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INTRODUCCIN

Clonacin se define como el proceso por el que se consiguen, de


forma asexual, copias

semejantes

de

un organismo, clula o molcula ya

desarrollado. Sobre este tpico existe una gran confusin entre la fantasa y la
realidad, y muchos de los debates que existen sobre el tema se deben a esta
confusin. Biolgicamente, un clon es un organismo multicelular que es
genticamente idntico a otro organismo. Por ejemplo, los hermanos gemelos son
clones, lo que no impiden que sean personas diferentes.
Las clonaciones artificiales en plantas se realizan desde hace varios siglos
y con mtodos relativamente simples. En la dcada del 50 se produjeron
exitosamente clones de ranas pero fue recin en 1997 cuando se pudo clonar el
primer mamfero: la oveja Dolly.
Pero la clonacin no ha llegado a su punto mximo, el ser humano. En este
aspecto entran varios inconvenientes, la tica moral y los posibles riesgos no
permiten a los cientficos efectuar una clonacin humana y saber realmente que
riesgos acarrea. Pues lo que se ha dicho es que el alma espiritual la crea Dios y
no puede ser creada por los padres ni producida por la clonacin, adems, la
persona clonada no va a tener una identidad propia ya que va ser la copia de
alguien.
Hoy en da otro carcter que se est tomando en cuenta es la clonacin de
especies extintas: el sueo de muchos cientficos. Es por esto que el proceso de
clonacin, con tantas hiptesis, es censurado por muchos.

Definicin y Generalidades
Gracias al descubrimiento del ADN y como se transmite este, se plantea la
posibilidad de clonar individuos. Se sabe que el ADN se encuentra en el ncleo de
las clulas de los seres vivos, y que es una molcula que contiene toda la
informacin acerca de como es y cmo se desarrolla dicho individuo.
Como ya se dijo anteriormente, la clonacin es el proceso por el cual se consiguen
copias idnticas de un organismo ya desarrollado, es decir adulto, porque en esta
etapa se conocen todas las caractersticas del organismo que nos interesa. El
proceso es asexual, ya que la reproduccin sexual siempre genera diversidad, y
por la tanto no serian idnticas al progenitor las copias deseadas.
Todas las clulas de un individuo derivan de el embrin unicelular o zigoto, que se
obtiene por la fusin entre el ovulo y el espermatozoide, cada uno aportando la
mitad de la carga gentica. En el zigoto ya se tienen las caractersticas del nuevo
ser, y a partir de all esta se ir dividiendo y especializando en funciones diferentes
poco a poco . Estas nuevas clulas provenientes de la divisin de la inicial,
contendrn la misma informacin gentica de esta, sin embargo solo utiliza la
parte que necesita para realizar su funcin una vez que el individuo este
desarrollado.
Teniendo esto en cuenta, cualquier clula de un organismo(excepto las
reproductoras), sirven para formar otro individuo idntico al primero, ya que
contienen el ADN de este. Entonces, clonar consistira en " reprogramar una clula
somtica para que empiece el proceso embrionario" e implantarla en un tero.
Hasta ahora pareciera sencilla la idea de clonacin, pero pronto se descubri que,
a pesar de que las clulas pueden crecer en cultivo, se limitan a dividirse y
especializarse, difcilmente produciendo un nuevo individuo, ya que a pesar de
que tienen la informacin gentica, solo usan la parte que necesitan de acuerdo a
la funcin que desempean. Hasta que se logro el nacimiento de la oveja Dolly, el
primer animal clonado, se ha ido profundizando acerca del tema.

Clonacin Animal: Partiendo de la oveja Dolly


Para la creacin de Dolly,se utilizaron 2 ovejas( A y B). De la oveja A de seis aos,
se extrajo una clula de la ubre, en donde solo se utilizo el ncleo. De la oveja B,
se extrajo un ovulo no fecundado, se desecho el ncleo y se uso el citoplasma.
Luego, de la oveja A, se obtuvo una clula no sexual , de la cual se extrae el
ncleo, es decir la informacin gentica de esta. Este ncleo, se uni por fusin
elctrica con el ovulo de la oveja B, al que previamente se le haba extrado el
ncleo.
El ovulo de la oveja B, pero con el ncleo de la oveja A, fue puesto in vitrio( en una
probeta), hasta convertirse en embrin. El embrin, se subdividi por capacidad
reproductiva; con Dolly, se utilizaron 29 embriones. Entre 3 y 6 das despus, el
embrin fue implantado en el tero de una tercera oveja, que realizo la gestacin.
Finalmente, a las 5 semanas de gestacin normal, naci Dolly, idntica a la oveja
A, donante del ADN.
Dolly fue de raza Finn Dorset, naci el 23 de febrero de 1997, peso 6,6kg al nacer
en el Instituto Rosin,Edimburgo y muri, el 14 de febrero de 2003. Sin embargo,
fueron necesarios 277 intentos antes de que Dolly naciera y el proceso fue muy
costoso.
Los usos que se le podran atribuir a la clonacin en animales son variados. En
primer lugar nos permitira tener copias idnticas de especies que nos interesan
por alguna razn especifica. Actualmente, hay un desarrollo en tcnicas para
manipular

genticamente

plantas

animales

llamados

transgnicos),

introduciendo genes para hacerlos ms productivos. En el caso de Dolly, uno de


los objetivos era que produjera leche con protenas que teraputicamente
interesaba a los humanos.
Por otro lado, se podran tener animales genticamente modificados de tal forma
que sus rganos no produzcan rechazo al ser trasplantados al hombre, lo cual
constituira un gran avance para la medicina. Por ltimo, la clonacin animal

resulta til para la investigacin y as conocer el efecto de la variabilidad gentica


y las mutaciones.
A pesar de los beneficios, existen objeciones ticas. La mayora tienen que ver
con el impacto medioambiental que tendran los animales clonados y su
supervivencia. La reproduccin sexual confiere diversidad que permite a los
individuos adaptarse a las diferentes condiciones del ambiente; solo las especies
primitivas dan lugar en su reproduccin a copias idnticas de organismos. Algunos
modos de reproduccin de este tipo son la germinacin y la biparticin. Por esta
razn, se teme que la clonacin "empobrezca el patrimonio gentico", generando
consecuencias irreversibles en el ecosistema.
Este peligro, puede ser evitado si se establecen medidas adecuadas para el
respeto del ambiente, y utilizando a los animales clonados nicamente para
produccin ganadera o teraputica, controlando que el numero de estos clones
sea limitado . Aparte, estos son capaces de reproducirse sexualmente, por lo que
se podra mantener la biodiversidad.

El nuevo debate: La clonacin Humana


A partir de la existencia de Dolly, se pens sobre la posibilidad de clonar humanos,
que se piensa, es posible desde un punto de vista tcnico, aunque se necesitaran
muchos vulos, y la inversin econmica seria muy grande. Pero lo ms
importante, son las implicaciones ticas y los riesgos existentes.
Mauro Cozzolli, profesor de Teologa de la Pontificia Universidad Lateranense,
opina que la clonacin es " un hecho abusivo y moralmente censurable" y aade
adems, que el hecho de hacerlo con fines teraputicos, agrava ms el juicio
porque entonces implicara crear un individuo para luego suprimirlo en beneficio
del otro. Considera que , aunque el embrin tiene pocas clulas, es considerado
como individuo. Tambin, el Papa Juan Pablo II haba estado en desacuerdo con
los experimentos con embriones .
En todo caso, los fines de la clonacin humana serian el reproductivo y el
teraputico. El primero, es generalmente rechazado por la comunidad cientfica,
por el bajo porcentaje de xitos, as como tambin la cantidad de vulos
requeridos y el alto costo. Y, aunque, esta fuera exitosa, supone un atentado a la
persona obtenida del proceso, ya que tendr que aceptar la idea de que otros
decidieron sus caractersticas, adems del impacto psicolgico al saber que existe
por inters de conservar las caractersticas de otra persona. Y, lo ms
controversial, es que carecera de madre y de padre en esencia. En resumen, se
violan los derechos humanos y la tica moral.
El otro fin de la clonacin humana, es el teraputico, que se empieza a postular a
partir del descubrimiento de las clulas madre embrionarias. Los ltimos
descubrimientos apuntan a la posibilidad de hacer trasplantes con clulas,
mediante la terapia celular que consiste en reemplazar clulas enfermas por
sanas, a travs de la utilizacin de clulas madre embrionarias que son capaces
de dividirse y lograr una especializacin dirigida a las mismas, en otras palabras,
desempean la funcin requerida para curar la enfermedad del paciente,

dependiendo del lugar del cuerpo donde se inserten y el tratamiento que se les
confiera.
La clonacin humana con fines teraputicos, entonces consistira en combinar la
tcnica de clonacin con la de obtencin de clulas madre para curar
enfermedades a travs de trasplante celular. Primero, se generara un embrin a
partir de clulas diferenciadas de la persona que se quiere curar, destruyndolo a
los 6 das para obtener clulas madre embrionarias, las cuales se especializaran
y finalmente se implantaran en el enfermo. A pesar de que este proceso es una
posibilidad y aun requiere mucha investigacin, pero tericamente, al proceder las
clulas de un embrin idntico de la persona de partida, las clulas no provocaran
rechazo al ser trasplantadas.
En cuanto a las implicaciones ticas, no hay manipulacin del nuevo ser humano,
ya que es destruido antes de llegar a trmino, su nico fin, seria la obtencin de
tejidos. Sin embargo, este proceso es "teraputico para un ser humano, pero a
costa de vida de otro" , por consiguiente se viola el derecho a la vida de un ser
humano independientemente a su grado de desarrollo. "Nadie tiene derecho a la
salud a cualquier precio, y menos si el precio es otra vida humana".

Antecedentes

En primer lugar, el modelo de Watson y Crick de la molecula de DNA, marco el


comienzo de la investigacion a profundidad del mismo. Posteriormente, Nirenberg
y Mathaei, llevaron experimentos cruciales cuando rompieron celulas de E. Coli y
extrajeron

su

contenido,

luego

le

aniadieron

aminoacidos

marcados

radiactivamente y muestras crudas de diferentes fuentes celulare; el resultado fue


que todas las meustras de RNA estimularon la sintesis de proteinas. Asi,
comprobaron que el material extraido de las celulas E. Coli, era capaz de producir
moleculas de proteina aunqeu las ordenes de RNA que recibian fueran externas.
Luego probaron con un RNA artificial. Severo Ochoa , de la Universidad de Nueva
York, produjo una cadena larga de RNA que solo contenia uracilo y a la que
denomino " poli-U" , esta secuencia fue utilizada por Nirenberg y Mathaei y
despues de realizar experimentos en 20 tubos de ensayo, empezaron definiendo
el codigo genetico a partir de UUU que corresponde a la fenilalanina, la primera
palabra del codigo descubierta. Posteriormente, Khorana , tras experimentar con
mensajeros artificiales en los cuales se repetian 3 nucleotidos una y otra vez, llego
a la conclusion de que el RNAm se lee secuencialmente, el modo en que se lle
depende del nucleotido en el cual comienza la traduccion y el codon esta formado
por un numero impar de nucleotidos, lo que apoyaba la hipotesis del triplete. Asi
Nirenberg y Khorana descifraron casi todo el codigo genetico y en 1968
compartieron el Premio Nobel de Medicina y Fisiologia.
Hasta 1960, se pensaba que todos los moldes necesarios para la sintesis proteica
se encontraban RNA ribosomico, sin embargo los pesos moleculares de las
proteinas varian notablemente respecto a los pesos de los rRNA. Por esta razon,
los cientificos franceses Jacob y Monod predijeron la existensia de un RNA
mensajero, el cual se sintetiza de un DNA molde. Decidieron estudiar la
degradacion de la lactosa en E.Coli, de la cual se sabia que estaba controlada por
3 enzimas cuyos genes se encuentran adyacentes en el cromosoma bacteriano.

Objetivo
Estudiar el proceso de la regulacion genica en organismos procariotas, como lo
son las bacterias, a traves de la degradacion de la lactosa en E. coli

Materiales
Bacterias E. coli ( para estudiar el proceso de degradacion de la lactosa, ya que
se sabe que esta controlado por 3 enzimas, siendo una de estas la galactosidasa,que hidroliza la lactosa)
Medios de cultivo ( para cultivar las bacterias y luego estudiarlas)
Glucosa ( como fuente de carbono en uno de los medios de cultivo )
Lactosa ( para otro medio de cultivo)
Mutantes de E. coli con control defectuoso en la induccion de las enzimas( para
que la investigacion fuese mas completa )

Experimentos ( Marchas analiticas)


Experimento 1
Cultivar bacterias E.coli en un medio de cultivo con glucosa
Observar la concentracion de -galactosidasa
Experimento 2
Cultivar bacterias E.coli en un medio de cultivo con lactosa
Observar la concentracion de -galactosidasa
Eliminar la lactosa del medio
Observar de nuevo la concentracion de -galactosidasa
Experimento 3
Analizar mutantes de E. Coli
Explicacion :
Para estudiar la degradacion de la lactosa en E.coli, se colocaron a las bacterias
en 2 medios de cultivo diferentes : uno con glucosa y luego otro con lactosa. Esto
permitia a los cientificos observar bajo que situaciones actuaba la enzima galactosidasa y por consiguiente como los genes regulan esta funcion.
Posteriormente se analizaron mutantes de E.coli que presentasen defecto en la
induccion de las enzimas, para finalmente proponer un modelo de regulacion
genica en procariotas denominado operon-lac

Resultados
En el experimento 1, al cultivar las bacterias en un medio con glucosa, se observo
que la concentracion de

-galactosidasa era muy baja, con menos de 10

moleculas de la misma por cada celula de E.coli. En el experimento 2, al cultivar


las bacterias en un medio con lactosa, la concentracion de la enzima aumento, y,
en este caso, cada celula contiene varios miles de moleculas de la misma. La
presencia de lactosa en el medio de cultivo provoca provoca un gran aumento de
la -galactosidasa, no porque activo algun precursor inactivo preexistente, sino
porque induce la sintesis de nuevas moleculas de enzima.
Junto con la -galactosidasa, las otras 2 proteinas que se sintetizan son la
galactosido permeasa y la tiogalactosido transacetilasa; esta observacion es
importante y crucial para el estudio de la regulacion genica en E. coli. La primera
es importante para transportar la lactosa a traves de la membrana celular de la
bacteria. La segunda si bien no es esencial para el metabolismo de la lactosa,
parece desempaniar un papel en la destoxicacion de otros compuestos que
tambien pueden transportarse mediante la permeasa. Cuando se elimina la
lactosa se observa como las 3 enzimas disminuyen rapidamente, y de igual forma
en un medio de glucosa sus concentraciones son bajas, mientras que en un medio
con lactosa, son altas.
Jacob y Monod llegaron a la conclusion de que los niveles de expresion de una
serie de enzimas implicadas en la adaptacion a una determinada modificacion del
entorno, cambian de manera conjunta. Esta unidad de expresion genica
coordinada recibe el nombre de operon. Propusieron el modelo del operon paraa
explicar tanto esta regulacion de enzimas en paralelo como los resultados de otros
experimentos geneticos. Los elementos geneticos de este operon son un gen
regulador, una secuencia de DNA reguladora denominada centro operador y un
conjunto de genes estructurales. El gen regulador codifica una proteina represora
que se une al centro operador, esta union impide la transcripcion de genes

estructurales. El operador y sus genes estructurales asociados constituyen el


operon.
En el caso del operon para la lactosa (lac), el gen i codifica el represor, o es el
centro operador, y los genes z, y, a son los genes para la -galactosidasa, la
permeasa y la transacetilasa respectivamente. Tambien tiene un centro promotor p
que dirige a la RNA polimerasa al lugar correcto para el inicio de la transcripcion.
La transcripcion de los 3 genes origina una unica molecula de mRNA que codifica
las 3 proteinas ; a este tipo de moleculas se les denomina transcrito poligenico. En
ausencia de lactosa, la proteina represora lac se une al operador y bloquea la
transcripcion. Primero, el represor se une rapidamente al centro operador, asi
cuando esta unido al DNA, impide que la RNA polimerasa desenrolle el DNA para
dejar expuestas las bases que puedan servir como molde para la sintesis de una
hebra de RNA. El represor lac logra localizar el centro operador del cromosoma E.
coli 4 x 10^6 veces mas intensamente que a otro lugar al azar del genoma
seleccionado al azar. En otras palabras tiene un grado alto de selectividad,
ademas en el resto de la secuencia del genoma de E. coli no hay mas lugares
cuya secuencia sea parecida a la del centro operador lac.
En presencia de lactosa, es la alolactosa quien desencadena la expresion del
operon lac, o en otras palabras, la alolactosa es el inductor del operon lac. Esta se
produce por las pequenias cantidades de -galactosidasa antes de la induccion. El
inductor desencadena la expresion de los genes al impedir que el represor lac se
una al centro operador ( como lo hace en ausencia de lactosa).Asi, el inductor se
une al represor lac, logrando que se reduzca notablemente la afinidad del represor
hacia el DNA operador.
En resumen sobre los procesos que regulan la expresion genica en el operon
lactosa, se puede decir que, en ausencia del inductor, el represor se puede unir al
DNA, impidiendo la transcripcion de los genes z y a por parte de la
RNApolimerasa; por tanto se produce una pequenia cantidad de las 3 proteinas.
Por otro lado, la adicion de lactosa al medio conlleva a la formacion de alolactosa

(inductor) que se une al represor provocandole cambios conformacionales que


disocian el represor lac del DNA, de esta forma el RNApolimerasa puede
transcribir los genes y dar lugar a una alta produccion de -galactosidasa,
permeasa y transacetilasa, utilizando la lactosa de manera eficiente.

Conclusion

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