I. TINCION SIMPLE.

a) Safranina.
Safranina...................................... 0.5 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante en el agua.
b) Cristal violeta.
Cristal violeta.................................... 1 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante en el agua.
c) Azul de metileno.
Azul de metileno............................ 3 mL
Etanol de 96%............................. 20 mL
Agua destilada............................ 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante en alcohol.
Agregar el agua y filtrar.
II. TINCION DE GRAM.
a) Cristal violeta y oxalato de amonio. (Reactivo de
Hucker)
Solucin A:
Cristal violeta (pureza del colorante de por lo menos, el
90%)........ 2 g
Etanol
(95%)...................................................................................
20 mL
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Solucin B:
Oxalato de amonio.............................................. 0.8 g
Agua destilada..................................................... 80 mL
Mezclar cada uno de los solutos en su disolvente
respectivo.

Dejar la solucin de oxalato de amonio en reposo durante

una noche o calentar
ligeramente hasta que se solubilice.
Mezclar las dos soluciones y filtrar.
b) Solucin de yodo yodurado. (Lugol)
Yodo (qumicamente puro).............. 1 g
Yoduro de potasio........................... 2 g
Agua destilada............................ 300 mL
Preparacin:
Combinar el yodo y el yoduro de potasio con la ayuda de
un mortero.
Lavar el contenido de ste con pequeas alcuotas de
agua destilada.
Agregar agua suficiente para obtener un total de 300 mL.
Agitar fuertemente.
Almacenar la solucin en una botella oscura y con tapn
de vidrio.
c) Alcohol acetona.
Alcohol etlico (95%)................................ 500 mL
Acetona.................................................... 300 mL
Preparacin:
Mezclar los ingredientes respectivos de cada combinacin
para su uso.
d) Safranina.
Safranina (pureza del colorante, 90%)....... 0.25 g
Alcohol etlico (95%)...................................... 10 mL
Agua destilada............................................ 1000 mL
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Preparacin:
Disolver el colorante en el alcohol.
Agregar el agua destilada.
Filtrar.

Almacenar en frasco con tapn de vidrio.

III. TINCION DE ESPORAS. (Mtodo de Schaeffer y
Fulton)
a) Verde de malaquita al 5%.
Verde de malaquita................. 5 g
Agua destilada..................... 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante en el agua y dejar en reposo durante
una hora y media.
Filtrar.
Guardar en frasco oscuro.
b) Safranina al 0.5%.
Safranina..................................... 0.5 g
Agua destilada............................ 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante y filtrar.
IV. TINCION PARA FLAGELOS. (Mtodo de Leifson)
Colorante de Leifson*.
Disolucin acuosa saturada de AlK (SO4)2 12H20
AlNH4 (SO4)2 12H2O.................................................. 20 mL
Disolucin acuosa al 20% de Acido tnico................. 10 mL
Agua destilada........................................................... 40 mL
Alcohol etlico al 95%................................................. 15 mL
Disolucin saturada en alcohol etlico al 95%
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de fucsina bsica....................................................... 3 mL
Preparacin:
Mezclar los ingredientes en el orden citado.
Guardar en un frasco bien tapado.
* Se encuentra en el comercio en forma de polvo.

V. TINCION DE FLAGELOS. (Alternativa)

Solucin A:
Fucsina bsica............................ 1.2 g

Etanol (95%)............................... 100 mL

Disolver el colorante.
Filtrar y tapar perfectamente para evitar la evaporacin.
Solucin B:
Acido tnico......................................... 3 g
Agua destilada................................. 100 mL
Disolver el reactivo.
Si la mezcal no se usa pronto adicionar fenol al 0.2% para
prevenir el desarrollo de
hongos.
Solucin C:
Cloruro de sodio......................... 1.5 g
Agua destilada............................ 100 mL
Disolver el reactivo.
Esta solucin es estable a temperatura ambiente.
Preparacin:
Mezclar cantidades iguales de las soluciones A, B y C.
Guardar en frasco de vidrio y mantener bien tapado.
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NOTA:
La solucin es estable por 5 semanas a temperatura
ambiente y en
refrigeracin dura varios meses.
Colorante de contraste.
p-rosa anilina o azul de metileno................... 1 g
Agua destilada........................................... 100 mL
Preparacin:
Disolver el colorante en el agua.
VI. LACTOFENOL AZUL DE ALGODON.
Agua destilada.......................................... 20.0 mL
Cristales de fenol Q. P...............................20.0 g
Acido lctico...............................................20.0 mL
Glicerina.................................................... 20.0 mL

Azul de algodn........................................ 0.05 g

Preparacin:
Disolver el fenol en el agua.
Agregar el cido y la glicerina.
Calentar a 70 C.
Adicionar el colorante.
Guardar en frasco de vidrio.