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2008
Prlogo
Como resultado de una encuesta aplicada en dos aos sucesivos, en
generaciones anteriores del curso de Biologa Celular Bsica (251.121) dictado a
los estudiantes de Biologa Celular Bsica de la Carrera de Enfermera de la
Universidad de Concepcin, con el fin de averiguar posibles carencias que
hubieran en el curso con el objetivo de lograr un mejor rendimiento de los
estudiantes, surgi la idea de hacer un manual de apuntes para este ramo.
las clases
sesiones
de
laboratorio.
Estas
ltimas
actividades
son
Este material impreso puede adems ser utilizado por cualquier estudiante
del rea biolgica que requiera complementar informacin sobre biologa celular
actualizada hasta el ao 2005, en espaol.
CAPTULO I
MEMBRANAS BIOLGICAS
H. Eugenio Arriagada M.
Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular.
Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
membranas
internas
que
delimitan
los
diversos
organelos
cualquier lado de la membrana que los separa; la energa puede as, convertirse a
otras formas de energa mientras las molculas se mueven a travs de las
membranas desde el lado de mayor concentracin hacia el de menor
concentracin. Este proceso de transduccin de energa (cambio de una forma de
energa en otra), es el mecanismo bsico que utiliza la clula para convertir y
almacenar energa. En el interior celular, las membranas mitocondriales sustentan
procesos de transduccin de energa.
Las membranas celulares tambin desempean la importante funcin de
superficie de trabajo, as, algunas reacciones qumicas son catalizadas por
enzimas ligadas a las membranas. Las membranas proporcionan un andamiaje
que permite organizar en la superficie celular a las enzimas que participan en
reacciones sucesivas, ordenando los reactantes para una interaccin ms
efectiva, pudindose generar ms rpidamente algunas molculas requeridas por
la clula.
Las membranas biolgicas son estructuras muy dinmicas (flexibles)
permitiendo a los componentes celulares y subcelulares los cambios de forma que
acompaan al crecimiento celular y al movimiento (movimiento ameboideo).
Gracias a la fluidez de las membranas sus componentes lipdicos y proteicos son
capaces de moverse e interactuar.
Las membranas son autosellantes (por razones termodinmicas), lo que
permite entre otras cosas que dos membranas se fusionen como ocurre en el
fenmeno de la exocitosis.
En las membranas, hay protenas integrales que atraviesan la bicapa
lipdica tales como: protenas transportadoras o portadoras (carriers) que
translocan iones y solutos orgnicos a travs de la membrana; receptores que se
combinan con molculas especficas externas (ligandos o primeros mensajeros)
tales como hormonas, neurotransmisores, factores de crecimiento, provocando
que la membrana genere una seal que puede estimular o inhibir una respuesta
celular (transduccin de seales); molculas de adhesin que hacen posible que
las clulas se reconozcan y se adhieran entre s y con componentes de la matriz
extracelular.
membrana
plasmtica
funciona
como
una
barrera
de
membranas
biolgicas
fue
necesario
previamente
contar
con
cromatogrficas.
Los
resultados
obtenidos,
mostraron
los
diversos
y protenas
vara
considerablemente
dependiendo del tipo de membrana, del organismo y del tipo celular (Tabla 1).
Protena
Lpido
Carbohidrato
18
79
Eritrocito (humano)
49
43
Hgado (rata)
58
42
(5-10)
Membrana interna
76
24
(1-2)
membrana externa
55
45
RE rugoso
55
45
RE liso
47
53
B. subtilis
80
20
Mitocondria (cerdo)
Microsomas (bovino)
tres
clases
de
lpidos
de
membranas
celulares
animales:
Fosfoglicridos.
10
Figura 2. Estructura qumica de un fosfoglicrido, 1,2-dipalmitoilfosfatidilcolina (1,2dihexadecanoil-sn-glicero-3-fosfocolina). Se muestra en rectngulos, la cabeza polar y la
cola apolar del fosfolpido (molcula anfiptica).
11
12
c
Figura 4. Representacin de la estructura de: a) esfingosina, b) ceramida, y c)
esfingomielina (SM).
son
13
de
la
naturaleza
del
azcar,
se
distinguen
diversos
mientras
que
pequeas
cantidades
de
cerebrsidos
14
Colesterol.
El colesterol es un componente mayoritario de las membranas plasmticas
animales. En las membranas de organelos, se encuentra en menor cantidad. Las
15
16
tambin
precursor
de
hormonas
esteroidales
(cortisol,
aldosterona,
G. R.
Colesterol
25
25
PC (lecitina)
11
23
PE (cefalina)
14
20
SM
PS
Mitocondria
Microsoma
E. coli
48
55
28
18
82
18
11
PG
Resto*
37
18
13
11
Bicapa lipdica.
A pesar de la variabilidad en la composicin fosfolipdica de las
membranas biolgicas, la unidad estructural es siempre una bicapa (Figura 7), una
estructura laminar compuesta de dos capas de molculas de fosfolpidos en
aposicin cuyas cabezas polares enfrentan el medio acuoso y cuyas colas
alifticas forman un medio hidrofbico de alrededor de 3 nm (30 ) de espesor.
La bicapa lipdica, es una consecuencia de la orientacin espontnea
energticamente ms favorable de las molculas de fosfolpidos (tienen forma
17
otra
propiedad
importante,
el
autosellado.
Si
se
interrumpe
veces por
18
Figura 7. Bicapa lipdica. Algunos de los movimientos que exhiben los fosfolpidos en la
bicapa.
19
Para
tal
efecto,
se
incorporan
protenas
en
los
liposomas
20
Importancia de la fluidez.
Muchos procesos celulares bsicos dependen del movimiento de
componentes de la membrana, lo que es posible gracias a la fluidez de la
membrana. La fluidez permite que ocurran entre otros procesos celulares: el
ensamblaje de membranas, la asociacin de protenas de membrana, la unin de
ligandos a sus receptores y que se genere la transduccin de seales, el
funcionamiento correcto de los sistemas de transporte y las enzimas (transduccin
de energa), la distribucin de los lpidos y protenas de membrana desde sus
sitios de sntesis, y la distribucin de molculas de membrana entre clulas hijas
cuando una clula se divide.
21
por GPI y protenas miristoiladas estn asociadas a rafts. Los rafts participaran
en: polarizacin y trfico de membranas, transduccin de seales e infeccin viral.
A partir de rafts lipdicos por polimerizacin de caveolina, protena integral
con dos dominios globulares con un dominio hidrofbico con forma de horquilla
que une la protena a la cara citoslica de la membrana plasmtica, se forman las
caveolas, pequeas invaginaciones locales de las membranas plasmticas de
clulas endoteliales y epiteliales. Tienen un dimetro de 50 a 100 nm. Se
relacionan con funciones tales como: endocitosis, transcitosis de albmina y otras
protenas en endotelios, homeostasis del colesterol y transduccin de seales.
en
el
sistema
nervioso
causando
neurodegeneracin
22
Protenas de membrana.
Todas las
lipdica, sin embargo, mucha de las funciones claves de una membrana son
debidas a las protenas que la atraviesan o que se asocian con ella.
Todas las membranas biolgicas contienen protenas cuyas propiedades
dependen del tipo de clula y de la localizacin subcelular.
El tipo y cantidad de protenas que componen las membranas es muy
variable. Por ejemplo, la membrana mitocondrial interna contiene poco ms de
70% de protenas y la mielina slo 18%. El alto contenido de lpido de la mielina
posibilita que asle elctricamente a una neurona de su medio ambiente.
En una membrana que contiene un 50% de protenas y ya que las
protenas son mucho ms grandes que los lpidos, hay 50 a 100 molculas de
fosfolpidos por molcula de protena. Las protenas de membrana son
principalmente glicoprotenas.
23
Protenas integrales.
Las protenas integrales, requieren detergente a fin de ser extradas desde
las membranas. Lo anterior pone de manifiesto que la interaccin de las protenas
integrales con la bicapa lipdica es de tipo hidrofbico (Figura 9a).
La insercin de protenas integrales en el interior apolar de la bicapa, se
pudo visualizar mediante microscopa electrnica de transmisin (TEM) de
superficies de fractura por congelamiento o criofractura (freeze-fracture). En esta
tcnica la membrana en estudio es congelada rpidamente a 196C y luego es
fracturada con una cuchilla de ultramicrotomo. La fractura ocurre por la parte
central de la bicapa, separndose en las dos monocapas constituyentes con sus
superficies hidrofbicas expuestas. Al observar al TEM, rplicas metlicas de las
superficies, se aprecian en ellas partculas de 5-10 nm de dimetro, que
corresponden a protenas integrales que penetran la bicapa. En general, las
superficies expuestas de una misma membrana difieren en el nmero y tamao de
24
las partculas, lo que significa que las protenas integrales no tienen una
distribucin simtrica en las membranas. Al observar preparaciones de bicapas
lipdicas, stas muestran slo superficies de criofractura lisas.
Una protena integral unipaso, atraviesa la bicapa con un dominio
hidrofbico interior, formado por alrededor de 20 residuos de aminocidos
generalmente apolares, y con dominios extracelular y citoplasmtico hidroflicos,
de tamao variable dependiendo de la funcin de la protena, hacia las fases
acuosas.
La glicoforina A, glicoprotena de la membrana del eritrocito, fue la primera
protena de esta clase en la que se demostr por mtodos qumicos que atraviesa
una vez la bicapa. Esta protena integral presenta: a) un dominio N-terminal
hidroflico en el lado externo de la membrana, que consta de 72 residuos de
aminocidos y de 16 cadenas de oligosacridos (~60% de la masa molecular), b)
un dominio hidroflico de 40 residuos de aminocidos en el lado citoslico, con
numerosos residuos de aminocidos con carga elctrica y el extremo C-terminal, y
c) un segmento hidrofbico de 19 residuos de aminocidos que atraviesa la
bicapa. Un aspecto destacable en esta glicoprotena es la presencia de cido
silico y por tanto de carga negativa en el extremo de cada cadena de
oligosacrido las que pueden permitir a los eritrocitos repelerse unos a otros y
prevenir el agrupamiento de los mismos cuando circulan por vasos finos.
Otras protenas transmembrnicas (canales y transportadores) atraviesan
varias veces la bicapa. Por ejemplo, los transportadores de glucosa atraviesan 12
veces la membrana. Un tipo importante de receptores hormonales (receptor
acoplado a protena G) atraviesan la membrana 7 veces.
Algunas protenas integrales estn inmersas (alfa hlices hidrofbicas)
slo parcialmente en la bicapa (Figura 9b), por aos se crey que este tipo de
protena no exista, pero la melitina (veneno de abeja) y la prostanglandina H2
sintasa comprueban lo contrario.
Muchas protenas transmembrnicas, se asocian a otras protenas
transmembrnicas para formar dmeros, trmeros, tetrmeros, etc. Por ejemplo,
receptores para protenas de la matriz extracelular (colgeno, fibronectina y
lamininas) son conocidas como integrinas, protenas heterodimricas con una
25
subunidad alfa y una beta, cada una de las cuales atraviesa la membrana slo una
vez. Las subunidades se mantienen unidas por interacciones no covalentes.
Adems de unirse entre s y con otros componentes de la membrana, las
protenas pueden unirse a protenas del citoplasma que las anclan a los
microfilamentos, microtbulos, filamentos intermedios o forman parte de alguna
cadena de transduccin de seales. Anlogamente, hay protenas que reconocen
y se unen a componentes de la matriz extracelular, o forman estructuras que les
permiten asociarse a clulas vecinas, como es el caso de los desmosomas,
uniones oclusivas y uniones comunicantes.
La regin de la protena que atraviesa la membrana es en la mayora de
los casos una a-hlice, pero en otros como el de las porinas de la membrana
externa de bacterias Gram negativa (E. Coli) y las porinas de la membrana
mitocondrial externa es un barril b, en el cual 8-22 hojas beta antiparalelas
conforman una estructura cilndrica en forma de barril. Estas estructuras,
presentan poros centrales que permiten el transporte de pequeas molculas
hidroflicas que incluyen nutrientes y productos de deshecho. No todos los barriles
beta son protenas de transporte. Algunas de estas ltimas protenas de bacterias
funcionan como receptores o enzimas.
Las mismas fuerzas termodinmicas que favorecen la formacin de una ahlice en el interior apolar de una bicapa lipdica estabilizan tambin los barriles
beta. En estos barriles b de membrana, cada hoja beta est unida rgidamente a
sus vecinas por uniones hidrgeno, de manera que es improbable que ocurran
cambios conformacionales como sucede en las a-hlices de protenas de
membrana.
Protenas perifricas.
Las protenas perifricas (Figura 9d), pueden ser extradas desde las
membranas por tratamientos suaves como soluciones de alta fuerza inica o con
tampones de alto o bajo pH. Al removerlas o solubilizarlas, no se altera la
estructura de las bicapas lipdicas.
26
27
28
29
30
31
32
33
intestinales
posee
protenas
integrales
que
funcionan
como
Na
y K
bomba Na -K
34
fuera de la clula y K
Asimetra lipdica.
Una caracterstica de las membranas es la asimetra en la composicin de
lpidos de la bicapa. Aunque la mayora de los fosfolpidos estn presentes en
ambas monocapas, ellos son normalmente ms abundantes en una u otra
superficie de las membranas. La asimetra de las bicapas lipdicas es
consecuencia de su modo de biosntesis, pero esta asimetra no es absoluta,
excepto para los glicolpidos.
En la membrana plasmtica de los eritrocitos, los fosfolpidos que poseen
un grupo colina (SM y PC), se encuentran predominantemente en la monocapa
externa y los lpidos con grupos amino (PS y PE), se encuentran en la cara
citoslica. Tambin el fosfatidilinositol, se halla en la cara citoslica de la
35
Asimetra de carbohidratos.
Una asimetra interior-exterior es proporcionada por la ubicacin de
carbohidratos unidos a protenas y lpidos de membrana. Las cadenas de
carbohidratos de los glicolpidos y glicoprotenas, se ubican en la superficie
externa de la membrana plasmtica.
Hay tambin asimetras regionales en las membranas como las de las
clulas mucosales intestinales. En las membranas plasmticas de las clulas
epiteliales, los glicolpidos estn confinados a la superficie apical expuesta, donde
estas molculas pueden ayudar en la proteccin de la membrana contra las
difciles condiciones que presenta esta zona (bajo pH y enzimas degradativas).
36
unidos
covalentemente
protenas
formando
glicoprotenas
polisacridos
unidos
covalentemente
protenas
son
glicoprotenas
tienen
dominios
de
secuencias
hidroflicas
37
La
membrana
que
cubre
las
microvellosidades,
es
altamente
38
39
mediciones de las
40
extendida
ms
que
una
configuracin
globular,
estn
propia funcin particular. La pregunta que surgi en ese momento fue: cmo las
membranas pueden variar en funcin si todas ellas tienen la misma estructura?
Tambin se realizaron observaciones que mostraban variaciones en el espesor de
las membranas y que ponan en duda la generalizacin hecha por Robertson.
Al
inicio
complementarios
de
la
dcada
del
70,
dos
enfoques
experimentales
41
42
43
Resumen.
lipdicos
principales
de
las
membranas
animales
son
Las bicapas lipdicas son barreras al flujo de molculas polares con carga o
sin carga.
Las membranas son altamente asimtricas. Las dos caras de las membranas
biolgicas siempre difieren en composicin una de otra.
44
Bibliografa
Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. Biologa
Molecular de la Clula. Ediciones Omega, Barcelona. 4 edicin. 2003.
Cooper, G. M. La Clula. Editorial Marbn, Madrid. 2 edicin. 2002.
Lodish, H., Berk, A., Zipursky, S. L., Matsudaira, P., Baltimore, D., & Darnell, J.
Biologa Celular y Molecular. Editorial Panamericana. 4 edicin, 2002.
Nelson, D. L, & Cox M. M. Principios de Bioqumica. Ediciones Omega S.A.
Tercera Edicin, 2000.
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46
CAPTULO II
SISTEMAS DE ENDOMEMBRANAS (RE Y GOLGI),
SISTEMA VACUOLAR Y LISOSOMAS
Fidelina Gonzlez, Gabriela Sconzo, Giussepina Turturici, Fabiana Geraci, Giovanni Giudice.
Depto Biologa Celular. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
Dipartamento di Biologia Cellulare e dello Sviluppo. Universit di Palermo. Palermo. Italia.
Temas.
1. Retculo endoplsmico rugoso.
2. Retculo endoplsmico liso.
3. Golgi.
4. Vesiculacin y secrecin.
5. Formacin de los lisosomas y funcin.
6. Endocitosis y exocitosis.
7. Proyecto Genoma Humano y la va secretora.
Aplicacin al rea de la salud.
1. Enfermedad de Parkinson.
2. Enfermedades producidas por defectos enzimticos en los lisosomas.
3. Fibrosis qustica o fibrosis cstica.
Retculo Endoplsmico Rugoso.
1. Generalidades.
2. Pptido seal.
3. Traslocacin cotraduccional. Traslocn.
4. Protenas solubles y la insercin de protenas transmembrana. Peptidasa
seal. Complejo peptidasa seal.
5. Control de calidad en el retculo endoplsmico. Chaperonas. Plegamiento de
las protenas. Glicosilacin. Complejo oligosacariltransferasa.
6. Formacin de puentes disulfuro.
Retculo endoplsmico liso.
1. Generalidades.
2. Sntesis de lpidos y fosfolpidos. Vitamina A.
3. Sntesis de hormonas esteroidades
4. Calcio y sodio.
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5. Metabolismo de Glcidos.
6. Detoxificacin.
7. Formacin de vesiculas que van del RE al Golgi.
Golgi.
1. Generalidades.
2. Glicosilacin de protenas.
3. Grupos fosfato protenas lisosmicas
4. Sulfatacin de protenas.
5. Empaquetamiento.
6. Condensacin.
7. Acumulacin.
8. Protelisis final.
9. Distribucin especfica.
10. Vesiculacin.
Lisosomas.
1. Generalidades.
2. Formacin de lisosomas.
3. Endosoma primario.
4. Membrana plasmtica del lisosoma.
5. Funciones de los lisosomas.
48
INTRODUCCIN
apropiado,
formando
parte
del
contenido
de
estos
la
clula,
las
funciones
desarrolladas
por
el
sistema
de
49
1. Generalidades.
La descripcin morfolgica de estos organelos se debe principalmente a la
microscopa electrnica de transmisin. El retculo endoplsmico es una red de
tbulos y cisternas o sacos ramificados e interconectados. El dimetro de los
-10
m). La
50
2. Pptido seal.
Una vez asociadas las subunidades de los ribosomas al mensajero, se
inicia la sntesis de protenas en el citoplasma, que se detiene si en la secuencia
de aminocidos se lee la correspondiente a un pptido seal, que es reconocido
por la protena citoplasmtica SRP (es una sigla derivada del ingls que significa
partcula de reconocimiento de la seal) que se une a la secuencia del pptido
seal y ancla al ribosoma a la membrana del retculo endoplsmico a travs del
receptor de la partcula (RP) situado en el retculo endoplsmico. La secuencia
51
por
52
53
La protena TRAM.
La protena TRAM (protena de membrana asociada a la traslocacin de la
cadena polipeptdica) es una protena glicosilada multipaso que cumple un rol
54
55
56
Glicosilacin de protenas.
La adicin de carbohidratos o glicanos a la protena cumple roles
esenciales en el destino de la protena. Es as que se ha demostrado que la
composicin de carbohidratos codifica la informacin crucial sobre la estructura,
localizacin y edad de las protenas, promueve la maduracin y facilita el control
de calidad de las protenas en el lumen de la va secretoria. Adems actan de
forma estrica (en el espacio) impidiendo el acceso de proteasas. Los glicanos
agregados a las protenas en el retculo endoplsmico constituyen el 50% de la
masa de la protena, son por lo tanto modificaciones voluminosas, que le dan
flexibilidad a la protena y a la vez le confieren propiedades hidroflicas, se ha
comprobado que se extienden aproximadamente 3 nm desde la protena.
En el retculo endoplsmico ocurre la glicosilacin N-ligada de protenas
mientras la traslocacin est en progreso: glicosilacin cotraduccional. Las
unidades de oligosacridos de 14 residuos de azcares son agregadas al
aminocido asparragina de la cadena polipeptdica en crecimiento por el complejo
oligosacrido transferasa (OST). Previamente el oligosacrido es sintetizado en
un lpido que est anclado a la membrana del retculo endoplsmico, dolicol, que
porta el oligosacrido, a la forma de dolicol pirofosfato. Este oligosacrido es
transferido a la protena en el residuo asparragina en una secuencia de consenso
Asn-X-Ser/Thr de la protena, por el complejo oligosacrido transferasa. La OST
tiene al menos dos sitios de unin, uno para el sitio de consenso y el otro para el
oligosacrido unido al dolicol, es probable que exista otro sitio de unin al
traslocn. Posteriormente son removidos cuatro residuos de azcar: tres glucosas
y una manosa del glicano. La Figura 2 indica claramente la composicin del
glicano transferido a asparagina, con sus respectivos enlaces y se indican las
enzimas que participan en forma posterior a la unin del glicano N-ligado (a
asparagina). En la Tabla 1, se detallan las funciones de cada uno de los pasos.
57
58
Modo de generacin
Funcin
El glicano es transferido por OST
desde OS-PP-Dol
Glc2Man9GlcNAc2 Glucosidasa I
para
iniciarse
el
plegamiento
Glc1Man9GlcNAc2 Glucosidasa II y GT
Man9 GlcNAc2
Glucosidasa II
Man8 GlcNAc2
Manosidasa I del RE
ManX GlcNAc2
59
60
61
62
Reglucosilacin.
La calreticulina y la calnexina, son ayudadas en el reconocimiento de las
protenas mal plegadas por la glucosil transferasa (GT) dependiente de UDP. GT
es una protena de 174 kDa que tiene dos dominios, uno para la actividad
transferasa de la glucosa a la glicoprotena, en el glicano, especficamente en la
ramificacin A (Figura 2, Tabla 1), y el otro dominio es el sensor de plegamiento,
que comprende alrededor del 75% de la protena. La protena GT reconoce los
residuos hidrofbicos expuestos en glicoprotenas en formacin, realizando as
una actividad complementaria con calnexina y calreticulina, que se asocian a la
porcin hidroflica de la protena, es decir a la porcin glicanos N-ligados. La GT
agrega glucosa a aquellas molculas que detecta como glicoprotenas mal
plegadas. Esta es una marca de retencin en el RE y que da tiempo para que la
protena mal plegada pueda plegarse correctamente. Los siguientes son los pasos
que se siguen en el lumen del retculo:
1) La enzima Glucosidasa I remueve la glucosa terminal de la ramificacin A del
glicano de una protena.
63
64
65
FBS1
y SCF
FBS2
1. Generalidades.
El retculo endoplsmico liso es ms tubular que el retculo endoplsmico
rugoso, y estos tbulos se encuentran profusamente anastomosados formando
una verdadera red de tbulos. El retculo endoplsmico liso no tiene ribosomas en
su superficie externa.
66
4. Calcio y sodio.
En las clulas regula la distribucin de los iones calcio, ya que el lumen
del retculo endoplsmico es el principal sitio de almacenamiento de la clula. En
las clulas musculares, se denomina retculo sarcoplsmico, regula la contraccin.
Contiene en su interior una AT pasa dependiente de Calcio. La liberacin de los
iones calcio promueve la contraccin.
5. Metabolismo de Glcidos.
En el retculo endoplsmico liso de hepatocitos, la presencia de Glucosa
6 fosfato interviene en el metabolismo del glicgeno (heptico). En el retculo
endoplsmico liso de los hepatocitos ocurre la sntesis de glicgeno y
almacenamiento como grnulos en el exterior del retculo endoplsmico liso
disponible para la degradacin de glucgeno con la liberacin de glucosa 1
fosfato.
67
6. Detoxificacin.
Aumenta en los hepatocitos luego de la exposicin a barbitricos;
transforma los frmacos liposolubles en productos hidrosolubles que pueden ser
excretados por el rin. Tambin metaboliza el alcohol producto de beber en
exceso. Contiene hidrolasas, lipooxidasas y metilasas que son responsables de
estos procesos.
desde el retculo
endoplsmico salen del organelo en vesculas que yeman desde la porcin lisa de
retculo endoplsmico, esta regin carece de ribosomas. El retculo endoplsmico
liso no se encuentra tan desarrollado en algunas clulas y por esto es denominado
retculo endoplsmico de transicin.
Por qu se produce la retencin de protenas en el RE? Algunos
autores se refieren a esto como regulacin de los sitios de salida de los
productos proteicos en los que intervendran dos estructuras protecas, una el
coatmero COP II que forma la cubierta externa de la vescula que sale del RE
con destino a las cisternas cis del Golgi y una protena SAR, una GTPasa
(intercambia GTP por GDP, pudiendose de esta manera hacer el movimiento de
vesculas entre compartimientos) de la familia Ras. En estos sitios de salida,
tambien denominados RE de transicin (ERGIC), se inicia la yemacin de las
vesculas, con la incorporacin de los coatmeros en la parte externa, que van
unidos a otras protenas integrales de membrana, como lo muestra el esquema.
Micrografas electrnicas muestran que en estos sitios se producen numerosas
vesculas que migran hacia el Golgi, y se fusionan con las cisternas cis del Golgi.
Las vesculas tienen dimensiones de alrededor de 50 nm.
A nivel de la exportacin del RE, la clasificacin de las protenas en los
sitios de salida determina si una protena puede abandonar el RE. Aqu las
seales de exportacin y retencin, los efectos de la movilidad de protenas en el
RE y la inclusin selectiva en los sitios de salida del RE son factores cruciales.
Como conclusin se debe sealar que en el retculo el plegamiento y la
maduracin estn constantemente sujetos a procesos de ensayo-error, y una
68
1. Generalidades.
El aparato o complejo de Golgi es un organelo constitudo por una serie de
sacos aplanados o cisternas y vesculas asociadas, cuya funcin principal es la
modificacin postraduccional y clasificacin de protenas sintetizadas en el RE y
destinadas por medio de vesculas a: lisosomas, membrana plasmtica o a
secrecin. El Golgi est ubicado cerca del ncleo, del retculo endoplsmico y del
centrosoma. Su tamao es variable y su desarrollo depende del tipo celular y de
su estado metablico y del ciclo celular.
La unidad bsica del organelo es el sculo, que consiste en una vescula
o cisterna aplanada con una regin central de 0,5-1 mm de dimetro. Las
cisternas o sculos presentan una forma curva concntrica, con una cara
convexa y otra cncava, se disponen en pilas paralelas separadas por 20 a 30
nm. Esta serie de sculos apilados conforman un dictiosoma.
En las clulas animales, el nmero de dictiosomas vara entre 3 y 7. El
Golgi est compuesto de una asociacin de dictiosomas. Los dictiosomas estn
polarizados. Tienen una cara cis (proximal o formadora), generalmente convexa y
cercana a la envoltura nuclear y al retculo endoplsmico, y una cara trans, (distal
o de maduracin), cncava, rodeando la regin que contiene vesculas grandes
que contienen el material procesado.
Forman tambin parte del Golgi, una serie de vesculas regularmente
esfricas que se forman a ambos lados de los extremos del Golgi, y entre los
sculos. En la cara cis se localizan las denominadas vesculas de transicin y en
la cara trans las vesculas de secrecin. Es frecuente encontrar la denominacin
con la sigla TGN, que significa red trans Golgi, al lugar donde emergen las
69
70
71
Normalmente la parte de las protenas que son escindidas del producto final
corresponde a regiones donde se encuentran pptidos seales que han enviado
a la protena como preprotena hasta la cisterna donde es procesada. Ejemplo
de esto es la insulina. La insulina es transportada desde el retculo endoplsmico
rugoso como proinsulina al Golgi, y tiene como parte de la cadena polipeptdica
a un pptido C, adems del pptido A y pptido B. Este pptido C es escindido
de la cadena polipeptdica antes de abandonar el Golgi. La funcin de esta parte
de la cadena polipeptdica es asegurar el paso por el Golgi.
Distribucin especfica de los productos a travs del proceso de vesiculacin,
est dada por seales peptdicas principalmente que envan a las protenas en
distintos tipos de vesculas y de compartimientos endocticos (endosomas,
lisosomas, vacuolas).
En resumen.
Todas las cisternas participan en los procesos de vesiculacin: formacin de
pequeos cuerpos rodeados por membranas y que contienen sustancias que
van a ser transportadas dentro de la clula o hacia afuera de la clula.
Glicosilacin de protenas. En el Golgi ocurre la glicosilacin en los residuos de
aminocidos de la protena serina o treonina. Estos aminocidos contienen un
grupo hidroxilo al que se agregan cadenas de azcares a las protenas.
72
Sistema vacuolar.
Las distintas vesculas se pueden diferenciar por las cubiertas protecas
que llevan en el lado citoplasmtico. Hay tres tipos de vesiculas de acuerdo a la
cubierta proteca: vesculas con cubiertas de clatrina, vesculas recubiertas por
coatmero COP I y vesculas cubiertas por coatmero COP II.
73
74
75
Proceso de vesiculacin.
Adems de las protenas de cubierta mencionadas anteriormente y las
molculas adaptadoras, tambin en el proceso de vesiculacin participan
pequeas molculas que unen GTP en el caso de la formacin del canastillo de
clatrina, que son necesarias para la formacin de la vescula revestida.
Sistema endoctico.
Cmo se orienta una vescula que contiene material a transportar
desde el sitio que se genera al sitio donde debe depositar su carga?
La opcin del destino de la vescula, especialmente en el sistema
endosoma-lisosoma est dado por pptido seales contenidos en los dominios
citoslicos de las protenas transmembrana. Como parte de estas seales estn
76
Lisosomas
1. Generalidades.
Los lisosomas son organelos rodeados de membrana de alrededor de
250 a 500 m, su nombre se debe a que el organelo puede lisar es decir romper
o degradar productos dentro de la clula, como protenas, cidos nuclecos
(ADN, ARN), carbohidratos y lpidos. Su ruptura en una clula causara la
destruccin total de sta. Tienen una membrana que rodea al lisosoma y que
contiene una mezcla de enzimas hidrolticas que sirven como el principal
compartimiento degradativo para macromolculas dentro del sistema vacuolar.
Son el destino final de muchos materiales celulares endocticos, autofgicos y
secretorios marcados debidamente con una seal para su destruccin. La
degradacin en los lisosomas es crtica en muchos procesos fisiolgicos
incluyendo el recambio de protenas normales de la clula, los productos de la
degradacin de las protenas pueden ser reutilizados por la clula, la regulacin
en cadena de los receptores, la liberacin de los nutrientes endocitados, la
inactivacin de organismos patgenos y el procesamiento de antgenos. Los
lisosomas juegan un rol fundamental en la homeostasis de iones metlicos y en
la reparacin de membranas.
La identificacin de los lisosomas al microscopio basado en la apariencia
es difcil debido a la heterogeneidad de formas. La identificacin de los lisosomas
77
2. Formacin de lisosomas.
Los lisosomas se forman a partir del Golgi a travs de compartimientos
endosmicos. Hay dos modelos propuestos para la biognesis de los lisosomas,
uno es el modelo de maduracin de los lisosomas que implica la formacin de
endosomas tempranos por coalescencia de vesculas originadas en la
membrana plasmtica. La remocin de vesculas reciclables y la adicin de
vesculas de la red trans Golgi transforma estos endosomas en endosoma
tardos y eventualmente lisosomas.
El otro modelo de transporte vesicular propone que los endosomas
tempranos, los endosomas tardos y los lisosomas son compartimientos
estables. El transporte procede desde los endosomas tempranos a travs de
vesculas transportadoras de endosomas con caractersticas de un cuerpo
multivesicular, a endosomas tardos los cuales maduran a lisosomas.
Las interacciones entre endosomas tardos y lisosomas incluyen el
modelo "kiss and run", contacto transiente entre endosomas tardos y lisosomas.
Este modelo propone que los endosomas y los lisosomas sufren ciclos repetidos
de fusin y fisin permitiendo la transferencia de materiales y mantencin de los
lisosomas maduros. Una reciente variacin de este modelo propone la fusin de
endosomas tardos con lisosomas, dando origen a un organelo hbrido con una
subsecuente reformacin de los lisosomas.
78
79
80
3. Endosoma primario.
El sistema endosmico juega un importante rol en el procesamiento de
nutrientes derivados extracelularmente, en la regulacin de receptores activados
de la superficie celular, mantencin de la homeostasis de la membrana y defensa
contra patgenos. Los ligandos internalizados son vaciados al inicio a los
endosomas,
donde
ocurre
una
serie
de
eventos
de
clasificacin
81
82
83
Bomba de Protones.
La bomba de protones dependientes de ATP de endosomas tardos y
lisosomas corresponde a ATPasas que son responsables de la acidificacin de
estos compartimientos. La acidificacin de los compartimientos vacuolares juega
84
85
Exocitosis y endocitosis
Autofagia.
La autofagia es un complejo proceso celular que implica rearreglos
dinmicos de membrana en condiciones fisiolgicas. Luego de la induccin de la
autofagia, en condiciones de hambruna, el citoplasma es secuestrado en
vesculas y vaciado a organelos de degradacin, el lisosoma en mamferos y la
vacuola en la levadura. El proceso es nico y convierte el material intracelular en
uno extracelular. Constituye un proceso de adaptacin a condiciones
ambientales diferentes. Cuando en condiciones experimentales se cultivan
clulas sin los nutrientes adecuados a su sobrevivencia, en el citoplasma se
forman rpidamente vacuolas o vesculas en el citosol conteniendo un gran
volumen
de
protenas
organelos.
Estas
vesculas
se
denominan
autofagosomas y tienen corta vida media, de alrededor de minutos, antes que las
hidrolasas lisosmicas inicien la degradacin del contenido de macromolculas,
permitiendo la liberacin de unidades monomricas desde el lumen lisosmico al
citosol. Esta forma de autofagia se denomina macroautofagia. La membrana del
autofagosoma
86
se
caracteriza
por
una
relativa
ausencia
de
protenas
Fagocitosis.
Rutas endocticas en mamferos. Johannes y Lamaze (2002) han
propuesto 5 rutas en mamiferos.
87
Endocitosis y Pinocitosis.
-
Caveolas y caveosomas
Las caveolas son depresiones planas de superficie lisa de 50-80 nm de
88
y glicoesfingolpidos. Participan en la
internalizacin de
89
90
Retrmero.
El retrmero es un complejo proteco que participa en la va de
recuperacin de receptores desde el sistema endoctico al TGN. Se ha
demostrado su participacin en la recuperacin de un tipo de MPR (CI-MPR:
receptor de manosa fosfato catin independiente). El retrmero se encuentra
presente en endosomas tempranos y de maduracin intermedia entre endosoma
temprano y tardo, principalmente. El retrmero impide la liberacin de los
91
92
4 genes en la vesiculacin
7 genes en la secrecin
producidas
por
priones,
pertenecen
las
denominadas
93
94
95
96
Defecto
Ejemplo
Mutacin
Dominio
Aspectos
afectado en
clnicos
la protena
I
Produccin de protena
G542X
NBD1
3905InsT
NBD2
marco
Insuficiencia
pancretica
de
lectura
621+G-T
Procesamiento o
DI507
NBD1
Insuficiencia
maduracin de la
DF508 (*)
NBD1
pancretica
protena en la va
N1303K
NBD2
Regulacin del
G551D
NBD1
Insuficiencia
transporte de cloruros.
G1244E
NBD2
pancretica
R117H (**)
MSD1
Suficiencia
MSD1
II
secretora
III
Falta de reconocimiento
de nucletidos
IV
Conduccin defectuosa
del cloruro
pancretica
97
Figura 3. Modelo propuesto para explicar el camino que sigue en la clula la formacin de
un canal de cloruros y la forma como se manifiestan las mutaciones.
Modificado de Welsh MJ & AE Smith. 1993. Molecular mechanisms of CFTR chloride
channel dysfunction in cystic fibrosis. Cell 73 (7): 1251-1254.(Con permiso de la editorial)*.
98
Bibliografa:
Herbert, DN, Garman, SC, Molinari, M. 2005. The glycan code of the
endoplasmic reticulum: asparagine-linked carbohydrates as protein maturation
and quality-control tags. Trends in Cell Biology 15(7):364-370.
Johannes y Lamaze (2002). Clatrin-dependent or not: Is it still the question?
Traffic. 3:443-451.
Rmisch, K. 2005. Endoplasmic Reticulum-associated degradation. Annu Rev
Cell Dev. Biol. 21: 435-456.
Welsh MJ & AE Smith. 1993. Molecular mechanisms of CFTR chloride channel
dysfunction in cystic fibrosis. Cell 73 (7): 1251-1254.
99
100
CAPTULO III
ARMAZN CELULAR Y ORGANELOS: CITOESQUELETO, MITOCONDRIA,
PEROXISOMAS Y NCLEO
Fidelina Gonzlez, Gabriela Sconzo, Giussepina Turturici, Fabiana Geraci, Giovanni Giudice
Depto Biologa Celular. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
Dipartamento di Biologia Cellulare e dello Sviluppo. Universit di Palermo. Palermo. Italia.
mitocondriales,
localizacin
de
funciones
mitocondriales.
2. Transporte de protenas de la mitocondria codificadas en el ncleo.
3. Origen de los fosfolpidos en las membranas de la mitocondria.
4. ADN y genes mitocondriales.
3. Peroxisomas, organizacin para la destoxificacin celular, metabolismo de
lpidos y de hormonas esferoidales.
1. Biognesis
de
los
peroxisomas
y transporte
de
las
protenas
peroxisomales.
2. Funciones de los peroxisomas: Metabolismo y Destoxificacin.
4. Ncleo, organizacin para el almacenamiento y procesamiento de la
informacin gentica.
1. Envoltura y poros nucleares.
2. Lmina nuclear.
3. Cromatina y cromosomas.
4. Compartimientos nucleares y funcin en el procesamiento de la
informacin gentica.
101
Enfermedades
producidas
por
defectos
102
en
los
peroxisomas,
Citoesqueleto
estructurales:
En
la
clula
podemos
distinguir
los
103
Microtbulos
Estructura
Microfilamentos
Filamentos intermedios
Tbulos huecos
Protenas fibrosas
Pared consistente de 13
entrelazadas
superenrrolladas fprmando
columnas de molculas de
cables engrosados
tubulinas
Dimetro
7 nm
8- 12 nm
Subunidad
Actina
proteca
tubulina y -tubulina
Funcin
Mantencin de la forma
Mantencin de la forma
principal
compresin
soportan tensin)
soportan tensin)
Cambios en la forma
flagelos)
celular
Movimientos cromosmicos en
Formacin de la lmina
la divisin celular
pseudpodos en
nuclear
Movimientos organelares
amebas y macrfagos)
Contraccin muscular
Ciclosis: movimiento del
citoplasma
Divisin celular:
formacin del surco de
clivaje o de divisin
celular.
104
Forma celular:
El esqueleto de actina es el ms importante componente del citoesqueleto
celular. La actina se localiza en la periferia de la clula, por debajo de la
membrana plasmtica formando una red que la sustenta. Al tener propiedades de
gel viscoso elstico, el citoesqueleto de actina mantiene la forma celular y sustenta
los cambios de la forma. La dinmica de la actina permite la extensin de la
membrana plasmtica. Los manojos de actina de la red de filamentos sustentan la
estructura celular. Los motores de miosina asociados permiten la contractilidad y
transporte de vesculas. Los manojos de actina y los filamentos intermedios
permiten la adhesin celular. La red de lmina sustenta la estructura nuclear.
En el caso del citoesqueleto de actina, este es una matriz porosa,
formando un andamio como sendas o caminos a lo largo de las cuales las
miosinas transportan sus cargamentos o se deslizan para realizar la contractilidad
celular. Los manojos de filamentos de actina (fibras de estrs o soporte) estn
unidas a la matriz extracelular mediante las integrinas. Las integrinas son
protenas integrales de membrana de aproximadamente 160 kDa que participan
en el anclaje a la matriz extracelular unindose a las protenas fibronectina y
laminina. Las integrinas estn conformadas por dos subunidades, alfa y beta. La
subunidad alfa tiene un dominio de unin del calcio. Dos enfermedades humanas
se originan por defectos genticos de las integrinas. La trombostenia de
Glanzmann, en las que las plaquetas carecen del receptor celular para el
fibringeno GpIIb/IIIa lo que lleva a la agregacin anormal y tiempos de sangrado
prolongados. La deficiencia de adhesin de leucocitos producido por la
ausencia de la subunidad beta de la integrina de leucocitos y causa infecciones
bacterianas recurrentes, adems de retardar la curacin de heridas. Esto es a
causa que la ausencia de integrina dificulta el movimiento de estas clulas
defensivas, perjudicando su capacidad de migrar hacia los lugares de infeccin y
fagocitar los microorganismos invasores.
105
regulando la dinmica de los filamentos de actina. Entre estas protenas estn las
aquellas que unen monmeros, las que permiten el crecimiento del filamento, las
adaptadoras, las protenas que cortan el filamento y las protenas que
desestabilizan el filamento. Ejemplo Timosina beta 4, es una pequea protena de
masa molecular de 5000, une G-actina, la actina monomrica globular, est
presente en alta concentracin en la clula (aproximadamente 0,5 mM) y
secuestra G-actina manteniendo un gran volumen de actina no polimerizada en la
clula. Otro ejemplo es la profilina, una protena de masa molecular de 15000, se
une al extremo de la G-actina en una proporcin 1:1, promueve el intercambio de
ADP por ATP. El complejo actina-profilina puede agregarse al extremo positivo o
de crecimiento de un filamento, y compite con la timosina beta 4 por la actina.
106
Nmero de
Tipo FI, de
Grupo de
Genes que
acuerdo a la
ensamble de
codifican FI
forma de la
polimerizacin
varilla central
de los FI
Tamao kDa
Distribucin
Keratina (cida)
>25
40-64
Epitelio
Keratina (Bsica)
>25
II
52-48
Epitelio
Vimentina
III
55
Heterogneo
Desmina
III
53
Msculo
GFAP
III
50-52
AstrocitoAstroglia
Periferina
III
54
Neuronas SNP
Sincoilina
III/IV
54
Msculo
NF-L
IV
62
Neuronas SNC
NF-M
IV
102
Neuronas SNC
NF-H
IV
110
Neuronas SNC
Alfa-Internexina
IV
66
Neuronas SNC
Lamina A/C
72/62
Ncleo
Lamina Beta 1
65
Ncleo
Lamina Beta 2
78
Ncleo
Nestina
VI
240
Heterognea
Sinemina
VI
182
Msculo
Desmosina
VI
140
Msculo
Fakinina/CP49
Orfan
46
Lentes
Filensina
Orfan
83
Lentes
Microtbulos de 25 nm de dimetro.
Microtbulos: cilindros huecos de 25 nm de espesor y pared de 5 nm de grosor.
Tienen longitud variable.
107
Morfologa.
Microtbulos lbiles y microtbulos estables. Axonema de cilios y flagelos.
Centrolos. Microtbulos lbiles se observan luego de la fijacin con glutaraldehdo
(>4C). Se originan del centro organizador de microtbulos (MTOC). Se agrupan
en haces. Microtbulos estables se observan despus de la fijacin con distintos
fijadores y a diversas temperaturas.
Axonema de cilios y flagelos. Centrolos. Los cilios y flagelos se caracterizan por
contener un axonema. El axonema est constitudo por
un haz central de
CENTROSOMA
El centrosoma o centro celular est conformado por dos centrolos
dispuestos cercano al ncleo. Los centrolos son organoides formados por
microtbulos organizados en tripletes, revelado por estudios de ultraestructura. El
centrosoma determina la polaridad de la clula y el eje de la clula.
Los microtbulos se observan en el centro organizador de microtbulos
(MTOC). El MTOC, corresponde a cualquier estructura que en la clula cumple la
funcin de agrupar y organizar los microtbulos. En las clulas animales el MTOC
es un centrosoma, protenas que forman una red que puede contener un par de
centrolos. El MTOC puede nuclear la polimerizacin de subunidades de tubulina o
puede unir los extremos de los microtbulos, que se ensamblan en forma
independiente en el citosol. Es probable que el MTOC sea la principal estructura
organizadora de la clula y contribuya a determinar la organizacin de las
estructuras y organelos asociados a microtbulos como por ejemplo las
mitocondrias, el Complejo de Golgi y el reticulo endoplsmico. En la mayora de
108
109
las MAPs fosforiladas son incapaces de unirse a los microtbulos o MAPs sin
fosforilar asociada a los microtbulos. Las MAPs son fosforiladas por una MAP
quinasa y desfosforilada por una fosfatasa. Las MAP se encuentran asociadas a
microtbulos de dendritas y axones son las MAP del tipo I: MAP1A, MAP1 B y las
MAP del tipo II: MAP2A, MAP2B, en dendritas; MAP2C, en dendritas
embrionarias, MAP4 en clulas no neuronales y Tau en dendritas y axones.
Transporte intracelular.
Las vesculas limitadas por membranas dentro de la clula son
transportadas a lo largo de vas bien definidas. Uno de los movimientos que son
mediados por microtbulos que sirven de carriles dentro de la neurona, es el
transporte axnico que puede ser de dos tipos: antergrado, desde el cuerpo
de la neurona hacia las uniones sinpticas o retrgrado, en sentido contrario.
Puede ser transportado material rodeado por membranas en vesculas, protenas
del citoesqueleto y organelos como las mitocondrias. El transporte de pigmentos
en melanforos es otro ejemplo donde el material transportado usando a
microtbulos como carriles son pigmentos. Las vesculas del Golgi y el retculo
endoplsmico, tambin son transportadas a travs de los carriles formados por
microtbulos en la clula. Si se desorganizan los microtbulos mediante la adicin
de colchicina, se desorganiza la conformacin reticular del RE, in vitro.
El transporte de las vesculas antergrado a lo largo del microtbulo es
dirigido por protenas motoras asociadas al microtbulo. Una de estas protenas es
la quinesina que dirige el movimiento hacia el extremo positivo del microtbulo,
este transporte requiere de ATP. La quinesina es un dmero que consta de dos
cabezas globulares conectadas por un largo tallo central. La cabeza se une a los
microtbulos y al ATP y la cola se une la membrana de
las vesculas
110
111
MITOCONDRIA
112
113
Receptores
de
direccionamiento
importacin
de
las
que
protenas
reconocen
citoslicas
secuencias
destinadas
de
las
114
115
116
117
es
esencial
para
la
oxidacin
de
glucosa,
lipognesis
funciona
como
homodmero
como
un
cotransportador
118
119
Como
parte
del
complejo
tambin
hay
diferentes
componentes
120
121
1. Remocin de calcio del citosol. Este transporte que realiza una ATPasa Ca
122
-18
123
124
Estas
protenas
adems
de la
Apoptosis y mitocondria.
La mitocondria juega un rol fundamental en la regulacin de la apoptosis,
acta como un centro de control de la apoptosis. En la mitocondria daada se
forma un poro de transicin de permeabilidad mitocondrial (mt PTP) que al parecer
consiste en un traslocador de nucletidos de adenina (VDAC) y de varias otras
protenas mitocondriales incluyendo a miembros de la familia Bcl2. Uno de los ms
potentes activadores de la apoptosis es el citocromo C derivado del espacio
intermembrana de la mitocondria. Su presencia en el citosol activa una cascada de
enzimas protelticas denominadas caspasas, en conjunto con otras protenas. La
activacin de las caspasas lleva a la destruccin de protenas claves en la
mantencin de la estructura celular, como ejemplo se puede citar la degradacin
de una protena que inhibe la enzima que destruye el ADN (DNAasa activada por
caspasas, CAD), liberando CAD para clivar el material gentico.
Los miembros de la familia de protenas Bcl2 estn ubicados
preferentemente en la membrana externa y se ha demostrado que la fraccin
citoplasmtica enriquecida de mitocondrias es capaz de inducir la apoptosis
nuclear. El estrs oxidativo que induce la apoptosis es frenado por las protenas
Bcl2, es por lo tanto un factor antiapopttico.
125
PEROXISOMAS
Peroxisomas organizacin para la destoxificacin celular, metabolismo de
lpidos y de hormonas esferoidales.
Los peroxisomas (microcuerpos) son organelos presentes en todos los
tipos celulares, con la excepcin de los glbulos rojos. Son cuerpos de forma
ovalada o esfrica, limitados por una nica membrana lisa. La matriz se aprecia
granulosa y homognea. Normalmente son esfricos, pero tambin hay de formas
elongadas, tubulares o reticuladas tienen un dimetro vara de 0,1 a 1 m, y su
nmero vara entre 100 y 1000 por clula, siendo en las clulas hepticas y
renales normalmente muy numerosos. La membrana del peroxisoma es
+
126
127
128
Pex1p
Pex6p
7q21-q22
Pex12p
8q21.1
Pex19p
6q23-q24
Pex3p
Pex5p
12p13.3
Pex13p, Pex14p
Pex6p
Pex1p
6p22-p11
Pex5p, Pex13p,
6q21-q22.2
Receptor PTS2
Pex14p
129
Pex10p
Pex12p
1p36.32
Pex19p
Pex5p, Pex10p,
Pex19p
17q21.1
del peroxisoma
Pex13p
Pex13p, Pex14p
Pex17p
Pex16p
Pex19p
11p11.2
Pex19p
Diferentes peroxinas
1q22
de la membrana del
peroxisoma
peroxisoma
Pex1p, Pex6p
Pex26p
22q11.21
130
131
R + H2O2 ), mediante la
siguiente reaccin:
catalasa
2 H2O2
2 H2O + O2
2 H2O + T
132
NCLEO
Ncleo, organizacin para el almacenamiento y procesamiento de la
informacin gentica
El ncleo es el organelo que contiene la informacin gentica de la clula
a la forma de secuencias de ADN que en los organismos eucariontes
discretamente organizada en cromosomas. En esta parte del captulo se hace
referencia a la organizacin del ncleo en la interfase del ciclo celular, que es la
etapa del ciclo celular en que se encuentra organizado para que tenga lugar el
flujo de informacin gentica hacia el citoplasma, a travs de la transcripcin en el
ncleo hacia el citoplasma donde se realiza la traduccin.
En el ncleo se sintetiza la molcula de ARN teniendo como molde la
informacin contenida en el ADN de los cromosomas y ocurre tambin la
maduracin o procesamiento del ARN heteronuclear o transcrito primario para
formar el ARN mensajero. La organizacin de los genes, la regulacin de la
expresin gnica y la generacin de traslocaciones cromosmicas (intercambio de
segmentos de cromosomas no homlogos), tiene lugar durante la interfase en el
ncleo. Durante la mitosis se interrumpe la organizacin del ncleo, los
cromosomas se condensan y se congregan en la placa metafsica, desaparece la
organizacin espacial tridimensional del ncleo. El ncleo es, por lo tanto, el
organelo ms dinmico de la clula. Almacena la mayor parte del material
gentico y es el sitio donde ocurre la mayor parte de los procesos regulatorios del
genoma. El ncleo contiene adems una variedad de estructuras dinmicas que lo
hacen un organelo con varios subcompartimientos que han sido delimitados
claramente aunque la interaccin funcional entre ellos an se desconoce.
133
134
la
interaccin
de
Ran
con
los
transportadores.
La
familia
135
una variante de splicing del gen B2. Las laminas B3 y C2 son especficas para
clulas germinales, donde probablemente juegan un rol en la reorganizacin de la
cromatina durante la meiosis. LAP1, LAP2, emerina, MAN1, LBR, nurima y UNC84 son todas protenas integrales de membrana. LAP2, emerin y Man1 comparten
un dominio homlogo de 43 residuos de aminocidos cerca del extremo N-terminal
denominado dominio LEM. LBR es una protena de unin a la lmina B que es
homloga de la reductasa esterol C14 ubicada en el retculo endoplsmico SR1 y
SR2. Nurima tiene cinco dominios transmembrana que median su marcaje a la
membrana interna, donde interacta con el andamiaje nuclear. La protena arresto
joven (YA o young arrest) es una protena codificada por genes maternos en la
mosca de la fruta, Drosophila y se requiere para la transicin desde meiosis a
mitosis. YA o protena de arresto joven es una protena perifrica de membrana
asociada a la lamina y la cromatina.
Diversas actividades nucleares requieren de la lmina nuclear, as por
ejemplo, durante la mitosis, el adecuado ensamble y desensamble de la lamina
nuclear se requieren para el progreso del ciclo celular. La lmina nuclear juega un
rol esencial en la organizacin nuclear por anclaje de la cromatina a la envoltura
nuclear. Se ha demostrado interaccin especfica entre histonas y laminas, entre
protenas con dominios LEM y BAF (BAF: barreras a factores de autointegracin) y
tambin entre LBR y HP1 (HP: protena asociada a heterocromatina). As las
interacciones entre estas protenas y sus respectivas protenas de interaccin en
la lamina estn probablemente implicadas en la organizacin del silenciamiento de
la cromatina en la periferia del ncleo, que da origen a la heterocromatina. Cabe
sealar que las histonas y las protenas HP-1 y BAF se distribuyen ampliamente
en el ncleo y no son especficas de la lmina. La protena UNC-84 facilita la
interaccin ncleo-centrosoma requerida para migracin y anclaje de nucleos
durante procesos del desarrollo de algunos invertebrados.
136
El Nuclelo.
El nuclelo es la nica estructura subnuclear que es visible a la
microscopa ptica, como se puede apreciar claramente en las neuronas, en
hepatocitos, en oocitos de anfibios, etc. El nuclelo est conformado por una
regin fibrilar y una regin granular, el compartimiento perinucleolar, componente
fibrilar denso. Los nuclelos se forman en las regiones organizadoras del nuclelo
(NOR) ubicados en cromosomas especficos, en los cromosomas 13, 14, 15, 21 y
22. Las NOR contienen genes codificantes que transcriben activamente el ARN
ribosmico (ARNr).
137
del
ARNr
(maduracin
del
ARN
ribosomal)
ocurren
las
138
regulacin
gnica
como
un
modelo
territorio
cromosmico-
dominio
intercromosmico.
139
140
de
la
poliadenilacin
(CPSF),
ambos
necesarios
para
el
141
de
los
dominios
cromosmicos,
mientras
que
los
genes
142
dominios
OPT
(Oct/PTF/Transcripcin)
son
dominios
transcripcionalmente activos ricos en PTF, Oct1, TBP, SP1 y ARN polimerasa II.
Estos dominios tienen 1 a 1,5 micrmetros de dimetro y adems de los factores
de transcripcin, contienen tambin transcritos primarios en formacin. Cada
ncleo de clulas de mamfero contiene de uno a tres dominios OPT que aparecen
en G1, en estrecha proximidad al ncleolo, y desaparecen en fase S. Los dominios
OPT aparecen asociados con una banda del brazo corto del cromosoma 6 (banda
6p10) y al cromosoma 7, por lo tanto estara asociado a genes especficos en
estos cromosomas donde se concentran factores de procesamiento y transcripcin
que facilitan la expresin de estos genes. La funcin precisa de estas estructuras
nucleares es desconocida. Con el nuclelo adems comparten otro rasgo similar
aparte de la asociacin con genes especficos, y es la de contener ARN
polimerasas. El nuclelo contiene ARN polimerasa I que transcribe genes
ribosomales. Los dominios OPT contienen ARN polimerasa II y III. Los dominios
OPT y los nuclelos pueden aparecer prximos entre s en el ncleo, pero no se
traslapan.
Nucleoplasma propiamente tal contiene protenas nucleares difusas que
no se encuentran presentes en los nucleolos como por ejemplo muchos factores
de transcripcin con motivo dedos de zinc.
Miopatas mitocondriales.
Las miopatas mitocondriales muestran a la microscopa electrnica
mitocondrias de morfologa anormal como por ejemplo escasez de crestas dando
a la mitocondria un aspecto vacuolar o bien apareciendo como remolinos formado
panales al interior de la mitocondria. Estos cambios estructurales tienen
repercusin en transtornos en el transporte de electrones o en la ATP sintasa.
143
Peroxisomopatas.
Los peroxisomas que presentan un malfuncionamiento son la causa de
numerosas enfermedades genticas humanas causadas ya sea por la deficiencia
en la actividad de alguna enzima, que por tanto bloquea una va metablica o bien
por defectos en el transporte hacia la matriz del peroxisoma de los componentes
de este compartimiento. Las vas metablicas principales que ocurren en la matriz
del peroxisoma son:
a) beta oxidacin de cidos grasos
b) alfa oxidacin de cidos grasos
c) sntesis de colesterol y varios isoprenoides
d) sntesis de ter fosfolpidos
e) biosntesis de cidos grasos poliinsaturados
en
la
etapa
adulta,
muchas
de
ellas
mal
diagnosticados
144
145
Referencias.
Becker W.M., Kleinsmith I.J.
146
CAPITULO IV
CICLO CELULAR, APOPTOSIS Y ENVEJECIMIENTO
Fidelina Gonzlez, Gabriela Sconzo, Giussepina Turturici, Fabiana Geraci, Giovanni Giudice
Depto Biologa Celular. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
Dipartamento di Biologia Cellulare e dello Sviluppo. Universit di Palermo. Palermo. Italia.
1. Ciclo celular.
1. Mitosis.
2. Meiosis.
3. Genes y control del ciclo celular.
4. Genes supresores y protooncogenes.
2. Ciclo celular y apoptosis.
1. Apoptosis versus necrosis.
2. Cambios morfolgicos.
3. Mitocondria y apoptosis.
4. Formacin del apoptosoma. Estructura del apoptosoma humano.
5. Caspasas.
3. Tipos de apoptosis.
1. Apoptosis mediada por el ligando Fas.
2. Apoptosis inducida por TNF (factor necrtico tumoral).
3. Apoptosis estimulada por linfocitos T citotxicos.
4. Apoptosis por disminucin de factores de crecimiento.
5. Lesin del ADN mediada por apoptosis.
4. Envejecimiento.
147
Ciclo celular.
Una de las propiedades de la materia viviente es la capacidad de
autoreplicarse. La clula se reproduce duplicando su contenido y dividindose en
dos. En los organismos multicelulares los ciclos de divisin celular se requieren
para reemplazar las clulas que se pierden en forma natural, en los organismos
unicelulares es la forma de aumentar el nmero de individuos de la poblacin, esto
incluye a eucariontes y procariontes.
Se puede definir el ciclo celular como una serie ordenada de eventos que
culmina en la duplicacin celular.
El rol del ciclo celular en eucariontes se puede resumir en los siguientes
puntos:
a) Aumento del nmero de clulas en un organismo.
b) Reparacin de clulas que se han perdido en forma natural, incluyendo a
aquellas que se pierden por apoptosis.
c) Participacin en la diferenciacin y el desarrollo de los organismos.
d) Forma de reproduccin de unicelulares.
148
149
permanecen unidas a travs del centrmero, que es requerido en lnafase para una
adecuada segregacin o separacin de las cromtidas hermanas. Al final de la
profase cada centrolo se mueve a los polos de la clula para conformar el huso
mittico. El huso mittico es una estructura conformada por dmeros de tubulinas
que conforman microtbulos como se vi en un captulo anterior. El huso se
ensambla inicialmente por fuera del nucleo. A nivel celular los cambios observados
en la clula en mitosis son un aumento de la viscosidad del citoplasma en general,
desorganizacin de los organelos de la va secretoria, y al final de la profase
vesiculacin de la envoltura nuclear. Estas vesculas permanecen visibles
alrededor del huso mittico. El huso mittico empieza a crecer hacia el espacio
nuclear.
Alrededor
del
centrmero
se
organizan
complejos
protecos
150
entre los don ncleos hijos. En el lugar del surco de clivaje, se forma un anillo de
actina contrctil perpendicular a las fibras del huso mittico.
Meiosis.
La meiosis es una divisin celular especializada que ocurre en las clulas
germinales dando origen a los gametos. En la meiosis hay dos divisiones celulares
sucesivas sin duplicacin del ADN, esta ocurre slo antes de entrar a la meiosis.
La obtencin del nmero haploide ocurre al final de la primera divisin meitica,
cuando se separan los cromosomas homlogos apareados durante la Profase I.
La importancia gentica de la meiosis en la variabilidad de la especie se puede
resumir en lo siguiente:
En el Paquinema de Profase I ocurre entrecruzamiento o croosing-over,
que es el intercambio de segmentos de ADN entre cromtidas homlogas
catalizado
por
ndulos
de
recombinacin
que
conforman
el
complejo
151
152
mecanismos
responden
seales
que
indican
un
mal
funcionamiento, y el ciclo celular se detiene. Hay tres puntos de vigilancia del ciclo:
a) Punto de control de la fase S. En este punto hay control sobre el crecimiento
celular. Una seal de no replicacin del ADN impide que se inicie la mitosis y el
ciclo celular se arresta o detiene en S.
b) Control G2/M. En este punto de control se verifica que el ADN se encuentre
duplicado por lo tanto hay control sobre el aparato de replicacin del ADN, que el
crecimiento celular sea el apropiado, hay control sobre el crecimiento celular.
c) Punto de control de la metafase. Aqu hay control sobre el alineamiento de los
cromosomas en el ecuador de la clula. Una seal que indique que el huso
mittico no est correctamente ensamblado a los cromosomas, y que por lo tanto
los cromosomas no se encuentran bien alineados en el ecuador de la clula,
entonces se impide la anafase, y hay arresto en M.
153
Topoisomerasa: Top3.
154
p53.
La prdida de heterocigosidad en el brazo corto del cromosoma 17 ha sido
asociada con tumores de pulmn, colon y mama. Esta regin incluye al gen p53.
El gen p53 fue descubierto originalmente porque formaba complejos con algunos
antgenos. Se pens en un comienzo que se trataba de un oncogn ya que clones
de ADN copia (ADNc) aislados desde lneas tumorales eran capaces de cooperar
con el oncogn Ras en ensayos de transformacin. En las lneas celulares
normales, p53 es incapaz de cotransformar en presencia de ras. Las `protenas
mutantes p53 se demostr que tenan alterada su estabilidad y conformacin as
como su capacidad de unin a la chaperona hsp70. Anlisis posterior de varias
lneas celulares de leucemia demostraron que el locus p53 se pierde por insercin
o delecin de ambos alelos, lo que sugiere que el tipo silvestre es un supresor de
tumores y no un protooncogn dominante. Se ha demostrado que la mutacin en
el locus p53 es frecuente en varios tipos de neoplasias ms que cualquier otro gen
supresor o protooncogn.
La protena codificada por p53 es una fosfoprotena nuclear. Tiene un
dominio cido en el extremo N-terminal, similar a muchos factores de
transcripcin, que la define como un factor de transcripcin. La protena P53 es un
tetrmero que se puede unir al ADN para promover la sntesis de otras protenas
implicadas en la supresin del crecimiento celular. Una de las principales
protenas blanco es la protena del gen p21, que es una protena inhibitoria del
ciclo celular (denominada p21CIP) que da por resultado la detencin o arresto en
las fases G1 y G2 del ciclo celular. Tambin se ha demostrado una funcin
155
Retinoblastoma (RB).
El locus del gen RB se ubica en el brazo largo del cromosoma 13 (13q14).
Este gen ha sido identificado mediante la clonacin de un transcrito de 4,7 kb. El
gen RB comprende 27 exones que promedian 180 kb en el cromosoma. Este gen
tiene dos intrones de gran tamao, aproximadamente de 35 y 70 kb. El producto
del gen es una protena de 110 kDa conformada por 928 aminocidos.
Corresponde a una protena localizada en el ncleo.
Existen muchas mutaciones que producen la prdida de la funcin del
gen. La mayor parte corresponden a deleciones. Otro tipo de mutaciones
corresponden a mutaciones de punto o errores de maduracin del transcrito
primario.
La principal funcin de pRB es la regulacin de la progresin del ciclo. Su
capacidad de regular el ciclo celular est correlacionada con el estado de
fosforilacin de pRB. La pRB es fosforilada por el complejo SPF, inactivando la
funcin de la protena. La fosforilacin es mxima al inicio de la fase S menor
despus de la mitosis y al inicio de la fase G1. La protena pRB fosforilada se
encuentra presente en las fases S y G2/M, y no fosforilada en estado G y G1 del
ciclo. La estimulacin de clulas quiescentes con sustancias que estimulan la
mitosis (mitgenos) induce la fosforilacin de pRB, sin embargo, la diferenciacin
celular es inducida por pRB no fosforilada. Por lo tanto la forma no fosforilada de
RB suprime la proliferacin celular.
156
Por lo tanto, la pRB puede ser parte del punto de control en G 1. En clulas
en reposo G o G1 la pRB no est fosforilada y corresponde a la protena activa y
detiene el paso a travs del ciclo celular. Slo antes que la clula entre a la fase S,
pRB es modificada por fosforilacin correspondiente a la forma inactiva de la
protena, permitiendo que la clula pueda hacer mitosis.
La protena pRB est presente en todos los tipos de clulas y tejidos
examinados hasta ahora y se encuentran en todos tipos de clulas tanto las que
se encuentran en proliferacin como aquellas que estn en reposo y en todas las
fases del ciclo celular, lo que cambia solamente es su estado de fosforilacin.
A nivel molecular, pRB en el ncleo interacta con la protena EF2, un
factor de transcripcin. Cuando la clula pasa de G1 a S el complejo SPF fosforila
la pRB induciendo un cambio conformacional en la protena que induce la
liberacin del factor EF2 de la pRB. As EF2 queda libre para transcribir genes que
se necesitan para que el ciclo celular prosiga, participando incluso en su propia
transcripcin.
Por lo tanto, en clulas donde pRB no funciona a causa de mutacin, o
est ausente, el factor EF2 no est regulado y permanece activo. Esto permite una
expresin permanente de los genes necesarios para pasar a travs del ciclo
celular, ocurriendo proliferacin descontrolada. En conclusin pRB es un gen
supresor que es un punto de control importante entre ciclo celular y transcripcin
de genes.
En las formas de cncer familiar hereditario causado por pRB, los
individuos que heredan una forma mutada del gen heredada de uno de sus
padres, pueden sufrir una segunda mutacin somtico (en la lnea celular) que
inactiva el alelo normal, dando por resultado el desarrollo del retinoblastoma.
Protooncogenes y Oncogenes.
Los protooncogenes corresponden a genes que codifican protenas que
estimulan la proliferacin celular, los oncogenes corresponden a mutaciones de
los protooncogenes que pueden ser ms activos que los genes normales o ser
activos en tiempo o de una forma no apropiada.
157
Factores de crecimiento.
Reguladores citoplasmticos.
158
vs
necrosis)
sugieren
que
los
dos
procesos
son
En la muerte celular por necrosis hay una declinacin rpida de los niveles
de energa no vistas en la apoptosis y se ha demostrado de forma
experimental que el ATP es esencial para que se desencadene la
apoptosis. Las clulas pueden sufrir necrosis en respuesta a estmulos
apoptticos debido a que los niveles de ATP se encuentran agotados.
159
Necrosis
Fisiolgica o patolgica
Siempre patolgica
Clulas nicas
Conjunto de clulas
Independiente de energa
Contraccin celular
No participa la mitocondria
Activacin
de
proteasas
(caspasas)
especficas
Proceso regulado
No es un proceso regulado
No es un proceso conservado
vecinas
macrfagos
Caspasas.
Las caspasas comparten similitudes en la secuencia de aminocidos,
estructura y especificidad de sustrato. Son expresadas como proenzimas o
zimgenos (30-50 kDa), que contienen tres dominios, uno N-terminal, seguido por
una subunidad de 20 kDa y otra de 10 kDa. La forma inactiva inicial da paso a una
forma activa capaz de clivar a otra caspasa para hacerla activa. Pueden ser
160
161
162
Por lo tanto, el Ca
2+
transmembrana selectivos.
a travs de los
uniportadores y de PTP.
2+
La combinacin de la salida de Ca
163
patolgicas
que
incluyen
cncer,
autoinmunidad
neurodegeneracin.
164
165
166
Vas apoptticas.
Se pueden distinguir dos vas apoptticas, dependiendo de donde emerja
la seal de apoptosis, externa a la clula, la va extrnsica o desde el interior de la
clula la va intrnsica.
Figura 1. Modelo del apoptosoma humano (Yu et al 2005). (Con permiso de la editorial)*
167
pero en su lugar la maquinaria apopttica asegura que las clulas sean eliminadas
limpiamente, a fin de evitar la inflamacin. El dao mitocondrial puede iniciar la va
intrnsica regulando el efecto de la protena Bcl-2. En esta va participa el
citocromo C de la mitocondria, que tiene como funcin ser lanzadera de electrones
en la cadena respiratoria. El citocromo C liberado de la mitocondria daada une
Apaf1, que entonces activa a las capasas iniciadoras en este caso caspasa 9 que
luego activa a las caspasas efectoras, caspasa 3. Otras protenas liberadas de la
mitocondria daada son Smac/DIABLO y Omi/HtrA2 que contrarrestan el efecto de
protenas inhibidoras de la apoptosis (denominadas con la sigla IAPs) que
normalmente se unen y evitan la activacin de la caspasa 3. La interaccin entre
miembros de la familia Bcl, IAPs, Smac/DIABLO y Omi/HtrA2, es el centro de la
va intrnsica de la apoptosis.
Envejecimiento.
El proceso de envejecimiento implica un proceso de post- maduracin que
conduce a una reducida homeostasis y aumento de la vulnerabilidad del
organismo, el trmino ms adecuado es senescencia. El envejecimiento se refiere
a cualquier proceso que es dependiente del tiempo. Este proceso implica cambios
fisiolgicos a nivel organsmico, e implica a factores intrnsicos que son de
naturaleza gentica y del desarrollo y a factores estocsticos de naturaleza
extrnsica.
El proceso de envejecimiento en mamferos implica al menos 5
caractersticas:
a) Aumento de la mortalidad con la edad posterior a la maduracin.
b) Cambio en la composicin bioqumica de los tejidos con la edad. A nivel celular
aumentan los niveles de lipofucsina (pigmento) y aumento del entramado de
colgeno en la matriz extracelular. Aumenta la tasa de transcripcin de genes
especficos y la tasa de sntesis proteca y numerosas alteraciones en relacin con
la edad como la adicin de glicanos y oxidacin de las protenas como
modificacin post-traduccional.
c) Progresiva disminucin de la capacidad fisiolgica con la edad. A nivel de rin
por ejemplo, disminuye la filtracin del glomrulo.
d) Capacidad reducida de responder adaptativamente a los estmulos ambientales
168
169
170
a) Genes de longevidad.
Hay una amplia evidencia que el envejecimiento es hereditario. Las
mutaciones genticas pueden modificar la senescencia. Los productos de estos
genes que modifican la senescencia actan en diversas formas:
171
c) Neuroendocrina.
La teora neuroendocrina propone que los decrementos funcionales en las
neuronas y las hormonas asociadas son parte central del envejecimiento. Una
importante versin de esta teora sostiene que el eje hipotlamo-pituitaria-adrenal
es el regulador maestro del envejecimiento de un organismo. Esto es debido a que
el sistema neuroendocrino regula el desarrollo temprano, el crecimiento, la
pubertad, el control de los sistemas reproductores, el metabolismo y otros
aspectos de la fisiologa normal, los cambios funcionales de este sistema ejercen
efectos en todo el organismo.
172
d) Inmunolgica.
La teora inmunolgica del envejecimiento se basa en dos puntos:
La
autoinmunidad
aumenta
con
la
edad
con
el
aumento
de
e) Senescencia celular.
Algunas de las caractersticas mostradas por las clulas senescentes son
las siguientes:
173
2) Por recombinacin.
En aquellas clulas con deficiencia de telomerasa, la prdida de la
telomerasa es acompaada por acortamiento progresivo del telmero y
senescencia (envejecimiento). Las pocas clulas que sobreviven es porque son
capaces de activar un mecanismo basado en la recombinacin que les permite
alargar el telmero.
La protena p53 se une con mayor frecuencia al ADN en clulas
envejecidas que en clulas ms jvenes. Las protenas p16 y p21 estn
sobreexpresadas en clulas envejecidas, ambas protenas impiden la progresin
del ciclo celular, manteniendo la clula en la etapa G1 de la interfase, los ciclos
celulares se detienen. La interrupcin del aumento de concentracin de p21, evita
el envejecimiento de fibroblastos en cultivo.
174
f) Muerte celular.
Mutaciones que afectan la estabilidad del genoma: Protena p53 es
esencial para el punto de control que detiene el ciclo celular en la etapa G1 de la
interfase, en clulas que tienen daado el ADN. Si hubiera replicacin celular se
perpetuara la mutacin.
La protena p53 es un factor de transcripcin que induce la expresin del
gen p21, una protena que es un inhibidor del complejo cdkc- G1 50% de casos de
cncer humanos se deben a dao en la protena p53. Esta protena es un
tetrmero. Existe otra protena expresada en tumores, la protena MDM2 (en
ingls, murino doble diminuto), que inhibe la capacidad de la p53 de controlar la
proliferacin de tumores. La protena MDM2 se fija al extremo N-terminal de p53,
por lo tanto se impide la transcripcin del gen p21.
Existe en pacientes que sufren el sndrome de Li-Fraumeni que son
heterocigotos para el gen p53, los fibroblastos en cultivo pierden el alelo normal
para el gen p53, resultando homocigotos para el defecto, por lo tanto no expresa
el gen p21 y envejecen de igual forma que los pacientes normales, por lo tanto, el
envejecimiento no depende de p53. Sin embargo, el producto del oncogen ras
induce la senescencia que es acompaada por acumulacin de las protenas de
los genes p53 y p16.
* Agradecimientos: Agradecemos al autor y a la editorial la facilitacin de la figura
1 para la publicacin en este captulo.
175
Referencias.
Troen BR. 2003. The biology of aging. The Mount Sinai Journal of Medicine 70 (1):
3- 22.
Yu X, D Acahan, JF Menetret, CR Booth, SJ Ludtke, SJ Riedl, Y Shi, X Wang, CW
Akey. 2005. A structure of the human apoptosome at 12.8 A resolution provides
insights into this cell death platform. Structure 13: 1-10.
176
CAPITULO V
MATERIAL CROMOSMICO Y FORMAS DE ESTUDIO
Fidelina Gonzlez. Depto Biologa Celular. Facultad de Ciencias Biolgicas.
Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
Confeccin de cariotipos.
Cariotipo: ordenamiento de los cromosomas de una placa metafsica
fotografiada luego de ser teidos con Giemsa u orcena actica. Ambas tinciones
tien uniforme a los cromosomas.
Este ordenamiento se hace emparejando los cromosomas homlogos de
acuerdo al tamao y posicin del centrmero. Se denomina al brazo por sobre el
centrmero, brazo corto y se le asigna la letra p (del francs ptite) y brazo largo
por debajo del centrmero, asignndose la letra q. Es un ordenamiento
decreciente de acuerdo al tamao. A cada par de cromosomas que ha sido puesto
en orden de acuerdo a los criterios sealados se les asigna un nmero con el cual
se identifica. Se emparejan los autosomas y luego los cromosomas del par sexual.
177
178
179
180
alteran los genes y sus productos gnicos. La secuencia alterada de un gen puede
producir una protena defectuosa porque su estructura est alterada, y por lo tanto
no puede cumplir con la funcin que normalmente desarrolla en el organismo.
Adems, estos estudios han llevado a la dilucidacin de la secuencia de regiones
reguladoras no codificantes necesarias para conservar la homeostasis de la
clula.
Anlisis de PCR.
La reaccin en cadena de la polimerasa ha permitido adems disponer de
cantidades mayores de un fragmento especfico de ADN. Esta tcnica tiene tres
pasos de un ciclo fundamentales en un tubo de reaccin:
1. Apertura de la doble hebra de ADN molde por accin de calor.
2. Hibridacin con cebadores o partidores, por descenso de la temperatura. Los
partidores son secuencias de 15 a 25 desoxinucletidos que complementan con
las secuencias expuestas de ADN molde.
3. Extensin de la cadena complementaria del partidor por ADN polimerasa.
La tcnica de PCR es ampliamente utilizado en laboratorios de
investigacin y tiene muchas aplicaciones en gentica humana, terapia del cncer,
diagnstico prenatal, identificacin de agentes infecciosos como bacilo de la
tuberculosis, virus del SIDA. La limitacin es que es fcil contaminar las muestras
de pacientes con ADN proveniente de personal del laboratorio u hospital por lo
que se requiere de adecuados controles.
Una tcnica vlida para el estudio de la variabilidad gentica es RFLP que
significa polimorfismo en la longitud de fragmentos de restriccin. Esta tcnica
consiste en cortar la secuencia de ADN con enzimas de restriccin. Estas enzimas
provienen de procariontes y cortan en forma especfica la secuencia de ADN ya
que reconocen secuencias de 4 a 6 pares de bases de forma especfica. Esto
produce fragmentos de ADN de distinta longitud que pueden ser resueltos en un
gel de agarosa o poliacrilamida. La ubicacin de estos marcadores asociados a
cromosomas humanos ha ayudado a la localizacin de genes en los cromosomas.
181
182
Longitud
Indice
Forma
Grupo
cromosmico
relativa
centromrico
9,08
48,0
Metacntrico
8,45
38,1
Metacntrico
7,06
45,9
Metacntrico
6,55
27,6
Submetacntrico
6,13
27,4
Submetacntrico
5,84
37,7
Submetacntrico
5,28
37,3
Submetacntrico
5,8
36,9
Submetacntrico
4,96
35,9
Submetacntrico
4,83
33,3
Submetacntrico
10
4,68
31,2
Submetacntrico
11
4,63
35,6
Submetacntrico
12
4,46
30,9
Submetacntrico
13
3,64
14,8
Acrocntrico
14
3,55
15,5
Acrocntrico
15
3,36
14,9
Acrocntrico
16
3,23
40,6
Submetacntrico
17
3,15
31,4
Submetacntrico
18
2,76
26,1
Submetacntrico
19
2,52
42,9
Metacntrico
20
2,33
44,6
Metacntrico
21
1,83
25,7
Acrocntrico
22
1,68
25,0
Acrocntrico
1,96
16,3
Acrocntrico
183
Par de
Caractersticas
Cromosomas
A
123
45
13 14 15
16 17 18
Cromosomas
de
pequeo
tamao
metacntricos
submetacntricos
F
19 20
21 22 Y
184
Referencias.
Welsh J & Smith AE. 1996. Fibrosis qustica. Investigacin y Ciencia, Febrero: 1624.
185
186
CAPITULO VI
HERENCIA Y GENOMA HUMANO. ENFERMEDADES GENTICAS Y
CONSEJO GENTICO. RBOL GENEALGICO O PEDIGR
Fidelina Gonzlez. Depto Biologa Celular. Facultad de Ciencias Biolgicas.
Universidad de Concepcin. Concepcin. Chile.
Consejo Gentico.
El Consejo Gentico es proceso de comunicacin que trata de problemas
humanos asociados con la ocurrencia y riesgo de ocurrencia de un desorden
gentico en una familia (Mahowald et al. 1998). El consejo gentico es un proceso
de consentimiento mutuo. Los consejeros genticos conforman un equipo de
profesionales de la salud que tiene la facultad de dar a un individuo o familia la
informacin actualizada y el apoyo (consejo o gua) considerando los problemas
de crecimiento, desarrollo y salud que podra tener una base gentica. Esto puede
ayudar a las familias y a los individuos a entender y adaptarse a la diagnosis de un
desorden gentico.
Los consejos genticos estn conformados por una o ms personas que
conocen el fundamento mdico, tienen el diagnstico, conocen la evolucin de la
enfermedad y el posible tratamiento. Conocen como contribuye la herencia a la
recurrencia de una anormalidad entre parientes. Pueden discriminar entre
alternativas al riesgo de ocurrencia. Al visualizar el riesgo eligen acciones
apropiadas desde la perspectiva familiar, religiosa y tica. Realizan un programa
de adaptacin del individuo afectado a la vida familiar o como evitar el riesgo de
ocurrencia de la anomala.
Una diagnosis de un desorden gentico se puede hacer o confirmar en un
embarazo, despus del nacimiento, en la infancia o ms tarde en la vida. La
diagnosis podra ser realizada sobre la base de las caractersticas clnicas, test
bioqumicos o test genticos. Esta diagnosis podra significar que otros miembros
de las familias estn en riesgo. Por otro lado, un miembro de una familia podra
reasegurar encontrar que ella o el no tiene o probablemente es improbable que
desarrolle, el desorden en particular. La susceptibilidad o predisposicin a una
enfermedad puede requerir el anlisis de genes mltiples y de factores
ambientales.
187
Dominancia.
Recesividad.
Herencia intermedia.
Codominancia.
Interaccin factorial.
Epstasis.
Variacin.
188
y docenas
de genes
parecen haber
derivado de elementos
189
f) La tasa de mutacin del genoma nuclear es dos veces ms alta en los hombres
que en las mujeres.
g) El anlisis citogentico de los clones secuenciado confirma la sugerencia que
grandes regiones pobres en CG estn correlacionadas con las bandas G de los
cariotipos.
h) Las tasas de recombinacin tienden a ser ms altas en las regiones distales de
los cromosomas (alrededor de 20 megabases) y en los brazos de los cromosomas
ms cortos en general, en un patrn que promueve la ocurrencia de al menos un
retrocruzamiento por brazo cromosmico en cada meiosis.
El Proyecto Genoma Humano ha contribuido a la identificacin de los
genes que contribuyen a las enfermedades. Jimnez-Snchez et al. 2001
propusieron una clasificacin funcional de los genes que producen enfermedades
y sus productos que definen algunos principios de la manifestacin de las
enfermedades consideradas. Han agrupado genes que causan enfermedades y
demostraron correlacin entre la funcin del producto de un gen determinado y
algunos de los rasgos de la enfermedad como la edad de aparicin de la
enfermedad y la forma de herencia.
Los resultados de esta clasificacin funcional de genes comprenden genes
que codifican enzimas, es de alrededor del 31 % del total, aquellos que modulan
las funciones de protenas son de alrededor de un 13 % que incluyen la
estabilizacin, la activacin, el plegamiento de las protenas. Otras doce
categoras contabilizan menos del 10% de la muestra.
Enzimas.
Moduladores de protenas.
Receptores.
Factores de transcripcin.
Transportadores transmembrana.
Canales.
Seales celulares.
190
Hormonas.
Transportadores transcelulares.
Inmunoglobulinas.
codificacin de enzimas.
receptores defectuosos.
codificacin de enzimas
receptores defectuosos
191
Construccin de pedigrs.
A fin de establecer la base gentica de un rasgo familiar, su transmisin
de acuerdo a los principios mendelianos debe ser demostrado. Sin embargo,
obtener patrones de herencia es muy difcil debido a los prolongados tiempos
generacionales a nivel de vida humana, pequeos grupos familiares y la
imposibilidad que los cientficos puedan realizar experimentos de cruzamiento.
Una metodologa ampliamente utilizada es la confeccin de pedigr de familias,
sobre la base de la informacin multigeneracional. Generalmente se obtiene la
forma de herencia de un rasgo ligado al sexo versus autonmica, autonmica
versus dominante.
En el anlisis de la transmisin gentica humana se comienza por la
identificacin de un individuo afectado, denominado propsitus, seguido por la
construccin histrica gentica o pedigr de los individuos de la familia.
En una representacin grfica los hombres se representan con cuadrados
en tanto que las mujeres con crculos. Las reas blancas representan a los
individuos no afectados en tanto las ennegrecidas a los afectados. Las reas
mitad ennegrecidas son los individuos heterocigotos en general y representan los
individuos sanos portadores de un gen recesivo que al estado homocigoto es
afectado, es decir su fenotipo corresponde a la manifestacin de su genotipo
afectado en el estado homocigoto. Tambin los heterocigotos (diferentes alelos en
un locus) u homocigotos (el mismo alelo en un locus) de un rasgo dominante que
d fenotipos afectado se representan con reas ennegrecidas. Las generaciones
de un pedigr son numeradas con nmeros romanos. Los diferentes individuos que
componen una generacin se numeran de derecha a izquierda con numeracin
arbiga, como se observa en la Figura 1.
192
193
Los miembros de una pareja se unen con una lnea horizontal y las
generaciones con lneas verticales. El propsitus o probando que es el individuo
con el que se inicia el pedigr, se indica con una flecha.
En el anlisis de un rasgo gentico a nivel humano usando la construccin
de pedigrs para determinar la transmisin y expresin de genes, se pueden
plantear dos problemas:
a) Transmisin y posicin del gen: en este caso hay que distinguir entre herencia
nuclear y herencia citoplsmica, lo otro es si se encuentra asociado a autosomas o
a cromosomas ligados al sexo y finalmente la posicin o lugar que ocupa un gen
en un cromosoma, definido como locus (plural loci).
b) Expresin del gen: en este caso hay que discriminar entre las interacciones
allicas: dominancia, recesividad, co-dominancia, herencia intermedia; las
interacciones no allicas como epstasis, interaccin factorial; y finalmente los
efectos del ambiente externo e interno sobre el carcter estudiado que afecta la
variacin de la expresin del carcter, las fenocopias.
generaciones y los hijos de una pareja formada por un individuo afectado y uno
normal (que casi siempre es heterocigoto, si la enfermedad no es muy frecuente)
da una proporcin de 1:1 entre hijos normales y afectados. Ambos sexos estn
afectados en la misma proporcin.
Autosmico recesivo: se establece una herencia de un carcter determinado por
un gen recesivo cuando hay consanguinidad de los padres de los individuos
afectados. La mayor parte de los individuos afectados tienen padres normales. De
padres heterocigotos la proporcin entre hijos normales y afectados es 3:1. Todos
los hijos de padres afectados son afectados. Los hijos de un heterocigoto normal
con una pareja normal no son afectados.
Recesivo ligado al sexo: afecta principalmente a varones que provienen de
padres normales. La madre es normal pero es portadora del gen ligado al
194
195
Referencias.
International Human Genoma Sequencing Consortium. 2001. Initial sequencing
and analysis of the human genome. Nature 409: 860-921.
Jimnez-Snchez G, B Childs, D Valle. 2001. Human Disease genes. Nature 409:
853-855.
196
ANEXO: CUESTIONARIOS
ANEXO 1: CUESTIONARIOS DE CLASES
CUESTIONARIO 1
1. Qu es una clula? Qu distingue a las clulas procariticas de las clulas
eucariticas?
2. Cmo se hace el estudio de la clula?
3. Haga un paralelo entre clula procaritica y eucaritica desde el punto de vista
de la estructura.
4. Cmo relaciona Ud el concepto estructura- funcin a nivel celular? D
ejemplos.
5. Mencione las principales macromolculas que componen la clula.
6. Mencione los principales procesos metablicos que cumple la clula.
7. Mencione los principales procesos fisiolgicos que cumple una clula.
8. Mencione los principales roles biolgicos que cumple una clula.
9. Cules son las molculas que dan las caractersticas fsicas a una
membrana celular?
10. Ilustre la forma en que una protena transmembrana est ubicada, refirase
especficamente a canales inicos y fuerzas hidrofbicas.
11. Qu es la difusin simple, difusin facilitada y transporte activo? D
ejemplos.
12. Cules son las funciones de la membrana plasmtica?
197
Cuestionario 2
1. Qu rol juega el estado fsico de la bicapa lipdica en las propiedades
biolgicas de la membrana?
2. Discuta el efecto de: a) longitud de cadena del cido graso, b) grado de
insaturacin de los cidos grasos y c) colesterol, en la bicapa lipdica.
3. A qu se refiere el movimiento de flip-flop (difusin transversal) de los
fosfolpidos de membrana y cul es su funcin en las clulas?
4. Comente papel que cumple el colesterol en las membranas de clulas
animales.
5. Seale el tipo de protenas presente en las membranas biolgicas. Mencione
las diversas funciones que desempean las protenas de membrana.
6. Indique y comente las caractersticas principales del modelo de mosaico fluido
de la membrana biolgica.
7. Qu tipo de interacciones mantienen la estructura de las membranas? Se
requieren uniones covalentes?
8. Qu se entiende por permeabilidad selectiva de una membrana biolgica?
9. Qu es un canal inico dependiente de voltaje? Qu tipo de transporte
realiza? Cmo selecciona los iones que lo atraviesan? D dos ejemplos de
este tipo de canal.
10. Qu es un canal inico ligando dependiente? Cmo funciona? Seale un
ejemplo de esta clase de canal.
11. Hay enfermedades producto de canales inicos defectuosos de tejidos
excitable y epitelial. Al respecto seale qu tipo de canal est afectado en:
a) fibrosis cstica o fibrosis qustica, b) parlisis peridica hipercalmica,
c) sndrome del QT prolongado.
12. Cmo ocurre el paso de sustancias liposolubles a travs de la membrana
plasmtica? Cul es la fuerza impulsora para este tipo de transporte?
13. Mencione las caractersticas del proceso de difusin facilitada. D un ejemplo
de este tipo de proceso.
14. Qu tiene de particular el transportador de glucosa denominado GluT 4?
Cmo opera? Qu podra suceder eventualmente si el GluT4 es defectuoso
o completamente ausente?
15. Indique las caractersticas de un proceso de transporte activo primario. D un
ejemplo.
+
K (bomba de sodio)?
198
199
Cuestionario 3
1. Qu funciones desempea el retculo endoplsmico?
2. Cules son los organelos que participan de la sntesis de los componentes
de las membranas?
3. Cules son las funciones del retculo endoplsmico liso?
4. Cmo ocurre la sntesis de lpidos en el REL?
5. Cmo se realiza la detoxificacin en el REL?
6. Cul es la participacin del REL en la sntesis de hormonas esteroidales?
7. Cmo ocurre el transporte de Calcio en el REL y qu diferencias hay entre el
REL de la fibra muscular y otras clulas?
8. Qu tipos de Transportadores funcionan en le REL en relacin con el calcio?
9. Dnde ocurre la formacin de las lipoprotenas?
10. Qu importancia tiene la desfosforilacin de la glucosa en los hepatocitos del
hgado y en qu organelo ocurre?
11. Qu son los polirribosomas, donde se pueden encontrar, y cul es su
funcin?
12. Cules son las estructuras de una protena? Explique.
13. Hacia qu lugares son direccionadas las protenas que son sintetizadas en el
citosol, cul es el mecanismo de direccionamiento de protenas?
14. Mencione los pasos de la sntesis de una protena multipaso?
15. Qu es el PRS y cual es su funcin?
16. Cules son los aminocidos hidrofbicos y qu caractersticas tiene una
secuencia proteica que es rica en este tipo de aminocidos?
17. Cules son los pasos que llevan a la sntesis de protena, una vez que est
unido el ribosoma al mensajero?
18. Qu es un traslocn y que funcin desempea?
19. Qu funcin tiene la riboforina?
20. Qu significa que el cdigo gentico sea redundante?
21. Qu es un anticodn?
200
Cuestionario 4
1. Qu es la glicosilacin de protenas, en qu organelos ocurre y cmo se
realiza?
2. Cules son las funciones del Golgi y por qu se le puede relacionar con el
servicio postal?
3. Por qu algunas protenas se fosforilan en el Golgi?
4. Cmo explica el procesamiento de la insulina, explique? Por qu se le
denomina procesamiento post- traduccional?
5. Mencione las enzimas que participan en las modificaciones a los azcares en
el Golgi y en el RE.
6. Cules son los componentes del Golgi?
7. Cmo se originan los lisosomas?
8. Cules son las vas de las protenas que pasan desde RE a Golgi? Explique
cuales son las diferencias de cada uno de los destinos.
9. Qu es KDEL, en que proceso participa y para qu sirve?
10. Cul es la diferencia de los destinos de una protena que sigue la va
citoslica?
11. Si una protena que va al ncleo es superior a 20 kDa, cmo entra al
ncleo? y si una protena tiene un peso menor a 20 kDa?
12. Qu es la clatrina y cul es la diferencia con un coatmero? En qu proceso
participa? Cul es su funcin?
13. Cules son las funciones del RE liso?
14. En qu proceso es posible recuperar los receptores en el Golgi?
15. Qu es la transcitosis, endocitosis y exocitosis?
16. Cuntos pptidos seales o secuencias seales tiene una protena integral
de la membrana plasmtica que forma parte de un canal multipaso? Cules son
y con qu elementos interactan?
17. Dnde ocurre la sulfatacin de protenas en la porcin de los oligosacridos?
Para qu sirve la sulfatacin?
18. Qu son las adaptinas y en qu proceso participan?
201
Cuestionario 5
1. Qu determina que una protena sintetizada en el RER sea soluble (sea
liberada a la cavidad del RER) o sea insertada en la membrana?
2. Qu se entiende por preproinsulina, proinsulina e insulina? a qu proceso
celular se atribuye esta secuencia de eventos y dnde ocurre?
3. Dnde ocurre la glicosilacin inicial de las glicoprotenas y en qu consiste
este proceso?
4. Qu son las vesculas transportadoras y cul es su funcin?
5. Cmo ocurre la secrecin regulada de protenas, y la secrecin constitutiva?
Haga un paralelo.
6. Qu son los endosomas y cul es su funcin?
7. Qu es la traslocacin cotraduccional de protenas y dnde se produce?
8. Cmo las protenas que son sintetizadas en el RER, modificadas y
diferenciadas dentro del Golgi son dirigidas a los lisosomas?
9. Cmo ocurre el proceso de fusin de membranas entre una vescula y el
organelo de destino?
10. Porqu las enzimas contenidas en los lisosomas no destruyen las
membranas de los lisosomas?
11. Indique y comente las 4 vas por las cuales llega material a los lisosomas para
su degradacin.
12. Qu son los peroxisomas y qu funciones cumple en la clula?
13. Qu rol cumple la dinamina y la adaptina?
14. Cul es la funcin del pptido seal KDEL y del pptido seal KFERQ en las
protenas que los llevan?
15. Qu rol tiene el REL en el proceso de autofagia?
16. Qu es la Transcitosis? D un ejemplo.
17. Cul es la importancia de la glicosilacin en la clula?
18. Dnde ocurre la sntesis de lpidos en la clula?
19. Haga una lista con los aminocidos hidrofbicos.
20. Haga una lista con los aminocidos hidroflicos. Cules son los aminocidos
bsicos y cules los cidos. Cuales son los aminocidos que participan en la
formacin de puentes o enlaces disulfuro.
21. Qu es la traslocacin cotraduccional?
22. Nombre cules son las protenas transmembrana que participan en la
traslocacin cotraduccional que ocurre en el retculo endoplsmico rugoso y
que rol cumple cada una de ellas.
202
203
Cuestionario 5 (continuacin)
1. A qu estructuras corresponden las uniones intercelulares?
2. Qu funcin tienen las uniones intercelulares?
3. Cuntos grupos de uniones intercelulares pueden distinguirse y cules son?
4. Cmo est formada una unin oclusiva y qu protenas la componen?
5. Cuntos tipos de uniones anclantes pueden distinguirse y qu funcin
cumplen?
6. Cules son las protenas que forman las uniones anclantes?
7. Qu funcin cumplen las uniones comunicantes o nexos?
8. Cuntos tipos de protenas cumplen la funcin de adhesin celular y dnde?
204
Cuestionario 6
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10. Cuntas vas tiene una protena codificada en el ncleo y sintetizada en los
polirribosomas libres de llegar al espacio intermembrana de la mitocondria?
11. En qu se diferencia la composicin lipdica de la membrana interna de la
mitocondria de la membrana externa y de otras membranas presentes en la
clula?
12. Dnde estn situadas las porinas, qu son y qu funcin cumplen?
13. Qu funcin se desarrolla en cada uno de los compartimentos de la
mitocondria: a) membrana externa, b) membrana interna, c) espacio
intermembrana, d) matriz mitocondrial? En cules de estos compartimentos
es posible encontrar protenas integrales y en cules protenas solubles?
14. Con qu funcin es posible asociar las protenas TIM y las protenas TOM?
Desde el punto de vista de secuencia de la protena ser posible encontrar
dominios de la protena que sean fuertemente hidrofbicos? Por qu?
15. A qu se le denomina enfermedades lisosmicas de almacenamiento o
acumulacin? Cul es la causa? Qu efectos tiene sobre la clula?
16. Cules son los destinos que tienen las protenas en la va citoslica? Qu
mecanismos permiten que las protenas no se equivoquen y lleguen al
destino para cumplir sus funciones?
17. Qu funciones desempean las protenas que se quedan en el citosol y no
se incorporan a algn organelo?
18. Qu protenas componen la lmina nuclear?
205
206
Cuestionario 7
1. Cules son las caractersticas genticas de las enfermedades atribudas a
defectos en los genes?
2. Qu importancia tiene la informacin para los sistemas biolgicos?
3. Cmo se define genoma?
4. Qu son las ciclinas y cmo regulan el ciclo celular?
5. Cules son los tipos de proliferacin celular y cul es la importancia de
estos?
6. Cmo acta la protena p53 en el ciclo celular?
7. Qu eventos promueve el factor promotor de la sntesis de ADN?
8. Qu eventos regulan los factores promotores de la mitosis?
9. Cul es el producto de un ciclo celular?
10. Cmo se define G1?
11. Qu es un nucleosoma?
12. Qu es la cromatina y qu diferencia hay con un cromosoma metafsico?
207
Cuestionario 7 (continuacin)
1. Nombre las etapas de la profase I y describa cmo ocurre cada una de ellas.
2. A qu corresponde el complejo sinaptonmico? Cmo est formado? Qu
funcin cumple?
3. Qu importancia biolgica tiene la meiosis desde el punto de vista de la
variabilidad gentica? En qu etapas se genera esta variabilidad?
4. Dnde ocurre la reduccin del nmero diploide en la meiosis (2n a n)?
5. Qu estructura del cromosoma une a los cromosomas a la lmina perifrica
de la envoltura nuclear en el leptonema?
6. Qu es un cariotipo?
7. Qu es la heterocromatina? Cuntos tipos de heterocromatina existen?
8. Cul es la estructura de un cromosoma metafsico? Cuntos tipos de
cromosoma existen de acuerdo a la posicin del centrmero?
9. Qu son los ndulos de recombinacin? Qu funcin cumplen?
10. Qu es el corpsculo de Barr?
11. Cuntos
compartimientos
nucleares
existen?
Cmo
se
define
un
208
Cuestionario 8
1. Describa la va apoptsica en un tejido nervioso.
2. Indique en forma precisa cuales son las formas de regulacin de la protena
p53 a nivel celular.
3. Qu es un oncogn?
4. Qu es un gen supresor de tumores?
5. En qu consiste la metstasis?
6. Cul es el mecanismo general a nivel molecular que se regula la apoptosis y
qu genes participan en Caenorhabditis elegans y en vertebrados?
7. Indique las posibles funciones normales que en una clula puede cumplir un
protooncogn.
8. Qu es APC y qu regula y cmo regula?
9. Qu importancia tiene la poliubiquitinacin de una ciclina cuando est
formando parte de un complejo regulador del ciclo celular?
10. En la fibrosis qustica las mutaciones que se producen a nivel de ADN
corresponden en la mayora de los casos a la falta de un nucletido en la
secuencia del ADN, Cmo explica que este pequeo cambio lleve a una
catstrofe en el funcionamiento de las clulas donde se expresa el gen?.
209
Cuestionario 9
1. Qu aspectos se consideran importantes en la teora del envejecimiento?
2. Cul es el aspecto gentico del envejecimiento?, refirase a genes y su
accin.
3. Qu es el sndrome de Werner?
4. Qu es un locus?
5. Qu es un alelo?
6. Qu es una serie allica?
7. Qu es dominancia, codominancia y recesividad? Refirase a sistema AB0
8. Qu es ligamiento y cmo se relaciona con la distancia entre los genes en un
cromosoma?
9. Qu es haplotipo? Ejemplifique con el sistema Rh de acuerdo a Fisher y
Race.
10. Cmo influye el sistema H en la expresin del sistema AB0?
210
Cuestionario 10
1. Cules son los principios mendelianos y en qu casos se aplican a la
herencia humana?
2. Qu se entiende por segregacin independiente de los caracteres?
3. Qu diferencia existe entre 2 caracteres codifcados por dos loci que se
encuentran en el mismo cromosoma y caracteres codificados en dos loci
ubicados en cromosomas distintos?
4. En qu consiste la herencia ligada al sexo? Explique.
5. Cmo se define mutacin y cuntos tipos de mutacin se reconocen de
acuerdo a las distintas clasificaciones que existen?
6. Qu son las traslocaciones cromosmicas?
7. Qu son las aneuploidas?
8. Qu son las poliploidas?
9. A qu se debe el sndrome de Down?
10. Qu es un corpsculo de Barr?
211
Cuestionario 11
1. Indique el significado del primer y segundo principio mendeliano de la
herencia.
2. Cul es la consecuencia principal del ligamiento en trminos de proporcin
gamtica en la generacin F1? Haga un paralelo con lo que sucede en un
dihibridismo.
3. Cmo explica la herencia de la hemofilia en el que gran parte de los varones
de una familia son hemoflicos?
4. Cmo explica que en una mutacin de punto, donde hay ausencia de un par
de nucletidos en la secuencia de ADN que codifica el gen se produzca un
defecto tan importante como es la falla de un canal de cloruro en la fibrosis
qustica?
5. Cmo explica la diversidad de combinaciones que forman los haplotipos del
sistema HLA?
6. Cmo explica la incompatibilidad entre hermanos en trminos de
transplantes?
7. Cmo explica la diversidad de anticuerpos que es capaz de producir el
sistema inmunolgico de un individuo en respuesta al medio externo?
8. Qu se entiende por individualidad gentica?
9. Qu es aglutinacin?
212
Cuestionario 12
1. Qu es el Sistema HLA? Qu significa etimolgicamente? Cul es su
funcin en el organismo?
2. Cmo se hereda el sistema HLA? En qu cromosoma se encuentra?
3. Cuntos genes participan en la formacin de los anticuerpos? En qu
cromosomas se encuentran?
4. Qu son las inmunoglobulinas?
5. Cmo estn formadas las inmunoglobulinas?
6. Cuntos tipos de cadenas polipeptdicas forman las inmunoglobulinas?
7. Explique brevemente cmo se genera el gran nmero de anticuerpos en el
organismo.
8. Qu se entiende por recombinacin somtica y qu diferencia tiene con la
meitica?
9. Qu es un pedigr? cmo se representan o visualizan las distintas formas
de herencia en un pedigr?
10. Qu es consejo gentico? Cmo puede integrarse un enfermero o
enfermera a los equipos de trabajo de consejeros genticos?
11. Una familia cuyo padre tiene grupo A, Rh positivo y la madre tiene grupo 0 y
Rh negativo tienen tres hijos con grupo 0 y Rh negativo. Explique. Construya
el pedigr. Asigne los genotipos correspondientes a cada miembro de la
familia. Defina genotipo. A qu tipo de herencia corresponde?
12. Usando un tablero de Punnett resuelva la siguiente situacin de compatibilidad
en una familia, usando los loci A y B. Asigne alelos arbitrarios. Recuerde que
los alelos son numerosos y prcticamente
no hay situaciones de
213
14. Dibuje y rotule una molcula de Inmunoglobulina, indicando los posibles pasos
que la originaron desde el punto de vista gentico y molecular.
15. Explique cmo funcionan los linfocitos T, linfocitos B y macrfagos en la
produccin de anticuerpos. Relacione con lo que ocurre en el SIDA y el resfro
comn. Relacione con la produccin celular de anticuerpos y receptores de
membrana cmo funciona? Intente una hiptesis. Por qu los linfocitos
detienen su ciclo celular y en qu etapa?
16. Relacione la informacin relacionada con las mutaciones, el cncer, factores
de crecimiento, transduccin de seales intracelulares, proliferacin celular,
apoptosis, cariotipo. D ejemplos.
17. Relacione regulacin del ciclo celular con apoptosis, envejecimiento y
cromosomas. Refirase a las teoras de envejecimiento.
18. Relacione consejo gentico, proyecto genoma humano, construccin de
pedigrs y hemofilia.
19. Haga un paralelo entre profase meitica de espermatognesis y ovognesis y
mittica a nivel molecular y celular. Describa cmo los factores de proliferacin
controlan la mitosis y relacionelo con cncer. Refirase tambin al rol que
cumplen las clulas foliculares y de Sertoli, comparelas.
214
215
Cuestionario Laboratorio 2
1. Qu es un frotis? en qu casos se utiliza? D ejemplos.
2. Qu tipos de clulas se pueden distinguir en la sangre? Enumere y d las
carctersticas de cada uno.
3. Qu es la osmosis? Qu es la presin osmtica? De qu depende?
4. Qu es la plasmlisis? Qu es la crenacin? Explique cmo se realizaron
los experimentos en el laboratorio.
5. Por qu el cloruro de sodio no puede atravesar la membrana plasmtica, y
de qu manera es posible que entren los iones a la clula?
6. Por qu en el experimento de las levaduras algunas estaban teidas y otras
no? Cul es el rol de la membrana plasmtica?
7. Cmo explica que la sntesis de protenas sea vital para que nuestras
neuronas permanezcan funcionales a lo largo de nuestra vida? Argumente
desde el punto de vista de la estructura celular.
8. Qu tcnica se usa para teir el lobulillo de hgado de cerdo? Qu
elementos celulares puede distinguir?
9. Las clulas renales que conforman el epitelio de tbulo renal tienen la funcin
de absorber contra gradiente Cmo se apoya esta observacin desde el
punto de vista de la estructura celular?
10. Enumere las funciones de las siguientes estructuras y organelos celulares:
a) Membrana plasmtica.
b) Ncleo.
c) Mitocondria.
d) Complejo de Golgi.
e) Peroxisomas o microcuerpos.
f)
Lisosomas.
216
Ribosomas.
217
Cuestionario Pelculas 2
1. De acuerdo a la pelcula cul es la definicin de vida?
2. Cmo estn organizados los seres vivos?
3. Qu es el metabolismo?
4. Cules son las caractersticas de la vida?
5. En qu consiste el segundo principio de termodinmica y cmo se
relaciona con la vida.
6. Qu tipos de clulas son mencionadas en la pelcula y cules son sus
caractersticas?
7. Por qu existen tantos tipos de clulas en un organismo?
8. Cmo se define tejido, rgano y sistema de rganos?
9. Cul es la razn que exista la reproduccin sexual en la naturaleza?
10. Qu es el mtodo cientfico?
11. Cules son los pasos del mtodo cientfico?
12. Qu es una hiptesis?
13. Cmo se define teora?
14. Cmo se comprueba (aprueba o rechaza) una hiptesis?
218
Cuestionario Pelculas 3
1. Qu es la materia? Cules son los componentes ms pequeos de la
materia?
2. Qu son los istopos?
3. Cmo afecta el ozono a la salud humana?
4. Cmo se forma un enlace inico?
5. Qu tipo de tomos forman las protenas?
6. Por qu la molcula de agua tiene cargas parciales?
7. Cmo se forman los enlaces o puente hidrgeno?
8. Qu es la cristalografa? Para qu sirve?
9. Cules son las molculas de la vida?
10. Qu son las grasas?
11. Qu son las protenas?
12. A qu se debe el plegamiento especfico de las protenas?
13. Qu tipo de fuerzas favorecen el plegamiento de una protena?
14. Qu rol cumplen las cinasas o quinasas en la clula?
15. Qu enfermedades se encuentran asociadas a quinasas o cinasas
defectuosas?
219
Cuestionario Pelculas 4
1. Cules son las razones de hacer cortes histolgicos?
2. Cmo se toma una muestra? Qu cuidados hay que tener?
3. Cules son las etapas de la tcnica de corte histolgico?
4. En qu consiste la etapa de fijacin y cuales son los principales fijadores?
5. Cul es el objetivo de la etapa de fijacin?
6. En qu consiste la etapa de deshidratacin y sustitucin? Cul es el
objetivo de esta etapa?
7. En qu consiste la etapa de inclusin? Cul es el objetivo? En qu
material se incluye?
8. En qu consiste la etapa de corte? Cul es el objetivo? En qu
instrumento se realiza?
9. En qu consiste la etapa de tincin? Cmo se realiza? Cules son las
tinciones usadas?
10. En qu consiste la etapa de montaje? Qu materiales son necesarios para
hacer este paso?
220
Cuestionario Pelcula 5
1. Cul es la unidad de la vida?
2. Cmo se ilustra la relacin estructura funcin en la audicin?
3. Qu organelos se mencionan en la pelcula y cul es su funcin?
4. Cul es la funcin del retculo endoplsmico rugoso?
5. Cul es la funcin del Golgi?
6. Cul es la composicin del ncleo y cul es su funcin?
7. Cmo la funcin de una clula determina la abundancia de cierto organelos?
D ejemplos.
8. Cul es el rol de la membrana plasmtica? Cules son sus caractersticas?
9. Cules son las protenas integrales responsables del intercambio inico?
10. Qu es el transporte pasivo y el transporte activo?
11. Qu es la endocitosis?
12. Qu es la exocitosis?
13. De dnde se originan las vesculas que se fusionan con la membrana
plasmtica?
14. Cules son las diferencias entre clula procariticas y eucariticas?
15. Desde el punto de vista qumico Cules son las funciones de los organelos
de las clulas eucariticas?
16. Cules son las funciones del citoesqueleto de la clula eucaritica y cmo
est conformado?
221
Cuestionario Pelculas 6
1. Cuntos reinos existen en ela naturaleza?
2. Qu criterios se usan para ordenar las especies en un determinado
sistema de clasificacin?
3. Considerando la existencia de todas las bacterias qu porcentaje relativo
es daino al hombre?
4. Cules son los tipos de monera que existen?
5. Para qu sirve la tincin Gram?
6. Qu criterios sirven para diferenciar bacterias?
7. Qu es la fisin binaria? Cmo ocurre? Cunto tiempo dura?
8. Qu son los virus? Cuntos tipos de virus se mencionan en la pelcula?
9. Qu caractersticas tienen los antibiticos para combatir las bacterias?
10. Cmo estn conformados los virus?
11. Qu necesitan los virus para reproducirse?
12. Cmo infecta un virus a una clula?
13. Qu problema causan los virus a la salud humana?
14. Cul es la mejor forma de evitar las enfermedades?
15. Qu es la marea roja? A qu tipos de organismos corresponden?
16. Qu es la teora endosimbitica?
222
Cuestionario Pelculas 7
1. Cmo se reproducen los virus?
2. Cmo estn conformados los virus?
3. Qu son los retrovirus?
4. Qu enfermedades son producidas por virus?
5. Por qu es difcil observar y diagnosticar virus?
6. Qu es una pandemia?
7. Cul fue la contribucin de la Primera Guerra Mundial a la pandemia de
infuenza?
8. Cmo se reproduce el bacteriofago T4?
9. Qu son las vacunas?
10. Cmo surgieron las vacunas?
11. Cules son las funciones del sistema inmune?
12. Cmo se fabrica una vacuna?
13. A qu razn se atribuye el cambio de cepas de virus que a lo largo del
ao producen la gripe?
14. Cmo se transmite la poliomelitis?
15. Qu es el rotavirus y en qu circunstancias y lugar se ha hecho ms
frecuente?
16. Cmo se extingui la viruela en el mundo?
17. Por qu se piensa que la viruela contribuy a la conquista de Amrica?
18. Qu es la emergencia viral? En qu circunstancias ocurre?
19. Cmo se rastrea un virus en la selva?
20. Qu rganos ataca el virus hanta en humanos?
21. De acuerdo a la pelcula Cmo se origin y disemin el virus del SIDA?
22. Dnde surgi el virus ebola o virus del mono verde?
23. Cul es la utilidad potencial de los virus para curar enfermedades como
la fibrosis qustica? Cmo se procedera?
223
Cuestionario Pelcula 8
1. Cul es el objetivo de la pelcula?
2. Qu es un cariotipo? Cmo se confecciona un cariotipo?
3. Qu caractersticas tienen las diferentes especies desde el punto de vista del
nmero de cromosomas?
4. Qu funcin cumple la heparina?
5. Qu funcin cumple la colchicina?
6. Qu funcin cumple la fitohemoaglutinina?
7. Por qu los linfocitos son sometidos a shock osmtico luego de ser
cultivados?
8. Con qu tincin se tien los crosmosomas?
9. Qu elementos es posible visualizar al microscopio luego de hacer la tcnica
del goteo sobre el portaobjeto y teirlos?
10. Qu es el sndrome de Turner, a qu se debe? Cules son las
caractersticas que presenta la persona afectada?
11. Qu es el sndrome de Klinefelter, a qu se debe? Cules son las
caractersticas que presenta la persona afectada?
12. Qu es el sndrome de Down, a qu se debe? Cules son las
caractersticas que presenta la persona afectada?
13. Qu es el sndrome de maullido de gato (cri du chat), a qu se debe?
Cules son las caractersticas que presenta la persona afectada?
14. Cul es la causa del tumor gstrico desde el punto de vista cromosmico?
15. Cul es la causa de la leucemia mieloide crnica desde el punto de vista
cromosmico?
16. Cul es el efecto de las sustancias mutagnicas sobre la forma de los
cromosomas?
17. Qu efectos tienen los virus sobre el genoma?
18. Por qu se decanta la muestra de sangre antes de hacer los cultivos de
linfocitos?
224
Cuestionario Pelculas 9
1. Cul fue el aporte de Mitchel al estudio del ADN?
2. Cul fue la contribucin de Hershey y Chase al estudio del ADN?
3. Cules son las bases nitrogenadas del ADN?
4. Qu es un nucletido y cmo est conformado?
5. Cmo estn conformados los pasamanos de la escalera de ADN?
6. Qu es lo que identifica a una especie desde el punto de vista del ADN?
7. Cmo se realiza la duplicacin del ADN y en qu etapa del ciclo celular
ocurre?
8. Cundo son sintetizadas las cromtidas hermanas?
9. Qu es lo que pasa con el nio Andrew Gobea? Qu enfermedad tiene y
por qu?
10. Desde el punto de vista gentico cul es la constitucin gentica del padre, la
madre y la hermana de Andrew?
11. Qu es la terapia gnica? Cmo se aplic a Andrew?
12. Dnde se encontraba inserto el gen ADA? Qu se trat de hacer para
introducir el gen sano?
13. Qu es un vector? De qu naturaleza es?
14. A qu corresponden las enzimas de restriccin y qu funcin cumple?
15. Qu es una ligasa y que funcin cumple?
16. A qu corresponde el ADN recombinante?
17. Cmo se evalu el tratamiento aplicado a Andrew?
18. Qu es el PCR?
225
Cuestionario Pelculas 10
1. Cul es la funcin de la divisin celular?
2. Qu son los cromosomas? Qu es la cromatina?
3. Qu son las cromtidas?
4. Qu son los centrmeros? Qu funcin cumplen?
5. Por qu razn la molcula de ADN siendo tan larga, puede estar
contenida en el ncleo de una clula?
6. Qu es el cariotipo y para qu sirve?
7. Cul es el nmero haploide de la especie humana?
8. Qu son los cromosomas homlogos?
9. Desde el punto de vista del nmero de cromosomas cmo se diferencias
las distintas especies?
10. Cules son las etapas de la mitosis?
11. Cmo se mantiene el nmero de cromosomas de una clula a travs del
ciclo celular, y a travs de las generaciones?
12. Qu caractersticas tiene la interfase?
13. Qu caractersticas tiene la mitosis?
14. Cules son los eventos que ocurren en la profase de una clula?
15. Qu permite que los cromosomas se muevan en la anafase?
16. Qu funcin cumple la mitosis en distintos organismos?
226
Cuestionario Pelculas 11
1. Cul es el enfoque de Mendel al iniciar sus estudios sobre herencia en
las arvejas?
2. Qu evento vital es intervenido para producir los caracteres deseados en
la frutilla?
3. Qu significa dominancia y recesividad en trminos de expresin
gentica?
4. A qu corresponden los factores de Mendel? Dnde se encuentran
fsicamente?
5. Qu es un alelo?
6. Qu es la homocigosis y la heterocigosis?
7. Qu pasa cuando se cruzan dos homocigotos o cuando los parentales
son heterocigotos?
8. Qu es un octoploide, y qu es un diploide?
9. A qu corresponde una cruza monohbrida?
10. Cmo se explica que de padres a hijos se traspase la informacin
gentica?
11. Qu es el cuadrado y para qu sirve?
12. Haga un Tablero de Punnet con T= alto y t= enano de un cruzamiento
entre padres heterocigotos Qu proporcin de fenotipos altos hay en la
generacin F1 o descendencia directa?
13. Qu es un cruce dihbrido? Cul fue el enunciado de la ley o principio
mendeliano que surgi de los estudios de Mendel?
14. Cuntos tipos de gametos distintos resultan de un cruzamiento dihbrido
entre padres heterocigotos altos y prpura?
15. Cmo se logra que las palomas sean blancas puras?
16. Cmo se denomina este tipo de interaccin entre genes para el color?
17. Cmo se explica que las palomas jaspeadas den colores blanco puro en
las palomas?
18. Qu es la codominancia? Qu ejemplos se dan en la pelcula?
19. Qu es la dominancia incompleta? Explique el ejemplo de las flores
dragones.
20. Por qu no se ve el color rojo o negro azulado en las palomas?
21. Qu es la interherencia polignica?
227
Cuestionario Pelcula 12
Primera Parte.
1. En qu consiste el Proyecto genoma Humano?
2. Cmo se defina Genoma?
3. Cuntos pares de cromosomas hay en el genoma Humano?
4. Qu es un gen?
5. Cul fue la contribucin de Watson y Crick?
6. Por qu los travesaos son ms importantes que los pasamanos de la
escalera del ADN, desde el punto de vista gentico?
7. Cmo se hace la lectura contenida en la molcula de ADN?
8. De dnde se obtiene la muestra para el anlisis de ADN de una persona?
9. Cul es la ventaja gentica de la familia Limone proveniente de Miln?
10. Cmo se explica esta ventaja gentica?
11. Por qu esta caracterstica est slo presente en algunas familias y no en
otras?
12. Qu nombre recibe el gen responsable de esta caracterstica y en qu
cromosoma se ubica?
13. Cmo transcurre la transcripcin de un gen?
14. Qu es el ADN mitocondrial y cules son sus caractersticas? Cules son
las consecuencias del proyecto Genoma Humano?
Segunda Parte.
1. Qu son los chips de ADN?
2. Cul es el principal objetivo del Proyecto Genoma Humano?
3. Qu es el cncer? Qu es la metastasis?
4. Cul es el problema de salud que afecta a la enfermera y cul es la causa?
5. Qu funcin cumple la protena p53 en la clula?
6. Qu funcin cumple la protena ras?
7. En el caso de la enfermedad que padece la enfermera Cul es la causa
gentica especfica? Qu causa esto en el mal funcionamiento de la protena
p53?
8. Desde el punto de vista gentico Cmo se puede mejorar una clula
cancerosa?
228
229
230
231
232
233
claramente
cmo
se
han
producido
las
contaminaciones
234
qu
concluyeron
que
asociado
al
SIDA
hay una
deficiencia
inmunolgica?
6. Cuntos tipos distintos de virus que producen SIDA existen y cmo se
transmiten?
7. Cmo est conformado el virin del HTLV-III?
8. A qu se debe la disminucin de clulas T4?
9. Qu funciones desempea la clula T4 en la respuesta inmunitaria?
10. Qu rol tiene la endocitosis en el proceso de infeccin del virus?
11. Cules son genes reguladores de los retrovirus y cuales son caractersticos
de HTLV-III, qu funcin tienen estos genes?
12. Qu son los LTR?
13. Qu efectos patognicos tiene el virus HTLV-III?
14. Qu es el AZT y para qu se usa?
15. Cul es la caracterstica principal del virus del SIDA desde el punto de vista
de la variabilidad gentica?
16. Qu diferencias hay entre virin, profago, cpside y virus?
235
236
237
Cuestionario seminario 2
El telmero humano
1. Qu son los telmeros?
2. Cul es la importancia del telmero?
3. Para qu se ha usado la clonacin del telmero?
4. Qu significa cartografiar el genoma humano?
5. Por qu el acortamiento telomrico es nefasto en las clulas somticas, pero
no es un peligro para la sobrevivencia de la especie?
6. Qu porcentaje del genoma presenta secuencias repetitivas, dnde se
ubican estas secuencias en el cromosoma y por qu tienen esa ubicacin,
obedecer a la funcin de esa regin?
7. Qu significado tiene el trmino tndem y el trmino clster? Explique.
8. Cmo se realiz la construccin de una biblioteca genmica de ADN
telomrico? Qu tipo de problema tuvieron que solucionar? Cul fue el
organismo de modelo que se sigui para caracterizar el telmero humano?
9. Qu son las enzimas de restriccin? Por qu no se usaron en el caso de la
construccin de la biblioteca genmica humana? Qu tcnica reemplaz la
accin de las enzimas de restriccin?
10. Cul es la unidad bsica del telmero humano?
11. Para qu se us la construccin de cromosomas artificiales de levadura
(CAL) para clonar ADN humano? Describa cmo se hizo la construccin
gentica.
12. Qu significa ADN quimrico?
13. Cul fue la conclusin que obtuvieron de los experimentos con CAL?
14. Cmo se propone medir la distancia de los genes en este trabajo? Cmo se
haba hecho hasta antes de los resultados de estos experimentos?
15. Qu caractersticas tiene el ADN en la regin vecina al telmero (regiones
subtelomricas)?
16. Qu relacin existe entre el acortamiento de los telmeros y el
envejecimiento? Por qu ocurre?
17. Qu rol cumple la telomerasa? Cul es el mecanismo molecular conocido
para la funcin de esta enzima?
238
Cuestionario seminario 3
Telmeros, telomerasas y cncer
1. Qu son los telmeros?
2. Qu funcin tiene la telomerasa?
3. Cul es la composicin de los telmeros?
4. De acuerdo a la lectura cul es la definicin de gen.
5.
239
Cuestionario seminario 4
Bases genticas del cncer
1. Cmo se genera el cncer? Cmo funciona una clula normal? Qu es la
metstasis?
2. Cmo pudieron comprobar que haban daos en los cromosomas de las
clulas cncerosas?
3. Es el cncer hereditario? Cmo lo han comprobado?
4. Cul es la hiptesis de Knudson? Qu estudios realiz para postular la
hiptesis? Qu mecanismo postul en relacin con la hiptesis?
5. Qu son los protooncogenes, qu funcin cumplen y qu son los
oncogenes? a qu tipo de herencia pertenecen?
6. Qu son los genes supresores de tumores? qu funcin cumplen?
7. Qu es el retinoblastoma? en qu cromosoma se encuentra ubicado?
Cul es la causa que produce la enfermedad?
8. Qu es la evolucin clonal? Ejemplifique con el cncer de colon. Refirase a
la planificacin del estudio para demostrar la evolucin clonal.
9. Dnde se sita el gen APC, en qu cromosoma? Cul sera su funcin? A
qu tipo de protena codifica?
10. Dnde se encuentra el gen p53, en qu cromosoma? Cul es su funcin?
11. Dnde se encuentra el gen DCC, en qu cromosoma? Cul es su funcin?
12. Qu comportamiento sufre el astrocitoma, cuando lo comparamos con el
cncer de colon?
13. Qu alteraciones se evidencian a nivel gentico en la aparicin y desarrollo
del astrocitoma?
14. A nivel celular qu pasa con los receptores que son cifrados por
protooncogenes?
15. Qu condiciones mnimas alteradas facilitan la formacin de tumores
cerebrales y probablemente tumores de colon?
16. Cules son las conclusiones del trabajo?
240
Cuestionario seminario 5
Suicidio celular en la salud y en la enfermedad
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
241
Cuestionario Seminario 6
Terapia gnica contra el cncer
1. Qu es la terapia gnica? Cmo ha sido considerada en el tratamiento de
cncer?
2. En qu se basa la terapia gnica?
3. Cules han sido los enfoques de la terapia gnica?
4. En qu consiste la leucemia? Cmo se ha tratado hasta la fecha? Cul es
el nuevo enfoque?
5. Qu se entiende por marcador inocuo, en qu consiste y por qu se usa?
6. En qu consisten las vacunas gnicas? Qu problema trae consigo el
tratamiento por este mtodo de prevencin?
7. Qu es la respuesta inmunitaria? Cmo participan las citoquinas en esta
respuesta?
8. Cul es el enfoque ms moderno que ha sido ensayado? En qu consiste?
Cul ha sido la respuesta de esta fase preliminar? y por qu no se
considera ptima?
9.
242
Cuestionario seminario 7
Radiacin solar y cncer de piel
1. Cul es la estadstica para el cncer de piel en EEUU y en cuntas formas se
manifiesta, a qu forma corresponde cada uno, cul es la gravedad de cada
tipo?
2. Cmo se produce una mutacin permanente a causa de la luz ultravioleta?
3. Cul es la poblacin de mayor riesgo en Australia? a qu se debe la
susceptibilidad a contraer cncer de piel?
4. Cmo es la gnesis de un tumor de piel? Cmo se producen las
mutaciones genticas inducidas por los rayos ultravioleta en genes de las
clulas epiteliales?
5. Cules son los dos tipos de efectos nocivos de origen solar en las clulas de
la piel?
6. Por qu se escogi el gen p53? Qu relacin hay con el ADN del
papilomavirus humano? Qu se concluy luego de comparar tumores de
diverso origen?
7. Qu son los puntos calientes de un gen?
8. Qu incidencia muestra el gen p53 a la mutacin en tumores no vinculados a
la radiacin solar?
9. Por qu no se reparan los puntos de mutacin en algunas clulas donde la
secuencia del gen p53 se ha alterado, como ocurre en otros casos?
10. Qu relacin hay entre la protena P53 en altas concentraciones dentro de la
clula y la apoptosis?
11. Qu sucede cuando la protena P53 est ausentes en ratones sometidos a
radiacin ultravioleta, comparados con ratones normales?
12. Por qu prolifera una clula con el gen p53 mutado en tanto las clulas
normales que la rodean sufren apoptosis?
13. Qu es un agente carcinognico?
14. Qu es la enfermedad de Gorlin?
243
Cuestionario seminario 8
Lucha contra el Cncer de prstata
1. Cul es la incidencia del cncer de prstata en la poblacin masculina
norteamericana?
2. En qu consiste la prueba de cribado no invasiva? Qu otras pruebas
existen para la deteccin de este tipo de cncer?
3. Cul es el problema de la deteccin del antgeno PSA?
4. Qu es la velocidad del antgeno especfico?
5. Qu significado tiene el NPI?
6. Qu relacin existe entre cncer de prstata y cncer de mamas?
7. Cules son los estadios del cncer de prstata? Describir y caracterizarlos.
Qu es el TNM?
8. Qu es la metstasis? En cual de los estadios hay ya indicios de
metstasis?
9. Cules son los tratamientos que deben seguirse en cada estadio del cncer
de prstata?
10. Qu es el ndice de Gleason?
11. Qu herramientas moleculares se usan para predecir el comportamiento de
un tumor a nivel experimental?
12. Cul es el rol del gen p53 en el comportamiento tumoral?
13. Qu resultados se logran con la radioterapia clsica en el tratamiento de
tumores prostticos?
14. En qu consiste la radioterapia conformacional tridimensional (RTC 3-D)?
15. Qu es la braquiterapia? Qu es la criociruga?
16. En qu consiste la terapia hormonal?
17. Qu es la terapia combinada? Qu significa el trmino neoadyuvante?
18. Cul es la relacin entre cncer de prstata y consumo de grasas en la
dieta?
19. Cules son los potenciales marcadores de virulencia en el cncer de
prstata?
244
Cuestionario seminario 9
Envejecimiento
1. Qu es la memoria molecular de las clulas?
2. Qu genes confieren mayor longevidad a las levaduras? y cules en
Caenorhabditis?
3. Qu causa produce en Drosophila una mayor longevidad?
4. Cules son las teoras imperantes sobre la naturaleza del envejecimiento?
5. Cules son los procesos moleculares responsables del envejecimiento?
qu evidencias existen?
6. Qu relacin hay entre los genes que regulan el ciclo celular y el
envejecimiento?
7. Cmo enfrenta la humanidad el envejecimiento?
8. Cules son los eventos celulares del envejecimiento?
9. Cmo se ha probado que el gen tin2 participa en el acortamiento del
telmero?
10. Cules son los efectos de las mutaciones mitocondriales?
11. Qu efecto tiene el envejecimiento sobre los sistemas de rgano?
12. Cul es el aporte de los temas de este seminario a su labor de enfermera o
enfermero?
245
Cuestionario seminario 10
Genes que oponen resistencia al SIDA
1.
Qu datos apoyan la tesis que existen genes que protegen contra el SIDA?
2.
3.
Qu quiere decir que el gen que codifica una protena sea polimrfico?
4.
5.
Qu es la cartografa gentica?
6.
7.
8.
9.
246
ANEXO 6
EL CDIGO GENTICO
Primera
Segunda posicin
Tercera
posicin
posicin
U
UUU-Phe
UCU-Ser
UAU-Tyr
UGU-Cys
UUC-Phe
UCC-Ser
UAC-Tyr
UGC-Cys
UUA-Leu
UCA-Ser
UAA-Stop
UGA-Stop
UUG-Leu
UCG-Ser
UAG-Stop
UGG-Trp
CUU-Leu
CCU-Pro
CAU-His
CGU-Arg
CUC-Leu
CCC-Pro
CAC-His
CGC-Arg
CUA-Leu
CCA-Pro
CAA-Gln
CGA-Arg
CUG-Leu
CCG-Pro
CAG-Gln
CGG-Arg
AUU-Ile
ACU-Thr
AAU-Asn
AGU-Ser
AUC-Ile
ACC-Thr
AAC-Asn
AGC-Ser
AUA-Ile
ACA-Thr
AAA-Lys
AGA-Arg
AUG-Met
ACG-Thr
AAG-Lys
AGG-Arg
GUU-Ala
GCU-Ala
GAU-Asp
GGU-Gly
GUC-Ala
GCC-Ala
GAC-Asp
GGC-Gly
GUA-Ala
GCA-Ala
GAA-Glu
GGA-Gly
GUG-Ala
GCG-Ala
GAG-Glu
GGG-Gly
247
ANEXO 7
SMBOLO DE LOS AMINOCIDOS
Ala
Alanina
Asx
Asparagina
Met
Metionina
Asn
Asparagina
cido asprtico
C
Cys
Cistena
Pro
Prolina
Asp
cido asprtico
Gln
Glutamina
Glu
cido Glutmico
Arg
Arginina
Phe
Fenilalanina
Ser
Serina
Gly
Glicina
Thr
Treonina
His
Histidina
Val
Valina
Ile
Isoleucina
Trp
Triptfano
Lys
Lisina
Tyr
Tirosina
Leu
Leucina
Glx
248