Toxicologa

- Extraccin alcalina de txicos revelado por

cromatografa de capa fina

UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA - UMA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Prctica numero N 5

Extraccin alcalina de txicos revelada por cromatografa de capa fina

CURSO: TOXICOLOGA

INTEGRANTE:
ALCEDO MORA, CARLOS

LIMA- PER
2016

DOCENTE:Q.F. AMADEO COLLADO PACHECO

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I.

INTRODUCCIN
En esta prctica se hizo la cromatografa de capa fina con las muestras
biolgicas de hgado (metaminofox), sangre (carbofurano) y harina de
coca, estas muestras ya estaban extradas anteriormente con cloroformo.
Pero se present un inconveniente no hubo reactivos para el medio
adecuado 19 (se utiliz otra estrategia del profesor 75% alcohol y 25% de
acetona) y no sali los resultados esperados.

II.

OBJETIVOS
Identificar con el reactivo de cloruro de paladio manchas amarilla
Identificar con el reactivo fax blue manchas fucsia.

III.

MARCO TERICO

La cromatografa
Es una tcnica para separacin de los distintos componentes de una
mezcla, permite la separacin de trozos de impurezas o bien de las
fracciones importantes. El fundamento de la cromatografa es la
separacin de diferentes tipos de molculas cuando desciende por una
columna o atraviesa una delgada capa de material inerte.
En ambos casos, existe una sustancia que proporciona una superficie
elevada y que interacciona fsicamente con el compuesto a analizar. Si
las molculas son adsorbidas por la superficie, el fenmeno se llama
cromatografa de adsorcin, y si se disuelven en una delgada superficie
lquida, cromatografa de reparto.
El nacimiento de la cromatografa de absorcin se remonta a 1903,
cuando el botnico ruso Mikhail S. Tswett estableci los primeros
fundamentos. Este cientfico observ que filtrando soluciones que
contenan pigmentos vegetales a travs de una columna de carbono de
calcio en polvo fino, los pigmentos quedaban retenidos.

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Haciendo pasar por la columna otro disolvente puro se consegua la

separacin de los pigmentos, los cuales aparecan en la columna en
varias zonas de diferente color que se distanciaban cada vez ms una de
la otra, mientras el disolvente atravesaba la columna, la vistosa
cromatografa, que realmente ha sido poco afortunada, ya que en la
actualidad se emplea esta tcnica para separar fraccin es incoloras en
la mayora de los casos.
Es un procedimiento fsico-qumico que consiste en separar los
componentes o sustancias integrantes de una mezcla en movimiento por
medio de reparto o adsorcin sobre una superficie estacionaria o inmvil.
La razn por la que es posible conseguir separaciones difciles de lograr
por otros mtodos estriba en que, pequeas diferencias en el coeficiente
de reparto o en la adsorcin desorcin de cada uno de los componentes
se va multiplicado a lo largo del sistema.

Se pueden establecer dos mecanismos:

1. Reparto o participacin: Es la distribucin de una sustancia o mezcla
de sustancias entre la fase mvil y la fase estacionaria soportada sobre
un slido adecuado.
2. Adsorcin: Fenmeno de superficie que consiste en el aumento de
concentracin de una sustancia en la superficie de un slido. El proceso
inverso, o sea la separacin de las molculas adsorbidas en la superficie
del slido, se denomina desorcin.
La fuerza con que se adsorbe un compuesto aislado depende de la
polaridad de la molcula, de la actividad del adsorberte y de la polaridad
del solvente.

PARTES DE UN SISTEMA CROMATOGRAFICO

1. Fase mvil: Lo constituyen los solventes, que son sustancias fluidas
de diferente polaridad, ejemplo: metanol, cloroformo, etanol, etc. La
polaridad de la fase mvil est relacionada con su capacidad de elucin o
desorcin. Los solventes deben tener elevado grado de pureza.
2. Fase estacionaria o soporte: Lo constituyen las sustancias
adsorbentes que generalmente se depositan sobre la placa de vidrio o
columna de vidrio, en el caso de la C. en papel, el papel Whatman. Debe
ser insoluble en el disolvente que se va a utilizar para la separacin y no
debe reaccionar con las sustancias que se van a separar.
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3. Cmara de saturacin: que es un recipiente con una tapa que cierra

hermticamente donde se realiza el cromatograma.
4. Reveladores: Si todos los compuestos son coloreados, bastar la
inspeccin ocular para distinguir las manchas, pero en la mayora de los
casos, los compuestos son incoloros y por ello no visibles en el
cromatograma, siendo necesario utilizar mtodos
fsicos (Luz UV) o qumicos, como los vapores de Iodo, u otros reactivos
especiales que permitan hacer visible.
5. Aplicadores: son micropipetas utilizadas en la aplicacin o
sembrado de las sustancias o cromatografiar.

IV.

MATERIALES

Cmara de saturacin

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Plancha de slice gel

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V.

METODOLGIA DE PROCEDIMIENTO

1 Se hizo la seleccin de las muestras quienes son del grupo

carbofurano (muestra biolgica sangre, metaminofox (muestra
biolgica de hgado).

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2 Se sembr en la placa de la slice gel las muestras, estndar de

carbofurano, muestra de rgano fosforado, muestra rgano de
carbofurano, estndar de rgano fosforado.

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3 Se prepar el medio 75% alcohol y 25% de acetona.

4 Se introdujo la plancha de slice gel ya sembrado

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5 Se esper un tiempo hasta que la fase estacionario suba una

distancia adecuada para revelarlo en la cmara de aluminio.

6 Revelamos primero con el reactivo de cloruro de paladio.

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7 Luego seguimos con el reactivo fast blue, y finalmente con

vainillina luego lo llevamos a una cocina elctrica para secarlo y
observar un color fucsia.

VI.

OBSERVACIONES

No se tuvo los reactivos adecuados para trabajar en la prctica.

Los medios (M19,M1, M2,ETC) desarrollados en la clase de laboratorio
fueron de gran ayuda para solucionar estos problemas de reactivos.

VII.

CONCLUSIONES
No se observ las manchas amarillas con el reactivo de cloruro de paladio,
una mnima mancha con el reactivo fax blue manchas fucsia. Esto
resultados es debido a que no fue el medio adecuado donde se trabaj
estas muestras biolgicas.

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VIII.

BIBLIOGRAFA
A. Khoo SH, Bond J, Denning DW. Administering arnphotericin B-a
practica1 approach. J Antimicrob Chemother 1994;33:203-13.
B. Serie Acadmicos CBS. Cromatografa de gases y de lquidos
de alta resolucin Mxico 2000. pag. 255-305

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