CURSO PEDECIBA

DESARROLLO Y PLASTICIDAD DEL SISTEMA NERVIOSO - 2014

Muerte Neuronal y Factores

Neurotrficos
Patricia Cassina
Laboratorio de Neurobiologa Celular y Molecular
Facultad de Medicina

 Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

 Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

Casi me olvido de usted,

la muy, la ma, la otra,
seora, seora,
seora muerte
Seora otra- Eduardo Darnauchans

Muerte celular programada

desarrollo del nematodo Caenorhabditis elegans
(Horvitz, 1999).

1090 clulas en el desarrollo - 959 (131 mueren)

Clulas que mueren en sitios particulares durante
el desarrollo de manera reproducible en el
tiempo y en otros individuos de la misma especie.

Muerte celular programada

desarrollo del nematodo Caenorhabditis elegans
(Horvitz, 1999).

Premio Nobel de Medicina 2002:

Brenner, Horvitz, Sulston por sus estudios sobre el desarrollo y la
muerte celular programada en el nematode Caenorhabditis
elegans.

La muerte celular es una forma ms de diferenciacin celular.

fenmenos progresivos
vs
fenmenos regresivos

Fenmenos progresivos

Proliferacin y determinacin neural

Migracin
Crecimiento y gua axonal y dendrtico
Seleccin del blanco
Sinaptognesis

Eventos regresivos
Muerte celular
Eliminacin sinptica

Zona ventricular

PROLIFERACIN
migracin
MIGRACIN Y
FORMACIN DE
PROLONGACIONES

CONTACTOS
SINPTICOS
INICIALES

Ncleo, ganglio o corteza

Estructura blanco

Muerte celular
SINAPTOGNESIS Y
ELIMINACIN DE
RAMIFICACIONES

Eliminacin sinptica
Burek, Oppenheim, 1996

Interacciones neurona-blanco

Hamburger 1934-1939

Levi-Montacini 1950s

Factores de supervivencia extracelulares previenen la muerte

celular

Stanley Cohen (1922-)

Rita Levi-Montalcini (1909-2012)

Premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1986, por el

descubrimiento de los factores trficos

Teora neurotrfica
El fenmeno de muerte celular programada de las
neuronas est regulado por la disponibilidad de
agentes neurotrficos (FACTORES TRFICOS)
proporcionados en cantidad limitada por las clulas
blanco.

 Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

El factor de crecimiento nervioso (NGF) fue el primer

factor trfico identificado
Nerve growth factor (NGF)

El factor de crecimiento nervioso (NGF) fue el primer

factor trfico identificado
control

NGF

NGF, neurotrofinas y sus receptores

Receptores
Factor

Con insertos de
quinasa

Sin regin
quinasa

Grupo neuronal sensible

NGF

trkA

p75

Colinrgicas
Ganglionares simpticas
Ganglionares de la raz
dorsal (nociceptivas)

BDNF

trkB

p75,
trkB truncados

Mltiples del SNC

Ganglionares vestibulare
Ganglionares de la raz
dorsal
(Mecanoceptivas)

NT-3

trkC
Menor afinidad
trkB, trkA

p75,
trkC truncados

Ganglionares cocleares
Ganglionares de la raz
dorsal
(propioceptivas)

NT-4 o NT 4/5

trkB

p75,
TrkB truncados

Algunas poblaciones del

SNC

NT6

trkA

p75

peces

NGF, neurotrofinas y sus receptores

La respuesta celular depende de la dotacin de receptores

de la clula blanco.

Vas activadas por el receptor p75

Diferentes interactores de p75

Diferentes interactores de p75

Vas activadas por receptores Trk

 Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

Apoptosis versus Necrosis

Identificacin de clulas apoptticas: morfologa

Identificacin de clulas apoptticas: clivaje entre nucleosomas de

ADN- Tcnica de TUNEL

Dos rutas de activacin de apoptosis

Va extrnseca de activacin de apoptosis

Va intrnseca de activacin de apoptosis

Ejecucin de la muerte celular por apoptosis

muerte de la clula por activacin de proteasas intracelulares
CASPASAS
Caspasas iniciadoras 2, 8, 9, 10
Caspasas ejecutoras 3, 6, 7

Actividad proteoltica
Protenas reguladoras

Protenas estructurales

La apoptosis depende de una cascada proteoltica intracelular

mediada por CASPASAS

Mecanismos moleculares de muerte

celular son muy conservados en las
especies

Se han identificado mecanismos de muerte celular que

comparten mecanismos de necrosis y apoptosis

Hitoshi Okada & Tak W. Mak

Nature Reviews Cancer 4, 592-603 (2004)

 Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

Lista parcial de factores de crecimiento y agentes neurotrficos que

promueven la supervivencia de motoneuronas in vivo e in vitro
Brain-derived neurotrophic factor (BDNF)
Cardiotrophin-1 (CT-1)
Choline acetyltransferase development factor (CDF)
Ciliary neurotrophic factor (CNTF)
Fibroblast growth factor-1 (FGF-1)
Fibroblast growth factor-2 (FGF-2)
Fibroblast growth factor-5 (FGF-5)

Glial cell-line-derived neurotrophic factor (GDNF)

Insulin
Insulin-like growth factor-1 (IGF-1)
Insulin-like growth factor-2 (IGF-2)
Interleukin-6 (IL-6)
Leukemia inhibitor factor (LIF)
Neurite promoting factor (NPF)

Neurotrophin-3 (NT-3)
Neurotrophin-4 (NT-4)
Platelet-derived growth factor (PDGF)
Protease nexin-1 (PN-1)
S-100
Transforming growth factor-b (TGF-b)
Vasoactive intestinal peptide (VIP)

Muerte de motoneuronas durante el desarrollo

El 50% de las motoneuronas espinales sufren
apoptosis 4-6 das luego del contacto muscular (muerte
celular programada).
Mecanismo por deprivacin de factores trficos con
aumento en la expresin de la NOS neuronal, FAS y
Fas-L.

Deprivacin de factores trficos induce apoptosis en

motoneuronas
BDNF 10ng/ml

Slo medio

Deprivacin de factores trficos induce apoptosis en

motoneuronas

tunel- PI

Estevez et al, 1998

Deprivacin de factores trficos induce apoptosis en

motoneuronas

Con factores
trficos
BDNF o
GDNF
(10ng/ml)

Sin factores
trficos

Gandelman, 2008

Sealizacin intracelular en ausencia de factores trficos

Deprivacin de factores trficos induce apoptosis en

motoneuronas

BDNF 10ng/ml

Estevez et al, 1998

Muerte celular durante el desarrollo

Factores trficos y sus receptores
Tipos de muerte celular y mecanismos
Regulacin celular y molecular de la muerte
celular
Un ejemplo motoneuronas
Desrdenes y neurodegeneracin

ESCLEROSIS LATERAL AMIOTRFICA

Muerte de motoneuronas en Esclerosis

Lateral Amiotrfica (ELA)
Prdida progresiva de motoneuronas que conduce a parlisis y
muerte.
Re expresin de p75, nNOS
Inmunotincin para nitrotirosina.
NO +O 2ONOO- (Peroxinitrito)
principal producto txico derivado del xido ntrico
Apoptosis dependiente de activacin de BAX y caspasas

p75/Islet 1/2

Cocultivos de astrocitos y motoneuronas para estudiar la muerte

neuronal
Astrocitos reactivos
FGF-1 o peroxinitrito

Purified motor
neurons (E15)

24 h
Astrocyte feeder
layer

72 h
Activated astrocytes

Astrocyte motor
neurons cocultures

Cassina et al, 2005

Astrocitos reactivos producen y liberan NGF

Astrocitos reactivos inducen muerte de motoneuronas que

revierte con anticuerpos anti NGF y p75

La muerte de motoneuronas inducida por astrocitos reactivos se

revierte con inhibidores de caspasas.

La inmunoreactividad para NGF y p75 aumenta en la mdula

espinal de los ratones SODG93A sintomticos.

Conclusiones???

Conclusiones
La muerte celular durante el desarrollo es la regla
ms que la excepcin
Las neuronas escapan a la muerte por seales de
supervivencia.
Estas seales son especficas de tipo celular y
perodo considerado.
Mecanismos moleculares que previenen la
muerte estn regulados por seales
extracelulares.
Aberraciones en estos mecanismos determinan
patologa.

Casi me olvido de usted,

la muy, la ma, la otra,
seora, seora,
seora muerte

Seora otra- Eduardo Darnauchans (1953-2007)