RECUENTO DE MESOFILOS AEROBIOS VIABLES (BMA)

DETERMINACIN DE BACTERIAS AEROBIOS MESFILOS VIABLES

I.

INTRODUCCION
El principal objetivo de este estudio fue determinar las colonias de las
bacterias psychrotrophic de la aguajina. Tcnica peruana para jugos de
frutas (NTP 203.002:1979) (LAB). Los microorganismos estn ampliamente
distribuidos en la naturaleza, por lo que siempre se encuentran presentes
en diversos productos, especialmente en aquellos que favorecen de algn
modo su sobrevivencia o desarrollo
Los alimentos por su produccin primaria, generalmente tienen una
importante microbiota normal, segn la regin y condiciones en que se
producen; adems, su composicin tiende a conservar dicha flora y, por
supuesto, le proporcionan nutrientes de manera que si las condiciones lo
permiten, los microorganismos pueden multiplicarse en los alimentos.
Como consecuencia de este desarrollo microbiano, los alimentos pueden
deteriorarse y perder sus atributos.
El recuentro de mesofilos aerobios se estima la micro flora total sin
especificar de microorganismo.
Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de
manipulacin, las condiciones higinicas de la materia prima.
Un recuentro bajo de aerobios mesofilos no implica o no asegura la
ausencia de patgenos o sus toxinas, de la misma manera un recuentro
elevado no significa presencia de flora patgena. Ahora bien, salvo en
alimentos obtenidos por fermentacin, no son recomendables recuentros
elevados
Un recuentro elevado puede significar:
Excesiva contaminacin de la materia prima
Deficiencia manipulacin durante el proceso de elaboracin
La posibilidad de que existan patgenos, pues estos son mesofilos
La inmediata alteracin del producto
OBJETIVOS
Determinar o conocer el nmero de microorganismos viables en la
muestra de aguaje
Conocer mtodos para la obtencin de recuento de colonias en
placa.
Determinar la calidad higinica del producto

II.

MATERIALES

III.

Medio de cultivo
Agua peptonada
Placas
Tubos de ensayo
Frasco o matraz
Pipetas
Mechero bunsen
Contador de colonias
Incubadora

METODOS Y PROCEDIMIENTO
3.1. Procedimiento
Preparacin de la muestra.
Aspticamente pesar 10 g. de muestra y diluir en 90 ml. de agua peptonada

1. Aspticamente pipetear 1 ml. de cada dilucin y sembrar en la placa Petri

previamente identificada. Volver a mezclar la dilucin a usar, si sta ha
permanecido ms de 3 minutos sin agitar.
2. Agregar a cada una de las placas 15-20 ml. de agar PCA
3. Inmediatamente mezclar la muestra diluida y el agar mediante agitacin
manual suave (movimientos circulares), durante un lapso igual o superior a
un minuto, evitando mojar los bordes de la placa; dejar enfriar sobre una
superficie plana y horizontal.
4. Una vez solidificado el agar, invertir las placas de Petri e incubar a 37C por
24 h.
5. Para realizar el contaje, se escogen las placas que presenten entre 30 y 300
colonias, y se utiliza una caja de recuento de colonias; se pone la placa de
Petri abierta con la superficie de vidrio hacia arriba y, si es preciso, se divide
en sectores marcando mediante un plumn a lo largo de los dimetros.
6. El clculo del vapor promedio del nmero de unidades formadoras de
colonias por gramo de muestra se efecta multiplicando el nmero de
colonias contadas en cada dilucin de las placas seleccionadas, por el factor
de dilucin correspondiente.

La diferencia entre los resultados extremos de la determinacin efectuada por

duplicado, no deber exceder del 10% de la media aritmtica de los 2
resultados; en caso contrario, debe repetirse la prctica.

3.2. METODO
3.2.1. Mtodo de placa vertida Profundidad:
-

Primero se diluye la muestra a analizar.

Luego se saca con una pipeta 1 ml de todas las diluciones y se vierten

en dos placas por dilucin.

Despus
de
esto

homogenizamos con 7 movimientos lentos de forma circular.

Para fines de la prctica solo trabajaremos con la dilucin 10 -3. Por lo

rpidamente

agregamos

el

Agar

que solo utilizaremos 6 placas.

3.2.2. Mtodo de Superficie:
-

De la dilucin 10-1, sacamos 1 ml y hacemos las diluciones hasta 10 -3

Luego en una placa servida con Agar, agregamos 1 ml sobre la

superficie.
Inmediatamente

superficie con la esptula.

Con fines de la prctica solo se trabaja hasta la dilucin 10 -3 y constan

procedemos

solo 1 placa por dilucin.

expandir

el

mililitro

sobre

la

IV.
V.

RESULTADOS Y DISCUSIN
CONCLUCION
Llegamos a estudiar y conocer mtodos para la determinacin de

mesofilos aerobios viables

Los microorganismos aerobios mesfilos son indicadores de
alteracin segn la normativa del Peruano, ms no indicadores

de la calidad higinica.
La muestra de refresco casero trabajada en laboratorio no ha
estado sumamente contaminada, ya que los valores de ufc/ml
obtenidos se encuentran dentro del rango normal para la

VI.

normativa que rige en el Per para el consumo de alimentos.

CUESTIONARIO