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INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LA FLUORESCENCIA

Al incidir radiaciones electromagnticas de longitud de onda adecuada


sobre las molculas orgnicas se puede producir una transicin desde el
estado electrnico fundamental hasta un estado electrnico excitado,
generalmente el primero. Si bien en una solucin a temperatura
ambiente la mayor parte de las molculas suelen encontrarse en su
nivel vibracional fundamental, tras la excitacin radiante pueden pasar a
un nivel vibracional ms elevado del primer estado electrnico excitado.
Los estados excitados son inestables; por tanto, existe en las molculas
una tendencia a retornar al estado electrnico fundamental.
La molcula, para perder el exceso de energa absorbida y volver el
estado de mnima energa y por tanto el ms estable. En fluorescencia
esa energa se pierde en forma de un fotn, sin cambio en la
multiplicidad del spin.

1.
Fluorometra o fluoroscopia Dr. Alberto Martn Lasa Definicin:
Fluorometra o fluoroscopia:
Espectrometra de fluorescencia La espectrometra de fluorescencia
(tambin llamada fluorometra o espectrofluorimetra) es un tipo de
espectroscopia electromagntica que analiza la fluorescencia de una
muestra. Se trata de utilizar un haz de luz, por lo general luz ultravioleta,
que excita los electrones de las molculas de ciertos compuestos y
provoca que emitan luz de una menor energa, generalmente luz visible
(aunque no necesariamente). Una tcnica complementaria es la
espectrometra de absorcin.
Los dispositivos que miden la fluorescencia se llaman fluormetros o
fluormetros. TEORA DE LA FLUORESCENCIA Las molculas tienen
diferentes estados llamados niveles de energa. La espectrometra de
fluorescencia se refiere principalmente a estados vibracionales y
electrnicos. En general, las especies objeto de examen tendrn un
estado electrnico basal (un estado de baja energa) de inters, y un
estado electrnico excitado de mayor energa. Dentro de cada uno de
estos estados electrnicos hay diferentes estados vibracionales. En la

espectroscopia de fluorescencia, primero se excita la muestra mediante


la absorcin de un fotn de luz, desde su estado electrnico basal a uno
de los distintos estados vibracionales del estado electrnico excitado.
Las colisiones con otras molculas causan que la molcula excitada
pierda energa vibracional hasta que alcanza el estado vibracional ms
bajo del estado electrnico excitado. La molcula desciende luego a uno
de los distintos niveles de vibracin del estado electrnico basal,
emitiendo un fotn en el proceso.
Como las molculas pueden caer a cualquiera de los diferentes niveles
de vibracin en el estado basal, los fotones emitidos tendrn diferentes
energas y, por lo tanto, frecuencias. As pues, mediante el anlisis de
las diferentes frecuencias de luz emitida por espectrometra de
fluorescencia, junto con sus intensidades relativas, se puede determinar
la estructura de los diferentes niveles de vibracin.

Fluorescencia. Emisin de luz de una sustancia que ha absorbido luz u


otra radiacin electromagntica. Es una forma de luminiscencia. En la
mayora de los casos, la luz emitida tiene menor longitud de onda, y por
ende menor energa, que la radiacin absorbida.

Espectrometra de fluorescencia
La espectrometra de fluorescencia (tambin llamada fluorometra o
espectrofluorimetra) es un tipo de espectroscopia electromagntica que
analiza la fluorescencia de una muestra. Se trata de utilizar un haz de
luz, por lo general luz ultravioleta, que excita los electrones de las
molculas de ciertos compuestos y provoca que emitan luz de una
menor energa, generalmente luz visible (aunque no necesariamente).
Una tcnica complementaria es la espectrometra de absorcin.
Los dispositivos que miden la fluorescencia se llaman fluormetros o
fluormetros.

Fluorescencia
La fluorescencia es un tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a
las sustancias que son capaces de absorber energa en forma de
radiaciones electromagnticas y luego emitir parte de esa energa en
forma de radiacin electromagntica de longitud de onda diferente.
La energa total emitida en forma de luz es siempre menor a la energa
total absorbida y la diferencia entre ambas es disipada en forma de
calor. En la mayora de los casos la longitud de onda emitida es mayor -y
por lo tanto de menor energa- que la absorbida, sin embargo, si la
radiacin de excitacin es intensa, es posible para un electrn absorber
dos fotones; en esta absorcin bifotnica, la longitud de onda emitida es
ms corta que la absorbida, sin embargo en ambos casos la energa
total emitida es menor que la energa total absorbida.
En general las sustancias fluorescentes absorben energa en forma de
radiacin electromagntica de onda corta (p ej radiacin gamma, rayos
x, UV, luz azul, etc), y luego la emiten nuevamente a una longitud de
onda ms larga, por ejemplo dentro del espectro visible;
los ejemplos ms notables de fluorescencia ocurren cuando la luz
absorbida se encuentra dentro del rango ultravioleta del espectro
-invisible al ojo humano- y la luz emitida se encuentra en la regin
visible.
Las sustancias que son capaces de emitir luz al ser excitadas por
diferentes tipos de radiacin se denominan fluorforos. Es posible
obtener una amplia variedad de colores por fluorescencia, dependiendo
de la longitud de onda que emita el compuesto fluorescente.

Fluorescencia
La fluorescencia es un tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a
las sustancias que son capaces de absorber energa en forma de
radiaciones electromagnticas y luego emitir parte de esa energa en
forma de radiacin electromagntica a longitud de onda diferente.

Al incidir radiaciones electromagnticas de longitud de onda adecuada


sobre las molculas orgnicas se puede producir una transicin desde el
estado electrnico fundamental hasta un estado electrnico excitado.
Los estados excitados son inestables; por tanto, existe en las molculas
una tendencia a retornar al estado electrnico fundamental.

Se trata de utilizar un haz de luz, por lo general luz ultravioleta, que


excita los electrones de las molculas de ciertos compuestos y provoca
que emitan luz de una menor energa, generalmente luz visible (aunque
no necesariamente).

Los dispositivos que miden la fluorescencia se llaman fluormetros o


fluormetros.

En general, las especies objeto de examen tendrn un estado


electrnico basal (un estado de baja energa) de inters, y un estado
electrnico excitado de mayor energa.

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