BA-3; 2010/11-1

TEMA 3.- ABSORCIN: Rutas de exposicin y Vas de entrada de los xenobiticos en los organismos.
Absorcin a travs de membranas biolgicas. Factores que afectan a la absorcin de compuestos qumicos.. Velocidad y
extensin de la absorcin. Relacin con los mecanismos de transporte.
3.1.- FASES DE LA DINMICA DE UN XENOBITICO EN LOS ORGANISMOS (EADME)
1.- EXPOSICIN (no se entra a estudiarlo, puesto que se considera materia de contaminacin ambiental )
2.- ABSORCIN
3.- DISTRIBUCIN
4.- BIOTRANSFORMACIONES
5.- ELIMINACIN

FASES DE LA
ACTUACCIN
FARMACOLOGICA

EXPOSICIN (ejemplo)
Potencial de contaminacin de los acuiferos por XBs:Con el objeto de evaluar el poder contaminante de un compuesto se han establecido diversos ndices de
riesgo potencial de contaminacin. Es de destacar que la mayora de los ndices utilizados para evaluar el
potencial de contaminacin de las aguas Se emplean con la finalidad es establecer dos categoras de
plaguicidas: lixiviables y no lixiviables.
Para ello se suelen utilizar dos tipos de ndices:
-basados en aproximaciones empricas
-basados en modelos de transporte.
Aproximaciones empricas
Existe un gran nmero de ellos, siendo el ms conocido el Groundwater Ubiquity Score-GUS (Gustafson,
1999).

GUS= [ log t1/2] [4-log Koc]

El ndice GUS se basa en la aplicacin de una funcin obtenida a partir de valores de plaguicidas detectados
en las aguas subterrneas y clasifica a los plaguicidas en lixiviables: GUS>2.8, no lixiviables GUS>1.8 y los
comprendidos entre estos dos valores de transicin. Los parmetros Koc y t1/2 constituyen un criterio ms o
menos simplificado de los efectos de tiempo de residencia y de degradacin sobre los procesos de transporte
de plaguicidas a los acuferos.

3.2 RUTAS EXPOSICIN y VIAS DE ENTRADA DE LOS XENOBIOTICOS

EXPOSICIN: Manera cmo el organismo se pone en contacto con los
txicos.
VAS DE ABSORCIN: mayoritarias (inhalatoria, cutnea, gastrointestinal) y minoritarias (placentaria, leche materna
y parenteral).

Las principales rutas de entrada de los xenobiticos en los organismos son: gastrointestinal, la drmica y la respiratoria.
Otras vas son puramente experimentales como: IP, IV, IM o subcutanea. La va alimentaria es la de mayor incidencia
generalizada, sin considerar algunas exposiciones profesionales.

Las inyecciones en el sistema circulatorio (IV) eliminan la fase de absorcin como

tal.
3.3.- ABSORCIN:

Es el ingreso del xenobitico en la sangre, atravesando las distintas barreras

biolgicas.

Absorcin es el proceso por el cual un compuesto penetra dentro del torrente circulatorio de un organismo desde
el entorno ambiental en el que se mantiene dicho organismo, despus podr llegar hasta el medio celular (rgano, tejido,
etc).
La ruta que sigue un xenobitico desde el entorno de exposicin o punto de administracin al lugar de accin
dentro de l abarca el trnsito por una serie de tejidos y clulas, todos aislados por membranas.
La transferencia hasta el interior de un orgnulo subcelular, aislado por membranas, puede ser necesaria para que
el txico pueda ejercer la interaccin molecular con la macromolcula correspondiente .

Ilustracin del nmero de membranas encontradas por un xenobitico en los procesos de absorcin y distribucin
por el organismo:

Exterior / M piel o mucosa / FLUIDO INTERSTICIAL / M capilares / PLASMA / M capilar / FLUIDO INTERSTICIAL / M
celular
/ FLUIDO INTRACELULAR / M orgnulo / FLUIDO INTRAORGNULO (nucleo, mitocondria, lisosoma,
etc).

3.4.- MEMBRANAS BIOLOGICAS

Sea cual fuere la va de entrada de los xenobiticos: ruta drmica, oral o por inhalacin, las membranas son la
primera estructura biolgica con la que se encuentran.
Las membranas biolgicas estn compuestas por fosfolpidos, colesterol y protenas. El modelo bsico, postulado
por Davson and Danielli (1935), es todava vlido para describir la estructura de las membranas celulares y una montaa
de datos (microscpicos, bioqumicos) han confirmado esta hiptesis con relativamente pocas modificaciones.
Diagrama esquemtico de la membrana biolgica, (modelo de mosaico fluido segn Singer y Nicolson,
1972) Componentes:
Protenas y
Lpidos: Fosfolpidos
protena / lpido = 5
mielina
Glicolpidos
=1
membrana externa mitocondrial
Colesterol
Contenido en protenas / lpidos muy
variable

Protena integral

Protena perifrica

3.5.- MECANISMOS FISIOLGICOS DE TRANSPORTE A TRAVS DE

MEMBRANAS
Los mecanismos primarios de transporte de compuestos a travs de las membranas biolgicas son bsicamente 4:
1
Difusin pasiva o
simple:
Parece ser el primer mecanismo en la entrada de txicos. El compuesto se mueve a travs de las membranas por
simple difusin y un coeficiente de reparto adecuado entre las fases agua:lpidos son los parmetros mas responsables de
la velocidad de movimiento. FORMAS ELEMENTALES DE METALES O COMPUESTOS INORGNICOS
2
Filtracin / Difusin facilitada
:
La filtracin a travs de los poros es un posible canal
para molculas de tamao relativamente pequeo (MW 100),
pero las molculas grandes son excluidas. La filtracin es
considerada importante en los mecanismos de eliminacin
ms que en los de absorcin. IONES, ALGUNOS
NECESITAN TRANSPORTE ACTIVO
3.Transporte activo: (con protenas de membrana)
Algunos exgenos pueden ser absorbidos por sistemas
especficos del transporte de compuestos endgenos.
Algunos sistemas de transporte requieren energa y
transportan los compuestos contra un gradiente de
concentracin (TRANSPORTE ACTIVO). No para XBs
Otros no requieren energa con lo que son incapaces de
mover compuestos frente a gradientes de concentracin, solo
actan a favor de gradiente (DIFUSIN FACILITADA o
mediada). IONES UNIDOS A LIGANDOS,
AMINOCIDOS, PROTENAS. El proceso depender de:
Membrana celular
compuestos

Naturaleza de los

4.- Endocitosis: La pinocitosis y la fagocitosis son procesos

especializados en los que las membranas celulares se
invaginan o fluyen alrededor de un txico y lo engullen; as

son capaces de transferirlo a su interior, sin atravesar

estrictamente la membrana. COMPUESTOS UNIDOS A
PARTICULAS.

3.6.- FACTORES QUE AFECTAN AL PROCESO DE ABSORCIN DE

XENOBITICOS:
3.6.1.-Propiedades fsico-qumicas de los
XBs:
Grado de ionizacin, pKa, Coeficiente de particin, Tamao, Solubilidad, Lipofilicidad
Ionizacin
de
los
compuestos
La naturaleza anfiptica de las membranas crea una barrera para los iones, compuestos altamente polares, aunque
no los excluye completamente. Con los alcaloides se demostr que las membranas eran ms permeables a los compuestos
no inicos que para los inicos. Los alcaloides en el medio cido del estmago son dificilmente absorbidos y la toxicidad
sistmica no se ve alterada. Si el medio estomacal se hace ms alcalino, los compuestos se hacen no inicos y son
absorbidos y por lo tanto ejercen su toxicidad. Luego la absorcin de xenobiticos por va estomacal est muy afectada por
las condiciones de pH.
La cantidad de txico en forma ionizada y no ionizada depende del pKa del txico y del pH del medio; cuando el pH
del medio sea igual al pKa del compuesto disuelto, el 50 % de compuesto estar en forma ionizada y el 50 % en forma no
ionizada. La relacin vendr dada por la ecuacin de Henderson-Hasselbalch.
log

Efect
log

forma no ionizada
-----------------= pKa - pH (cidos)
absorbibles forma ionizada
muy absorbibles

Compuestos cidos muy ionizados a pH > 6, poco

"
"
poco ionizados a pH < 6,

forma ionizada
-----------------= pKa - pH (bases)
absorbibles forma no ionizada
absorbibles

Compuestos bsicos muy ionizados a pH < 6, poco

"
"
poco ionizados a pH > 6, muy

o del pH sobre la ionizacin de compuestos

pH

cido
benzico

% no
ionizado

COOH

1
2
3
4
5
6
7

Anilina

COO

NH2

% de absorcin intestinal en funcin del pH

% no
ionizado

NH3+

99.9
99
90
50
10
1
0.1

Absorcin intestinal de cidos y bases dbiles en funcin del pH, en rata

0.1
1
10
50
90
99

BASES
Anilina
Aminopireno
Quinina
ACIDOS
Nitrosaliclico
Saliclico
Benzoico

pKa

3.6-4.3

4.7-5.0

7.0-7.2 7.8-8.0

4.6
5.0
8.4

40
21
9

48
35
11

58
48
41

61
52
54

2.3
3.0
4.2

40
64
62

27
35
36

<2
30
35

<2
10
5

Puesto que la forma lpido-soluble (no ionizada) de un electrolito dbil es el constituyente difundible, los cidos
orgnicos dbiles difunden ms fcilmente en un ambiente cido y las bases orgnicas dbiles en ambientes bsicos (ver
Tabla ).
La absorcin de un compuesto resulta muy afectada por el pH del medio y su eliminacin por el pH de la orina.
Los xenobiticos en general no son muy afectados, porque suelen ser compuestos anfteros (tetraciclinas).
Cuando tienen grupos con N pueden ser mas afectados por el pH: alcaloides, diquat, paraquat.
3.6.2.-Coeficiente de particin o de reparto
Puesto que despus de atravesar la bicapa lipdica los XB pasan a
la fase acuosa, ha habido estudios que correlacionan el coeficiente de
particin (solubilidad en fase orgnica/solubilidad en agua) de los txicos
con la tasa de penetracin a travs de las membranas. Los compuestos
liposolubles atraviesan mejor las membranas biolgicas. Muchos
estudios con series de compuestos homlogos muestran una buena
correlacin entre coeficiente de particin y tasa de penetracin.
En este parmetro se incluyen las propiedades de tamao y solubilidad.
Kow es el coeficiente de particin entre octanol/agua
Kow alto, alta afinidad por lpidos = lipoflico
Kow bajo, baja afinidad por lpidos = hidroflico
Las mayores tasas de bioacumulacin se producen para valores de

3 < log Kow < 6

3.7.-VELOCIDAD Y EXTENSIN DE LA ABSORCIN

La velocidad de absorcin, en un lugar determinado, depende como todos los procesos de transporte de masa, del
rea de transferencia, del gradiente de concentracin a travs de la membrana y del coeficiente de transferencia de masa.
El movimiento de xenobiticos no polares a travs de las membranas puede ser predicho por la ley de Fick`s que rige el
fenmeno de la difusin. Igualmente puede servir para grupos polares o electrolitos de bajo peso molecular.
K x A x [C1-C2]
velocidad de difusin = --------------------------<> Ka [C1-C2] para un supuesto concreto.
d
La velocidad de difusin es relativa al gradiente de concentracin a travs de membrana (C1-C2), del rea
superficial disponible para la transferencia (A), del espesor de la membrana (d) y de la constante de difusin (K) . Para
una situacin concreta, Ka ser constante y representa la velocidad de penetracin, ser la pendiente de la recta si la
relacin es lineal.
La representacin del logaritmo de la cantidad remanente, que no ha entrado, frente el tiempo, puede ser
lineal.
La curva puede ser: A) recta, monofsica, que indica una velocidad constante de penetracin; B) de apariencia
curva con dos fases, lo que demuestra que el compuesto penetra con dos velocidades diferentes, una fase rpida y otra fase
lenta.
La determinacin de la vida media de penetracin , si el proceso es de primer orden y la representacin es lineal
1/2
es un clculo fcil; T (vida media de penetracin) que es un parmetro til para la comparacin del comportamiento de
1/2
txicos. La T es el tiempo que tarda en entrar el 50% de la cantidad total de compuesto que finalmente penetra a travs
de la membrana.
Curvas de penetracin de XB a travs de la piel: (A) monofsica, (B) bifsica y (C) multifsica. (Se representa el % de compuesto
NO ABSORBIDO frente al tiempo).

concentracin plasmtica ( g/ml)

EVOLUCIN DE LOS NIVELES

PLASMTICOS DE UN FRMACO

i.v.
v.o.
CME

tiem po (horas)

Fraccin de absorcin

ABC v.o.
ABC i.v.

100

BIODISPONIBILIDAD: Velocidad y extensin de la absorcin.El efecto teraputico de un frmaco o txico de un XB depender de su velocidad de entrada (K) y de la
extensin de la absorcin (F). F es el total de la fraccin de droga absorbida, se le suele denominar con el trmino
biodisponibilidad. Ambos parmetros son importantes porque afectan a la correlacin entre la dosis administrada de un
frmaco o de la exposicin a un contaminante y su concentracin en circulacin, fundamento de la respuesta toxicolgica
(R. dosis-respuesta). El rea bajo la curva (ver figura) que representa la concentracin de un XB en sangre, frente al
tiempo, se corresponde con el perfil de evolucin del XB en sangre, despus de su administracin extravascular. La
cuantificacin de dicho rea representa la extensin de la absorcin y tiene carcter experimental, en general.
CASUISTICA: tres formulaciones de una misma droga, en funcin de su proceso de absorcin [velocidad (K) y extensin
(F)] pueden provocar un efecto teraputico o un efecto txico diferenciado. Ver figura: 1 parte: la misma extensin y
diferente velocidad (A puede alcanzar efectos txicos y C no alcanza efecto terapetico); 2 parte: la misma velocidad y
diferente extensin (D puede alcanzar efectos txicos y F no alcanza efecto terapetico)
Grafico del rea bajo la curva
compuesto

Valores de F y de K para tres formulaciones de un mismo

BIODISPONIBILIDAD

t=

Cantidad = d(Cp)/dt
t=0

concentracin plasmtica ( g/ml)

t=0
tiempo (horas)

t=

FACTORES QUE AFECTAN: La velocidad de absorcin depender del rea de transferencia, del gradiente de
concentracin a travs de la membrana y del coeficiente de transferencia de masa (difusin del compuesto y espesor de la
membrana). Una vez que el txico ha penetrado, el torrente sanguneo lo arrastra bajando su concentracin en la superficie
interior de la membrana, as que a mayor flujo de sangre en el sitio, se incrementa el gradiente de concentraciones y se
reduce la resistencia al transporte por lo que, ser mayor la velocidad de absorcin. En las superficies del organismo cuya
funcin principal es la absorcin, normalmente se presentan una o ms de las siguientes condiciones:

alta
irrigacin
sangunea,

tiempos
de
residencia
prolongados
superficies expandidas, ejemplo las vellosidades del
intestino,
pelculas muy delgadas, ejemplo los alvolos
pulmonares
se pueden presentar combinaciones de estas caractersticas, como en el caso de intestino delgado donde se tiene
la superficie expandida y el tiempo de residencia largo.
Los epitelios de absorcin son al mismo tiempo las superficies de contacto del organismo con el ambiente y por lo
tanto
forman parte de las principales vas de exposicin. Ya se mencion antes que las vas de exposicin a los txicos
ambientales son la ingestin, la inhalacin y la exposicin cutnea. Una misma dosis qumica pueden producir diferentes
efectos, dependiendo de la va por la cual ingresa. La ingestin es la va de exposicin ms comn, sin embargo la
inhalacin y la absorcin cutnea forman parte importante de varias rutas de exposicin en el ambiente de trabajo. La
exposicin cutnea es importante, cuando los txicos se encuentran en cuerpos de agua que se pueden usar para recreacin
(natacin y deportes acuticos). La velocidad de absorcin depende de varios factores entre los que se incluyen
la concentracin del
txico
la magnitud y localizacin en el cuerpo del rea
expuesta
la condicin de la
piel
. La hidratacin, quemaduras y ciertas enfermedades incrementan la
permeabilidad
la velocidad de flujo
sanguneo

temperatura
y
humedad
ambiental
la interaccin con otras substancias que puedan modificar la permeabilidad de la
piel. Condiciones ADME de un compuesto
3.8. PRINCIPALES VIAS DE ENTRADA DE LOS
XBS
3.8.1.piel

Absorcin cutanea:A travs de la

La absorcin a travs de la piel es un tema

complejo, por la propia estructura de la piel. Esta se
considera una buena barrera de proteccin (100 micras) ,
por lo tanto, es bastante impermeable a soluciones acuosas
y a iones; es permeable a muchos tipos de xenobiticos
fundamentalmente por su carcter lipoflico. Es importante
en especies acuticas (peces). Para humanos es importante
en casos de exposicin en ambientes de fabricacin o
manipulacin.
Txicos que pueden absorberse por piel y causar
intoxicacin aguda:

Organofosforados

Derivados halogenados de los hidrocarburos.

Anilinas
Derivados nitrados del benceno
Sales de talio
Por contacto drmico suelen entrar: Medicamentos y contaminantes. Factores que afectan al proceso:
* Biotransformacin cutnea, puede alterar la absorcin.
Diferentes velocidades de absorcin segn regin anatmica: escroto>axila>espalda>abdomen.
Efectos de surfactantes y disolventes que acompaan al XB. Para metales slo se absorben los derivados
orgnicos. Diferencias importantes entre especies, grosor, pelo, etc. El cerdo y los primates sirven para el
modelo humano.
Los steres penetran mejor que las drogas libres. Las esterasas (que hidrolizan steres) de la piel liberan la droga
activa.

3.8.2.Ingestin: absorcin intestinal: A travs del

digestivo
- Ruta ms frecuente en las intoxicaciones accidentales o con fines suicidas.
- Compartimentos con particulares caractersticas histolgicas, bioqumicas y fsico qumicas.
Cuando el txico se ingiere, entra al Tracto Gastro Intestinal (TGI), la mayor cantidad se absorbe en el estmago y en
los intestinos aunque tambin puede haber absorcin en cualquier lugar del TGI, incluyendo las absorciones sublingual y
rectal.
La gran rea de absorcin del intestino y los largos tiempos de residencia, dependiendo de la movilidad intestinal,
permiten que se tengan absorciones considerables aunque el flujo, cantidad transportada por unidad de rea y de tiempo,
sea pequeo.
Es la va mas importante para la entrada de txicos en el organismo. El tracto intestinal est muy capilarizado y una vez
que los compuestos han atravesado el epitelio entran en la circulacin sistmica a travs de los capilares. Se ha estimado
que la alimentacin con leche materna puede llegar a aportar 100 pg iTEQ/kg peso/dia. El sitio de absorcin depende en
parte del estado de ionizacin del compuesto. Los cidos dbiles es ms probable que se absorban en el estmago, donde
hay un pH bajo, mientras que las bases dbiles, que estn menos ionizadas a pH alto, se absorben mejor en el intestino
donde existen estas condiciones
- El lugar de absorcin ms importante es el estmago e intestino delgado.
- Gran superficie por el nmero de microvellosidades (120 m ).
- Presencia de alimentos.
- Peristaltismo intestinal y Velocidad de evacuacin gstrica.
- Concentracin, rapidez de disolucin, coeficiente
de particin (liposolubilidad).
La absorcin de los xenobiticos usa los mismos
mecanismos que tiene el TGI para absorber los nutrimentos.
Por ejemplo, el plomo se absorbe en el intestino usando el
sistema de transporte del calcio.
Para que un compuesto ingerido pueda alcanzar la
circulacin general, acceder al resto del organismo y tener
la posibilidad de causar un dao, debe primero ser capaz de
resistir:
la accin de las enzimas
digestivas,

el
pH
del
estmago,
la biodegradacin por la flora
intestinal.
la biotransformacin por las enzimas
hepticas.
La absortividad del txico ingerido depende de
sus propiedades fsicoqumicas. Los compuestos
liposolubles de
bajo peso molecular y los compuestos no ionizados se absorben mejor. . Factores que modulan la absorcin
gastrointestinal:
pH, la dieta, la motilidad intestinal.
* Biotransformacin. Por la flora microbiana y las enzimas liberadas desde el epitelio.
Diferencias importantes entre especies.
gastrintestinal

2+
Alimentos y agua son un vehculo:
en espinacas, Cd en cereales, aditivos, colorantes, etc. Se pueden conducir
NO3
fcilmente hasta el hgado. Es la va mas importante de entrada de XB, por ejemplo de PCDFs y PCDDs (hasta un 95 %).
En general se absorben bien las sales minerales; el Pb solo se absorbe un 10 %; en nios hasta el 53 %.

3.8.3.- Absorcin respiratoria:A travs del sistema respiratorio;

Es la tercera ruta mayoritaria.
La inhalacin es la va de exposicin a gases, vapores de lquidos voltiles, aerosoles y partculas suspendidas en el aire
(CO, NO2, benceno, formaldehido, CCl4, Pb, silica, asbestos, etc). Los sitios de absorcin son la nariz y los pulmones. La
nariz acta como un limpiador o trampa para los gases solubles en agua y los muy reactivos as como, para retener las
partculas grandes. La absorcin de gases que llegan al pulmn usa el mecanismo del intercambio de oxgeno y bixido de
carbono.

La velocidad de difusin de los gases en el pulmn es muy grande, debido a que la barrera es escasa, el flujo sanguneo es
muy alto y el rea de transferencia es muy grande. Lo anterior produce que la velocidad de absorcin en el pulmn sea
alta, independientemente de la naturaleza qumica del agente.
Las substancias ionizadas, que son las de ms lenta absorcin, normalmente no son voltiles, por lo que es poco probable
que se encuentren en el aire como vapores o gases, aunque pueden llegar hasta los alvolos si estn absorbidas a las
partculas . Vapores y gases: La velocidad de entrada vendr definida por la concentracin del compuesto, el tiempo de
inhalacin, la solubilidad del mismo en la sangre. Interior de edificios con conservantes de madera (clorofenoles).
Aerosoles y partculas: La entrada de aerosoles y partculas depender en gran medida del efecto de filtro que ejerzan las
vas respiratorias. Es una va importante de entrada de contaminantes ambientales (metales pesados y derivados,
PCDD/PCDF).

Rpida y completa.
Factores: gran tamao
de la superficie alveolar, rica red vascular y
corta distancia (1-1.5 micra).
Suelen ser muy agudas y graves.
El txico no pasa por el hgado, los
mecanismos de defensa y metabolizacin no
son eficaces.
No se puede hacer tratamiento neutralizante,
o que disminuya la absorcin.
La toxicidad depender de: Ctte de Haber,
relacionada con la frecuencia y el volumen
respiratorios del sujeto.
La regin del aparato respiratorio en la que se
depositan
las partculas y aerosoles depende de su tamao.
Las partculas de 5 m o ms grandes se depositan
en la
regin nasofarngea, que es la regin ms alta. Las partculas de 1 a 5 m son depositadas en la regin traqueobronquiolar
del pulmn, de aqu pueden ser eliminadas por medio de estornudos o tos, y pueden pasar al TGI. Las partculas de 1 m
y ms pequeas penetran a los alveolos pulmonares. Estas pueden ser absorbidas a la sangre o bien, pueden ser eliminadas
por medio de macrfagos alveolares. Las partculas inhaladas por la boca son deglutidas y entran al TGI.
3.9.- DISTRIBUCION
Una vez que el txico est en la circulacin sistmica, comienza su distribucin hacia los diferentes tejidos u rganos,
lugares donde ejercer una accin con respuesta toxicolgica o no. La distribucin de compuestos hacia los tejidos
perifricos suele hacerse en base a los sistemas de transporte de lpidos y es dependiente de cuatro factores:
- Las propiedades qumico-fsicas del compuesto (pKa, liposolubilidad,
MW).
- Su capacidad de unin a protenas y lipoprotenas para el
transporte.
- El gradiente de concentracin establecido entre la sangre y los
tejidos.
- La razn de flujo de sangre a masa del tejido y la afinidad del compuesto por los constituyentes del tejido u rgano
blanco.

DISTRIBUCIN de XBS en el ORGANISMO

ORAL
I
V
V

Lugar de ACCIN:
TXICA,
TERAPETICA

TPICO

INTESTINO

PIEL

HECES
Bilis

CCIIRRCCUUL
LAACCIINN
vveennaa PPOOR
RT T AA
Unin a
protenas

HGAD
O

M
TEJIDOS Unin a
tejidos,
BIOACUMULACIN

CIRCULACIN
SISTMICA
BIOACUMULACIN

BIOTRANSFORMACIN

HG
AD
O

RI
N

SC

Reabsorcin
tubular

Secreccion
onones

BILISORINA

ESQUEMA DE LAS FASES RECURRENTES EN LA INTERACCIN DE LOS XBS CON LOS

ORGANISMOS VIVOS y que son consideradas como contenido de la MATERIA.