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HEMOCULTIVOS

Se llama hemocultivo al cultivo de microorganismos presentes en la sangre,


a travs del el cual se detectan infecciones transmisibles por el torrente
sanguneo.

Indicaciones
Pacientes con fiebre > 38 C. o cuya temperatura sea inferior a 36
C.
Pacientes con leucocitosis o leucopenia
Pacientes con trombopenia o alteraciones de la coagulacin de
causa desconocida
Pacientes con infeccin focal de causas no claras
Pacientes con deterioro uni o multiorgnico, shock o inestabilidad
hemodinmica
Procedimiento
Informacin previa:
Debe requerirse informacin acerca del diagnstico presuntivo, curva
trmica y antibioticoterapia recibida. En este ltimo caso interesa
conocer la hora de administracin del antibitico ya que conviene
obtener las muestras cuando el nivel de antibitico circulante sea
mnimo, es decir antes de la administracin de la nueva dosis del
mismo.
Preparacin de la piel:
El desinfectante de eleccin es tintura de iodo al 2% o solucin de
iodo-povidona al 10%. Cuando existe hipersensibilidad al iodo
conviene emplear alcohol 70. Una vez determinado el sitio de
puncin, desinfectar la piel de la zona elegida y el tapn de goma del
frasco de Hemocultivo. En todos los casos el desinfectante debe
actuar durante 1 minuto. No efectuar una nueva palpacin luego de
desinfectada la piel a menos que el dedo haya sido similarmente
descontaminado o se utilicen guantes estriles.
Extraccin:
La muestra puede obtenerse por puncin arterial o venosa empleando
jeringa y aguja estriles. Si no da resultado la primera puncin, el
nuevo intento debe efectuarse con una aguja nueva. A los efectos de
descartar contaminaciones, las muestras sucesivas de un
hemocultivo seriado tienen que obtenerse de distintas zonas de
puncin. Luego de efectuada la extraccin de sangre, es conveniente
remover la tintura de iodo con alcohol para evitar fenmenos txicos
locales.

El nmero indicado de extracciones para poder documentar una


bacteriemia es de 2 a 3 venopunciones, siempre en lugares distintos.
Esto se hace as para poder contrastar, y comprobar si hay
contaminacin o bacteriemia verdadera. Por eso, al laboratorio de
microbiologa suelen llegar cuatro frascos de hemocultivo de un
mismo paciente: 2 aerobios y 2 anaerobios. Mediante este
procedimiento, logran detectarse el 95% de las bacteriemias.

Volumen de sangre:
Segn ensayos sobre medios con polianetol sulfonato de sodio (PSS),
las diluciones de sangre en el medio recomendadas, fluctan entre 1:
5 a 1:10. En el caso de lactantes o nios pequeos, pueden ser
necesarias diluciones mayores. Por lo tanto, y respetando la
concentracin de PSS presente en el medio, los volmenes
aconsejados son los siguientes:
HEMOCULTIVO NEONATAL (contiene 10 ml de medio de cultivo):
inocular 0,5-1 ml de sangre del paciente.
HEMOCULTIVO PEDIATRICO (contiene 20 ml de medio de cultivo):
inocular 1-2 ml de sangre del paciente.
HEMOCULTIVO ADULTO (contiene 50 ml de medio de cultivo):
inocular 5 ml de sangre del paciente.
Inoculacin de los frascos:
Una vez retirada la parte central de la tapa metlica del frasco de
Hemocultivo y efectuada la desinfeccin del tapn de goma, inyectar
la sangre cuidando especialmente no introducir aire. Mezclar de
inmediato por inversin para permitir la accin anticoagulante.
Importante:
- Nunca una sola muestra puede servir para descartar una
bacteriemia.
- Tampoco son tiles numerosos especmenes. Se considera que tres
son suficientes en la mayora de los casos.
- La extraccin debe hacerse tan pronto como sea posible, al aparecer
el cuadro febril.
- Es aconsejable efectuar la recoleccin de la muestra, media a una
hora antes del pico febril, cuando ste pudo ser detectado, y siempre
previamente a la terapia antibitica.
Para toma de muestras a travs de catteres centrales.
Utilizar la va proximal en el catter.

Suspender las infusiones en el momento de obtener la muestra de


sangre, si las condiciones clnicas del paciente lo permiten.
Extraer una muestra de sangre 3 a 5 mL en el paciente peditrico y
15 30 mL, en el paciente adulto. Evite la contaminacin de la
muestra obtenida y deseche. Inocule la muestra en el frasco #3 (tapa
azul), las dos muestras restantes provienen de dos muestras
perifricas (20 mL de un brazo distribuidas 10 mL en el frasco #1
(frasco tapa amarilla) y los 10 mL restantes en el otro frasco tapa azul
(frasco #2).
Aspirar lentamente para evitar la hemlisis de la muestra y/o el
colapso del catter o del vaso. La presencia de burbujas en la sangre
durante la aspiracin indica que se est aplicando demasiada presin.
Nmero y tiempo de hemocultivos: Tres botellas de hemocultivos
en un periodo de 24 horas es el indicado. Los hemocultivos sern
extrados de acuerdo con las polticas de la Institucin, siguiendo la
recomendacin de no exceder los 30 minutos entre las tomas

Incubacin
A 35-37 C.
Como regla general r incubar los frascos durante 7 das. Incubaciones
prolongadas por ms de 7 das, son necesarias para grmenes
difciles de detectar, como Actinobacillus, Cardiobacterium, Eikenella,
Haemophilus, Neisseria spp. Tambin en endocarditis causada por
levaduras o cuando el paciente ha recibido terapia antibitica.
Importante: si los frascos inoculados no pueden llevarse a la estufa
de incubacin de inmediato, tienen que conservarse a temperatura
ambiente hasta el momento de remitir al laboratorio. En ningn caso
se deben colocar en heladera.
Interpretacin de los resultados
Al menos una vez al da observar los frascos de los Hemocultivos
inoculados con la muestra del paciente. La notable transparencia de
los Hemocultivos permite visualizar a travs del frasco la turbidez, el
cambio de color, la hemlisis o burbujas de gas. Estos datos permiten
sospechar la existencia de un desarrollo microbiano incipiente. Para
que estas caractersticas puedan ser observadas fcilmente debe
evitarse la agitacin del frasco cuando se retira de la estufa
Coloraciones y subcultivos:
Ante sospecha o evidencia de desarrollo microbiano en alguno de los
frascos, se debe realizar la coloracin de Gram y subcultivos.

Cuando no existieran evidencias de desarrollo, este procedimiento


debe efectuarse de igual forma a diferentes tiempos y previo al
descarte de los hemocultivos. La tcnica operatoria es la siguiente:
- Desinfectar el tapn de goma del frasco.
- Extraer aproximadamente 0,25 ml de medio con jeringa y aguja
estriles. Cuando se introduce la aguja debe sujetarse fuertemente el
mbolo de la jeringa por si existiera presin de gas debida a
productos de fermentacin. Invertir el frasco y retirar la muestra.
- Transferir la muestra a un tubo estril intermedio o subcultivar
directamente en Sangre Agar, Chocolate Agar
- Depositar una gota de la muestra en un portaobjetos y efectar la
coloracin de Gram. Actualmente se considera ms til la coloracin
con naranja de acridina, para el examen rpido por microscopa de
fluorescencia de extendidos de sangre o de hemocultivos, para
facilitar su diferenciacin respecto de la tincin de base del material
proteico de la muestra. Permite la deteccin temprana de cantidades
tan pequeas como 102 microorganismos por ml de caldo.
Los subcultivos deben incubarse preferentemente en atmsfera con
tensin de CO2 aumentada (5-10%) y en anaerobiosis (jarras
anaerbicas).
Un hemocultivo es positivo en los siguientes casos:
- Cuando el mismo germen se asla en dos o ms muestras.
- Cuando se lo encuentra en una sola muestra pero simultneamente
se lo recupera en otro material extrado al paciente (por ejemplo
orina, L.C.R.).
- Cuando se lo recupera de una o ms muestras y el ttulo de
anticuerpos frente a la cepa aislada es significativo o asciende
durante la evolucin del proceso.
- En aquellos casos en que el microorganismo sea recuperado de una
sola muestra y el germen hallado no corresponde a la flora habitual
de piel, siempre que el hallazgo est relacionado con el cuadro clnico.
Por ejemplo: Escherichia coli, Klebsiella spp. Salmonella spp., Brucella
spp., etc.
- Se considera como posible contaminacin el hallazgo de un germen
habitual de la flora cutnea en una sola de las muestras obtenidas,
siendo el ttulo de anticuerpos no significativo. Pero es necesario
tener en cuenta el estado del paciente.
Importante: el hallazgo de un microorganismo en muestras de
hemocultivos, an en aquellos casos que se presume contaminacin

debe ser motivo de evaluacin por el equipo de profesionales para


definir la situacin.
Control de Calidad
- Claridad del medio preparado: Transparente.
- pH Final: 7.3 0.2.
- Coagulacin: Negativa.
- Desempeo microbiolgico: crecimiento de inculos 10-100
UFC/frasco.
La obtencin de 2-3 hemocultivos en 24 horas, no slo aumenta la
probabilidad de recuperar las bacterias a partir de la sangre sino que
tambin permite diferenciar una bacteriemia verdadera de una
contaminacin.

https://analisisclinicosblog.files.wordpress.com/2012/10/hemocultivos.
pdf
http://iso9001.inr.gob.mx/Descargas/iso/doc/MOP-SIB-09.pdf

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