UNIVERSIDAD NACIONAL DE

HUANCAVELICA

2015

UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA

FACULTAD CIENCIAS DE INGENIERIA
E.A.P. INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA

INFORME DE PRCTICAS
N 03
TEMA

: ACCIN TAMPN DE LOS LIQUIDOS NATURALES Y

PREPARACIN DE BUFFERS

CTEDRA

: BIOQUMICA

CATEDRTICO

CICLO

: Ing. CHAVEZ ARAUJO, ELMER

:Blgo. McBlgo. SANCHEZ ARAUJO, VICTOR
: Ing. CASTAEDA DUEAS, JULIO
: TICLLASUCA ALVARES ADDIEL
: III B

SEMESTRE

: I

INTEGRANTES

ANCALLE ESPEZA CARLOS

CARDENAS DE LA CRUZ YACU
CONES CAPCHA NERY
AHUINCOPA ESPEZA SHADAN
ORTIZ BARRETO NIRIAN
PARI SEDANO LUIS FERNANDO
RUIZ OLARTE OMAR
SANTOYO ZUIGA MAYUMI
SULLCARAY LAIME ROBERTO

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INTRODUCCION

Muchas de las reacciones qumicas que se producen en solucin acuosa necesitan que el
pH del sistema se mantenga constante, para evitar que ocurran otras reacciones no
deseadas. Las soluciones reguladoras o buffer son capaces de mantener de acidez o de
basicidad de un sistema dentro de un intervalo reducido de pH, por lo cual tienen
mltiples aplicaciones tanto en la industria como en los laboratorios.
Esta prctica tiene como propsito reforzar en el estudiante el concepto de lo que son
soluciones buffer, adems de ayudar a los estudiantes a familiarizarse con la resistencia
que estas soluciones poseen en cuanto al pH. As mismo se puede obtener una solucin
reguladora haciendo reaccionar parcialmente por neutralizacin; un cido dbil con una
base fuerte o un cido fuerte con una base dbil. Una vez formada la solucin
reguladora el pH vara poco por el agregado de pequeas cantidades de cido fuerte o de
una base fuerte, y pierde su capacidad reguladora por el agregado de agua (disolucin).
La disolucin no cambia el pH de la solucin buffer pero disminuye considerablemente
su capacidad reguladora.

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OBJETIVOS

Preparar soluciones buffer de diferentes pH.

Comprobar el efecto regulador de las soluciones tampn de los lquidos
naturales.

FUNDAMENTOS TEORICOS
DATOS HISTORICOS:
Lavoisier (1777) observ que sustancias como el azufre y el fsforo en combinacin
con oxgeno, y en disolucin acuosa, daban lugar a sustancias cidas. Pens que el
responsable era el oxgeno y lo llam principio acidificante. Arrhenius (1887) propuso
la Teora de la disociacin electroltica inica: Cuando los electrolitos (cidos, bases y
sales) se disuelven en H2O se disocian en partculas cargadas (Iones).
Brnsted y Lowry (1923) definieron como:
cido: Toda especie capaz de ceder protones.
Base: Toda especie capaz de aceptar protones.
Reaccin cido-base, aquella que implica transferencia de protones.
Las sustancias que pueden actuar tanto como cido como base, se llaman

anfolitos,

anfteros o anfiprticos.
Lewis (1938) propuso que no todas las reacciones cido-base implican transferencia de
protones, pero sin embargo forman siempre un enlace covalente dativo.
cido: Sustancia que puede aceptar un par de electrones de otros grupos de
tomos, para formar un enlace covalente dativo.
Base: Sustancia que tiene pares de electrones libres, capaces de ser compartidos
para formar enlaces covalentes dativos.
CONCEPTO:
El agua es un electrolito dbil con una conductividad de 4 x 10 m /cm. Esto indica que
aunque muy dbilmente el agua se disocia en iones

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Un accin tampn en los lquidos, buffer fosfato, solucin amortiguadora o solucin

reguladora es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y
su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de
mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades relativamente
pequeas de cidos o bases fuertes. Se puede entender esta propiedad como
consecuencia del efecto ion comn y las diferentes constantes de acidez o basicidad:
una pequea cantidad de cido o base desplaza levemente el equilibrio cido-base dbil,
lo cual tiene una consecuencia menor sobre el pH.

(DEVLIN TT (2004)"BIOQUIMICA"4ta ed.

Editorial Revert (Barcelona, Espaa)).

Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender de
la constante de equilibrio del cido o base empleado.
Los sistemas encargados de evitar grandes variaciones del valor de pH son los
denominados amortiguadores, buffer, o tampones. Son por lo general soluciones de
cidos dbiles y de sus bases conjugadas o de bases dbiles y sus cidos conjugados.
Los amortiguadores resisten tanto a la adicin de cidos como de bases.

(E., A. (1998).

PREPARACION DE DISOLUCIONES "BIOQUIMICA CLINICA" (1RA ed.). MADRIT, ESPAA: EDITORIAL

ALAMBRA)

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MATERIALES
IMAGEN
HUANCAVELICA EQUIPOS

MATRAZ
AFORADO

BALANZA
ANALTICA

VASO DE
PRECIPITACIN

FOSFATO
MONO
SDICO

PISETA

LUNA DE
RELOJ

GOTERO

AGUA
DESTILADA

AGITADOR
MAGNETICO

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IMAGEN

PH-METRO

MATERIALES

MTODOS

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LA ACCIN TAMPN EN LOS LIQUIDOS NATURALES

Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la mezcla en
concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base conjugada, es decir,
Sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una
disolucin frente a la adicin de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases
fuertes. Este hecho es de vital importancia, ya que meramente con un leve cambio en la
concentracin de hidrogeniones en la clula se puede producir un paro en la actividad de
las enzimas. Se puede entender esta propiedad como consecuencia del efecto ion
comn y las diferentes constantes de acidez o basicidad: una pequea cantidad de cido
o base desplaza levemente el equilibrio cido-base dbil, lo cual tiene una consecuencia
menor sobre el pH. Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual
depender de la constante de equilibrio del cido o base empleado. Son importantes en
el laboratorio y en la industria, y tambin en la qumica de la vida. Tampones tpicos son
el par amonaco-catin amonio, cido actico-anin acetato, anin carbonato-anin
bicarbonato, cido ctrico-anin citrato o alguno de los pares en la disociacin del cido
fosfrico.

Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn

Para poder entender con claridad el mecanismo que utiliza el organismo para evitar
cambios significativos de pH, pondremos un ejemplo de actuacin del tampn de ms
importancia en el organismo, el equilibrio de cido carbnico (H2CO3) y
bicarbonato (HCO3-), presente en el lquido intracelular y en la sangre. Como producto
del metabolismo se produce CO2 que al reaccionar con las molculas de agua
produce cido carbnico, un compuesto inestable que se disocia parcialmente y pasa a
ser bicarbonato segn el siguiente equilibrio:

CO2 + H2O H2CO3 HCO3- + H+

Entonces, el bicarbonato resultante se combina con los cationes libres presentes en la clula,
como el sodio, formando as bicarbonato sdico (NaHCO3), que actuar como tampn cido.
Supongamos que entra en la clula un cido fuerte, por ejemplo, cido clorhdrico (HCl):

HCl + NaHCO3 NaCl + CO2 + H2O

Como se puede ver en la anterior reaccin el efecto cido clorhdrico queda neutralizado
por el bicarbonato de sodio y resultan como productos sustancias que no provocan
cambios en el pH celular y lo mantienen en su valor normal, que es 7,4.

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LA ACCIN TAMPN EN LOS LIQUIDOS NATURALES

Tomar 02 tubos de ensayo. En uno de ellos poner 5 ml. Aproximadamente se
saliva y en el otro 5 ml de agua corriente. Anotar en un papel los valores de
pH de ambos medios, que suelen ser en ambos medios de 7. Aadir a cada
tubo 1 ml de HCL al 0.1% y volver a observar el pH. Se comprueba que el
agua queda a un pH menor que la saliva. Esta diferencia se cada de pH se
debe al efecto del amortiguador de las protenas presentes en la saliva.

BUFFER FOSFATO
El tampn fosfato salino o buffer fosfato salino (conocido tambin por sus siglas en
ingls, PBS, de phosphate buffered saline) es una solucin tampn o buffer empleada en
la investigacin biolgica, bioqumica y de inmunologa diagnstica. Es una solucin
acuosa y salina que contiene cloruro sdico, fosfato sdico, cloruro de potasio y fosfato
de potasio. Su osmolaridad y concentracin de iones (Cl-, Na+ y K+) es muy semejante
a
la
del lquido
extracelular de
los
mamferos.
Mientras
que
los
grupos fosfato mantienen el pH estable, la osmolaridad coincide con la del cuerpo
humano (isotnico). Se trata de una solucin isotnica, es decir, la concentracin de
soluto es igual dentro y fuera de la clula; no es txica para las clulas de los
mamferos, y su pH es de 7.4.
USOS Y APLICACIONES
Es uno de los buffers ms utilizados porque es isotnico y no txico para las clulas. Se
utiliza para diluir sustancias utilizadas para el cultivo y para lavar los recipientes que
contienen clulas. El PBS se emplea como vehculo neutro para clulas, ya que no
modifica el perfil de expresin y funcionamiento celular normal. El uso de esta solucin
es muy comn para lavar clulas a travs de centrifugacin. El PBS puede emplearse
como diluyente para mtodos de desecacin de biomolculas, ya que las molculas de
agua presentes en el PBS se adhieren alrededor de la biomolcula y permiten
inmovilizarla a una superficie slida. Esta monocapa de agua evita que la biomolcula
sea desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el proceso de
desecacin.

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LA ACCIN TAMPN EN LOS LIQUIDOS NATURALES

Tomar 02 tubos de ensayo. En uno de ellos poner 5 ml. Aproximadamente se
saliva y en el otro 5 ml de agua corriente. Anotar en un papel los valores de
pH de ambos medios, que suelen ser en ambos medios de 7. Aadir a cada
tubo 1 ml de HCL al 0.1% y volver a observar el pH. Se comprueba que el
agua queda a un pH menor que la saliva. Esta diferencia se cada de pH se
debe al efecto del amortiguador de las protenas presentes en la saliva.

PH DE LA SALIVA HUMANA
En la saliva tenemos un mecanismo buffers que intenta mantener el PH
entre el 7 y 7,4

Entonces la saliva tiene un mecanismo buffers el cual mantiene el PH, entre

7 y 7,4.

Por el cual los anlisis que se hizo en el laboratorio fueron errneos por
que dio un resultado de cido fuerte.

El resultado se debe al no hacer el respectivo lavado de la parte sensible

del peachimetro por que los otros grupos trabajaron con acido

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PROCEDIMIENTO DE PREPARACION DE BUFFER FOSFATO

Na 2 HP O4

A 0,2 M A pH 7,1.
Preparamos 100ml de buffer fosfato

Na2 HP O4

Primero hallamos la masa de fosfato

0,2 M.

Na2 HP O4

a utilizar con las siguientes

formulas.
M=

nsto
V sol

n=

m
M

REEMPLAZANDO FORMULAS HALLAMOS UNA NUEVA FORMULA

m=M x V sol xM
m=142

Entonces reemplazando datos

g
mol
x 0,1 Lx 0.2
mol
L

m=2,84 g
Usamos papel aluminio en forma de una caja de fosforo para pesar 2,84g en la
balanza analtica el buffer fosfato.
Luego de obtener el peso requerido se usa uso un vaso precipitado para disolver
la solucin con agua destilada.
Finalmente la solucin del vaso precipitado se lleva a una fiola para luego
enrrazarlo a 100mL con agua destilada.
Para preparar el buffer fosfato a pH 7,1 se hiso lo siguiente:
Usamos el peachimetro para medir la solucin el cual nos da un pH 9,6.
Luego usamos 26mL de NaOH para llegar finalmente a un pH de 7,1 de la solucin.

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DISCUCIONES
Al iniciar los anlisis en el laboratorio utilizamos el peachimetro. El cual segn
informacin del encargado del laboratorio estara des calibrado.
Tuvimos unos inconvenientes al obtener la muestra de saliva
En los anlisis de PH de la saliva en 5 ml, el peachimetro dio un resultado de
que es neutro, Luego de agregar 1ml de cido clorhdrico a 1 normal en 200 ml
dio un resultado acido fuerte, el cual no fue un resultado esperado para el
ingeniero encargado del laboratorio, quien dijo que los resultados debera de
estar en neutro
PH DE LA SALIVA HUMANA

El ph de la saliva humana se encuentra entre 7 y 7,4 y est compuesta de agua y de

iones como el sodio, el cloro o el potasio, y enzimas.
En la saliva tenemos un mecanismo buffer que intenta mantener el pH entre 7 y 7,4
Conclusiones
1. Entonces la saliva a tiene un mecanismo buffers el cual mantiene el ph, entre
7 y 7,4
2. Por el cual los anlisis que se hiso en el laboratorio fueron errneos por que
dio un resultado de cido fuerte
3. El resultado se debe al no hacer el respectivo lavado de la parte sensible del
peachimetro por los otros grupos trabajaron con acido
Tuvimos unos inconvenientes al utilizar el peachimetro por que todos los grupos
quisieron utilizar al mismo tiempo. Y terminamos tarde el anlisis.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

(http://es.wikipedia.org/wiki/An%C3%A1lisis_volum%C3%A9trico)
(E., A. (1998). PREPARACION DE DISOLUCIONES "BIOQUIMICA
CLINICA" (1RA ed.). MADRIT, ESPAA: EDITORIAL ALAMBRA)
Apuntes realizados en clase.

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