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DIAGNOSTICO DE

SIFILIS Y RPR

Mg. T.M. Robert Caballero Bardales

DIAGNOSTICO - SIFILIS
Microscopa Directa
(muestra de lesin o tejido)

Ex. Serolgicos
(Suero, plasma y

Ex. No Treponmicos

LCR)

Ex. Treponmicos

Ex. Treponmicos
VDRL
RPR

FTA-ABS
TPHA
TPI
Inmunocromatografia
ELISA

SIFILIS
PRIMARIA

SIFILIS
SECUNDARIA

Diagnstico
Las pruebas
directo a
reagnicas y
travs de
treponmicas
lesiones.
son positivas
Seroconversi
en el 100 %
n de 1- 4 sem
de los casos.
Sospechoso
repetirse el
RPR 1 sem, 1
mes y 3
meses

SIFILIS LATENTE
PRECOZ
(< 1 AO)

No
diagnostico
directo
Cada lenta
pero
progresiva de
los ttulos de
las pruebas
reagnicas =>
NEGATIVO

SIFILIS LATENTE
TARDIO
(> 1 AO)

Pruebas
treponmicas
positivas
Pruebas
reagnicas
positivas o
negativas,
segn el
tiempo de
evolucin.
No sntomas
clnicos
(evaluar para
neurosfilis)

SIFILIS
TERCIARIA

Diagnostico
serologico
dificil.
Treponmicas
positivas en el
95 %
Reaginias
negativas 30
% de casos
Gumas, sfilis
cardiovascula
r, neurosfilis,
etc.

Los Anticuerpos Contra la sfilis comienzan a


aparecer en la sangre entre 1 a 4 semanas despus
de la infeccin.

Las pruebas no Treponemicas (inespecficas)


determinan la presencia de la reagina, que es un
anticuerpo no Treponemico dirigido contra los
antgenos de la cardiolipina.

TCNICAS SEROLGICAS
Exmenes

No Treponmicos

Treponmicos

Antgeno

Cardiolipina,
lecitina,
colesterol.
T. pallidum

Anticuerpo

Reagina

IgG, IgM

Toda prueba serolgica para sfilis debe


poseer dos cualidades, tales son:
Sensibilidad :
La capacidad de detectar los verdaderos postivos
(Anticuerpos: Reaginas y Acs. Especificos)
Especificidad
La capacidad de la prueba de detectar los verdaderos
negativos (Ausencia de Anticuerpos).
Pero lo ideal de una reaccin serolgica con
sensibilidad y especificidad al ciento por ciento, no
se ha alcanzado.

RPR (REAGINA PLASMTICA RPIDA)


RPR
CRIST. COLESTEROL
CARDIOLIPINAS
LECITINA

FLOCULACION

REAGINAS

CARBON = FACILITA LA VISUALIZACION

La reagina es un Ac. contra los lpidos de los tejidos, el Treponema


pallidum al destruir las celulas libera lipidos (Cardiolipina)
estimulando la formacion de REAGINAS. Estos anticuerpos
reagnicos, no son exclusivos de la sfilis, tambin son producidos
en otras enfermedades infecciosas.

REACTIVOS - ANTGENO RPR.


Suspensin de Antgeno

Cardiolipina 0,003%
Lecitina
0,020 - 0,022%
Colesterol 0,09%
Cloruro de colina 10%
EDTA 0,0125 mol/L,
Micropartculas de carbn 0,01%, en tampn
fosfato.

La
suspensin
del
antgeno
Debe
homogenizarse por 5 a 10 segundos antes de
abrirse, para resuspender las particular de
carbn, antes de ser utilizado, pues tiende a
sedimentar en reposo.
La suspensin del antgeno siempre debe
refrigerarse, es estable sin abrir y
almacenado entre 2-8C, hasta la fecha de
caducidad.
Cuando no se utilice. No congelar!.

CONTROL POSITIVO RPR.


Control lquido estabilizado, Suero
humano con anticuerpos anti Treponema
pallidum + Azida de sodio 0.1 %

CONTROL NEGATIVO RPR.


Liquido estabilizado No Reactivo + Suero
humano + 0.1 % Azida de sodio

MATERIALES SUMINISTRADOS

PALILLOS
HOMOGENIZADORES
CONTROL
POSITIVO

CONTROL
NEGATIVO

ANTIGENO RPR

AGUJA N 18

CARD-TEST

PIPETAS PLASTICAS

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO


PROPORCIONADOS

Rotador (100 2 rpm)


Solucin salina (0.9%)
Cronmetro
Lmpara
GUANTES
AGUJAS Y TUBOS VACUTAINER
LEGIA 5%.

RECOLECCIN Y PREPARACIN DE LA MUESTRA


Las muestras pueden ser sueros, plasmas recolectados
con EDTA como anticoagulante.
Evite la hemlisis, si la muestra esta severamente
lipmica de manera que se obscurece el estado de las
partculas de antgeno podran dar una aglutinacin no
especfica, la muestra no debe ser utilizada.

Las muestras con restos de fibrina deben ser


centrifugadas nuevamente antes del ensayo.
ANEMIA (Hb < 10)
Ictericia (< 20 mg/dL)

Hemolisis
Lipemia
FR > 300 UI/mL

No Interfieren

Interfieren

ESTABILIDAD DE LA MUESTRA

Las muestras de suero se reportan estables por 5 - 7


das entre 2-8C 3 meses conservados a -20C. Los
plasmas recolectados con EDTA y almacenados entre
2-8C se reportan estables hasta 24 hrs.

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO
1. Lleve a temperatura ambiente la suspensin del
antgeno de RPR, los controles y las muestras.

INTERPRETACION DE RESULTADOS
La ltima dilucin que contenga agregados
macroscpicos indica el ttulo de la muestra.
Ejemplo:
CIRCULO No.
1
2
3
4
5
6
7

Dilucin del suero


1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
1:64
1: 128

Resultado
REACTIVO
REACTIVO
REACTIVO
REACTIVO
NO REACTIVO
NO REACTIVO
NO REACTIVO

El ttulo del suero problema ser: 1:16.

DILUCIONES ALTAS
Prepare una dilucin 1:16 de la muestra Reactiva agregar en
un tubo de ensayo 0.1 ml. del suero reactivo a 1.5 mL de SSF
al 0.9% Mezcle firmemente.
Colocar 50 ul de la dilucin 1:16 preparada en el circulo N 1 y
a partir del circulo N2 ,3,4,5 o hasta donde considere
necesario colocar 50 ul de SSF 0,9%
A partir del circulo 2 e iniciar la dilucin agregando 50 ul de
dilucin 1:16 mezclar con la SSF 0,9% y transferir 50 ul al
siguiente crculo y as hasta el circulo N 5 eliminando 50 ul al
final y agregar los 17-18 ul del antgeno RPR mezclar por todo
el rea del circulo y colocar en el rotador a 100 rpm x 8 min. e
interpretar.

LECTURA-RPR
REACTIVO
Cuando hay presencia de grumos
Intenso, finos y dificultosos de ver

El resultado ser la mas alta dilucin que


Muestre reaccin

TPHA
PRUEBA CONFIRMATORIA

NO REACTIVO
Si no muestra grumos

ENVIO DE
MUESTRA PARA
EXAMEN
CONFIRMATORIO

TIPO DE EXAMEN
CODIGOS
ESTABLECIMIENTO
FECHA
DE
NACIMIENTO

TPHA

VOLUMEN
DE SUERO
1.5 - 2.0 ml.

FALSOS POSITIVOS
Frmacodependencia
Lupus eritematoso sistemico
Mononucleosis infecciosa
Paludismo
Lepra
Neumona viral
Vacunacin reciente
Raras ocasiones durante el embarazo.
Muestras hemolisadas
Antgeno contaminado

FALSOS NEGATIVOS
Al principio de la enfermedad o durante la fase inactiva
o tarda.

Reactivos y muestras muy fras


Fenmeno de Prozona.

1)

2)

3)

1) FENOMENO PROZONA
donde existe exceso de Ac.
Frente al
Ag, donde no se
produce aglutinacin , originando
falsos(-) por altas [ ] de Ac. Esta
dificultad
se
elimina
con
diluciones seriadas estndar del
suero.
2) Equivalencia
3) POSTZONA, se da en la zona
de exceso de Ag, donde tampoco
se da la aglutinacin, dando
tambin falsos (-).

INTERFERENCIAS:

El exceso de lpidos en la sangre


El alcohol
intensidad =>24 hrs antes.
Temperatura
El mal funcionamiento del rotador mecnico
Volmenes de muestra

UTILIDAD DE EX. NO TREPONEMICOS


Son utiles para seguir la progresion de la enfermedad
y la respuesta al tratamiento.
Los resultados Reactivos deben ser titulados
Si el titulo de Ac. No disminuye en forma progresiva
con el tratamiento, debe considerarse la posibilidad
de un fracaso al tto.

UTILIDAD DE EX. NO TREPONEMICOS


Disminucin de por lo menos 4 veces en el titulo de
Ac. despus de 3-6 meses de tto antitreponemico se
considera eficaz.
Tratamiento en estadios tardos o reinfeccin,
disminucin lenta o permanecen estables.
Algunos de estos persisten crnicos, pueden
mantener las pruebas No Treponemicas Reactivos
toda la vida.

RESULTADO NO REACTIVO
Indica que el paciente no tiene sfilis.
La sfilis se encuentra en fase latente o inactiva.

Las tcnicas del laboratorio tuvieron fallas.

RESULTADO REACTIVO
No es dato concluyente de sfilis ya que
existen varias situaciones que producen
falsos positivos.
Las reacciones falsas positivas en realidad
no son falsas, muchas veces indican la
presencia de otra enfermedad.

El resultado se reporta como No Reactivo


o Reactivo.

Todas aquellas muestras Reactivas deben


ser diluidos seriadamente para realizar la
titulacin y se reporta la dilucin mas
alta que exhibe reaccin

PUNTOS A TENER EN CUENTA


RPR con una dilucin menor o igual a 1/8
SOSPECHOSO de Sfilis =>TPHA (+ o -)
RPR con una dilucin mayor a 1/8 MUY PROBABLE
Sfilis =>TPHA (+)
Purpera con Sfilis, RPR con titulo 1/X , el Recin
nacido RPR con titulo 1 /4X => MUY PROBABLE
SIFILIS CONGENITA (9/16)
Paciente con antecedente de SIFILIS, RPR NO
REACTIVO => TPHA Siempre POSITIVO (95%)

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