muestra.

Respuesta: 1.83x10-3 %
Problema 18
En la determinacin de Pb en una harina de pescado contaminada se peso 5,0 g de muestra. Se
aplico digestin con cidos y se llevo a sequedad. Luego se aforo a 10 mL y se midi la
absorbancia obtenindose un valor de 0,012. En la tabla siguiente se presentan los datos de la
curva de calibracin realizada.
Pb, g/L
0,011 0,025 0,042 0,084
Absorbancia 0,001 0,005 0,009 0,020

Calcule la concentracin de Pb en la muestra en ppm.
Respuesta: 106 ppm
Problema 19
Un laboratorio de anlisis de alimentos desea poner a punto una tcnica para determinar
cido ascrbico en jugos de naranja. Para ello disponen de los siguientes datos:
-Se determin la concentracin de cido ascrbico en un jugo de naranja comercial utilizando
una tira comercial. En este mtodo el cido ascrbico reduce el cido molibdofosfrico
(amarillo) a azul de fosfomolibdeno. La muestra de jugo se decolor empleando celulosa
microcristalina y se realiz una dilucin 1/10 para entrar en el rango de concentraciones de
este ensayo:
Se compar visualmente el color de la tira de ensayo de la muestra con la escala colorimtrica

que provee el kit y este fue similar a un color correspondiente a concentraciones entre 100 y
200 mg/L de cido ascrbico (aproximadamente 150 mg/L).
- Se obtuvo un espectro de absorcin del azul de fosfomolibdeno.

En base a los datos disponibles y considerando que el laboratorio realizar la misma

preparacin de la muestra y usar la misma reaccin qumica que la empleada en el mtodo
rpido:
a. Elija la longitud de onda adecuada para realizar la curva de calibracin y justifique.
b. Luego de realizar la curva de calibracin a la longitud de onda ptima empleando una
cubeta de 1cm, se obtuvo un coeficiente de extincin para el azul de fosfomolibdeno de 0,003
L/(cm mg). Se analiz la misma muestra de jugo de naranja que se haba empleado para el
mtodo rpido y se obtuvo un valor de absorbancia de 0,457 y de 0,02 para el blanco de
reactivos. Calcule la concentracin de cido ascrbico en el jugo.
Respuesta: a) 425 nm b) 1,47 g/L
Resolucin de mezclas
Explique claramente cul es la hiptesis que emplea para resolver los siguientes problemas de
mezclas de especies absortivas
Problema 20
A partir de los espectros de absorbancia de dos sustancias coloreadas X, Y, en una celda de 1,0
cm se obtuvieron los siguientes resultados:
Solucin
X
Y
X+Y
Concentracin
5,0 x 10-4 M
2,0 x 10-4 M
Desconocido
A (450 nm)
0,800
0,100
0,600
A (700 nm)
0,100
0,600
1,000

Calcule las concentraciones de X y Y en la solucin desconocida.

Respuesta: (X)= 2,77 10-4 M; (Y)= 3,15 10-4 M
Problema 21
El titanio (IV) y el vanadio (V) forman complejos coloreados cuando son tratados con perxido
de hidrgeno. Los espectros de algunos productos de reaccin dan los siguientes resultados:
Metal
Ti (IV)
V (V)
C (M )
1 x10-3
1x10-2
Abs 415 nm
0,805
0,400
Abs 455 nm
0,465
0,600
Una muestra de 1,00 g de una aleacin que contiene ambos metales, se disuelve y se trata con
un exceso de perxido de hidrgeno y se diluye a 100,0 mL. Las absorbancias medidas para la
muestra fueron de 0,685 a 415 nm y 0,513 a 455 nm, s b=1 cm. Calcule el porcentaje en masa
de V y Ti en la aleacin.
Respuesta: Ti: 0,33% y V: 1,6 %.
Problema 22
En el anlisis espectrofotomtrico para la determinacin simultnea de una mezcla de iones
dicromato y permanganato a 440 y 545 nm en medio cido, los valores de absorbancia
medidos fueron 0,385 y 0,653, respectivamente a cada longitud de onda, en una celda de 1cm.
Independientemente, la absorbancia de una solucin 8,33 x10-4 M de dicromato en medio
cido fue de 0,308 a 440 nm y 0,009 a 545 nm. Similarmente, una solucin 3,77 x10-4 M de
permanganato tiene una absorbancia de 0,035 a 440 nm y de 0,866 a 545 nm. Calcule la
absortividad molar de cada in a sus respectivas longitudes de onda y las concentraciones de
las especies en la muestra.
Respuesta: Dicromato 9,71x10-4 M, Permanganato 2,79x10-4 M.
Mediciones en presencia de equilibrios qumicos

Explique que es un punto isosbstico. Cul es el fundamento y utilidad de los mtodos de
variaciones continuas y de razones molares?
Equilibrios cido-base
Problema 23
El coeficiente de absortividad molar de un cido dbil, HA (Ka=1.00x10-5) es 1100 L.mol-1.cm-1 a
305nm, donde la especie A- no absorbe. Calcular los valores de absorbancia correspondientes a
soluciones 1.00x10-3M, 5.00x10-4M y 2.00x10-4M (b=1.00cm) a 305nm

Problema 24
Determine para un cido dbil el valor de la absortividad molar, la Ka y el porcentaje de
transmitancia a pH 4 a partir de los datos presentados en la tabla siguiente:
pH
A
4
0,00
5
0,00
6
0,10
7
0,75
8
1,00
9
1,15
10
1,25
11
1,25
Considere que todas las soluciones buffer contienen 1 mM de la muestra y todas las soluciones
fueron medidas bajo las mismas condiciones. El anin del cido, es la nica especie que
absorbe a la longitud de onda usada. Respuesta: =1.250 L/cm*mol, Ka=1,5x10-7, T=100 %.
Problema 25
Un indicador cido-base tiene una forma cida que absorbe a una longitud de onda de 410 nm,
con una absortividad molar de 347 L/mol*cm. Mientras que la forma bsica del indicador tiene
una banda de absorcin con un mximo a 640 nm y una absortividad molar de 100 L/mol*cm.
Por otra parte, la forma cida no absorbe significativamente a 640 nm y la forma bsica no
presenta absorcin significativamente a 410 nm. Una pequea cantidad del indicador se
aadi a una solucin acuosa y se determin que los valores de absorbancia son 0,118 y 0,267
a 410 y 640 nm, respectivamente. Se utiliz una celda de 1cm. Asumiendo que el indicador
tiene un pK de 3,90, calcule el pH de la solucin acuosa.
Respuesta: pH=4.80.
Equilibrios por formacin de complejos

Problema 26
Las especies P y Q son incoloras y forman un compuesto coloreado PQ en una relacin
estequiomtrica 1:1. Cuando 2x10-3 moles de P son mezclados con un exceso de Q y diluido a
un 1L, la solucin tiene una absorbancia que es el doble, en comparacin que cuando se
mezclan cantidades iguales de P y Q (a 2x10-3 moles) tratadas de la misma forma. En base a
estas consideraciones, determine la constante de formacin del complejo PQ.
Respuesta: 1000.
Problema 27
Al hacer reaccionar el ligando B- con el metal M+2 forman un complejo fuertemente coloreado.
En un experimento se mantuvo constante la concentracin del metal en 2x10-4 M y se vario la
concentracin del ligando, midindose la absorbancia de cada solucin, se obtuvieron los
resultados siguientes:
-4
[B-]x10 M
A
0,25
0,055
0,5
0,112
0,75
0,162
1,0
0,216
2,0
0,438
2,5
0,456
3,0
0,457
3,5
0,458
4,0
0,465
Graficando la absorbancia en funcin de la relacin molar ligando/catin. Determine:
4,5
0,470

a) La absortividad molar del complejo.
b) La estequiometria del complejo.
c) La constante de formacin del complejo
Respuesta: =2.350 L mol-1 cm-1 y Kf=9,5x105
Problema 28
Un complejo soluble X2Y se disocia en agua de acuerdo a la siguiente reaccin: X2Y 2X+ + Y=
A 520nm las especies Y= y X2Y no absorben, pero una solucin 1,00.10-4 M en X+ muestra una
transmitancia de 52% en celda de 2cm. Cuando 1,00.10-4 moles del complejo se disuelven en
100mL de agua, la transmitancia obtenida es de 86% a 520nm. Calcule la constante de
estabilidad del complejo.
Fluorometra
Problema 29
Una cantidad desconocida de riboflavina (100 tabletas) fue disuelta en 1 L de agua. Un mililitro
de la solucin obtenida fue diluido a 1 litro. La fluorescencia medida de la solucin resultante
fue de 42 % T. Un patrn que contiene 9,05 mg/L de riboflavina fluorece con intensidad de 32
% T. Cul es la cantidad promedio de riboflavina en cada tableta?
Problema 30
La forma reducida del dinucletido de adenina y nicotinamida (NADH) es una importante y
altamente fluorescente coenzima. Tiene un mximo de absorcin a 340nm y un mximo de
emisin a 465nm. Unas soluciones estndar de NADH dieron las siguientes intensidades de
fluorescencia:
C NADH (mol/ L)
0,100
0,200
0,300
0,400
0,500
0,600
0,700
0,800
Intensidad relativa
2,24
4,52
6,63
9,01
10,94
13,71
15,49
17,91
a. Construya la curva de calibrado para el NADH.

b. Deducir por mnimos cuadrados la ecuacin para la recta del apartado (a)
c. Una solucin problema presenta una fluorescencia relativa de 12,16. Calcule la
concentracin de NADH

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