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Introduccin.
Las enzimas son los catalizadores que determinan el patrn de las transformaciones
qumicas en los sistemas biolgicos. Casi todas las enzimas son protenas que median la
transformacin de diferentes formas de energa; por ser protenas, son susceptibles a los
mismos factores que desnaturalizan a las protenas, como el calor, cidos fuertes, bases
fuertes, metales pesados y detergentes. Pueden tener componentes no proteicos, como
carbohidratos, fosfatos, lpidos, iones metlicos o pequeas molculas orgnicas. Un
sustrato es el compuesto especfico sobre el que acta una enzima afectando la
velocidad de la reaccin.
La cintica enzimtica se encarga de la velocidad de la reaccin y del modo es que sta
cambia en respuesta a cambios en los parmetros experimentales.
Un inhibidor es una sustancia que, cuando interacciona con una enzima, provoca una
disminucin en la actividad cataltica. La inhibicin enzimtica puede ser:
Reversible, si se produce una formacin de un complejo enzimtico inhibidor no
covalente.
Irreversible, si se forma un complejo covalente enzima-inhibidor. Se combinan con o se
destruyen un grupo del enzima que es esencial para su actividad, o aquellos que forman
una asociacin no covalente muy estable. Son tiles para estudiar los mecanismos de
reaccin. Los aminocidos con funciones catalticas clave en el sitio activo, pueden ser
identificados, determinado qu aminocido se ha unido covalentemente a un inhibidor
despus de la inactividad del enzima.
Los inhibidores suicidas son relativamente poco reactivos hasta que se unen al sitio
activo de un enzima especfico. Pasa a travs de los primeros pasos de una reaccin
enzimtica normal, a continuacin se convierte en un compuesto muy reactivo que se
combina irreversiblemente con el enzima en lugar de ser transformado en el producto
normal.
La ureasa cataliza la hidrlisis de la urea en amoniaco y bicarbonato, donde el primero se
difunde a travs de la capa semipermeabe de acetato butirato de celulosa interpuesta
entre el reactivo y las capas de indicador para minimizar la difusin de los iones hidroxilo
del colorante.
La funcin de la enzima es degradar la urea en amonaco y dixido de carbono.
La ureasa se produce a partir de Lactobacillus fermentum. Dicha enzima pertenece al
grupo se las ureasas denominadas ureasas cidas. Se activa a pH bajo.
L. fermentum se cultiva en medio sinttico. Despus de la fermentacin se filtra el
cultivo, se lava con agua y las clulas se matan en alcohol de 50 % vol. La suspensin se
seca por liofilizacin o por pulverizacin.
La preparacin consiste en un polvo formado por clulas muertas enteras que contienen
la enzima.
La ureasa no debe contener ni substancias ni microorganismos ni actividades enzimticas
colaterales que puedan:
- ser perjudiciales para la salud,
- ser perjudiciales para la calidad de los productos tratados,
- llevar a la formacin de productos indeseables,
- ocasionar o facilitar un fraude.
La ureasa se presenta bajo forma de polvo cristalino, blanco, inodoro, de un sabor ms
bien dulce.
Las enzimas tiene un pH ptimo en el que su actividad es mxima; a valores superiores o
inferiores de pH la actividad disminuye. Algunas cadenas laterales de aminocidos
pueden actuar como cidos o bases dbiles que desarrollan funciones crticas en el sitio
0
0.1
0.05
0.1
0.1
Problem
a
0.1
0.5
0.8
1
1.6
Concentracin
2
1.5
1
0.5
0
0.5
1.5
2.5
Concentracin. Blanco
3.5
4.5
Concentracin. Problema
5.5
pH
Tubos
Blanco
1
2
3
4
5
0
0.6
0.6
2
1.2
Problem
a
0
2
2
1.1
0.1
pH
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0.5
1.5
2.5
pH Blanco
Temperatura
C
Blanco
0
20
50
70
90
0.2
0.5
1
0.4
0.2
Problem
a
0.3
1.3
2
1.6
0.8
3.5
pH Problema
4.5
5.5
Temperatura
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
10
20
30
40
50
Temperatura Blanco
Tiempo
Segundo
s
10
20
30
40
Blanco
0.1
0.1
0.1
0.1
60
70
80
90
100
Temperatura Problema
Problem
a
0.3
0.2
0.1
0.1
Tiempo
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
5
10
15
20
Tiempo Blanco
Anlisis de resultados.
Conclusin.
Bibliografa.
25
30
35
Tiempo Problema
40
45