RESUMEN

En esta prctica hemos podido ver cmo es que se realiza la cromatografa

plana (cromatografa en papel) y la cromatografa en columna. En el
momento de realizar la cromatografa en papel se utiliz colorantes de
cocina y flores secas (verdes). La fase mvil que utilizamos es ter de
petrleo y el agua, viendo con esto como en el caso de las hojas se puede
ver como por capilaridad sube la fase mvil por el papel en el caso de la
cromatografa en columna se intent realizar el experimento con azcar
impalpable pero el resultado fue negativo ya que no se filtra el lquido de
las flores ya molidas. Solo se logra pequeas separaciones de la azcar
impalpable.

INTRODUCCIN
La cromatografa es una tcnica verstil ya que se puede realizar para
separar los componentes de una mezcla (cromatografa preparativa) y
tambin tiene la finalidad de identificar y cuantificar las distintas sustancias
que la componen. En toda cromatografa hay dos fases: mvil y
estacionaria. Se clasifica en cromatografa en papel y cromato).

PARTE TERICA
CROMATOGRAFIA
La Cromatografa es una tcnica de separacin en la que los componentes
de una muestra se separan en dos fases: una fase estacionaria de gran rea
superficial, y una fase mvil. El objetivo de la fase estacionaria es retrasar
el paso de los componentes de la muestra. Cuando los componentes pasan a
travs del sistema a diferentes velocidades, estos se separan en
determinados tiempos. Cada componente tiene un tiempo de paso
caracterstico a travs del sistema, llamado tiempo de retencin. La
separacin cromatogrfica se logra cuando el tiempo de retencin del
analito difiere del resto de componentes de la muestra.
La cromatografa puede ser preparativa y analtica.
La cromatografa preparativa se refiere a la separacin de los
componentes de una mezcla para su posterior procesamiento, y se
puede considerar un mtodo de purificacin.
En la cromatografa analtica generalmente se hace con una pequea
muestra permitiendo para cuantificar la proporcin relativa de los
componentes en la mezcla.
La cromatografa es una de los principales mtodos analticos y permite la
separacin y cuantificacin de sustancias muy similar en estructura y
propiedades qumicas.

 cromatografa en papel
La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios
para realizar unos anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy
potente no requiere de ningn tipo de equipamiento.
La fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel
filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de
la solucin y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como
fase mvil se hace ascender por capilaridad. Luego se coloca la tira de
papel verticalmente y con la muestra de abajo dentro de un recipiente que
contiene fase mvil en el fondo.
Despus de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha
llegado al extremo se retira el papel y se deja secar. Si el disolvente elegido
fue adecuado y las sustancias tienen color propio se vern las manchas de
distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el
papel se somete a procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz: la
eleccin del disolvente y la del papel de filtro.
Un ejemplo podra ser que utilices un pedazo de papel y le hagas puntos de
colores con plumones permanentes y le pongas un lapiz del lado donde no
estn los puntos de colores (esto te servir como soporte), despus en un
vaso pon alcohol y coloca la tira de papel con el lapiz horizontalmente en la
parte de arriba para que el papel no caiga y tienes que esperar para que el
alcohol haga efecto en el papel, lo que suceder es que a los puntos de
colores se les harn unas pequeas lneas hacia arriba.

 Cromatografa en capa fina (CCF)

En la cromatografa en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una
capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de slice, almina o
celulosa) depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o
una lmina de aluminio o de plstico. La CCF es una tcnica analtica y
tiene como objetivo el anlisis de una mezcla de componentes. El proceso
es similar a la cromatografa de papel con la ventaja de que se desarrolla
ms rpidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir entre
diferentes adsorbentes. La CCF es una tcnica estndar en el laboratorio de
qumica orgnica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a
menudo para monitorizar las reacciones qumicas y tambin para el anlisis
cualitativo de los productos de una reaccin, puesto que permite conocer de
manera rpida y sencilla cuntos componentes hay en una mezcla.

Procedimiento
Una placa de CCF es una lmina de vidrio, metal o plstico recubierta con
una capa delgada de un slido adsorbente (gel de slice o almina). Se
deposita una pequea cantidad de la muestra problema en disolucin en un
punto en la parte inferior de la placa. Entonces la placa se introduce en una
cubeta cromatogrfica, de forma que slo la parte inferior de la placa queda
sumergida en el lquido. Este lquido o eluyente es la fase mvil y asciende
por la placa de CCF por capilaridad.
A medida que el eluyente pasa por el lugar donde est la mancha de la
mezcla problema se establece un equilibrio entre las molculas de cada uno

de los componentes en la mezcla que son adsorbidas y las que se

encuentran en disolucin.
En principio, los componentes se diferenciarn en solubilidad y en la fuerza
de su adsorcin, de forma que unos componentes se desplazarn ms que
otros. Cuando el eluyente llega a la parte superior de la placa, esta se saca
de la cubeta, se seca, y los componentes separados de la mezcla se
visualizan.

Visualizacin de las manchas

Si los compuestos son coloreados se pueden observar las manchas a simple
vista. Si no es as, hay varios mtodos para visualizar las manchas
correspondientes a cada componente de la mezcla.
1. Utilizar luz ultravioleta (UV254) para observar la placa.
Normalmente se adiciona un colorante fluorescente al adsorbente, de
forma que la placa sea fluorescente en todas partes excepto donde
haya una mancha correspondiente a un compuesto orgnico.
2. Utilizar reveladores, por ejemplo, vapores de yodo que es un reactivo
inespecfico.
3. Emplear reactivos especficos para desarrollar coloracin en las
manchas. Esto se puede hacer sumergiendo la placa de CCF en una
disolucin que los contenga o en forma de spray.

Clculo del factor de retencin Rf

Cuando son visibles, se puede determinar para cada una de las manchas el
valor de Rf (factor de retencin), o la distancia que cada compuesto se
desplaza en la placa. Cada compuesto tiene un Rf caracterstico que
depende del disolvente empleado y del tipo de placa de CCF utilizada, pero
es independiente del recorrido del disolvente. De esta manera se puede
ayudar a identificar un compuesto en una mezcla al comparar su Rf con el
de un compuesto conocido (preferiblemente cuando se hacen eluir en la
misma placa de CCF).

 Cromatografia en columna
Es una tcnica de purificacin, puesto que permite aislar los compuestos
deseados de una mezcla.

Procedimiento
La cromatografa en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se
llena con un soporte slido adsorbente (fase estacionaria: los ms utilizados
son gel de slice (SiO2) y almina (Al2O3)). La muestra que se quiere
separar se deposita en la parte superior de este soporte. El resto de la
columna se llena con el eluyente (disolvente que constituye la fase mvil)
que, por efecto de la gravedad, hace mover la muestra a travs de la
columna. Se establece un equilibrio entre el soluto adsorbido en la fase
estacionaria y el disolvente eluyente que fluye por la columna. Debido a
que cada uno de los componentes de una mezcla establecer interacciones
diferentes con la fase estacionaria y la mvil, sern transportados a
diferentes velocidades y se conseguir su separacin. As, de manera
similar a otros tipos de cromatografa, las diferencias en las velocidades de
desplazamiento a travs del medio slido se corresponden con diferencias
en los tiempos de elucin por la parte inferior de la columna para cada uno
de los componentes de la muestra original, que se recogern en fracciones
diferentes.La polaridad del eluyente afecta las velocidades relativas con las
que los diferentes componentes de la mezcla se mueven en la columna. Los
disolventes polares compiten ms eficientemente con las molculas polares
de una mezcla por los lugares polares del adsorbente. Por lo tanto, un
disolvente polar desplazar las molculas, incluyendo las ms polares,
rpidamente a travs de la columna. Si el disolvente es muy polar la
elucin ser muy rpida y generalmente habr poca separacin de los
componentes de la mezcla. Si por el contrario el disolvente es muy apolar,
no eluirn los compuestos de la columna. Por lo tanto, la eleccin del

eluyente es crucial para el xito de la cromatografa en columna. A menudo

se utiliza un gradiente creciente de polaridad para la elucin. La CCF se
utiliza para determinar y elegir el sistema solvente adecuado para cada
separacin.
En 1978 se introdujo una versin modificada denominada cromatografa
en columna rpida. La diferencia con la cromatografa en columna
tradicional es que en la tcnica rpida el disolvente se hace atravesar la fase
estacionaria aplicando una presin positiva. Esto hace que las separaciones
mejoren en resolucin y se pueda disminuir el tiempo de elucin, por lo
cual constituye un mtodo de eleccin.

Anlisis de los elatos de la columna

Si los compuestos separados en una cromatografa en columna son
coloreados, el progreso de la separacin se puede monitorizar visualmente.
No obstante, a menudo los compuestos que deben ser aislados suelen ser
incoloros. En este caso, se recogen secuencialmente pequeas fracciones de
eluatos en tubos rotulados y la composicin de cada fraccin se analiza por
cromatografa en capa fina. Una vez identificadas las diferentes fracciones
que contienen el mismo producto, se renen, se elimina el disolvente y se
analiza la identidad de los componentes por mtodos espectroscpicos.

Procedimientos Experimentales
Materiales

2 vasos de precipitados de 250mL

Papel whatman
Capilares
Probeta de 25mL
Mortero con piln
Tijeras
Embudo
Lpiz

Muestras
Flores color purpura y verdes (bien secas)
Colorantes orgnicos, aptos para digerir.
Reactivos
HCl
Metanol

Fase mvil: CH 3 COOH (glacial ) , HCl(c ) , agua [60:6:20]

PROCEDIMIENTO:
a) Preparacin del extracto de flores:
Se trituro las hojas secas, las cuales previamente se encontraban en la
estufa, con la ayuda de un mortero hasta conseguir un polvo fino,
nuestra muestra era de 3,2gr.
En un vaso se coloc la muestra triturada, agregndole una mezcla
de cido clorhdrico metanolico al 1%; posteriormente con la ayuda

de una bagueta se trat de extraer la mayor cantidad posible de

sustancia colorante.
Finalmente esta muestra se envolvi en una bolsa negra, y se guard
en un sitio oscuro durante unos 20 min.
Luego se filtr sobre otro vaso precipitado con la ayuda de un papel
filtro y un embudo.

b)

Cromat
ografa de papel

Se cortaron tiras del papel whatman, de acuerdo al tamao del vaso que se
utilizara.
Con un lpiz se traz una lnea 1cm por encima del fondo, en esta lnea se
colocaran con la ayuda de capilares las muestras a tratar; se coloc la fase
mvil evitando mojar las paredes del vaso.
Una vez el sistema ya ensamblado, las muestras de colorantes se colocaron
en la lnea, primero tratamos los colores bsicos (azul, rojo, amarillo); en
otro papel en simultaneo se colocaron 4 muestras; las cuales estaban
mezcladas en diferentes lunas de reloj. Esto se trato con agua, al tratarse de
compuestos comestibles.
Se introdujo el papel y dejamos correr el eluyente durante unos minutos. Al
finalizar se calcul la distancia recorrida por el solvente y la distancia
recorrida por el colorante.

Y nos dio los siguientes valores: el solvente subi hasta 6cm.

Colorante
Azul

Distancia
recorrido(cm)
6

Amarillo

5,1

Rojo

5,8

En las mezclas nos sali: el solvente subi hasta 8,2cm

Muestra

Colores mostrados

Mezcla 1

Rojo, amarillo

Mezcla 2

Morado(rojo, azul)

Mezcla 3

Verde( amarillo,
azul)
Verde, rojo, azul
amarillo

Mezcla 4

Clculos de los Rf
Rf AMARILLO=

5,1
=0.85
6

6
Rf AZUL= =1
6

Rf ROJO =

5,8
=0.97
6

 Posteriormente se sac la muestra de hojas que se haban guardado y

se coloc la mezcla del solvente; y con un capilar se coloc una
muestra en la lnea; la cual tuvo este valor.
Recorrido del solvente: 5cm
Recorrido de la muestra: 4,2cm

Rf HOJAS=

4,2
=0,84
5

DISCUSIN DE RESULTADOS
Nuestros valores pueden tener dos orgenes; uno el que se mostr
instantes despus de la experiencia, y otro que se toma al momento
de realizar este informe, con unos das despus, en el cual el solvente
ha ido recorriendo ms superficie del papel.
Los valores aqu mostrados pueden tener un margen de error debido
a su permanencia dentro de una mica de pvc.
Por ms que se trat de ponerlo ms impermeable; el solvente sigui
corriendo, y algunos colores son ms persistentes, como el rojo.

CONCLUSIONES
La clorofila se presenta como un colorante verde, el cual al pasar dos
das en nuestra mica se desvanecio.
Los colorantes comestibles son solubles en agua.
El azul es mucho mas soluble que los otros colorantes.