UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZNICA

Carrera de Ingeniera Ambiental

Tcnicas de Monitoreo y Muestreo

Prctica de Laboratorio

DETERMINACIN DE PROTEINA BRUTA POR METODO KJELDAHL.

OBJETIVO:
Determinar la concentracin de nitrgeno presente en la muestra para luego ser transformado a
travs de un factor en protena.
INTRODUCCIN:
El mtodo Kjeldahl se utiliza en qumica analtica para la determinacin del contenido de nitrgeno
en muestras orgnicas lo cual es de gran inters en mbitos como: el alimentario y el
medioambiental.
FUNDAMENTO:
Se basa en la ingestin en hmedo de la muestra por calentamiento con cido sulfrico
concentrado en presencia de catalizadores metlicos y de otro tipo para reducir el nitrgeno
orgnico de la muestra hasta amoniaco, el cual queda en solucin en forma de sulfato de amonio.
El amoniaco digerido una vez alcalinizado con hidrxido de sodio concentrado, se destila para
desprender amoniaco, el cual es atrapado y luego titulado.
REACTIVOS:
1.
2.
3.
4.

cido sulfrico concentrado

Pastillas Kjeldahl
Hidrxido de sodio 45.4 % 10 N
cido brico 2 %

5. SolucinTashiro
6. cido sulfrico 0.2 N estandarizado
7. Agua destilada

INSTRUMENTAL:
1.
2.
3.
4.

Balanza analtica sensible al 0,1 mg

Unidad de digestin Kjeldahl
Unidad de destilacin Kjeldahl
Tubos de digestin 250 ml

5.
6.
7.
8.

Bureta de 50 ml
Fiola de 250 ml
Probeta de 100 ml
Pipeta graduada

PROCEDIMIENTO:
1. Pesar 1 gr de muestra previamente molina en papel graso y colocar y colocar en el tubo de
digestin en forma de paquete de tal forma que no se adhiera al tubo la muestra.
2. Adiciona 1,1 g de pastilla Kjeldahl y 20 ml de cido sulfrico concentrado.
3. Colocar los tubos en el digestor el cual debe estar a 370 400C, abrir la llave de
extraccin de gases al vaco y digestionar por 2 horas.

Profesor
Marco Heredia Rengifo

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4. Retirar los tubos del digestor, dejar enfriar evitando que se endurezca, si eso ocurre
caliente los tubos en bao mara.
5. Aadir 10 ml d agua destilada y agitar suavemente.
6. Dejar enfriar
7. En una fiola de 250 ml agregue 10 ml de cido brico al 2 % y 3 gotas de indicador Tashiro
y colocar en el aparato destilador de tal forma que el tubo de condensado quede
sumergido en dicha solucin
8. Aadir 10 ml de hidrxido de sodio al 45.4 % al tubo de digestin y colocar en el equipo
destilador.
9. Destilar por 10 minutos hasta que se halla recogido aproximadamente 100 150 ml en la
fiola
10. Titular con cido sulfrico 0.2 N hasta cambio de color de verde, a purpura, esto nos indica
el punto final
11. Anotar el consumo y revise los datos.
12. Realice un blanco con todos los reactivos sin la muestra, siguiendo el mismo mtodo para
la determinacin

FORMULA:

P=

0,014 100

DONDE:

P =
contenido de protena
V =
ml de cido sulfrico consumido
N =
normalidad del acido
F =
factor para convertir el contenido de nitrgeno a protena 6,25 protena en general
y 5,7 trigo y polvillo.

NOTA: Durante la destilacin se observan dos cambios de coloracin debida al pH

Violeta: pH cido (cido brico + indicador Tashiro

Violeta a gris: pH neutro
Gris a verde: pH alcalino

En caso de escases de las pastillas Kjeldahl se usa. (3,5 gr de sulfato de sodio o potasio o de +
0,4 g de sulfato de cobre pentahidratado).
ERROR La diferencia entre los resultados de este anlisis efectuado por duplicado de no debe
exceder del 0.7 %.

Profesor
Marco Heredia Rengifo