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Gas Lquido
Limitantes en bioprocesos
Paso de transporte de masa : substrato y el
catalizador se encuentran.
Paso cataltico: pH, Temperatura, etc.
Soluciones para reacciones donde los fenmenos de
transporte son limitantes:
Aumentar el movimiento de substrato y catalizador en el
biorreactor.
Aumentar la concentracin de substrato.
Aumentar la concentracin de catalizador.
Pelculas interfases
Entre poros
1
3
2
lquido
lmite interfase
Fase 1
pelcula intefase
concentracin
interfase
distancia
lquido
Transferencia interfases
La velocidad de transferencia de masa a travs de la
interfase se puede incrementar :
Aumentando el rea entre las fases.
Aumentando el gradiente de concentracin.
Disminuyendo el tamao de la pelcula interfases.
Aumentando la velocidad de transferencia del soluto
en la pelcula interfacial.
Transferencia interfases
Factores que la afectan:
El rea interfacial
interfacial..
Solubilidad del soluto en el lquido.
Concentracin del soluto en las dos fases.
Mezclado.
Viscosidad y temperatura del lquido.
Transferencia interfases
rea interfacial:
aumentando el rea de contacto entre dos fases
mejora al transferencia de masa.
Transferencia interfases
Solubilidad del soluto en el lquido:
Caractersticas del soluto: tamao, carga, polaridad, etc.
Temperatura.
Condiciones de mezclado.
Caractersticas del medio de cultivo.
Transferencia interfases
Concentracin del soluto en las dos fases
fases..
A mayor gradiente mayor la velocidad de transferencia
transferencia..
Un mezclado eficiente permite mantener los gradientes
de concentracin y por lo tanto mejorar la transferencia
transferencia..
Transferencia interfases
Mezclado.
La agitacin provoca la ruptura de burbujas y partculas
aumentando de esta manera el rea interfases
interfases..
Remueve el soluto de la pelcula interfase
interfase..
Transferencia interfases
Viscosidad y temperatura del lquido
Medios viscosos retardan los procesos de difusin en la pelcula
interfase por lo tanto disminuyen la trasferencia de masa
masa..
La temperatura reduce la viscosidad de los lquidos y aumenta la
movilidad de los solutos, por lo tanto produce un aumento en la difusin
de los solutos en la pelcula interfacial mejorando la transferencia
transferencia..
dCs = k * a ( Cs* - C L )
dt
CS es la concentracin de soluto en el lquido
k es el coeficiente de transferencia de masa del soluto a travs de la interfase
a es el rea total interfase
Cs* es la concentracin de saturacin de soluto en la pelcula interfase.
CL es la concentracin de soluto en la pelcula .
Velocidad de agitacin.
Dimetro del agitador.
Diseo del bioreactor.
Densidad del medio de cultivo.
Densidad de las burbujas o glbulos.
Viscosidad del medio de cultivo.
Difusividad del soluto.
Fase lquida
CAG
CAGi
CALi
CAL
Pelcula de la
fase gaseosa
Pelcula de la
fase lquida
OTR
dC L = k L * a ( C L * - C L )
dt
OTR
dC L = k L a ( C L * - C L )
dt
p AG
= H *
CL*
aire
g =
Vg
Vg + Vl
P base = g h + 1 atm
: densidad.
g: fuerza de gravedad.
h: altura.
Pbase: presin en la base de la columna
Consumo de Oxgeno
Crecimiento
limitado en O2
Crecimiento no
limitado en O2
max
0.5
m = m max * C O
KO + CO
max
KO
Ccrit
qO =
2
qO
max
CO
KO + CO
dC O = dt
1
Yxo
m max * C O
KO + CO
OUR
= Q O2 = q O2 * X
Consumo de Oxgeno
La concentracin de oxgeno disuelto en el bioreactor estar dado por
el balance de la transferencia (OTR) y el consumo (OUR):
dC O = OTR
- OUR
dt
Que es lo mismo que decir:
dC O = k L a ( C L * - C L ) - q O2
dt
Consumo de Oxgeno
Integrando la dos ecuaciones en el estado de equilibrio (estacionario):
OTR = OUR
De tal manera que:
k L a ( C L * - C L ) = q O2
CL
C*
0
tiempo
Graficando
ln (1-CL/C*) = - Kla t
100
0
0
90
80
100
200
-0,5
70
ln (1-Cl/C*)
60
CL
300
50
40
y = -0,008x + 0,299
R = 0,999
-1
-1,5
30
20
-2
10
0
0
100
200
tiempo, s
300
400
-2,5
tiempo, s
400
Ventajas y Limitaciones
* Es un mtodo rpido
* Puede usarse directamente el medio de fermentacin
* Se requieren volmenes grandes de nitrgeno por lo cual no es
conveniente en gran escala
* considerar que el electrodo de oxigeno es permeable al gas y por
.
lo tanto mide presiones parciales y no concentraciones
* Hay que considerar el tiempo de respuesta del electrodo y las nuevas
resistencias que se generan por la introduccin del electrodo mismo.
120,0
Sin O2.
100,0
CL
80,0
60,0
40,0
20,0
0,0
0
20
40
60
Tiempo, s
80
100
Saturado
de O2.
KL a =
oferta
KLA (C*-CL)
demanda
X * qO2
X * qO2
(C* - CL)
Condicin
La medicin debe efectuarse en forma rpida, de modo que los parmetros
fisiolgicos (respiracin) y cinticos (biomasa, CL, C*) puedan considerarse
constantes. En estas condiciones tenemos un cultivo en estado estacionario (no
continuo).
suministro de O2
OFF
restitucin del
suministro de
ON
O2
dC L = k L a ( C L * - C L ) - q O 2 * X
dt
KL a 1
CL
KL a 2
dC L = q O 2 * X
dt
KL a 1 > KL a 2
C critica
tiempo (minutos)
dC L = 0
dt
y KLa = 0
dC L = k L a ( C L * - C L ) - q O 2 * X
dt
Reordenando
CL = -
1
kLa
dC L + q O 2 * X
dt
+ C*
dC L + q O 2
dt
1
kLa
dC L + q O 2
dt
CL
dC L = k L a ( C L * - C L ) - q O 2 * X
dt
corte del
suministro de O2
OFF
restitucin del
suministro de O2
ON
CL 2
CL 1
dC L = q O 2 * X
dt
C critica
t1
t2
tiempo (minutos)
dCL
dt
qO2 + X
= Kla ( C* - L )
= Kla (L - CL )
Considerando
dCL
dt
= Kla (L - CL )
ln
(L CL1)
(L CL2)
kla =
(t2- t1 )
De esta forma podemos calcular kla entre dos tiempos del perodo de
re-aireacin.
Ventajas
- La determinacin se hace in situ.
- Rapidez.
- Solo requiere un electrodo de oxigeno.
-Puede calcularse el C*.
Limitaciones
- Se requiere un electrodo de respuesta rpida.
- El KLa que se calcula es puntual.
- Hay errores dados por:
tiempo de respuesta del electrodo.
transferencia de oxigeno desde la superficie.
- Para minimizar estos errores deben introducirse
correcciones que contemplen la resistencia del electrodo,
el tiempo de respuesta del mismo, y la transferencia
superficial de oxigeno.
kLa (
CL*
- CL ) =
F * p AG
R * VL
F * p AG
T
p T *F
[ ( y AG ) i - ( y AG )o ]
R * T * VL
F : flujo volumtrico de del gas; R: constante general de los gases;
T: temperatura absoluta.
pT : presin total gas; VL: volumen de lquido en el fermentador;
yAG: : fraccin molar de oxgeno en el gas.
i: se refiere a entrada; o: se refiere a salida.
p T *F
kLa * R * T * VL
Xmax =
Kla * C*
qO2
Kla critico
(Kla )crit=
Evitar que Cl llegue a Ccrit
qO2 * X
(C*- Ccrit)
T C
Ccrit mM
Azotobacter vinelandii
30.0
0.018-0.049
Escherichia coli
37.8
0.0082
15.0
0.0032
Serratia marcescens
31.0
0.015
Pseudomonas denitrificans
30.0
0.009
Yeasts
34.8
0.0046
20.0
0.0037
24.0
0.022
30.0
0.009
30.0
0.020
Penicillium chrisogenum
Aspergilus oryzae
Vectores de Oxgeno
Caractersticas generales
Qumica y biolgicamente inertes.
No txicos.
Esterilizables por calor.
Econmicos.
Vectores de Oxgeno
Perfluorocarbonos
Alcanos: n-heaxadecano y n-dodecano
Pluronic F-68
Aceites vegetales: girasol, soja y mani.
Aceites de silicona
Nanopartculas (Fe3O4) cubierta con cido oleico y
surfactante
Perfluorocarbonos
Pluronic F-68
Vectores de Oxgeno
Vectores de Oxgeno
Parametro
Biorreactor Lab
(10 l)
Planta Piloto
(2000-5000 l)
Produccin
(50000 l)
Reproducibilidad
Variable, buena
Razonable
Transferencia de calor
Fcil de controlar
Buen control
Limitante
Aireacin/Potencia
aplicada
Fcil de controlar
Relativamente
Limitacin > Capacidad
Fcil de controlar compresor,
Agitacin
Uniforme
Uniforme
No uniforme
Control de proceso
Tiempo de respuesta
Pequeo
Pequeo
Grande, no uniforme
Error en la toma de
muestra
Pequea, puede
afectar el volumen
Pequea
No uniforme
Riesgo tolerado
Alto
Moderado
Bajo
Criterio
% Industria
P/V constante
30
Kla constante
30
utip constante
20
PO2 constante
20
Pg = Potencia aplicada
V = Volumen
KLa
Pg
V
0.95
0.67
Vs
= constante
Correlacin de Richards
KLa
Pg
V
0.4
Pg = Potencia aplicada
0.5
Vs
0.5
V = Volumen
N = velocidad del agitador
Vs = velocidad superficial de aire
Vs =
= .
En general, los caldos de fermentacin se comportan como fluidos no
newtonianos, con viscosidad variable a lo largo del proceso
fermentativo.
KLa
2.34 x
10-4
Pg
0.86
Pg = Potencia aplicada
VL
VL = Volumen
KLa
0.7
0.32
Vs
Vs =
Airlift
KLa
0.84
14.32
Vs
Vs =