Dogma Central da Biologia Molecular

Transcrio do DNA - Procariotos

Gene do RNAr

Gene do RNAt

Molcula de
RNA ribossomal

Molcula de
RNA
Transportador

Produtos finais da expresso gnica

Gene do
RNAm

Molcula de
RNA
mensageiro
Intermedirio

Molculas estveis
Traduo
Desempenham seus papis na clula como
molculas de RNA

Protena

Traduo
RNA mensageiro
Traduzido

Protena
Participao do RNAr e do RNAt

Como????

RNAm

RNAm carrega a informao a ser traduzida

Cdon

RNAm final

1
2
3
4
5
6
7
AUG GGC UUC UAG UCA AAC
UUA

Trinca de nucleotdeos do RNAm final = cdon

1 cdon

3 nucleotdeos no RNAm

7 cdons

21 nucleotdeos

Um cdon = codifica um
aminocido

RNAt

Triptofano

3 base =
pareamento
oscilante

Cdigo gentico degenerado - 1966

Alguns cdons diferentes podem codificar o mesmo aminocido

Base 1

Base 2

Base 3

Arginina

O mesmo cdon pode codificar mais de um aminocido?

NO! No-ambiguidade

RNAt
Cada RNAt responsvel por carregar apenas um tipo de aminocido
RNAt que carregam o mesmo aminocido = isoaceptores
Aminoacil-RNAt-sintetase=liga RNAt ao aminocido correto
Aminoacil-sintetase
(20 diferentes)

Aminocido
Brao aceptor

Correo de erro
Brao TC
Brao D

Ala varivel 3 a 21 bases

Brao do anticdon

Complementar ao
RNAm

Cdo
n

Posio 1

A, U, C,
G

Posio 2

A, U, C,
G

Posio 3

A, U, C,
G

Combinaes possveis

4 x 4 x 4 = 64 cdon diferentes

20 aminocidos
Por qu?

64 aminocidos

Cdigo gentico degenerado

Cdon de iniciao da traduo: AUG Metionina

Cdon de finalizao da traduo : UGA, UAA, UAG Mais degenerada

Cdigo gentico degenerado

No-ambiguidade = cada cdon corresponde a apenas um

aminocido

Open reading frame

determinao da janela de leitura (ORF)

Cdigo gentico semi-universal

Quase todos os organismos utilizam o mesmo cdigo gentico

RNAr
RNAr associa-se protenas, formando os ribossomos; orientam a sntese protica
Eucarioto
Procarioto
70S

RNA
pol III

RNA
pol I

Formao de ribossomos eucariticos

Nuclolo
1 - Transcrio do RNAr 45S;
2 - Clivagem em 5,8S; 18S e 28S;
18S

5,8S 28S

3 - Empacotamento do RNAr em
partculas pr-ribossomais

Transcrito
fora do
nuclolo
Boisvert et al. (2007)

Ribossomo

Citoplasma
1 Associao das
subunidades 40S e 60S =
formao
dos
ribossomos

Como RNAm, RNAt e ribossomos interagem para produzir protenas?

Como ocorre a traduo?

Traduo

RNA mensageiro

Ser reconhecido pelos fatores de

iniciao: IF 1 e IF 3

Fatores de iniciao + RNA m

Traduo em procariotos

RNAt da metionina se ligar ao

RNAm e aos fatores de transcrio

Fatores de iniciao + RNAm

1 0 RNAt f met

E. coli pode usar

GUG como
cdon de
iniciao

Metionina formilada

Grupo amino bloqueado por grupo

formil

Traduo - Procariotos

Subunidade menor do ribossomo se

ligar ao RNAm + fatores de
transcrio

Procariotos
Sequncia Shine-Dalgarno
AGGAGG
Local de insero da subunidade
menor do ribossomo

Traduo em procariotos - Iniciao

Subunidade menor do ribossomo desliza na fita de RNAm at

encontrar o cdon AUG ( cdigo da metionina formilada)

Sentido da leitura do RNAm

5-3

Traduo em procariotos - Iniciao

Fatores de iniciao se
desligam

Traduo em procariotos - Iniciao

Ribossom
o
completo

Subunidade maior do ribossomo se liga ao

complexo

Elongao

Try
Traduo em procariotos - Elongao

UG
G

RNAt reconhece o
cdon do stio A

Aminoacil
transferase
Try

UAC AC
C
UG
G

Traduo em procariotos - Elongao

Try

Segundo
aminocido se liga
ao primeiro
Ligao
peptdica

UA AC
C C
UG
G

Peptidiltransferas
e

Energia

Ligao libera energia

Subunidade maior se
desloca no sentido 5- 3

Traduo em procariotos - Elongao

Energia

Energia

Subunidade menor se
desloca no sentido 5- 3

Stio A pode receber o

RNAt

GG
G

Traduo em procariotos - Elongao

Primeiro RNAt se
desliga do RNA

Libera o stio E

Processo se
repete

Traduo em procariotos - Finalizao

Fator de
liberao

Cdon de parada
Stop cdon

Nenhum transportador
reconhece os cdons:
UAA; UGA; UAG

Fator de liberao
Dissociao do
complexo RNAmRNAt-ribossomo

Traduo
Diferenas entre procariotos e eucariotos
Procariotos

Eucariotos

Metionina iniciadora
(Cdon AUG)

Formilada

No formilada

Complexo de iniciao

Sequncia ShineDalgarno

Sequncia tima
5-GCC (A ou G)
CCAUGG-3

Fatores de iniciao

Mais simples

Mais complexos

Subunidade menor dos

ribossomos

Subunidade 30S (rRNA

16S + 21 protenas)

Subunidade 40S (rRNA

18S + 30 protenas)

Subunidade maior dos

ribossomos

Subunidade 50S (rRNA

23S + 5S)

Subunidade 60S (rRNA

28S + 5,8S + 5S)

Qual a importncia mdica/farmacutica da

diferena nas subunidades dos ribossomos dos
eucariotos e procariotos?

E se ocorrer uma
mutao?????

Normal

Mutada

Mutao no DNA

QUALQUER ALTERAO PERMANENTE NO MATERIAL GENTICO

Mutaes gnicas

Mudanas na sequncia do DNA

Surgimento de novos alelos

Mutao

DNA de cada homem ou mulher acumula entre 100 e 200

variaes diferentes - a maioria no tem efeitos evidentes na
aparncia ou na sade

Por qu?

Maior parte
do DNA no
codificante

Regio codificante

Para que houvesse tanta biodiversidade, as mutaes devem ter ocorrido

ao longo da evoluo nas clulas somticas ou gamticas dos indivduos?

Mutaes

Clulas somticas

No herdveis

Clulas germinativas

Herdveis

Mutaes gnicas

Mutaes de ponto

Alteraes de um nico par de bases

Substituies
Transio (A-G ou G-A; T-C ou C-T)
Transverso (prica para pirimdica)

Indels

3-AGACAAA-5

Replicao

G
C

5- TCTTGTTT- 3 5- TCTG_TT - 3
Insero
Deleo

E onde entra o DNA nessa

histria?

Mutaes sinnimas ou mutaes silenciosas

Muda um cdon de um aminocido por outro cdon do mesmo aminocido

RNAm 5

Metionina Treonina

Lisina

AUG ACA

AAG

Serina

Glicina

AGC GGU

Fim

UGA

Met

Treo

Lis
Ser

Gli
Transio
RNAm 5

AUG ACA
Metionina Treonina

AAG

AGU

GGU

Lisina

Serina

Glicina

UGA

Fim

Met

Treo

Ser
Gli

Diferentes cdons codificam um mesmo AA

Lis

Mutaes de sentido trocado ou mutaes no sinnimas ou Missense

Muda um cdon de um aminocido por cdon de outro aminocido

RNAm 5

Metionina Treonina

Lisina

AUG ACA

AAG

Serina

Glicina

AGC GGU

Fim

UGA

Met

Treo

Lis
Ser

Gli
Transverso

RNAm 5

AUG ACA
Metionina Treonina

AAG
Lisina

AGA GGU
Arginina

Glicina

UGA
Fim

Met

Treo

Lis
Arg
Gli

Mutaes sem sentido ou Nonsense

Cdon de um aminocido mudado para um cdon de trmino de traduo

RNAm 5

Metionina Treonina

Lisina

AUG ACA

AAG

Serina

Glicina

AGC GGU

Fim

UGA

Met

Treo

Lis
Ser

Gli
Transverso
RNAm 5

AUG ACA

UAG

Metionina Treonina

Fim

AGA GGU

UGA

Met

Treo

Mudana da matriz de leitura ou Frameshift

Toda a sequncia de aminocidos no tem relao com a sequncia original

RNAm 5

Metionina Treonina

Lisina

AUG ACA

AAG

Serina

Glicina

AGC GGU

Fim

UGA

Met

Insero
AUG ACA

AA A G A G A G G U

RNAm 5

AUG ACA

AA A

Metionina Treonina

Lisina

Lis
Ser

Gli

RNAm 5

GAG

Treo

UGA

AGG UUG A

Ac. Glut Arginina Leucina

Met
Treo

Lis
Glu
Arg

Perda completa da estrutura e funo da protena

Leu

S regies codificantes podem sofrer mutaes?

Promotores e acentuadores

Mutaes em regies no codificantes

Juno ntron-xon

Nomenclatura de mutaes: exemplo de mutaes do gene CFTR

Posio do cdon

cDNA = RNAm

protena

O que ocasiona as mutaes?

Mecanismo de mutaes espontneas

Erros na replicao do DNA

Insero de pares de errados de nucleotdeos

Tautmeros

Depurinao/
Desaminao

Ao de radicais livres

Timina
Adenina
Guanina
Citosina

Nucleotdeo perde NH2 em contato com H20

Mecanismo de mutaes espontneas

Erros na replicao do DNA

Escorrego da DNA polimerase (DNA polymerase slippage) Doenas

Muda matriz
de leitura

Protena
trocada

No muda
matriz de
leitura

Aumenta ou
diminui a
protena

Pessoas saudveis
CAG (cdon para glutamina)
repetido menos de 20 vezes no cromossomo 4

Doena de Huntington

5 a 10 pessoas em
cada 100 mil
EUA = 30.000 casos

CAG (cdon para glutamina)

repetido em mdia 46 vezes no cromossomo 4 (4p)

Degenerao mental e corporal

Por que isso acontece?

Repetio dos trinucleotdeos

Acmulo das protenas nas clulas

Sintomas das doenas

Maioria neurodegenerativa
Causa atrofia muscular

Agregado txico

Doenas ocasionadas por repetio dos trinucleotdeos

Quanto maior a
expanso, maior a
instabilidade

Induzidas
Mutgenos
Agentes qumicos ou fsicos que aumentam a taxa de mutao

Substituio de bases de DNA

Pareamento errado com outra base
Danifica a base e o pareamento no ocorre

Compostos qumicos

Alteram bases

Alteram estrutura
do DNA

Intercalantes

Anlogos de base

Inserem-se entre as Incorporados no DNA

bases

Provocam o mal pareamento das bases e todos os tipos de mutaes

Radiao ionizante
A energia deve ser suficiente para deslocar um eltron de uma rbita mais
interna para outra mais externa INSTABILIDADE = reaes qumicas
Produzem radicais livres

Interagem com DNA e protenas

Dmeros de timina
(ligaes covalentes)

Radiao ionizante
Dmeros de timina
(ligaes covalentes)

Bloqueiam a transcrio e replicao

Ocasionam ruptura do DNA (em uma ou nas duas fitas)

De onde vem a radiao ionizante?

Fontes naturais
-Raios csmicos
-Materiais radioativos de
algumas rochas

Fontes artificiais
-Raio X
- Exploses nucleares

Quanto maior a dose e tempo de exposio = maior nmero de mutaes

Qual a dose permissvel para exposio a radiao ionizante por ano?

International Commission on Radiological Protection

Organizao Mundial da Sade
Unesco

Tentam definir os limites

Exposio no deve exceder 50mSy por ano

Isso bastante ou pouco?

1 mSy + ou igual a:
50x a dose recebida em um raio-X de trax

Se o DNA pode ser danificado de tantas formas, como os

seres vivos conseguem sobreviver?

Sistema de reparo!

Reparo das mutaes

Sistema de reparo tenta corrigir as falhas
100 protenas de reparo conhecidas
Exciso de base

Exciso de nucleotdeo

Correo de pareamento

O que ocorre se o sistema de reparo no funcionar?

Doenas

http://www.scielo.org.ar/img/revis
tas/aap/v105n5/a11f3.gif

Xeroderma pigmentoso 100 casos no Brasil

Indivduos excepcionalmente sensveis luz

Acmulo de mutaes em regies expostas

Leses na pele
Cncer
Referncia no Brasil: Carlos Frederico Menck

Referncias bibliogrficas

GRIFFITHS, A.F.; WESSLER, S.R.; LEWONTIN, R.C.; CARROLL, S.B. 2009. Introduo
Gentica. 9 ed. Guanabara Koogan S.A., Rio de Janeiro. 712 p.
SNUSTAD, D.P.; SIMMONS, M.J. 2008. Fundamentos da Gentica. 4 a Ed. Editora
Guanabara Koogan S.A., Rio de Janeiro. 903 p.
ZAHA, A;. FERREIRA, H.B; PASSAGLIA, L.M.P. 2003. Biologia molecular bsica. 3a ed.
Editora Mercado Aberto, Porto Alegre.