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Unidade 5

Crescimento e
Renovao Celular
5.1.

Universalidade
variabilidade de DNA

Existem diferenas relativas ao


material
gentico
dos
procariontes e dos eucariontes
ao nvel da quantidade de DNA
que constitui a informao
gentica, da organizao e da
localizao do DNA da clula

fibroso e facilmente corvel,


constitudo por filamentos de
DNA associados a protenas.
As unidades de estrutura da
cromatina so os cromossomas.

Nos
procariontes
o
DNA
encontra-se no hialoplasma,
como uma molcula circular,
sem
outros
constituintes
associados nucleoide.

DNA

molcula
pertencente categoria
dos cidos nucleicos; na
sua estrutura encontra-se,
em cdigo, a informao
que programa todas as
atividades celulares e
que transmitida de
gerao em gerao.

O
ncleo
das
clulas
eucariticas separado pelo
invlucro nuclear (membrana
dupla). Em determinados locais
as duas membranas fundem-se e
formam os poros nucleares
regulam o movimento de
macromolculas entre o ncleo
e o citoplasma. O invlucro
nuclear est em continuidade
com o retculo endoplasmtico
rugoso.

5.2.

No
ncleo,
podem
existir
nuclolos regies em cuja
constituio
entram
cidos
nucleicos e protenas.

Cada nucletido adquire o nome


da base azotada que o constitui (no
DNA).

A substncia fundamental do
ncleo o nucleoplasma. No
ncleo existe cromatina, material

Natureza qumica e estrutura


do DNA

Nucletido
cido fosfrico
Pentose (desoxirribose)
Bases azotadas (adenina,
citosina, guanina, timina
e uracilo)
o Bases pirimdicas
C, T e U
o Bases pricas (anel
duplo) A e G

Os nucletidos ligam-se por ligaes


covalentes que se estabelecem
entre o grupo fosfato de um
nucletido e a pentose do
nucletido seguinte.
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O crescimento da cadeia de DNA


efetua-se na direo 5 3.

pontes de hidrognio. A
adenina emparelha com
a timina (A=T) e a guanina
com a citosina (GC). As
duas
cadeias
so
antiparalelas, isto ,
extremidade 3 de cada
cadeia corresponde a
extremidade 5 da outra.

nas sequncias nucleotdicas


(nmero e ordem dos nucletidos)
que est codificada a informao
gentica
que
define
as
caractersticas de cada novo
indivduo.

As molculas de RNA tm dimenses


inferiores s das de DNA e podem
ocorrer
em formas
estruturais
diferentes,
que
desempenham
funes diferentes.
Tipos de RNA

Figura 1 Estrutura de um fragmento de uma cadeia


polinucleotdica

5.3.

Estrutura da molcula de DNA


vs Estrutura da molcula de
RNA

Molcula de RNA
cadeia
simples
de
polinucletidos.

Molcula de DNA duas


cadeias
de
polinucletidos, enrolados
em espiral, em torno de
um
eixo
imaginrio,
formando uma dupla
hlice. As pentoses e os
grupos
fosfato
esto
orientados para o exterior
das cadeias e as bases
azotadas emparelham no
interior da hlice, onde se
estabelecem ligaes por

RNA mensageiro (mRNA);


RNA de transferncia (tRNA);
RNA ribossomal (rRNA).

DNA
Cadeia dupla
Desoxirribose
A, T, G e C
Cadeias longas
Ncleo,
mitocndrias,
cloroplastos
5.4.

RNA
Cadeia simples
Ribose
A, G, C e U
Cadeias curtas
Hialoplasma

Replicao do DNA

A molcula de DNA tem a


capacidade de copiar a sua prpria
informao, ou seja, de se replicar.
Segundo a hiptese da replicao
semiconstrutiva, a dupla cadeia de
DNA separa-se, na presena de
enzimas
especficas,
as
DNA
polimerases, por rutura das ligaes
de hidrognio.
Cada cadeia serve de molde
formao de uma nova cadeia a
partir de nucletidos livres na clula.
As
cadeias
complementares
desenvolvem-se
em
direo
antiparalela em relao cadeia
que serve de molde.
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No fim do processo, formam-se duas


molculas de DNA, idnticas
molcula original. Em cada uma das
novas molculas, uma das cadeias
pertence molcula inicial.

5.5.

mensageiro ao qual so retirados os


intres
(sequncias
que
no
codificam) e unem-se os exes
(sequncias que codificam).
Traduo

Sntese de protenas

So as protenas que determinam a


estrutura e a atividade metablica
das clulas.
DNA

mRNA
Transcrio

Protena
Traduo

A sntese de protenas ocorre nos


ribossomas,
organelos
no
membranares formados por RNA
ribossomal e protenas, que se
encontram no citoplasma ou
associados
ao
Retculo
Endoplasmtico Rugoso.
A sequncia de nucletidos do DNA
contm a informao sob a forma
do cdigo gentico (cdigo de
correspondncia
entre
os
nucletidos e os aminocidos).
Cada
tripleto
(unidade
mais
pequena da mensagem gentica
que constituda por 3 nucletidos)
de DNA chama-se codogene.
Transcrio sntese de mRNA a
partir de DNA. A molcula de DNA
serve de molde para a sntese da
molcula de mRNA (que uma
cpia das instrues do DNA). A RNA
polimerase provoca a abertura da
molcula de DNA e inicia a sntese
de RNA a partir de nucletidos livres.
A molcula de mRNA transporta a
mensagem para o citoplasma, onde
ocorre a sntese proteica. Cada
tripleto de mRNA (complementar
dos codogenes) um codo que
pode codificar um aminocido ou
ordenar o incio ou fim da sntese.
Antes do mRNA forma-se o RNA pr-

Figura 2 Traduo da mensagem gentica

- Iniciao Neste processo verificase a ligao do mRNA e de um tRNA


iniciador, que transporta usualmente
a
metionina,

subunidade
pequena
do
ribossoma.
A
subunidade grande do ribossoma
liga-se ao conjunto. O ribossoma
est ento funcional.
- Alongamento Esta a fase de
traduo dos codes sucessivos e
da ligao dos aminocidos. Estes
acontecimentos
sucedem-se
regularmente. Um novo tRNA, que
transporta um segundo aminocido,
liga-se ao segundo codo. H a
formao de uma primeira ligao
peptdica entre o aminocido que
ele transporta e a metionina. O
ribossoma avana 3 bases. O
processo repete-se ao longo do
mRNA.
- Finalizao os codes de
finalizao (UAA, UAG, UGA) no
tm
nenhum
anticodo
complementar.
Quando
o
ribossoma chega a um desses
codes, a sntese acaba. Eles
constituem verdadeiras pontuaes
da
mensagem.
A
cadeia
polipeptdica
destaca-se
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experimentando
posteriormente
vrias
transformaes.
As
subunidades
dos
ribossomas
separam-se e ficam livres para iniciar
outro processo.

5.6.

Ciclo celular

O ciclo celular corresponde ao


conjunto de transformaes que
ocorre desde que uma clula
formada at ao momento em que
ela se divide, originando duas
clulas-filhas. Este um processo
contnuo e dinmico.
Podem considerar-se, no ciclo
celular, duas fases que, por sua vez,
se dividem em etapas diferentes: a
interfase e a fase mittica.

Figura 3 Ciclo Celular

Interfase
A interfase corresponde ao perodo
compreendido entre o fim de uma
diviso celular e o inicio da diviso
celular seguinte. a fase mais longa
do ciclo celular e corresponde a
cerca de 90% da durao total do
ciclo. Nesta fase do ciclo celular
atividade metablica intensa; a
clula cresce e duplica o seu DNA.
Os
cromossomas
encontram-se
dispersos pelo ncleo e no so
visveis.

As etapas da interfase so:


- Intervalo G1 ou ps-mittico
crescimento
e
formao
de
organelos decorre entre o fim da
mitose e o incio da replicao de
DNA. A atividade biossinttica
intensa,
especialmente
de
protenas, enzimas e RNA. H,
tambm, a formao de organelos
celulares. Aps esta etapa, as
clulas podem prosseguir para a
fase S do ciclo ou entrar na fase G0
(estdio no qual as clulas
continuam metabolicamente ativas,
mas no se dividem).

- Perodo S ou perodo de sntese de


DNA replicao do DNA com
duplicao dos cromossomas
ocorre a replicao do DNA da
clula. s novas molculas de DNA
associam-se protenas e cada
cromossoma passa a ser constitudo
por dois cromatdeos.

- Intervalo G2 ou pr-mittico
crescimento celular decorre entre
o fim da replicao do DNA e o
incio da mitose. D-se a sntese de
molculas necessrias diviso
celular e tambm de outros
constituintes celulares. O volume da
clula praticamente duplica.

Figura 4 Imagem microscpica da Interfase

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Fase mittica (Fase M)


O contedo celular, duplicado
durante a interfase, repartido
pelas clulas-filhas. Esta fase inclui a
diviso do ncleo e a diviso do
citoplasma.

Figura 5 Mitose

Na fase mittica
duas etapas:

consideram-se

Mitose / cariocinese diviso do


ncleo o conjunto de
transformaes que levam diviso
do ncleo das clulas eucariticas.
Apesar de este processo ser
contnuo, isto , uma vez iniciado
no sofre pausas, nele distinguemse, convencionalmente, quatro
subfases:
prfase,
metfase,
anfase e telfase.
- Prfase , geralmente, a fase mais
longa da mitose. Os cromossomas,
constitudos por dois cromatdeos
unidos
por
um
centrmero,
condensam
gradualmente,
tornando-se mais curtos e espessos.
Os
centrossomas
da
clula
comeam a deslocar-se para polos
opostos e forma-se, entre eles, o fuso
acromtico, constitudo por feixes
de microtbulos proteicos que se
agregam, formando fibrilas. O
invlucro nuclear desagrega-se.
- Metfase os
atingem
o
seu

condensao mximo e dispem-se


no
plano
equatorial
(plano
equidistante aos polos da clula),
com os braos para fora,
constituindo a placa equatorial e
estando prontos para se dividirem.
Os centrossomas atingem os polos
das clulas. O desenvolvimento do
fuso
acromtico
completa-se,
havendo
fibrilas
ligadas
aos
cromossomas e outras unindo os dois
polos.
- Anfase os dois cromatdeos de
cada cromossoma separam-se,
passando a constituir cromossomas
independentes. As fibrilas que se
encontram
ligadas
aos
cromossomas
encurtam
e
os
cromossomas
afastam-se
em
direo aos polos a este processo
d-se o nome de ascenso polar.
No final da anfase, existe, em cada
polo, um conjunto idntico de
cromossomas.
- Telfase o estado final da
mitose. A membrana nuclear
reorganiza-se
em
torno
dos
cromossomas nos dois polos da
clula e os nuclolos reaparecem.
D-se a dissoluo do fuso
acromtico.
Os
cromossomas
descondensam, tornando-se menos
visveis. A clula passa a ser
constituda por dois ncleos.
Citocinese diviso do citoplasma
durante a anfase e a telfase, nos
animais, forma-se na zona do plano
equatorial um anel contrctil de
filamentos
proteicos.
Estes
contraem-se e puxam a membrana
para dentro, causando um sulco de
clivagem que vai estrangulando o
citoplasma, at se separarem as
duas clulas filhas.

cromossomas
estado
de
5

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5.6.1. Diferenas entre a diviso da


clula animal e da clula
vegetal
Nas clulas vegetais, devido
existncia
de
uma
parede
esqueltica rgida, no possvel a
diviso celular do citoplasma por
estrangulamento.
Neste
caso,
vesculas do complexo de Golgi
alinham-se no plano equatorial da
clula, e constituem o fragmoplasto.
As vesculas fundem-se e formam a
membrana plasmtica da clula
filha. Pela disposio de fibrilas de
celulose, constituem-se as paredes
celulsicas, que se formam da parte
central para a parte externa da
clula, at se ligarem parede da
clula-me. A parede formada no
contnua, possui poros por onde se
efetuam trocas de substncias entre
as clulas.
Nas plantas superiores, tal como a
cebola, no existem centrolos
visveis. As regies correspondentes
s zonas polares atuam como
centros
organizadores
de
microtbulos que vo originar as
fibrilas do fuso acromtico.

Elaborado com base em:


Campbell et al., Biology, 2009
Figura 6 Diviso celular animal VS vegetal

Scott F. Gilbert, Biologia do


Desenvolvimento, 2003
Nuno Fernandes, Biologia e Geologia II, 2006

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A.L. 1.1. Extrao e observao do


DNA de clulas vegetais
A extrao de DNA pode ser
realizada a partir de diferentes tipos
de clulas eucariticas.
Consta
fundamentalmente
quatro etapas:

de

Rutura das clulas para


libertao dos ncleos
atravs de aes mecnicas
e qumicas para romper as
paredes e as membranas,
bem como os invlucros
nucleares a fim de soltar o
DNA existente nos ncleos.
Separao do DNA dos restos
das paredes e das estruturas
membranares das clulas,
atravs da filtrao.
Separao
dos
componentes bsicos dos
cromossomas:
DNA
e
protenas precipitao das
protenas e libertao das
macromolculas de DNA.
Separao do DNA atravs
do etanol o DNA foi
precipitado
e
separado
podendo ser visualizado.

Porqu a utilizao
cebola/Kiwi/Banana?

componentes bsicos dos


cromossomas: protenas e
DNA
Separao do DNA da
soluo
Qual o papel do almofariz?
Permite
uma
homogeneizao
mecnica,
para
romper
a
membrana que delimita a clula
como um todo para libertar o
ncleo existente no interior.
Qual o papel do detergente?
Como o almofariz no consegue
romper os ncleos (devido ao seu
reduzido tamanho) recorre-se
emulsificao para libertar o DNA.
As
membranas
celulares
so
formadas por uma bicamada de
fosfolpidos onde se integram
algumas protenas. Quando o
detergente entra em contacto com
as membranas nucleares, as suas
molculas penetram na estrutura
membranar
e
separam
as
macromolculas
fosfolipdicas,
provocando
tambm
a
desnaturao das protenas, o que
provoca a rutura do invlucro
nuclear e a dissoluo do material
gentico na mistura de extrao.

da

Qual a utilidade do cloreto


de sdio

Possuem clulas eucariticas, com


ncleo bem definido contendo
cidos nucleicos (DNA).

Pelo facto de o exterior da molcula


DNA possuir uma carga negativa
devido ionizao do grupo fosfato
logo e, naturalmente, as molculas
de DNA sofriam repulso umas em
relao s outras por possuir cargas
iguais. Assim, quando dissolvemos o
sal de cozinha na gua, este
composto dissocia-se rapidamente
em NA+ e Cl-. Desta forma, num
meio com estes ies, a carga
negativa do DNA neutralizada

Quais
as
etapas
fundamentais da extrao do
DNA
Rutura das clulas para
libertao dos ncleos
Separao
do
material
gentico dos restos das
paredes e das estruturas
membranares separao dos

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com a ligao de Na+ ao grupo


fosfato e assim impedida a
repulso das molculas de DNA e
permitida a agregao dessas
molculas de modo a formar
filamentos relativamente espessos e
compridos (logo, mais visveis).

A imagem seguinte
resultados obtidos.

ilustra

os

Por que razo necessrio


adicionar clorofrmio ou altas
temperaturas?
As histonas (protenas carregadas
positivamente com aa com grupos
amina NH3+) so as responsveis,
no interior da clula, por neutralizar
as cargas negativas dos grupos
fosfato. Mas existem outras protenas
associadas
ao
DNA
que

necessrio retirar para isolar ao


mximo o DNA. Assim, o clorofrmio
e outros agentes qumicos, como as
altas temperaturas, valores extremos
de pH, permitem a desnaturao
(precipitao) das protenas e
perda de funcionalidade porque
interfere
com
as
ligaes
responsveis pela estrutura da
protena.

Figura 7 Resultados obtidos da A.L. aps 10 minutos


da sua realizao

Por que razo necessrio


adicionar um lcool ao
filtrado que contem o DNA?
O DNA insolvel no etanol
temperatura
e
concentrao
usadas.
Quando o etanol lentamente
adicionado ao filtrado, o DNA
precipita. Uma vez que o DNA
precipitado menos denso que a
gua, os filamentos de material
gentico acumulam-se no topo da
camada do filtrado e ascendem
lentamente na camada (superior)
do etanol.

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