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Escuela Nacional
De Ciencias
Biolgicas
EQUIPO 3
HERNNDEZ BALDERAS JOSE LUIS, RAMREZ PREZ ANA BERTHA
CROMATOGRAFIA
La cromatografa puede definirse como una tcnica que separa una mezcla de solutos
basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se establece al
ser arrastrados por una fase mvil (lquida o gaseosa) a travs de un lecho cromatogrfico
que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser lquida o slida. Las propiedades de los
componentes de una mezcla determinan su movilidad entre s y con respecto a la fase
mvil. La base de la separacin cromatogrfica ser, por tanto, la diferencia en la
migracin de los mismos.
El botnico ruso Mijail Tswett (Figura
1) estableci las ventajas de la
tcnica, adopto la terminologa y
defini
los
procedimientos
experimentales bsicos para esta
tcnica, se considera que es el Padre
de la Cromatografa. En los aos 30 y
40 empez su desarrollo y aplicacin
en diferentes procedimientos de
experimentacin.
La
palabra
Cromatografa
significa Escribir en Colores, porque cuando fue
desarrollada los componentes separados eran
colorantes. Se define como una tcnica o mtodo
fsico de separacin basado en las diferentes
velocidades con que se mueven los solutos
disueltos en un disolvente llamado eluente (fase
mvil) a travs de un medio estacionario o fijo.
Los componentes a separar se distribuyen entre la
fase estacionaria y la fase mvil o fluido que pasa
a travs o a lo largo de la fase estacionaria. Como
los componentes de la mezcla presentan diferente
tendencia a permanecer en cualquiera de las
fases, la separacin se da por el movimiento de la
fase mvil en relacin con la estacionaria y de la
distribucin de las sustancias entre las dos fases.
Las molculas que "prefieren disolverse" en la
fase mvil sern eludas ms rpido que las que
son preferencialmente solubles en la fase
Fig. 2
Cromatografa
en capa fina
OBJETIVO GENERAL
Practica IV Cromatografa
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De Ciencias
Biolgicas
HIPOTESIS
Experiencia. Separacin de licopenos.
Si desarrollamos los pasos de cromatografa en
papel en los licopenos obtenidos en la prctica
Extraccin liquido-liquido y la mezcla de HexanoAcetato,
obtendremos
el
desarrollo
de
cromatograma y con esto poder observar los
componentes del licopeno.
Experiencia. Cromatografa en capa fina
de una mezcla de colorantes.
Si efectuamos la cromatografa en varias
cromatoplacas desde puntos sealados, en
contacto a la mezcla de Acetato de Etilo-Etanol a
diferentes concentraciones y medimos las
distancias entre los puntos, obtendremos los
valores de Rf y observaremos cual es la
concentracin adecuada para esta cromatografa.
MATERIALES
REACTIVO
Silica-gel para columna
Hexano-Acetato de Etilo 1:1
Acetato de Etilo-Metanol 1:1
Acetato de Etilo-Metanol 7:3
Acetato de Etilo-Metanol 1:1
Mezcla de colorantes anaranjado de metiloazul de metileno 1:1
OBSERVACIONES
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RESULTADOS
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CONCLUSIONES
Se conoci la tcnica de cromatografa y los
factores que la afectan, as como la efectividad
de diferentes mezclas de solventes para
realizar la tcnica.
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