UNIVERSIDAD NACIONAL

SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE AGRONOMA

EVALUACIN DE LA CAPACIDAD SIMBITICA DE LAS CEPAS NATIVAS

EN 40 LNEAS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris) EN CONDICIONES DE
CALLEJN DE HUAYLAS

TESIS PARA OPTAR EL TITULO DE

INGENIERO AGRNOMO

Presentado por:
Bach. NILTON WILFREDO MNDEZ RAMIREZ

Huaraz Per
2015

DEDICATORIA

A mis padres Antonio Mendez Montes y

Obdulia Ramirez Mendoza por haberme
forjado como la persona que soy, mucho de
mis logros se los debo a ustedes. Que con
su esfuerzo, sacrificio y apoyo en todos
estos aos han hecho posible alcanzar mis
anhelos.

A mis hermanos Fredii, Bilma y Consuelo

por estar siempre a mi lado y apoyarme,
quienes me brindaron su confianza, apoyo
moral y espiritual.

AGRADECIMIENTO
Primeramente, a dios por ser nuestro gua y ser el don del conocimiento y confianza,
con l es posible alcanzar todos nuestros objetivos.
A la Universidad Nacional SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO, Facultad de
Ciencias Agrarias, Escuela Profesional de Agronoma, alma mater de mi formacin
profesional.
A los seores docentes de la facultad de Ciencias Agrarias, escuela profesional de
Agronomia por sus valiosas enseanzas y orientacin que condujo al logro de mis
anhelos.
A mis patrocinadores M.Sc. Nelly Pilar Caycho Medrano y Ing. Mg. Sc. Amelia
Huaringa Joaquina, por sus apoyos brindados, que con sus conocimientos y experiencia
contribuyeron para hacer posible la culminacin de presente trabajo de investigacin.
Al proyecto, programa de leguminosas de la Universidad Nacional Agraria la Molina,
por brindar las facilidades y los materiales para el presente trabajo de investigacin.
A mis compaeros de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional
SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO, por su apoyo incondicional.

NDICE

RESUMEN
El trabajo de investigacin se realiz en el fundo Allpa Rumi de marcara y tuvo como
objetivo: evaluacin de la eficiencia simbitica de las cepas nativas del genero
Rhisobium spp. En las lneas de frijol, tradas del programa de Leguminosas y
Oleoginosas de granos de la Universidad Nacional Agraria la Molina con 15 lneas
tradas de CIAT Colombia y 25 lneas nacionales. Se emple el diseo sistemtico con
40 tratamientos, donde fueron evaluados el promedio de tres plantas por cada golpe,
dentro del parmetro evaluados a los 110 das para las lneas de CIAT y a los 137 das
para las lneas nacionales, para las variables de morfofisiologicas y nodulacion y para
las variables de rendimiento a los 184 das para las lneas del CIAT y a los 233 das para
las lneas nacionales. En las evaluaciones que se realizaron en el trabajo de
investigacin, se obtuvieron los resultados en cuanto a la eficiencia simbitica, en las
lneas introducidas del CIAT fueron: CIAT 38(), CIAT 49, CIAT 54 y las lneas
nacionales: LINEA 20, LINEA 21, LINEA 22 y LINEA 42, que sobresalieron en las
variables: altura de planta, peso seco de follaje, peso fresco de raz, peso seco de raz,
tamao de ndulo, numero de vainas por inflorescencia, numero de vainas por planta,
numero de granos por vaina y peso de la planta seca.
Es recomendable seguir con las investigaciones, con las lneas introducidas y compartir
con los agricultores de la.

I.

INTRODUCCIN

Las leguminosas (Leguminosae) representan la segunda familia ms

grande del mundo, despus de las gramneas (Poaceae), Agrupa alrededor de
20.000 especies distribuido en 700 gneros. Debido a su importancia agrcola,
alimenticia, econmica y social.
El frijol comn (Phaseolus vulgaris L.) es la especie de leguminosa de
grano, que constituye el 87% del consumo a nivel global, sobre todo los pases
Latinoamrica la de mayor produccin y consumo
El frijol se cultiva en el Per en la costa y en los valles interandinos por
sus buenas caractersticas alimenticias y por su alto contenido de protenas
constituyendo una alternativa de produccin para la poblacin de escasos
recursos econmicos por lo cual comnmente se le etiqueta como la carne de
los pobres, pero hoy es ms valorado como complemento de dieta basada en
carbohidratos.
El departamento de Ancash la superficie que se cultiva segn el censo del INEI
2012, es de 1.4 mil Has. En frijol de grano verde.
El frijol en asociacin con las bacterias del genero Rhizobium son muy
importantes para los suelos de la sierra, para la recuperacin de suelos daados
por el uso de agroqumicos. Se utiliza en la rotacin de cultivos para mejorar los
suelos y la incorporacin de nitrgeno y nutricionales (22-28% de protenas, 5960% de carbohidratos, vitaminas, minerales y fibra soluble), para los cultivos
posteriores. la deficiencia de nitrgeno es uno de los factores limitantes en la
produccin. La cantidad de nitrgeno fijado por el frijol es muy variada;
depende de la variedad, de la eficiencia fijadora de la bacteria del genero
Rhizobium y de las condiciones fsica, qumica y biolgica del suelo. Por eso se
realiz el trabajo de investigacin para demostrar la eficiencia de la fiacion de
las bacterias con las lneas de frijol.

OBJETIVO GENERAL

Evaluar la capacidad simbitica de las cepas nativas de genero Rhizobium spp. en las
lneas de frijol en condiciones del Callejn Huaylas.

OBJETIVOS ESPECFICOS
determinar las cepas nativas del cultivo de frijol (Phaseolus vulgaris L.) con mejor
capacidad simbitica condiciones del Callejn de Huaylas.
Determinar el nmero de ndulos de las lneas de frijol, con los mejores resultados

II.1.

II.
REVISIN BIBLIOGRFICA.
El Nitrgeno

II.1.1. Importancia
Chanway, Anand y Yang (2014), mencionan que despus del carbono, el
nitrgeno es el elemento requerido en ms grandes cantidades por las plantas
(1.5% de la materia seca) y uno de los ms importantes en los sistemas
biolgicos, que desempea un papel muy importante en el metabolismo de la
planta como un constituyente de cidos nucleicos, clorofila, co-enzimas,
fitohormonas y metabolitos secundarios.

En la naturaleza, existe

principalmente en forma gaseosa, y constituye aproximadamente de 78% de la

atmosfera. A pesar de su abundancia, el nitrgeno(N) es uno de los nutrientes
ms limitantes del crecimiento en ecosistemas terrestres y acuticos. El
nitrgeno (N) es uno de los elementos claves en la produccin agrcola
mundial, cada ao entre 150 y 200 millones de toneladas de N son requeridos
por las plantas.

II.1.2. Origen de nitrgeno en el suelo

Voroney y Derry (2008), mencionan que el ciclo del N en el suelo es una parte
integral del ciclo global de N en la naturaleza. En la naturaleza existen dos
fuentes principales de reserva de N para las plantas: la mayor es la atmosfera,
donde el N2 es el gas predominante (79.08% en volumen), tambin existen
otras formas gaseosas de N de mucha menor importancia como: xido nitroso
(N2O), xido ntrico (NO), dixido de nitrgeno (NO2) y amoniaco (NH3).
La capa arable de un rico suelo de la pradera puede contener hasta cerca de 3
toneladas de nitrgeno combinado por acre; todos los organismos de la tierra
requieren nitrgeno combinado para llevar a cabo sus actividades de la vida.
Catuto (2013), indican que los seres vivos cuentan con una gran proporcin de
nitrgeno en su composicin qumica. El nitrgeno oxidado que recibe como
nitrato (NO3-) es transformado a grupos aminocidos (asimilacin). Para

volver a contar con nitrato hace falta que los descomponedores extraigan de la
biomasa dejndolo en forma reducida de ion amonio (NH4+), proceso que se
llama amonificacion; y que luego el amonio sea oxidado a nitrato, proceso
llamado nitrificacin.
Olk, (2008), menciona que la otra reserva de N es la materia orgnica del suelo
(MOS). Del total N que hay en el suelo, aproximadamente el 98% se encuentra
formados compuestos orgnicos. Dependiendo de su contenido de materia
orgnica, los primeros 20 centmetros de profundidad, un suelo puede contener
entre 1.000 y 10.000 kg. de N por hectrea.
II.1.3. Nitrgeno molecular atmosfrico
Lara Mantilla (2007) manifiesta que el nitrgeno es fcilmente asimilable por
los vegetales debidos al triple enlace que une los tomos que forma la
molcula, que es difcil de romper
La nica forma de aprovechar el nitrgeno atmosfrico es mediante el proceso
metablico conocido como fijacin biolgica de nitrgeno (FBN), el cual
asegura la disponibilidad de nitrgeno en el ecosistema natural El proceso es
llevado por ciertos microorganismos del suelo que se conoce como
microorganismos fijadores de nitrgeno, que convierten el nitrgeno (N2) en
amoniaco lo hacen gracias a la actividad del complejo enzimtico llamado
nitrogenaza; la enzima requiere de dos protenas ferrodoxina y flavodoxina que
actan como donadores de electrones y reductores naturales de la nitrogenasa.
Los electrones son transportados a la nitrogenasa por la ferrodoxina y llagan a
la hierroproteina, est activa a la Mo-Fe-protena y se produce la reduccin de
nitrgeno, siendo luego fijado como compuesto aminado.
II.1.4. Fuentes de nitrgeno en el suelo
Marschner (2012), indica que el nitrato y el amonio son las principales fuentes
de N inorgnico absorbidos por las races de las plantas superiores. El nitrato es
tambin ms mvil en el suelo que el amonio y por lo tanto ms disponible
para las plantas. La disponibilidad de las fuentes de N en el suelo vara
sustancialmente en el tiempo y espacio, en funcin de las propiedades del suelo
tales como la textura, el pH, la humedad y la actividad microbiana.

La absorcin de nitrato y amonio en las races de la planta esta medida por

protenas de trasporte situados en la membrana plasmtica de las clulas
corticales y epidermales de la raz. Varios sistemas de trasporte fisiolgicas
median la captacin de nitrato y amonio con diferentes afinidades.
El nitrato esta generalmente presente en concentraciones ms altas (1-5mM)
que el amonio (20 -200M) en la solucin suelo de suelos agrcolas.
II.1.5. Absorcin y trasporte de Nitrgeno inorgnico en la planta
a)

Absorcin de nitrgeno por las races

Tsay et al (2007) menciona que, en las plantas superiores, hay
trasportadores involucrados en la absorcin de nitrato o amonio por la raz.
En el caso de nitrato, hay dos tipos de trasporte, NRT1 y NRT2 que
median los trasportes de nitrato de baja y alta afinidad en las races,
respectivamente.
Von y Merrick (2004) En el caso de amonio hay tres tipos de
trasportadores, AMT/MEP/Rh. Debido a que el amonio es un ion cargado
positivamente tiene una gradiente positiva sin gasto de energa y es la
principal forma tomada por las races, en general, la absorcin de N en las
plantas est regulada por la oferta de fotoasimilados, especialmente en la
noche.

b)

El flujo de nitrgeno por las races

Marschner (2012), manifiesta que, mientras que la absorcin del nitrgeno
por las races es esencial para el crecimiento de las plantas, el flujo
tambin puede ocurrir esto puede ocurrir cuando hay exceso de N. aunque
su importancia fisiolgica no es clara, se cree que desempea un papel en
la deteccin de la disponibilidad de nitrato proporcionado una regulacin
dinmica y flexible del homeostasis de nitrato y su absorcin neta. El flujo
de amonio sirve para regular la concentracin de amonio en las plantas, a
travs de la membrana plasmtica.

c)

Trasporte radical a travs de la raz y carga de nitrato al xilema

Miller, Cookson y Wells (2001) menciona que una vez que el nitrato se ha
incorporado en el simplasto de la raz, el nitrato puede moverse
radialmente a travs de los diferentes tipos de clulas de la raz y pasar la
banda de Caspary endodrmico. Para que el nitrato sea trasportado a los
brotes, en nitrato es cargado desde el simplasto de las clulas de la estela
en el apoplasto de la xilema para trasportar a larga distancia a travs de la
transpiracin.
El amonio absorbido por las races es asimilado o almacenada en vacuolas
en la raz o se transporta a las partes areas. Generalmente se ha supuesto
que el amonio no se utiliza para el transporte de larga distancia de N
dentro de la planta; lo que sugiere que el amonio se transporta desde las
races a los brotes.
d)

Absorcin orgnica del nitrgeno

Miller y Cramer (2004), indica que la absorcin de N orgnico contribuye
a la nutricin de la planta. El N orgnico es la principal forma de N en los
suelos, en la materia orgnica y en forma de pptidos y protena,
aminocidos y urea. Los pptidos y protenas se descomponen en
aminocidos en el suelo por proteasas liberadas por los microorganismos
del suelo. La concentracin de los aminocidos libres en los suelos
agrcolas est en el intervalo de 1 a 100Mm, que constituyen la mayor
fraccin N disuelto orgnico de bajo peso molecular. La absorcin de
aminocidos por las plantas est en fuerte competencia con los microbios.

e)

Asimilacin del nitrgeno

Schjoerring et al (2002), menciona que, Para que el N en forma de nitrato
(NO3-) sea incorporado en las estructuras orgnicas, en nitrato tiene que
ser reducido a amonio (NH4+). La mayor parte del amonio, ya sean
originarios de la reduccin de nitrato o de absorcin directa de la solucin
del suelo, se incorpora normalmente en compuestos orgnicos en las
races, aunque el NH4+ tambin puede ser traslocado al brote, incluso en
las plantas que recibieron nitrato como la forma de N en el suelo. La
reduccin de nitrato a amonio esta mediado por dos enzimas: el nitrato
reductasa, que cataliza la reduccin de dos electrones de nitrato a nitrito

(NO2-), y nitrito reductasa, que transforma el nitrito de amonio en un

proceso de transferencia de seis electrones. La reaccin neta es:
NO3- + 2H+ + [4NAD(P)H + 4H+]

NH4+ + [4NAD(P)+]

+ H2O
La mayor parte de las especies vegetales tienen dos genes de nitrgeno
reductasa (NIA) que se expresa en brotes y races.
Crowford M. y Arst N., (1993) mencionan que, el nitrito generado por el
nitrato reductasa se transporta al cloroplasto para la reduccin a amonio
mediante nitrito reductasa. Se localiza en los cloroplastos de las hojas y en
las proplastidios de races y otros tejidos no verdes. En hojas verdes, el
donador de e- es ferrodoxina reducida, generado por el fotosistema I
durante el trasporte electrnico fotosinttico lumnico. Los electrones del
ferrodoxina reducida son pasados al nitrito va un dominio unido a la
ferrodoxina (un grupo Fe-S), y un co-factor siroheme unido a la enzima
nitrito reductasa. En los plastidios de la raz, la ferrodoxina reducida se
genera a travs de NADPH en la va pentosa fosfato junto con rductasa
ferrodoxina-NADP+. La enzima tiene una vida media de solo unas pocas
horas y est ausente en las plantas que no reciben nitrato y se activa
fuertemente con la adicin de nitrato. Adems, la concentracin v del
nitrato reductasa se incrementa por la luz, sacarosa y citoquinina, mientras
que la glutamina, un producto primario de la asimilacin N, reprime el
nitrato reductasa. Alcanzando mximos picos de actividad cuando la tasa
de expansin de la hoja es mxima y se convierte en muy baja en las hojas
completamente expandidas. El nitrato puede ser reducido en races y
brotes, dependiendo del nivel de suministro de nitrato, especie y edad de la
planta.
Cuando se expresa en equivalentes de ATP, el requerimiento de energa
para la reduccin de un mol de nitrato es de 15 moles de ATP con un
adicional de 5 moles de ATP para la asimilacin de amonio.
Marschner H. (2012), menciona que, El amonio es un intermediario central
en el metabolismo del N en la planta. Adems de la absorcin del suelo por
las races, el amonio constantemente generado en altas tasas en los tejidos
vegetales por procesos tales como la reduccin de nitrato, la

fotorrespiracion, biosntesis de lignina, removilizacion inducida de N en la

senescencia y la fijacin de N2 en leguminosas. Independiente de la fuente
de amonio o el rgano en el cual es asimilado (races, ndulos de las races
y hojas), las enzimas clave involucradas son la glutamina sintetasa (GS) y
glutamato sintetasa (GOGAT). Ambas enzimas estn presentes en las
races, en los cloroplastos, y en microorganismos fijadores de N2. a travs
de estos dos enzimas, el aminocido glutamato acta como aceptor para el
amonio, formando la amina glutamina.
La reaccin neta es:
Glutamato + 2-Oxoglutarato + NH4+ GS

2-Glutaina + H+

La glutamina sintetasa (GS) tiene mltiples formas presentes en el citosol

y en los plastidios. La GS citosolica trasforma el amonio en glutamina para
su transporte y distribucin en toda la planta. La otra enzima implicada en
la asimilacin de amonio, glutamato sintasa (GOGAT), cataliza la
trasferencia del grupo amida (-NH2) de la glutamina a 2-oxoglutarato, que
es un producto del ciclo del cido tracarboxilico. La conversin de
glutamina tiene lugar en los plastidios que tiene isoformas de GOGAT.
Una forma acepta electrones de ferredoxina reducida (desde el fotosistema
I), el otro de NADPH de la respiracin.
f)

Abastecimiento del nitrgeno

Lee, (1999), indica que, en la eleccin de la fuente de suministro de N, ya
sea amonio o nitrato depende de varios factores. Suelos cidos o que
tienen un bajo potencial redox (e.g. humedales) tienen una preferencia por
amonio.
Hinsingr P., Plassard C., Jaillard B. y Tang X. (2003), nos menciona
el contrario, suelos calcreos con pH alto utilizan nitrato preferentemente.
Sin embargo, las mayores tasas de crecimiento y rendimiento de las
plantas se obtienen por suministro combinados de amonio y nitrato. Como
el amonio o nitrato comprende aproximadamente 80% de los cationes y
aniones totales absorbidos por las plantas, la forma de N tiene un fuerte
impacto en la absorcin de otros cationes y aniones, en la regulacin del

pH celular y el pH de la rizsfera. La asimilacin de amonio aumenta el

pH de la rizsfera mientras que el nitrato reduce el Ph de la rizosfera a
travs de una absorcin neta de protones de la rizosfera.

II.2.

FIJACIN BIOLGICA DE NITRGENO (FBN)

II.2.1. Generalidades
Unkovich et al (2008), manifiestan que el nitrgeno gas o dinitrgeno (N2) es
relevante inerte, pero puede reaccionar con otros compuestos y convertirse
en productos asimilables para las plantas y por otros organismos.
Aparicio T. (2008), menciona que la cantidad de N2 fijado en la naturaleza es
de unas 230x106 Tm por ao. De esta cantidad, aproximadamente un 13% se
fija por oxidacin, provocada por las descargas elctricas de las tormentas
(transformacin de N2 a cido ntrico en presencia de O2 y vapor de agua),
incendios forestales y la actividad volcnica. Y el 87% restante es fijado por
los microorganismos, unos 140 millones de Tm por ao. Este ltimo proceso
se denomina fijacin biolgica de nitrgeno.
Despus de la fotosntesis, la fijacin del N es probablemente el proceso
biolgicamente ms importante llevado a cabo en la tierra.
Vance (2002), menciona que la FBN terrestre se produce principalmente en
el suelo, ya sea por diazotrofos de vida libre o los asociados en diversos
grados con la planta.
La FBN es una importante ruta de suministro de N para la vegetacin natural
y las plantas cultivadas. Este proceso se lleva a cabo a temperatura ambiente
y presiones subambientales y lo pueden realizar solo unos pocos procariotas:
aquellos que poseen la enzima nitrogenasa. Aunque el proceso de FBN es
altamente demandante e energa (16 a 18 moles de ATP por molculas de N
fijado) y, en consecuencia, consumo de fotosintatos.
II.2.2. Bacterias fijadoras de nitrgeno

Paredes, (2013) indica que de forma natural en el suelo, que representa un

fertilizante ecolgico y se dividen en dos grandes grupos: las simbiticas,
especficas de las leguminosas como: Rhizobium y los libres que viven en el
suelo y no necesitan planta para su reproduccin como: Azotobacter y el
Azospirillum, entre los ms importantes en la agricultura.
Ventaja
Menciona, Paredes, (2013) al permanecer vivas durante aos en el suelo, no
lo degradan por el contrario contribuyen a su enriquecimiento en nitrgeno y
a su regeneracin de forma ecolgica

Entre los microorganismos del suelo que realizan la fijacin del

nitrgeno atmosfrico, los del genero Rhizobium, que colonizan y
forman ndulos de las leguminosas

Las bacterias obtienen alimento de la planta y est a cambio, recibe

compuestos nitrogenados.

El proceso de fijacin del nitrgeno atmosfrico que la bacteria realiza

consiste en combinar el nitrgeno gaseoso con el hidrogeno para formar
amoniaco.

Donde crece plantas de leguminosas suele aparecer en el suelo un poco

de nitrgeno extra que luego queda a disposicin de otra planta. En la
agricultura moderna, es una prctica comn rotar el cultivo de planta,
con leguminosas, luego de ser cosechada las raicillas queda en el suelo
rica en nitrgeno.

Las bacterias simbiticas son las ms importantes en cuanto a la

cantidad total de nitrgeno fijado.

II.2.3. Cantidad fijada de N2 por la FBN

Marschner (2012), menciona que, Diversa cantidades de N2 fijado han sido
medidas en sistemas agrcolas que, en ambientes naturales, estos se resumen
en el CUADRO N 01, los organismos fijadores de N2 de vida libre,
utilizando residuos vegetales como paja y hojarascas pueden contribuir con
pequeas cantidades de N a la agricultura de secano (menos de 5 kg/ha/ao).

La fijacin de N2 llevada a cabo por cianobacterias y bacterias fotosintticas

que habitan en los suelos inundados de cultivos como al arroz puede
contribuir con 30 kg N/ha.
Peoples et al (1995), nos refiere que, hay pocos datos sobre la cantidad de N 2
fijado por bacterias en asociacin con otros cultivos que no son leguminosas,
como la caa de azcar que pueden llegar a fijar de 10 65 kg Nha/ao. La
simbiosis rizobios leguminosas son las que ms aportan con N2 fijado a los
sistemas agrcolas, pero las cantidades que fijan pueden ser grandemente
influenciados por factores medioambientales y las prcticas agrcolas
empleadas.
CUADRO N 01 cantidades de nitrogeno por diferentes agentes en el
sistema agrcola.
Rango de medicin Rango

Tesis para
optar

el

ttulo

de

ingeniero
presentado
por
HECTOR
B.

Agente fijador de N2
Vida libre
Bacterias heterotrofas
Cianobacterias
Asociativa
Pasturas tropicales
Cultivos
Simbitico
Azolla
Leguminosas para abono
Leguminosas forrajeras
Leguminosas cultivadas
Arboles/arbustos

(Kg

N/ha

por observado

comnmente
(kg

cultivo o ao)

por cultivo o ao)

1 - 39
10 - 80

<5
10 30

0 - 45
0 240

10 20
5 65

10 150
5 235
1 680
0 450
5 - 470

10 50
50 150
50 250
30 150
100 - 200

N/ha

CARTARO SEGURA EFECTIVIDAD SIMBITICA DE DOS CEPAS DE Rhizobium sp. EN CUATRO

VARIEDADES DE FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris L.) EN CONDICIONES DE COSTA CENTRAL LIMA
PERU 2015

Tsai, et al (1993), mencionan que la fijacin de N 2 por leguminosas estn en

el rango de 24 a 250 kg N ha por temporada, aunque se reportan valores de
hasta a 340 kg N ha por temporada. Las diferencias inherentes en la
produccin de biomasa, la eficacia de las cepas de rizobios y factores
medioambientales tales como la fertilidad del suelo son responsables para
este amplio espectro de valores. Cuando estn en monocultivos, las

leguminosas contienen una menor proporcin de N fijado que cuando crece

en mezcla con no leguminosas (siempre que la mezcla es dominada por una
leguminosa). En varios genotipos de Phaseolus vulgaris el N derivado de la
fijacin de N2 puede variar entre 5,6 y 21,1% en el monocultivo, y entre 18,2
y 56,6% cuando es intercalado con maz.
II.2.4. Sistemas biolgicos fijadores de nitrgeno
Unkovich et al (2008), indican que, la capacidad de fijar N 2 atmosfrico a
NH3 es limitado a un pequeo subconjunto de diversos organismos
taxonmicamente dentro de los procariotas. Pueden ser simbiticos,
asociativos o de vida libre en relacin a las plantas superiores.
La rizosfera provee un ambiente ideal para el crecimiento de un gran nmero
de microorganismos. Dentro de este ambiente en el suelo, muchas bacterias
fijadoras de N proliferar debido a la energa, nutrientes y otros compuestos
liberados por, o derivados de las races de las plantas. La fijacin de
nitrgeno en esta situacin es referida como fijacin asociativa de
nitrgeno. Este trmino es usado para describir la fijacin de nitrgeno por
bacterias que pueden tambin vivir en asociacin con hojas, tallos o en las
vainas de las hojas de las plantas.
La fijacin asimbotica de nitrgeno es la fijacin de nitrgeno que no
involucra directamente el intercambio controlado de N y C entre la bacteria y
la planta hospedante.
La fijacin de nitrgeno por los organismos de vida libre es la fijacin de
nitrgeno por bacterias de vida libre en el suelo o agua, que no se asocia con
ninguna planta o animal. Esta constituye una forma de fijacin a simbitica
de nitrgeno.
La fijacin simbitica de N2 es la fijacin de nitrgeno por bacterias que
establecen una simbiosis con la planta, donde hay transferencia neta
significativa de fotosintatos de la planta (C) a las bacterias fijadoras de N 2,
simultneamente con la transferencia neta de N biolgicamente fijado
directamente de las bacterias a la planta husped. Con legumbres, de todo
esto ocurre en estructuras altamente especializadas llamadas ndulos, que
contiene la bacteria y se forman en las races o tallos de las plantas.

Mylona et al (1995), manifiestan que los simbiotes son los fijadores ms

significativos de N para las plantas; estn representados principalmente por
los rizoobios (protobacterias), Frankia (actinomicetos) y Nostoc/Anabaena
(cianobacterias). Estos organismos residen en estructuras especiales en las
que tiene acceso a una fuente de energa abundante en forma de fotosintatos
y un entorno que es propicio tanto para la actividad nitrogenasa (e.g.,
mediante la provicion de un mecanismo de proteccin de oxigeno) y la
translocacin de N fijado directamente a la planta hospedante.
Las leguminosas noduladas por rizobios, como la alfalfa y la soja, son
algunos de los sistemas de fijacin de N 2 ms destacados en la agricultura.
Las leguminosas arbustivas (e.g., Leucaena leucocephala y Robinia
pseudoacacia) tambin se benefician de la simbiosis de ndulos fijadores de
N2 con rizobios como lo hace una no-leguminosa, el rbol tropical
Parasponia.
Sin embargo, en algunos bosques y los ecosistemas forestales la mayora de
N de FBN viene de simbiontes en ndulos de las races de especies no
leguminosas, como actinomicetos del genero Frankia y leosas como Alnus,
Casuarina y Caenothus.
Vessey et al (2005), mencionan que aproximadamente 200 especies de
arbustos y rboles leosos, la mayora en la regin templada, forman
simbiosis actinorricicas con Frankia.
Las races de las plantas superiores son colonizadas por otras bacterias, que
no residen en rganos especializados, pero pueden, en algunos casos, invadir
la corteza de la planta como endfitos. La mayora de estas asociaciones, sin
embargo, implican bacterias de vida libre con relativamente bajas tasas de
fijacin de N2 que crecen en el rizoplano o en la rizosfera.
II.2.5. Sistemas simbiticos (fijacin simbitica de nitrogeno)
a) generalidades
Usher et al (2007), refieren que dos categoras amplias de sistema
simbitico pueden ser identificadas, basado principalmente en el tipo y la
ubicacin de la estructura que alberga el microsimbiote:
I.

legumbres noduladas y no leguminosas

II.

simbiosis con cianobacterias

En la categora I, los microorganismos fijadores de N 2 son o bien rizobios

(en las legumbres) o actinomicetos del genero Frankia (en no
leguminosas). Los ndulos son generalmente ubicados en las races de la
planta hospedante (alguna excepcin se produce entre legumbres, por
ejemplo, Sesbania rostrata donde rizobios forman ndulos en el tallo).
La fotosntesis de la planta hospedante es la fuente se sustratos utilizados
para generacin de ATP por el microsimbiote a travs de la respiracin
aerbica.
En la categora II, las cianobacterias fijadas de N2 son encontrados en
diversas localidades en una diversa (con respecto a los rizabios), pero un
tanto restringida, gama de huspedes. Ellos ocurren extracelularmente en
hifas de los hongos en lquenes, en cavidades en hojas de Azolla y los
tallos de briofitas, y en las races coraloides de cicadas. En Gunnera, por
otro lado, se encuentran intracelularmente en glndulas del tallo.
b) Los Rhizobium
Paredes, (2013), indica quelos Rhizobium son microorganismos capaces
de inducir la formacin de ndulos fijadores de nitrgeno atmosfrico en
las races de las plantas de la familia Leguminosae
Algunos rizobios tambin son capaces de inducir ndulos en el tallo de
leguminosas. Son bacilos de 0,5 a 0,9 nm de ancho y 1,2 a 3,0 nm de
longitud, son bacterias Gram negativas y no esporulan. Son mviles
debido a flagelos pertricos o a un flagelo polar osubpolar.
Rhizobium: cepas de crecimiento rpido (tiempo de generacin: de 2 a 4
horas), con varios flagelos, acidificantes en diferentes medios. Estos
rizobios generan nodulacin en leguminosas de zonas templadas.

c) Taxonoma
Estevez, (1983) menciona del autor, Buchanan y Gibbona (1974), las
bacterias se clasifican:
Sper reino

: Procariotas

Reino

: Mnera

Divisin

: Bacteria

Dominio

: Bacteria

Filo

: Proteobacteria

Orden

: Rhizobiales

Familia

: Rhizobiaceae

Gnero

: Rhizobium

Especie

: Rhizobium leguminosarum

d) Especies de Rhizobium
Segn Freire (1975) existen diversas especies de Rhizobium las mismas
que mediante inoculacin cruzada, son capases de nodular en los
siguientes
Cuadro N 02: especies de Rhizobium capases de nodular en las
especies de los siguientes cultivos
GRUPO

RHIZOBIUM

GENEROS

Alfalfa

Rhizobium meliloti

SUSCEPTIBLES
Medicago, melilotus,

Trebol
Arveja

Rhizobium trifolii
Rhizobium

trigonelis
Trifolium
Pisum, vicia, lens,

Frejol

leguminosarum
Rhizobium

lathyrus
Phaseolus

Tremoso
Soya

phaseoli
Rhizobium lupini
Rhizobium

vulgaris)
Lupinus ornithopus
Clicine (G. max)

Frejol

japonicum
Rhizobium sp.

Vigna,

(p.

lespedeza,

crotolaria, pueraria,
arachis, phaseolus

e) Morfologa fisiologa y bioqumica de Rhizobium

Segn Buchanan Y Gibbona (1074), los rizobios so bacilos gram
negativos, mide 0.5 0.9 micras de ancho, por 1.2 3.0 micras de largo,
y contienen grnulos de poli-B-hidroxibutirico. Cuando la bacteria es
joven se mueve con dos o seis flagelos peritricos, o un polar o sub
polar. No forma esporas.
Vincent (48) indica que las bacterias del genero Rhizobium son
hetertrofas y pueden utilizar una amplia variedad de hidratos de
carbono. Los rizobios son aerobios y se desarrollan mejor a temperatura
que osila entre 25 a 30 C con un pH que oscila entre 5 y 7.
El mismo autor menciona que algunas especies desarrollan con la edad
una estructura como cpsula.
f) Rango de simbiosis leguminosa Rhizobium
Sprent, (2009), indica que las leguminosas mantienen una posicin de
significancia especial dentro de las plantas agrcolas: su capacidad de
capturar N2 atmosfrico a travs de la presencia de rizobios en los
ndulos de las races hace que su crecimiento sea tericamente
independiente tanto del estado de N en el suelo y la adicin de
fertilizantes nitrogenados. Entre ellos son importantes importantes
cultivos de grano y forrajes que crece en las zonas tropicales o zonas
climticas templadas, incluyendo soja, frijol, arveja, alfalfa, trboles, y
lupino.
Postgate, (1998), la fijacin de nitrgeno se produce cuando estas plantas
estn en estado simbitico y los agentes de fijacin son bacterias del
suelo de los gneros Rhizobium, Bradyrhizobium, Sinorhizobium,
Mesorhizobium, Azorhizobium y Allorhizobium (los tradicionales rizobios
de los -proteobacterias), as como algunos gneros descubiertos ms
recientemente que se encuentran filogenticamente fuera de este grupo.
Estos

incluyen

Methylobacterium,

Devisia,

Ochrabacterium,

Phyllobacterium en -Proteobacteria y Burkholderia, Ralstonia y

Cupriavidus de la -proteobacteria.

Los rizobios son bacterias Gram negativas de forma bacilar (0.5 0.9
m*1.2 3.0 m). Su temperatura ptima de crecimiento est
comprendida entre 25 y 30C, el pH ptimo entre 6 y 7, son bacterias
aerobias. Todas producen un abundante polisacrido extracelular soluble
en agua cuendo crecen en medios con corbohidratos como fuente de
carbono. Los rizobios exhiben diversos grados de especificidad hacia sus
hospedantes. Con la excepcin de la no leguminosa Parasponia, la
infeccin se limita a los miembros de leguminosae. Algunas especies o
biotipos de rizobios, son especficos para grupos individuales o pequeos
de gneros de leguminosas. Por ejemplo, Rhizobium leguminosarum bv.
phaseoli y R. leguminosarum bv. trifolli forman ndulos radiculares solo
en especies de Phaseolus y Trifolium, respectivamente.
g) Eventos iniciales a la nodulacion
Mylona, et al (1995), mucho se sabe ahora, a nivel gentico, bioqumico
y molecular, sobre las interacciones entre los rizobios y sus plantas
hospedantes que conducen a formacin de ndulos en las races. El
estado simbitico es alcanzado a travs de un dialogo molecular,
involucrado la generacin, transmisin, reconocimiento y procesamiento
de seales por ambos socios.
Marschner (2012), los metabolitos secundarios de las plantas, los
flavonoides, son responsables de iniciar la interaccin simbitica. Ellos
son liberados de las cubiertas de las semillas de leguminosas o de las
races en cantidades micromolares o incluso nanomolares y son
detectados por rizobios de vida libre en la rizosfera de leguminosas y en
las superficies de los pelos radiculares, su funcin principal es la de
actuar, junto con las protenas NodD, como co-inductores de los genes de
nodulacion de rizobios de la siguiente manera. En los rizobios, un
complejo flavonoide-proteina es formado a travez de la combinacin con
un producto del gen regulador nodD constitutivamente expresado, NodD,
que est unido a secuencias conservadas de ADN (caja nod) en las
reacciones promotoras de los genes estructurales de la nodulacion (nad,
noe, y nol; conocidos colectivamente como genes nod). La presencia de

un flavonoide en el sitio de unin NodD en la caja nod activa la

transcripcin de estos genes.
Las diversas protenas producidas de los genes nod inducen la sntesis y
liberacin de molculas reciprocas a la seal detectada en la planta, los
lipoquitooligosacaridos factores Nod. Estos compuestos provocan una
serie de cambios en el metabolismo de la raz y su morfognesis y son
seales esenciales para la entrada de los rizobios en las races de
leguminosa.
El primer gen nod inducida por flavonoides a ser descubiertos fueron
flavonas, posteriormente, casi ms de 30 compuestos han sido
identificados en nueve gneros de leguminosas; que son o bien gliconas o
agliconas de una variedad de subgrupos de flavonoides tales como
cholconas, flavonas, flavononas, isoflavonas y cumestanos. La mayora
de las leguminosas analizadas liberan de varios compuestos, y en caso de
Phaseolus vulgaris, 13 inductores de genes nod se han aislado de plantas
crecidas aspticamente.
Chen, et al (2005), Se cree que la presencia de un flavonoide adecuado
altera el ngulo de la curva en el ADN en los puntos donde una protena
nodD est unida al sitio de la caja nod una regin promotora del gen nod,
permitiendo en esta manera que la ARN polimerasa inicie la
transcripcin de genes.
Diferentes rizobios responden a diferentes conjuntos inductores de
flavonoides y mientras en algunos casos este aspecto de interaccin
influye en la especificidad del hospedador, no hay correlacin consistente
entre la gama de hospedantes de una bacteria y el nmero de flavonoides
inductores a la cual es sensible. Los genes nod de Rhizobium sp. NGR
234 son inducidos por muchos flavonoides y esta bacteria tiene un muy
amplio rango de hospedante, pero R. leguminosarum bv. viciae, que
tambin responden a muchos inductores, tiene un pequeo rango de
hospedantes.
Fraysse, et al (2003), Los factores Nod incluso en ausencia de las
bacterias que los producen, puede inducir a algunos de los genes
nodulina en planta que se expresan en la pre-infeccin, infeccin

desarrollo de ndulos y fases funcionales del ndulo en la simbiosis. Los

factores Nod no son los nicos compuestos rizobiales participantes en el
dilogo molecular con leguminosas. Otras molculas de seal influencian
progresin exitosa para el funcionamiento del ndulo. Particularmente
importantes son los polisacridos de superficie que se encuentran en
todos los rizobios: extracelulares (EPS), lipo (LPS), capsular (KPS) y
gluconas cclicos. Estn involucrados en varias fases del desarrollo
simbitico, incluyendo la colonizacin de la raz, reconocimiento de
hospedantes, formacin del hilo de infeccin e invasin del ndulo.
Haney y Long (2010), Con respecto a los factores de la planta, inductores
de genes nod, distintos de los flavonoides y no flavonoides, por ms de
30 aos, las proteinsas lecitinas ligadas a carbohidratos, encontrados en
las superficies de los pelos radiculares de las leguminosas, se han
propuestos como factores determinantes de la especificidad del
hospedante. Sin embargo, a pesar de muchas investigaciones sobre su
interaccin con polisacridos de la superficie rizobial (especialmente
EPS), el papel preciso de las lecitinas en el proceso de infeccin an no
se ha dividido. Otra categora de protenas vegetales, las flotilinas, ha
sido recientemente demostrado que desempea un papel crtico en la
infeccin de las leguminosas por rizobios.
h) interaccin con la epidermis de la raz
Relic, et al (1993), cuando los rozobios colonizan las races de
leguminosas inducen la deformacin y el rizado de pelos radiculares y la
expresin de varios genes de la planta en la epidermis. En varios
sistemas, se ha demostrado que los factores Nod purificados inducen la
deformacin de los pelos radiculares a concentraciones tan bajos como
10-12 M110,142, pero generalmente no el rizado
Heidstra et al (1994), en un ensayo con Vicia sativa, un ensayo de
deformacin rpida semicuantitativa del pelo radicular ha permitido que
el proceso de deformacin del pelo radicular se caracterice en detalle. En
esta planta la deformacin del pelo radicular se induce solo en una

campaa zona de la raz, que abarca jvenes pelos radiculares que casi
han alcanzado su tamao maduro.
Weerasinghe, Bird y Allen (2005), la deformacin comienza con
hinchazn en las puntas del pelo de la raz, 1 hora despus de que los
factores Nod han sido aadidos. Posteriormente el nuevo crecimiento de
la punta se inicia en las puntas inflamadas, dando como resultados pelos
claramente deformados dentro de 3 horas. Incubacin con factores Nod
por 10 minutos es necesario para fijar el proceso de deformacin en
movimiento; despus de esto, incluso si se elimina los factores Nod, el
proceso de deformacin continua. Estos cambios morfolgicos estn
precedidos por una despolarizacin de la membrana plasmtica, cambios
en el flujo de calcio, eflujo de protones, reordenamiento de los filamentos
da actina en los primeros 3 a 5 minutos, y el aumento de la corriente
citoplasmtica. Estos cambios ocurren dentro de 5 a 30 minutos despus
que se aadan los factores Nod y pueden ser parte de una serie de eventos
que conduce finalmente a la deformacin de pelos radiculares.
i) Infeccin
Gage (2004), El modo de infeccin por rizobios puede ser inter o
intracelular o una combinacin de ambos. En muchos casos, incluyendo
plantas de cultivo tales como frijoles, arveja, soja, alfalfa y el trbol, la
invasin intracelular implica que los rizobios entra va infeccin de los
pelos radicales. Despus de la unin de rizobios a las puntas de los pelos
radiculares, las puntas se enroscan hermticamente y las bacterias quedan
atrapadas en los rizos. Un hidrolisis localizado de la pared celular de la
planta se lleva a cabo en la regin rizada, y la membrana plasmtica se
invagina y la nueva pared celular vegetal se deposita. Esto resulta en la
formacin de una estructura tubular cilndrica, el llamado hilo de la
infeccin, por el cual la bacteria entra en la planta. La ultra estructura de
la pared del hilo de infeccin es muy similar a la de la pared normal de
las clulas vegetales, pero la incorporacin de ciertos nodulinas puede
dotarlo de propiedades nicas.
Scheres, et al (1990), Las nodulinas tempranas ricas en prolina ENOD5
y ENOD12 son candidatos para los componentes de la pared del hilo de

infeccin, ya que las clulas corticales contienen un hilo infeccin que

expresa los genes correspondientes. Las bacterias en el hilo de infeccin
estn rodeadas por una matriz que parece consistir en compuestos
secretados por la planta y las bacterias.
Ang, et al (1994), Asociado con la formacin de hilo de infeccin, las
clulas corticales son mitticamente reactivadas, formando el primordio
del nodulo los hilos de infeccin crecen hacia este primordio y, una vez
all, liberan las bacterias en el citoplasma. En aquellas leguminosas que
forman ndulos indeterminados, como la alfalfa y el guisante, el
primordio de ndulo surge a partir de clulas corticales internas y las que
surgen a partir de clulas corticales externas producen ndulos
determinados. En la formacin del ndulo indeterminado, los hilos de
infeccin deben atravesar la corteza externa antes de llegar a estas
clulas. Antes de la penetracin del hilo de infeccin, las clulas
corticales externas sufren cambios morfolgicos. Los ncleos se mueven
al centro de las clulas, y los microtubulos y el citoplasma se reorganizan
para formar una estructura cnica orientada radialmente, el puente
citoplasmtico, que se asemeja a una banda pre-profase. Los hilos de
infeccin atraviesan las clulas corticales a travs de los puentes
citoplasmticos radialmente alineados, por lo tanto, son llamados hilos
de preinfeccion.
Aunque las clulas corticales externas que forman el hilo de preinfeccin nunca se dividen, los cambios morfolgicos inducidos son un
recuerdo de los que se observa en las clulas que entran en el ciclo
celular. Los experimentos de hibridacin in situ mostraron que hileras
estrechas de clulas corticales exteriores expresan el gen especfico
histona H4 de la fase S FIGURA N 01. Sin embargo, un gen de la
ciclina mittica expresado especficamente durante la fase de transicin
de G2 a M no es activado. Por lo tanto, las clulas que forman el hilo de
pre-infeccin vuelven a entrar en el ciclo celular y forman los
primordios. Esto muestra que parte del proceso de infeccin se deriva de
un proceso general, es decir, el ciclo celular. De alguna manera, los

rizobios lo han modificado y ahora lo explotan con un propsito

completamente diferente el proceso de infeccin.

FIGURA N 01: eventos en la corteza durante la induccin de un nodulo

indeterminado

(A) Representacin esquemtica que muestra la reactivacin de clulas corticales en las races de
guisantes despus de la inoculacin con rizobios o aplicacin de factores Nod. Las clulas
corticales externas, que se muestran en color lavanda, vuelven a entrar en el ciclo celular, que
procede de la fase G1/G0 para la fase S, y finalmente qued detenido en G2, como se indica en el
ciclo celular en el crculo amarillo. En contraste, las clulas corticales internas, que se muestran
en prpura, progresan todo el camino a travs del ciclo celular, como se indica por el ciclo celular
en el verde crculo, dividirse y formar los primordios ndulo. Las clulas activadas estn opuestas
a los polos del protoxilema de la raz, que se muestran en verde. (B) Modo de accin de los
factores Nod se muestran en una representacin esquemtica de una seccin longitudinal de la
raz de una leguminosa. Aplicacin de factores Nod conduce a la deformacin del pelo radicular,
seguido de una activacin del periciclo, ya sea debido a la accin de los factores Nod s mismos o
a la de los segundos mensajeros (indicado por?) generados en las clulas epidrmicas. Expresin
de ENOD40 en las clulas del periciclo puede causar un cambio en la relacin citoquinina /
auxina que se traduce en divisiones celulares corticales (panel superior). La clula se muestra en
rojo son aquellos que son sensibles a la accin, directa o indirecta, de los factores Nod

Los factores Nod purificados inducen la formacin de hilo de

preinfeccin, pero los hilos de infeccin no se forman. Por lo tanto, las
bacterias parecen ser necesarias para la formacin de los hilos de

infeccin la interaccin con los compuestos de la superficie bacteriana

parece jugar un papel importante en la formacin del hilo de infeccin.
Los factores Nod producen la divisin mittica de las clulas corticales
en algunas plantas hospedantes, los factores Nod purificados incluso
inducen la formacin de ndulos. Curiosamente, solo ciertas clulas
corticales son susceptibles a los factores Nod.
En leguminosas tropicales, como la soja, son las clulas corticales
exteriores las que son activadas mitticamente. En leguminosas
templadas, como arveja, veza y alfalfa, son las clulas corticales internas,
y especialmente aquellas localizadas opuesto a los pelos del protoxilema
que divide. El mecanismo que controla la susceptibilidad de las clulas
corticales es desconocido. Se ha postulado durante dcadas que la
susceptibilidad de las clulas corticales es conferida por una
detencin en la fase G2. La FIGURA N01, Muestra que solo hileras
estrechas de la celula corticales se activan para expresar el gen
Histona H4 por rizobios, en este momento, las puntas del hilo de
infeccin el sitio donde los factores Nod se liberan estn todava en la
epidermis, que indica que los factores Nod actan a distancia.
j) Mecanismo de nodulacion
Segn: Cardoso (1980) menciona, cuando est presente el Rhizobium en
el suelo, lo que ocurre es lo siguiente:

Multiplicacin del nmero de clulas de Rhizobium en la rizosfera e

la planta.
Invasin primaria de los pelos radiculares, que se deforman y
arrugan.
Penetracin de bacterias (del Rhizobium) es travs de los pelos
absorbentes, siendo envueltas por un cordn de infeccin de matera
vegetal y las clulas de la corteza de la raz. A veces la infeccin
puede darse por la clula de la epidermis sin intervencin del pelo
absorbente.
Multiplicacin del Rhizobium en el interior de la clula de la corteza
de la raz y multiplicacin intensa de esas clulas hasta la formacin
de ndulos.
Transformacin de las bacterias en bacteroides. Sntesis de
leghemoglobina e inicio de la fijacin del nitrgeno.

Matos y Zuiga 1998. Indican que el color interno de nodulo color rojo o
rosado, quienos lo relaciona con la presencia de leghemoglobina, enzima
que provoca el color rojo, indica la eficiencia de la fijacin biolgica de
nitrgeno.

FIGURA N02: proceso de infeccin de la raz, formacin de ndulo

k) Formacin de ndulo y su funcin en las leguminosas

Werner (2005), Las ramas de los hilos de infeccin penetran en las
clulas del primordio del ndulo y liberan los rizobios en ellos (con
alguna clula vegetal en el ndulo que permanecen libres de rizobios
durante toda la vida del ndulo). Una vez dentro de la clula hospedante,
los rizobios se diferencian de bacterias mviles Gram-negativas en
bacterias no mviles en una entidad similar a un orgnulo, el
simbiosoma. Un simbiosoma est rodeado por una membrana
simbiosomal (derivado del endocitosis de bacteroides por la membrana
plasmtica de la planta) y puede contener uno o varios bacteroides cada
encerrado en una membrana peribacteroidal (PBM; FIGURA N 02) y

cada clula del nodulo infectada puede ser llenado con varios miles de
simbiosomas.
Mellor, y Werner (1987), este proceso de internalizacin y propagacin
en el endoosimbiote requiere sntesis, masiva de membranas, en el caso
de los ndulos de leguminosas, 30 veces la cantidad de sntesis de la
membrana plasmtica. Forman la interfaz entre los socios simbiticos
travs de los cuales las seales metabolitos se intercambian y evitan una
respuesta de defensa por las plantas contra la bacteria intercelulares. La
membrana que rodea el microsimbiote se deriva de la membrana
plasmtica del hospedante. El PBM de ndulos de leguminosas tiene
fosfolpidos y la composicin de protenas son diferentes de aquellos de
la membrana plasmtica y que presumiblemente los dota con funciones
especializadas. El PBM de ndulos de leguminosas tiene fosfolpidos y
que presumiblemente los dota con funciones especializadas. El PBM
contiene varias nodulinas y tambin puede contener una protena
rhizobial. Dentro del espacio peribacterial entre los bacteroides y el
PBM, varias bacterias estn presentes que tambin se encuentran en las
vacuolas. As, el PBM puede haber adaptado algunas propiedades del
tonoplasto.
Marschner, (2012), la regin entre la membrana peribacteroidal (s) y la
membrana simbiosomal se denomina el espacio peribacteroidal.
Dependiendo de la planta hospedante, los ndulos pueden ser iniciados
en la corteza interna o externa de la raz. En las leguminosas cultivadas,
tales como Medicago, Lens, Trifolium, Pisum y visia, los ndulos son
iniciados en la corteza interior y son del tipo indeterminado, mantiene
un meristemo apical activo y distintas zonas de desarrollo, de la
diferenciacin del bacteroide en la punta de crecimiento a travs de
bacterias maduros, donde se encuentra la fijacin de Nitrogeno a una
zona senescente en la base. Los ndulos que se originan en la corteza
externa de la raz, como en Glycine, Lotus, Phaseolus y Vigna, son de
tipo determinado; no mantienen un meristemo activo y tienen un ciclo
de vida ms limitada. Otra diferencia entre los dos tipos es que los

bacteroides de ndulos determinados pueden regenerar la forma de vida

libre de la bacteria, mientras que los de ndulo indeterminado.
Werner, (2005), las plantas hospedantes apoyan en el control de la
diferenciacin de bacteroides en los ndulos indeterminados mediante el
bloqueo de la divisin celular bacteriana y fuerzan a los rizobios hacia un
estado bacteroidal de diferenciacin terminal; por lo tanto, es el
hospedante el que domina esta simbiosis.
El sistema radical de una sola planta, y quizs tambin los ndulos
individuales, pueden ser infectados por ms de una cepa de una especie o
biovar de Rhizobium.dado que no todas las cepas tienen una alta
capacidad de fijacin de N2, esta es una caracterstica problemtica de la
simbiosis en aplicaciones agrcolas, ya que puede causar variabilidad en
el rendimiento de las leguminosas cultivadas.
El gran potencial de las leguminosas noduladas para la fijacin de N 2 se
basa en tres factores principales:
(i)

el suministro directo de C fijados fotosintticamente a los

bacteroides en los ndulos.

(ii)

Mantenimiento efectivo de muy bajas concentraciones de O 2 en el

interior del ndulo para proteger la nitrogenasa.

(iii)

Exportaciones rpidas del N fijado por el xilema.

En todas las simbiosis Rhizobium-leguminosa, el sustrato energtico para

la fijacin de N2 se deriva de fotosintstos transportados al citosol del
ndulo como sacarosa en el floema.
FIGURA N 3 clula del ndulo.

Tesis para optar el ttulo de ingeniero presentado por HECTOR B. CARTARO SEGURA
EFECTIVIDAD SIMBITICA DE

DOS

CEPAS

DE

Rhizobium sp.

EN

CUATRO

VARIEDADES DE FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris L.) EN CONDICIONES DE COSTA

CENTRAL LIMA PERU 2015
Endosimbiontes fijadores de nitrgeno en la simbiosis: Rizobio intracelular en un ndulo formado
en trbol por Rhizobium trifolii. Esta magnificacin de la regin del ndulo indeterminado del
trbol muestra la transicin de la zona de prefijacin a la interzona. En la zona derecha de la
clula, la bacteria intracelular (ba) no est an diferenciado en su forma fijadora de nitrgeno. En
la zona izquierda de la clula contiene amiloplastos (a) y bacteroides fijadores de nitrgeno
diferenciados (b). En ambas clulas, la bacteria intracelular est rodeada por unas membranas
peribacteroidales derivada de las plantas (pbm).

Despus de entrar en las clulas no infectados del ndulo, la sacarosa

sintasa lo convierte en monosacridos; algunos de estos se someten al
glicolisis para producir fosfoenolpiruvato (PEP), que es carboxilado a
oxalacetato por la PEP carboxilasa seguido de la reduccin al cido
dicarboxilico

malato (C4) por la

malato deshidrogenasa. Los

monosacridos que no entran en la va glucolitica son canalizados en la

sntesis de celulosa o almidn. Malato, junto con otros cidos
dicarboxilicos tales como succinato y fumarato, es transportado de
clulas no infectadas del ndulo hacia el citosol de las clulas infectadas
y luego a travs del simbiosoma y las membranas peribacteroidales hacia
los bacteroides por un sistema de trasporte de cidos dicarboxilico
(DCT). Los cidos dicarboxilicos son la fuente de carbono suministrado
por la planta a las bacterias intracelulares.

Marschner, (2012), El nitrgeno fijado en bacteroides se difunde en

forma de NH3 en el espacio simbiosomal acido. Aqu en prootonado a
amonio y evita que se vuelvan a utilizar en los bacteroides por la
supresin de un sistema de trabajo de amonio (Amt) que de otro modo
funciona en rizobios de vida libre.
. El N fijado se entrega a travs de la xilema al brote principalmente
como amidas en las leguminosas con ndulos indeterminados
(generalmente leguminosas templadas), o como ureidos en ndulos
determinados (generalmente leguminosas templadas). Los ureidos se
sintetizan en las clulas no infectadas, a partir de asparagina y glutamina
recibida desde el citosol de las clulas infectadas adyacentes, antes de ser
exportados en el xilema.
Muchos intentos se han hecho para calcular los costos de carbono para
las plantas de la fijacin de N2 frente a la absorcin de N mineral de la
rizosfera. Aunque los costos de la energa de fijacin podrn sobrepasar a
los de absorcin por >10% d-1, estas comparaciones pueden ser
engaosas porque no tienen en cuenta el coste econmico de la
produccin de los fertilizantes nitrogenadas, su baja eficiencia en el uso
en la agricultura (con frecuencia menos de 50% de la cantidad aplicada al
suelo es absorbido por la cosecha) y los costos ambientales debido a la
lixiviacin del nitrgeno.
Deprent y Laguerre (2008), Una vez que han nodulado su leguminosa
hospedante, no todos los rizobios fijan altas cantidades de

N2. Las

capacidades de fijacin de N2 varan sustancialmente entre cepas dentro

de una especie o biovar de Rhizoobium que van desde cero (inefectivo) a
alta (efectiva). Para una especie Rhizobium giardinii, que nodula
Phaseolus vulgaris, todas las cepas hasta ahora descritas fueron
infectivas. Para una cepa de rizobio dado, su eficacia puede variar en
funcin del gnero, especie o la variedad del hospedante que se nodula.
Por lo tanto, una alta fijacin de N2 y rendimiento no se da
frecuentemente aun cuando otras condiciones para el crecimiento de la

planta ( e.g., el Ph del suelo, la disponibilidad de agua y nutrientes

distintos del N) son favorables.

II.2.6. Factores que limitan la simbiosis

Deficiencias o excesos en determinados elementos minerales afectan
directamente o indirectamente en la nodulacion.

Salinidad.
Hamdaoui et al (2003), la mayora de las leguminosas son clasificadas a
la salinidad y los efectos del estrs salino en la fijacin de N 2 en estas
plantas han sido ampliamente reportadas. La salinidad puede afectar la
simbiosis directamente reduciendo el crecimiento de la planta
hospedante o indirectamente por alterar las interacciones entre
Rhizobium y el hospedante conduciendo a la inhibicin de la formacin
de ndulo. Bajo condiciones de salinidad, la adhesin bacteriana a las
races se reduce y los pelos radiculares no muestran la caracterstica
respuesta a factores Nod, es decir, la deformacin del pelo radicular y el
posterior rizado. El estrs salino tambin inhibe la invasin y
proliferacin bacteriana dentro de las clulas del haspedante, que puede
ser aliviado por completar las leguminosas inoculadas con B y Ca20 . Sin
embargo, estos efectos varan segn las especies de las leguminosas, el
frijol comn, por ejemplo, es ms sensible a la sal que las sojas y la
alfalfa.

Temperatura.
Estevez Salazar (1983), que la temperatura afecta a la simbiosis, pero
esta interaccin es de modo indirecto aparece de un modo no especfico
a travs de los procesos metablicos de la planta como respiracin,
fotosntesis, transporte y transpiracin. En las leguminosas estudiadas,
que tienen un ciclo de Calvin normal, su temperatura ptima es de 15 a
20C.

Hungria y Vargas (2000), Las altas temperaturas perjudican la

sobrevivencia y presistencia de cepas de rizobios en el suelo y tambin
la infeccin de la raz. Adems, la temperatura elevada puede afectar la
produccin o liberacin de inductores de genes nod, alteran el
funcionamiento de ndulos a travez de cambios en la sntesis de
leghemoglobina y actividad de la nitrogenasa y aceleran la senescencia
del nodulo. Sim embargo, hay rizobos toleranes a altas temperaturas
(40C).

Luz.
Estevez Salazar (1983), La luz afecta a la simbiosis a travs de la
fotosntesis, controlando la cantidad de carbohidratos para el desarrollo
y funcionamiento del ndulo. Existen evidencias de algunos efectos
directos de la luz sobre la nodulacin

Humedad del suelo

Sadowsky (2005), En las regiones ridas, una pobre nodulacion de
leguminosas es ms probable a la muerte de rizobios durante la estacin
seca. La humedad del suelo tambin influye en el crecimiento de los
rizobios alterando el crecimiento de las planas, la arquitectura de la raz
y la eudacion de las races. La sincronizacin del estrs por sequa con
respecto a la etapa de crecimiento de la planta tiene un efecto
importante en la nodulacion y la fijacin de N2 y un periodo
prolongado de estrs durante la etapa vegetativa retarda ambos
procesos. Una vez establecido los ndulos, la sequa reduce la fijacin
de N2. El efecto de la sequa sobre la actividad del nodulo se debe
principalmente a un aumento de la resistencia a la difucion de O2 en los
bacteroides.
Las deficiencias en la disponibilidad de agua causan una bajada en la
fijacin del nitrgeno en leguminosas de todo el mundo.

Sistema radicular.

Estevez Salazar (1983), La soja cuenta con una raz principal pivotante,
un gran nmero de races adventiciasmuy ramificadas que salen de la
base del hipoctilo. En V2, las races laterales proliferan rpidamente
en los primeros 15 cm. de suelo y en V5 ya se entrecruzan con las races
de los surcos vecinos (con surcos a 70 cm. De separacin). Bajo
condiciones

favorables,

en

V6,

la

raz

principal

alguna

sramificaciones pueden crecer y alcanzar el metro de profundidad.

La acidez
Sadowsky (2005), La acides afecta rizobios de vida libre y fijadores de
N2. En suelos acidos, la densidad de rizobios puede ser baja. El
aumento de pH del suelo por el encalado es por lo tanto muy eficaz para
aumentar el nmero de ndulos, por ejemplo, el frijol comn, alfalfa y
mani.
En suelos acidos, diversos factores tales como altas concentraciones de
H+, al monomerica y, a veces micronutrientes que se vuelven ms
solubles a pH bajo, pueden contribuir a una pobre nodulacion y la
inhibicin del crecimiento de la planta, por otra parte la disponibilidad
de Ca y P estn perjudicados por bajo pH del suelo y tambin puede
influir el crecimiento y la supervivencia de rizobios.

II.2.7. Simbiosis
Menciona Hidalgo (1970), que la bacteria se encuentra presente en el
suelo en forma de pequeas varillas, que pueden penetrar los pelos
radiculares de la leguminosa.
Los rizobios viven en el suelo donde se encuentra las races de Fabaceae
La bacteria rizobial entra en el pelo radicular y crece como un tubo hacia
el centro del pelo. Las clulas de la planta proliferan formando el ndulo.
La planta provee a la bacteria con azcares, protenas y oxgeno. La
simbiosis leguminosa- rizobio es un ejemplo clsico de mutualismo como
el rizobio entrega amonio a la planta y recibe cidos orgnicos, como
fuente de carbonadas de energa.

l) Un ndulo: est constituido de los siguientes tejidos segn Cardoso

Zona meristematica o de crecimiento

Corteza nodular- regin externa y no infectada del nodulo

Sistema vascular en general barios haces vasculares que se unen en

el sistema vascular de la raz, separadas de la zona cortical por un
endoderma del ndulo.

Zona bacteroidal con clulas parenquimaticas infectadas que son

mucho ms grande (4 8x) y contienen la leghemoglobina. Estas
clulas son en general tetraploides.

II.2.8. Muestra de suelo para la evaluacin de ndulos CIAT (1982).

Menciona que esta evaluacin debe hacerse en R6 (en la etapa de
floracin) cuando la planta alcanza niveles mximos en nmero y masa
de los ndulos. En el frijol es suficiente examinar de 4 a 6 plantas,
utilizando una pala, se excavan las plantas del final de cada surco y se
retiran cuidadosamente, se separa luego con cuidado la raz del suelo y
el suelo se pasa por un tamiz para recuperar cualquier ndulo que se
pudiera desprendido se evala los ndulos que presenta un color interno
rojo o rosado. El nmero de ndulos por planta vara significativamente.
FIGURA N 4 escala de nodulacion para la evaluacin para los
frijoles arbustivos y volubles.

CIAT (1982) sistema estndar para la evaluacin de germoplasma

de frijol.
II.2.9. Cultivo de frijol

Generalidades
Gepts (2002), Los frijoles generalmente se refieren a las leguminosas del
genero Phaseolus, familia Leguminosae, subfamilia Papilionoideae, tribu
Phaseoleae, subtribu Phaseolinae. El gnero Phaseolus contiene unas 50
especies de crecimiento salvajes distribuidos nicamente an las Americas.
Agrupan cultivos extremadamente diversos en trminos de ciclo de vida,
habito de creciemineto, sistemas reproductivos, mtodos de cultivo, unos,
gama de ambiente a los que han sido adaptados, y la variabilidad
morfolgica. Se encuentra desde el nivel del mar hasta los 3.000 msnm, se
cultiva en monocultivo, en asociaciones, o en las rotaciones. El gnero
Phaseolus contiene cinco especies domesticadas: por orden de importancia
decreciente, frijol comn (Phaseolus vulgaris L), pallar (P. lunatus L),
frijol ayocote (P. coccineus L.), frijol tepary (P. acutifolius A. Gray), y
frijol de toda la vida (P. polyanthus Greenman), con distintas adaptaciones
y sistemas reproductivos: semi-humedo y templado, predominantemente
auto- polinizacin; calido y hmedo, predominantemente autopolinizacin;
caliente y seco, cleistogamia; fresco y hmedo, polinizacin cruzada; y
fresco y hmedo, la polinizacin cruzada, respectivamente.
El gnero Phaseolus es uno de los cultivos ms antiguos del nuevo mundo
junto con el maz y la yuca han sido un alimento bsico en las altitudes
bajas y medias de America por milenio.
La principal especie conocida econmicamente y cientficamente es el
frijol comn, tambin concida como friol, de la familia Leguminosae,

junto con arveja, soya, habas y lentejas con alrededor de 19400 especies.
Estas especies cultivadas hace 8000 aos. Donde su progenitor silvestre
(P. vulgaris var. Mexicanus y var aborigeus) que tienen una amplia
distribucin.

Importancia del cultivo

Castillo, (2008). Se cultiva en la costa, sierra y selva. - Son de mucha
importancia en la canasta bsica familiar por su alto contenido de
protenas, carbohidratos y minerales. Mejora los suelos incorporando el
nitrgeno atmosfrico fijado por simbiosis con bacterias del genero
Rhizobium. Sus granos contienen protenas (22% - 28%), vitaminas,
minerales y fibras solubles (pectinas). Es por ello que importantes
instituciones mdicas a nivel mundial vienen promoviendo su consumo
convirtindolo en un producto comercialmente atractivo.
Se desarrolla en zonas de sierra desde 700 hasta 2200 m.s.n.m.

Origen
Okii, et al (2014), originarias de America Central y del Sur, una especie
americano. Las formas silvestres que dieron origen a los cultivos de hoy se
les ha encontrado ampliamente distribuido desde Mxico hasta noreste de
Argentina. Tanto los frijoles silvestres como los cultivados de Centro y
Sud Amrica. Siendo nuestro pas uno de los centros de origen y
domesticacin del frijol. Grandes colecciones de germoplasmas de formas
domsticas y silvestres se encuentran en el CIAT, Cali, Colombia y USDA,
Pallman, Washington, EE.UU.
Valladares (20109
Marechal et al. y Delgado, seala la siguiente clasificacin para el frijol
comn:
Reino

: Vegetal

Clase

: Dicotiledoneae

Sub-clase

: Rosidae

Orden

: Fabales

Familia
Sub-familia

: Leguminosa (Papilionaceae)
: Litoidea (Papilionoideas)

Tribu

: Phaseoleae

Sub Tribu
Gnero
Especie

: Phaseolinae
: Phaseolus
: Phaseolus vulgaris L.

Propiedades nitritivas y usos del frijol

Diversos autores han destacado las propiedades nitritivas que posee el
frijol, de manera fundamental por su alto contenido en protenas y en
menor medidad en carbohidratos. Esto evidencia por que las culturas
mesoamericanas, desde tiempos inmemoriales basaron su alimentacin en
el frijol y el maz.
Morris (2003), indican que las leguminosas producen metabolitos
primarios y secundarios y otros fitoquimicos tales como nutraceuticos,
farmacuticas, pestcidas y productos industriales.
Se han determinado que el frijol no solo suministra protenas y
carbohidratos, tambin tiene cantidades importantes de vitaminas y
minerales, tambin proporcionan hierro, cobre, zinc, fosforo, potasio,
magnecio y calcio y tiene un alto contenido en fibra. Tambin es una
exelente fuente de cido graso poliinsaturados.
Adems de su efecto reductor del colesterol en la sangre, las leguminosas
de grano generalmente tambin tienen un efecto hipoglucemiante. Las
leguminosas son, por lo tanto, incluido en la dieta de los diabticos
dependiente de insulina. Sin embargo, producen factores antinutricionales,
tales como inhibidores de tripsina y fitohemaglutininas y alrgenos, siendo
este ltimo un grave problema en mani.

CUADRO N 03. Contenido de fitoquimicos nutraceuticos en ppm en

frijol.

Tesis para optar el ttulo de ingeniero presentado por HECTOR B. CARTARO SEGURA
EFECTIVIDAD SIMBITICA DE DOS CEPAS DE Rhizobium sp. EN CUATRO VARIEDADES
DE FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris L.) EN CONDICIONES DE COSTA CENTRAL LIMA
PERU 2015

Situacin actual del frijol

Pachico (1989) y MINAG (2014) El rea cultivada con el frijol en nuestro
pas alcanza las 82200 ha de un total de 29 millones de ha en el mundo,
con una produccin de 92952 toneladas, de un total de 23.6 millones de
toneladas en el mundo, con un rendimiento promedio de 1144 kg/ha
comparado con un rendimiento mundial de 1336 kg/ha, debido a que los
pases desarrollados tienen un alto rendimiento. La produccin es
especialmente importante en Amrica Latina y el este de frica, regiones

que representan el 47 y 24%, respectivamente, de la produccin mundial

de frijol seco. Para aquellos pases en los frijoles son un cultivo
importante, rendimiento vara significativamente. Como era de esperar, en
promedio, el rendimiento de los pases desarrollados, 1.944 kg / ha, es
significativamente superiores a los de los pases en desarrollo, 1.035 kg /
ha.
MINAG (2014), En el caso del Per (Anexo 1), en el 2013, la mayor rea
sembrada se encuentra en la sierra (53.7%), seguido por la selva (24.1%) y
luego la costa (22.2%). La sierra ocupa el primer lugar en cuanto la
produccin (55.60%) esto debido a sus rendimientos unitarios, la costa
ocupa el segundo lugar (25.32%) y la selva el tercer lugar con 19.08% de
la produccin nacional. El rendimiento promedio de la costa es 1363.6
kg/ha, de la sierra es 1337.2 kg/ha y en la selva 1036.4 kg/ha. El precio
promedio nacional en el 2013 es de S/. 3.52, variando de un mnimo en la
selva de S/. 1.77 en Loreto, un precio mximo de S/. 5.45 en Ica y Lima y
un precio medio en la sierra es de S/. 3.50.
El Departamento de Ancash la superficie que se cultiva segn el censo del
INEI 2012, es de 1.4 mil Has. En frijol de grano verde.

Morfologa de la planta de frijol

Valladolid (1993)
1. RAZ. En la primera etapa de desarrollo el sistema radicular est
formado por la radcula del embrin la cual se convierte
posteriormente en la raz principal. Sobre todo absorbente, formado
por un conjunto profuso (ramificado) de races, bastante lignificado
pero menos grueso que la raz principal, tambin penetrantes y
relativamente profundas. Son las races que tienen la capacidad de
asociarse simbiticamente con bacterias del suelo, del gnero
Rhizobium, que se fijan al sistema radical formando unos ndulos que
permite a la planta aprovecharse del nitrgeno del aire y de fijarlo al
suelo.
El sistema radical de las leguminosas es el responsable, en parte, de la
gran importancia que tiene la familia en la pascicultura.

2. TALLO. - Es el eje central de la planta y est constituido por una

sucesin de nudos y entrenudos. Un nudo, es el punto de insercin de
las hojas (o de los cotiledones) en el tallo.
3. HOJAS. - La planta de frijol tiene dos tipos de hojas: simples y
compuestas. Las hojas simples, son las hojas primarias y estn en
posicin opuesta en el segundo nudo, estas caen antes que la planta
alcance su mximo desarrollo. Las hojas compuestas, son las hojas
trifoliadas tpicas del frijol.

4. Flor. - la flor del frijol es una tpica flor papilioncea, de simetra

bilateral y con las siguientes caractersticas.

Un pedicelo glabro o subglabro con pelos uncinulados, y en su base

una pequea brctea no persistente, unilaterales, es decir la brctea
pedicular.
El caliz es gamospalo, campanulado, con cinco dientes triangulares
dispuestos, como labios, en dos grupos, en la siguiente forma: dos en
la parte alta completamente soldados y tres mas visibles en la parte
baja. En la base del caliz hay dos bractolas verdes, ovoides
multinervias, que persiste hasta poco despus de la floracin;
ordinariamente de un tamao equivalente a dos veces la longitud del
caliz.
La corola es pentmera y papilioncea y con tres petalos no soldados.
En ella se pueden distinguir

5. Inflorescencias. - las inflorescencias pueden ser laterales, o

terminales como sucede en las plantas de habito de crecimiento tipo I.
desde el punto de vista botnico se consideran como racimos de
racimos: un racimo principal compuesto de racimos secundarios, que
podran llamarse triadas florales. En la inflorescencia se puede
distinguir tres componentes principales: el eje de la inflorescencia que

se compone de pednculo y de raquis, las brcteas y los botones

florales.
El pednculo y el raquis puede tener coloracin y pubescencia
especial, pero siempre tienen pequeos pelos uncinulados.
6. Fruto. - es una via con dos valvas, las cuales provienen del ovario
comprimido. Puesto que el fruto es una vaina, esta especie se clasifica
como leguminosa. Dos suturas aparecen en la unin de las dos valvas:
una es la sutura dorsal, llamada placental; la otra sutura, se denomina
sutura ventral. Los ovulos, que son las futuras semillas, alternan en la
sutura placental; en consecuencia, las semillas tambin alternan en las
dos valvas. Estas dos suturas son muy importantes en la dehiscencia,
como tambin la produccin de las cepas pergaminosas de fibra en las
valvas.

III.

MATERIALES Y MTODOS.

III.1. Ubicacin del campo experimental

El presente trabajo de investigacin se realiz entre octubre del 2015 y junio
del 2015 el Fundo Allpa Rumi de la Facultad de Ciencias Agrarias, de la
Universidad Nacional de Ancash UNASAM:
Ubicacin poltica
Departamento
Provincia
Distrito
Lugar
III.2.

: ncash
: Carhuaz
: Marcara
: Fundo Allpa Rumi

Materiales

Wincha de 50 metros.

Estacas de madera y letreros.

Lampas restas, picos, bomba de mochila, yeso.

Bolsa para muestras.

Cuaderno de apuntes.

Calculadora.

Cmara fotogrfica.

Balanza digital.

III.3.
Material experimental
Para este experimento el material estuvo conformado por 40 lneas de frijol,
(Phaseolus vulgaris), provenientes del Programa de Leguminosas y
Oleaginosas de Granos de la Universidad Nacional Agraria la Molina,
procedentes del Centro Internacional De Agricultura Tropical.

III.4.

MTODOS

III.4.1.ANLISIS ESTADSTICO

a. Tipo de investigacin
Se trata de una investigacin descriptiva, aplicada los resultados
obtenidos en el trabajo de investigacin, que nos permitan recomendar
para las lneas ms eficientes.
b. Universo o Poblacin objetivo
Son las lineas de frijol (Phaseolus vulgaris L.), pertenecientes del Centro
Internacional De Agricultura Tropical.
c.

Muestral
Las platas de 40 lneas de frijol (Phaseolus vulgaris L.), provenientes del
CIAT.

d. Muestra
Se evaluaron 5 plantas de frijol (Phaseolus vulgaris L.), para cada lnea.
III.4.2.Diseo experimental
a. Diseo lgico
En el presente trabajo de estudio se utiliz el diseo sistemtico,
consistio en sembrar cada lnea en un surco, sembrndose 3
golpes/lnea en caso se las lneas nacionales y para el CIAT, 10 golpes
por lnea.
b. Tratamiento
Para este trabajo de investigacin los tratamientos lo constituyen las 40
lneas de frijol del CIAT, las cuales fueron sembradas en un surco por
lnea.
Cuadro N 04, cdigos de las lneas de frijol (tratamientos en
estudio)

c. Croquis experimental
Distribucin de los tratamientos en el campo experimental del frijol
(Phaseolus vulgaris L.), para los tratamientos por cada lnea del CIAT
y las lneas nacionales.

III.5.

PROCEDIMIENTO

III.5.1.Metodologa del trabajo de investigacin

-

Antes de la siembra se tom muestra de suelo del campo experimental

para su anlisis correspondiente.

la preparacin del suelo, luego se realiz la siembra del frijol en dos

parcelas esto debido a que no se cuenta con terreno disponible en el
mismo lugar. En la primera parcela se sembr una lnea por surco, en 15
surcos de 4 metros divididos en dos partes se sembrar las 15 primeras
lneas de CIAT como se muestra en el croquis.

En la segunda parcela se sembrar en un surco que es ms largo, se

sembraron varias lneas con 3 a 10 golpes por lnea, se debe a que no se
cuenta con suficiente disponibilidad de semilla, de las lneas restantes
tal como se muestra.

Posteriormente se realiz el aporque y cambio de surco del cultivo de

frijol para evitar el contacto del cuello de las plantas con el agua.

despues se realiz el tutoreo del frijol con palos y sobre los palos se
tensionaron la rafia (en espaldera vertical) para que se desarrolle el
frijol y evitar el contacto con el suelo.

en la fase de floracin se realiz la evaluacin de la eficiencia de

fijacin de la capacidad simbitica de las bacterias de Rhizobium.

para la evaluacin se extrajeron como mnimo 5 plantas de frijol, con la

ayuda de una lampa recta se sac con toda la raz, luego se separa la
tierra de la raz y los ndulos, y de la tierra se tamizo para ver los
ndulos que se han desprendido de la raz.

Se tom las muestras, se llevaron al laboratorio donde el pes, en fresco

la parte radicular, la parte area y los ndulos. Luego se llev a la estufa
por 48 horas a 80C, para obtener el peso seco de la parte radicular,
area y los ndulos.

III.5.2.Variables evaluadas en el experimento

La evaluacin en la recoleccin de datos, se realizaron en la etapa de
crecimiento R6 etapa de la floracin segn el manual del CIAT (1982)
III.5.2.1.

Variables morfofisiolgicas

a. Altura de planta.
Se evalu al momento de la madurez fisiolgica. Se tom la altura
promedio de 3 a 9 plantas seleccionadas en cada tratamiento. Se
mide desde la superficie del suelo hasta el pice del tallo principal.
b. Peso fresco de follaje y raz.
Se tom el peso fresco total, tanto del follaje y la raz
c. Peso seco de follaje y raz.
Se tom el peso seco total, del follaje y las races, las muestras de la
evaluacin anterior se llevaron a estufa a una temperatura de 80C
por 2 das.

III.5.2.2.

Variables de nodulacin

Para la evaluacin de la nodulacin se tomaron cuatro plantas por

cada lnea de frijol, en plena floracin y se sigui el procedimiento
que se tiene en el manual del CIAT, 1982.
a. Numero de ndulos
Se contabilizo el nmero total de ndulos en las races de las plantas
extradas al azar de cada tratamiento en la etapa de floracin (R5 y
R6) se registr el promedio.
b. Posicin de los ndulos
Al momento de contar los ndulos por planta a la vez se determina la
posicin de los ndulos ya sea en la raz principal o lateral.
Se determin la ubicacin tanto en la raz principal como en las
races secundarias en las plantas muestreadas de cada tratamiento.
c. Tamao de ndulo.
Segn Matos y la recomendacin del Programa de Leguminosas de
Grano y Oleaginosas de la UNALLM, la escala del tamao de
ndulos est determinado por la siguiente escala. Segn el manual
del CIAT, 1982.
Ndulos pequeos. Menores de 2mm
Ndulos medianos. 2 a 4 mm
Ndulos grandes. Mayores de 4 mm
d. Forma de ndulos
Se utilizan dos categoras: redondas y alargadas u ovaladas, los que
corresponden

ndulos

determinados

indeterminados,

respectivamente.

e. Color interno del ndulo

Se tom al azar don ndulos con tamao predominante y se cort por
la mitad el color utilizado segn las categoras utilizadas (rojo rosado), se utiliz las plantas recolectadas.
f. Peso fresco y seco del ndulo
De las plantas extradas para calcular el peso fresco del follaje y la
raz, tambin se obtuvieron el peso seco, luego se llevaron a la estufa
luego de 2 das se obtuvo el peso seco.

III.5.2.3.

Variables de rendimiento

a. Nmero de vainas por inflorescencia

Se cont el nmero de vainas por inflorescencia de las plantas
extradas y luego se registr el promedio.

b. Nmero de vainas por planta.

Se cont el nmero de vainas de cada planta extrada que se tom al
azar, se registr el promedio.
c. Nmero de ramas por planta
Se cont el nmero de ramas de las plantas al momento de extraer
tomando una muestra representativa de los 3 metros, se registr el
promedio.
d. Longitud de vaina (cm)
De las vainas por planta, se tom una muestra representativa de 10
vinas al azar para luego medirlos en unidad de medida cm. Y luego
se le dividi entre 10 para obtener la medida promedio de una vaina
y se registrarlo.
e. Nmero de granos por vaina
Se cont el nmero de granos por vaina, para lo cual se tom una
muestra representativa de 10 vainas para cada lnea.

f.

Peso de 100 semillas (gr)

Se obtuvo el peso de las semillas en granos de un promedio de 100
semillas tomadas de vainas maduras escogidas al azar con la ayuda
de una balanza analtica y se registr.

g. Peso de la planta seco completado su fisiologa vegetal

Se tom el paso de las plantas extradas de cada lnea, despus de

extraer todas las vainas.

IV.
IV.1.

RESULTADOS Y DISCUSIONES.

Variables morfofisiologicas

IV.1.1. Altura de planta

En el cuadro N 05: Al evaluar la altura de planta se aprecia que las lneas tienen
una variacin entre 54.8 cm y 217.7 cm, corresponden a los tratamientos LNEA
18 Y LNEA 21 (lneas nacionales), y resultando superiores con respecto a las
lneas del CIAT.
la lnea 18 presento menor altura de planta con respecto a las otras lneas, es
frijol de TIPO I, determinado arbustivo. Como se observa en el (figura N 01).

El coeficiente de variabilidad es de 22.61%, la cual es un valor confiable para las

condiciones de campo.
Obteniendo la altura de la planta promedio para el experimento en general de
164.66 cm.
Cuadro 05: Resultados de caracteres de planta y raz evaluado al inicio de
formacin de vainas (R7), en el material gentico de frijol Phaseolus vulgaris L.

LINEA

PESO
PESO
ALTUR
PESO
PESO
FRESCO FRESCO
CODIG
A DE
SECO DE SECO
DE
DE
O
PLANTA
FOLLAJ DE RAIZ
FOLLAJ
RAIZ
(cm)
E (gr)
(gr)
E (gr)
(gr)
CIAT 4
186.2
277.61
8.14
33.66
1.96
CIAT 5
180.18
492.92
6.51
76.35
2.18
CIAT 9
199.2
444.08
2.38
49.78
1.39
CIAT 10
207
470.96
3.9
50.33
1.76
CIAT 12
189.4
243.16
1.52
27.81
0.72
CIAT 13
158.6
683.96
2.8
75.46
1.76
CIAT 17
154.8
492.97
0.9
43.14
0.15
CIAT 38
205.8
428.62
8.8
118.07
3.8
CIAT 49
203.6
494.3
6.4
119.48
2.2
CIAT 51
175.2
443.62
6.3
105.37
2.8
CIAT 54
169.2
435.74
7
143.98
3.3

LNEA 1
LNEA 2
LNEA 3
LNEA 4
LNEA 5
LNEA 6
LNEA 8
LNEA 10
LNEA 12
LNEA 13
LNEA 14
RED
KINDEY
LNEA 18
LNEA 20
AH2
LNEA 21
AH3
LNEA 22
AH4
LNEA 24
LNEA 25
LNEA 26
LNEA 27
LNEA 28
AH8
LNEA 31 AH11
LNEA 33
LNEA 34
LNEA 37
LNEA 41
LNEA 42
PROMEDIO

98.2

187.24

4.17

42,76

1.6

54.8
216.67
217.7
160.88
172.5
162.5
160
154
160
149.5
147.11
179.6
113
114.5
155.62
164.66

146.81
255.76
162.41
428.62
763.62
298.62
265.62
403.62
269.29
433.62
152.43
453.67
428.64
295.74
423.64
380.64

3.5
10.3
3
21.5
14.5
9.3
8.6
6.8
4.7
11.6
10
9.7
9.3
10.6
12.2
7.57

30.01
57.06
99.36
84.42
126.6
63.55
89.46
98.88
97.78
136.31
74.77
84.49
78.97
47.03
86.64
80.72

1.1
4.2
1.3
4
3.7
2.1
1.8
2.8
1.9
3.5
2.6
2.2
3
2.8
2.9
2.35

ALTURA DE PLANTA

PROMEDIO

FIGURA N 05 Altura de planta (cm) en las lneas de frijol (Phaseolus

vulgaris L.) en estudio
En el grafico se observa que la variacin para altura de planta en las lneas CIAT
y las lneas nacionales son semejantes

IV.1.2. Peso fresco de follaje (gr)

En el cuadro N 05 se muestran que el peso fresco de follaje est dentro de
un intervalo entre 763.62 g a 146.81 g que corresponde a la lnea 24 y
lnea 18 respectivamente. El coeficente de variabilidad es de 91.48 %
se puede observar que las lneas 6, 24 presentan mayor follaje en
comparacin que las lneas 1, 5, RED KINDEY, 20, 21, 33 que presentaron
menor peso de follaje de frijol (Phaseolus vulgaris L.).
el peso fresco de follaje promedio para el experimento en general de
380.64g.
FIGURA N 06 Peso fresco de follaje en (g) de las lneas en estudio.

PESO FRESCO DE FOLLAJE

PROMEDIO

En el grafico se observa que la lnea 18 por su caracterstica arbustiva de

TIPO I, mostro menor peso fresco de follaje con 146.81 g. con respecto a
las dems lneas en estudio.
IV.1.3. Peso seco de follaje
En el cuadro N 5, se aprecia que el peso seco del follaje de las lneas
de frijol flucta entre 143.98 g y 27.81 g estos valores correspondiendo
a los tratamientos de la lnea 14 (CIAT 54) y lnea 5 (CIAT 12)
constituyndose en las lneas ms altos y bajos para esta caracterstica
respectivamente.
las lneas de frijol, del cdigo CIAT 38, CIAT 49 Y CIAT 54 superan en
promedio de peso seco, a las lneas del cdigo CIAT 4, CIAT 12 y CIAT
17.
Se observa que las lneas nacionales, los resultados que sobresalieron
fueron; las lneas 23, 24 y 31, y las de menor peso promedio fueron las
lneas 18, red kindey y lnea 41. El coeficiente de variabilidad es de

19.87%. Siendo el peso seco promedio de follaje para el experimento en

general de 92.02 gr.

PESO SECO DE FOLLAJE

PROMEDIO

Figura N 07, Peso seco de follaje (g) de las lneas de frijol en estudio.

IV.1.4. Peso fresco de races

En el cuadro N 5 se aprecia que el peso fresco de las races de las
lneas en estudio flucta entre 21.50 g y 0.90 g. Que corresponde a las
Lneas 22 y Lnea 8 (CIAT 17), correspondiendo los valores mximos y
minimos. Se puede observar que las lneas 22 y 24 superan a las lneas
restantes.
El coeficiente de variabilidad es de 2.72% la cual el valor es aceptable,
indicando que los resultados son aceptables. siendo el peso fresco
promedio para el experimento en general es de 7.57hr.

PESO FRESCO DE RAIZ

PROMEDIO

Figura N 08, Peso fresco de raz (g) en las lneas en estudio.

En la fugura se observa, que las Lneas 3 (CIAT 9), Lnea 5 (CIAT 12),
Lnea 8 (CIAT 17), Lnea 18 y la Lnea 28, presentan una disminucin
en el peso promedio de las race en comparacin a las otras Lineas,
debido a problemas a su cultivo en condiciones ambientales no
favorables a las lneas (bajas temperaturas y estrs hdrico que limita el
crecimiento de races).
IV.1.5. Pero seco de races. En el cuadro N 5, se observa que el peso seco de raz de las lneas de
frijol flucta entre 4.20 g y 0.15 g. Que lo corresponden a las Lneas 20
y Lnea 8 (CIAT 17), que representa el ms alto y ms bajo para esta
caracterstica. Se puede observar que las lneas CIAT 38, 20, 22, 24 y
31, superan a las lneas restantes.
se observas que la lnea 8 (CIAT 17) es la que obtuvo el menor peso
seguido de las lneas 5 (CIAT12), Lnea 18 y Lnea 21.
El coeficiente de variabilidad es de 43.40%. Obteniendo el peso seco
de races promedio para el experimento en general es de 2.35g.

Figura N09, Peso seco de raz (g) en las lneas en estudio.

PESO SECO DE RAIZ

PROMEDIO

IV.2.

Variables de nodulacion

IV.2.1. Numero de ndulos

En el cuadro 06, se aprecia que el nmero de ndulo de las lneas de
frijol flucta entre 98.00 y 3.00 que corresponden a las Lneas de 31,42
y Lnea 18 que representa al mximo y mnimo.
las lneas 3 (CIAT9), Lnea 4 (CIAT10), Lnea 6 (CIAT13), Lnea 14 (
CIAT54), Lnea RED KINDEY, Lnea 20, Lnea 22, Lnea 25, Lnea 26,
Lnea 27, Lnea 28, Lnea 31, Lnea 33, Lnea 34, y Lnea 42 superan
en nmero de ndulos a las lneas de Lnea 1 (CIAT4), Lnea 2
(CIAT5), Lnea 5 (CIAT12), Lnea 8 (CIAT17), Lnea 10 (CIAT38),
Lnea 12 (CIAT49), Lnea 13 (CIAT51), Lnea 18, Lnea 21, Lnea 24,
Lnea 37, Lnea 41. las que se muestran en la figura N 05, esto puede
deberse a las condiciones ambientales favorables para los de mayor
numero de ndulos y no favorables para los restantes.
El coeficiente de variabilidad es de 67.07%. Siendo el nmero de
ndulos promedio para el experimento en general de 51.73 ndulos

CUADRO N 06.- Resultado promedio de las variables de

nodulacion evaluadas de las lneas introducidas y nacionales.

NUMERO DE NODULOS

PROMEDIO

Figura N 10, Numero de ndulos, de las lneas en estudio

IV.2.2. Posicin de ndulo

En el cuadro N 06 y las fotos ::::::: se puede observar que la mayora
de las lneas presentan los ndulos en las races laterales, solo algunas
plantas presentan en las races principales, de esta manera lo describen
Tapia y Camacho, quienes refieren que los ndulos estn distribuidos en
las races laterales, en la parte superior media del sistema radical,
debido a que son estas races las que se encuentran en constante
crecimiento activo y los ndulos se forman en ellas, en el cuadro 04 se
observa que las races presentan mayormente en la parte de los pelos
absorbentes o terciarios, secundarias y algunos en las partes inferiores y
otras en la parte superior.
IV.2.3. Tamao de ndulos (mm)
En el cuadro 06, se observa que el tamao de ndulo flucta entre 4.00
y 1.20 mm que corresponde a las lneas 10 (CIAT38) y Lnea 18
corresponden a los valores mximo y mnimo para esta variable. Se
pude observar que las lneas CIAT10, CIAT38, CIAT49, 25, 27 y 33
presentan mayor tamao que est dentro del tamao intermedio, en
comparacin al resto; del mismo modo las lneas CIAT12, CIAT17,
CIAT51, 18, 21 y 31 presentan menor tamao que est dentro del

tamao pequeo, tal como lo mencionan el autor matos y las

recomendaciones del Programa de Leguminosas de Grano y
Oleaginosas de la UNALM.
El coeficiente de variabilidad es de 2.58% la cual es un valor aceptable
para las condiciones de campo, indicando que los resultados son
confiables.
Siendo el tamao de ndulos promedio para el experimento en general
de 2.58 mm

TAMAO DE NODULO

PROMEDIO

Figura N 11, Tamao de ndulo (mm) de las lneas en estudio

IV.2.4. Forma de ndulo

En el cuadro 06, se observa que los ndulos observados en el sistema
radicular de las diversas lneas introducidas de CIAT y las Lneas
nacionales fueron REDONDO/OVALADOS y REDONDO, con
algunas variaciones correspondiente a OVALADO/IRREGULAR,
OVALADO, que corresponden a las Lneas 10 (CIAT 38), Lnea 12
(CIAT 49) y Lnea 37; correspondiendo al tipo determinado citado por
(Marschner 2012), este tipo de ndulo es inducido en las plantas como
las de genero Phaseolus, Glycine, Vigna y Lotus, en esta clase de
ndulo no hay meristemos permanente. As, su crecimiento se basa en
la expansin en vez de la divisin celular, razn por la que presenta una
morfologa esfrica y no cilndrica.

IV.2.5. Color interno del ndulo

el color interno de los ndulos vivos puede ser rojo, rosado, blanco
negro o marrn, aunque un solo ndulo puede presentar dos colores.
El color interno de un ndulo efectivo generalmente es rojo o rosado,
por la presencia de leghemoglobina. Sin embargo. Algunas cepas
infectivas tambin pueden formar ndulos rojos. Los ndulos verdes y
blancos generalmente son inefectivos.
En el cuadro 04, se observan en todas las lneas, las coloraciones
internas de los ndulos corresponden al rojo-rosado, rojo, rosado segn
considera con la coloracin interna de los ndulos rojo o rosado, segn
Matos y Suiga

quienes lo relacionaron con la presencia de

leghemoglobina y una activa fijacin de nitrgeno.

En los resultados obtenidos en el experimento, los ndulos muestreados
estaban activos y fijando nitrgeno, con distintas variaciones segn las
lneas en estudio del experimento, esto depende de la cantidad de
bacterias fijadoras de Rhizobium presentes en el suelo.
IV.2.6. Peso fresco del ndulo
En el cuadro N 06 se observa que los pesos frescos de los ndulos de
las lneas de frijol (Phaseolus vulgaris L.) fluctan entre 3.45 y 0.02 g
que corresponden a las lneas 22 y Lnea 8 (CIAT17) respectivamente.
Se observa que las lneas 22, 34, 33, 42 y 25 presentan mayor peso
promedio en comparacin con las lneas de cdigo CIAT4, CIAT5,
CIAT12, CIAT17, CIAT38, LNEA 24 y 37 presentan menor peso
fresco promedio de los ndulos.
E coeficiente de variabilidad es de 72.04%, es un valor aceptable para
las condiciones de campo, indicando que los resultados son confiables.
Siendo el peso fresco de ndulos promedio para el experimento en
general es de 1.24 g.

PESO FRESCO DE NODULO

PROMEDIO

Figura N 12, Peso fresco de ndulo (g) de las lneas en estudio.

IV.2.7. Peso seco del ndulo

En el cuadro 06, se observa que el peso seco de los ndulos de las lneas
de frijol flucta entre 1.43 g y 0.02 g. correspondiente a las Lneas 22 y
Lnea 8 (CIAT17).
Se observar que las lneas 20, 22, 24, 33, 34 y 42 presentan mayor peso
seco de los ndulos y las lneas CIAT4, CIAT5, CIAT12, CIAT17,
CIAT38, CIAT51, 21 y 37, presentan menor peso seco de ndulos; hay
una correlacin entre el peso fresco y seco de ndulo.
El coeficiente de variabilidad es de 71.65%, lo cual es aceptable para el
experimento agrcola, lo que nos indica que los resultados son
confiables. y con el peso seco promedio para el experimento en general
de 0.59 gr.

PESO SECO DE NODULO

PROMEDIO

Figura N 13, Peso seco de ndulo (gr) de las lneas en estudio.

IV.3.

Variables de rendimiento
CUADRO N 07 Resultado promedio de las variables de rendimiento
evaluados en las lneas de frijol en estudio.

NUME
RO DE NUMER NUMER
NUMERO
VAINA
O DE
O DE
DE
LONGIUD
LINEA CODIGO S POR VAINAS RAMAS
GRANOS
DE VAINA
INFLO
PO
POR
POR
RESCE PLANTA PLANTA
VAINA
NCIA
LNEA 1 CIAT 4
1.36
56.00
2.80
10.76
3.17
LNEA 2 CIAT 5
1.35
53.80
2.60
9.46
3.78
LNEA 3 CIAT 9
2.16
49.20
2.80
10.98
4.08
LNEA 4 CIAT 10
1.23
43.40
2.40
10.23
3.59
LNEA 5 CIAT 12
1.68
50.00
2.20
10.50
4.21
LNEA 6 CIAT 13
1.76
46.20
2.40
11.03
4.34
LNEA 8 CIAT 17
1.57
51.00
2.40
10.41
3.77
LNEA
CIAT 38
1.74
58.00
2.20
9.93
5.48
10
LNEA
CIAT 49
1.35
55.00
2.20
10.10
4.49
12
LNEA CIAT 51
1.24
45.20
2.00
9.41
2.80

PESO
DE 100
SEMIL
LA

PESO
SECO DE
LA
PLANTA

50.76
52.44
35.96
46.26
46.12
47.30
58.36

12.45
13.66
35.53
10.73
34.76
12.86
10.12

54.98

52.31

58.78

11.57

61.80

7.30

13
LNEA
CIAT 54
14
RED
KINDEY
LNEA
18
LNEA
AH2
20
LNEA
AH3
21
LNEA
AH4
22
LNEA
24
LNEA
25
LNEA
26
LNEA
27
LNEA
AH8
28
LNEA
AH11
31
LNEA
33
LNEA
34
LNEA
37
LNEA
41
LNEA
42
PROMEDIO

1.00

47.40

2.40

10.48

4.98

46.82

19.52

1.40

36.40

1.40

9.91

4.68

55.32

19.20

1.40

35.60

1.20

10.64

4.58

47.24

11.70

2.00

56.89

1.00

10.52

5.39

50.41

14.33

1.66

65.90

1.60

11.16

3.40

63.11

14.21

1.00

52.12

1.38

10.68

7.24

84.29

28.24

1.00

53.75

1.00

8.80

5.28

42.53

12.38

1.00

44.25

1.00

9.00

5.13

43.65

17.00

1.00

35.00

1.00

8.77

4.73

41.80

16.03

1.30

32.00

1.00

8.60

4.74

39.52

17.13

1.00

34.33

1.00

9.10

4.70

44.17

13.11

1.50

40.00

1.00

10.26

4.70

62.85

30.65

1.58

45.33

1.16

11.20

5.20

60.51

24.13

1.26

39.40

2.00

11.10

3.62

30.86

41.65

1.00

28.75

1.50

8.83

4.09

56.62

29.87

1.00

21.25

1.00

11.40

3.31

77.14

24.87

2.06

48.12

1.00

12.16

5.08

58.38

29.42

1.39

45.34

1.69

10.20

4.47

52.52

20.92

IV.3.1. Numero de vainas por inflorescencia

En el cuadro 07, se observa que el nmero de vainas por inflorescencia
de las lneas de frijol (Phaseolus vulgaris L.) flucta entre 2.16 y 1.00
correspondientes a las lneas 3 (CIAT9) Y a las lneas 14 (CIAT54), 22,
24, 25, 26, 28, 37 y 41 respectivamente.

las lneas CIAT9, 20 y 42, presentan mayor nmero de vainas por

planta. El nmero de vainas por inflorescencia promedio para el
experimento en general es de 1.39 vainas por inflorescencia.
El coeficiente de variabilidad es de 25.21%, lo cual lo ubica en un
rango aceptable para experimentos agrcolas.

VAINAS POR INFLORESCENCIA

PROMEDIO

Figura N 14, Numero de vainas por inflorescencia, de las lneas de

frijol (Phaseolus vulgaris L.) en estudio
IV.3.2. Numero de vainas por planta
En el cuadro 07, se aprecia que el nmero de vainas por planta de las
lneas de frijol (Phaseolus vulgaris L.), fluctan entre 65.90 y 21.25
correspondiente a las Lneas 21 y Lnea 41, que representa el mximo y
mnimo.
El coeficiente de variabilidad es de 22.47%, la cual es un valor
aceptable para las condiciones de campo, indicando que los resultados
son confiables.
El nmero de vainas por planta promedio para el experimento en
general es de 45.34 vainas por planta.

NUMERO DE VAINAS POR PLANTA

PROMEDIO

Figura N 15, Nmero de vainas por planta, de las Lneas de frijol

(Phaseolus vulgaris L.) en estudio.

IV.3.3. Ramas por planta

En el cuadro 07, se aprecia que el nmero de ramas por planta fluctan
entre 2.80 y 1.00 correspondiente a las Lneas, con cdigo: CIAT 4,
CIAT 9 y las Lneas 20, 24, 25, 26, 27, 28, 31, 41 y 42, que representa
el nmero mximo y mnimo de ramas por planta.
El coeficiente de variabilidad es de 39.02%, la cual es un valor
aceptable para los experimentos en campo, nos indican que los
resultados son confiables.
Siendo el nmero de ramas por planta promedio para el experimento en
general es de 1.69 ramas por planta.

RAMAS POR PLANTA

PROMEDIO

Figura N 16, Numero de ramas por planta, de las lneas de las Lineas
de frijol (Phaseolus vulgaris L.) en estudio
En el grfico se observar que las lneas introducidas de CIAT, superan
en nmero de ramas, a las lneas nacionales.
IV.3.4. Longitud de vaina (cm)
En el cuadro 07, se aprecia que la longitud de vaina flucta entre
12.16cm y 8.60cm., estos valores corresponden a las Lneas 42 y Lnea
27 respectivamente,
En el grafico se observar que las Lneas 6, 21, 33, 34, 41 y 42 presentan
mayor longitud de vaina en comparacin a las Lneas 24, 26, 27, y 37
que presentan menor longitud de vaina.
El coeficiente de variabilidad es de 9.18%, para las condiciones de
campo es aceptable, y es de confiabilidad de los resultados del
experimento.
Siendo la longitud de vaina promedio para el experimento en general de
10.20 cm.

LONGITUD DE VAINA (cm)

PROMEDIO

Figura N 17, Longitud de vaina en (cm), de las lneas de frijol

(Phaseolus vulgaris L.) en estudio.
IV.3.5. Numero de granos por vaina
En el cuadro 07, se aprecia que el nmero de granos por vaina fluctan
entre 7.24 y 2.80 granos por vaina que corresponden a las Lneas 22 y
Lnea 13(CIAT 51), que representan el mximo y mnimo resultado.
Se observa que las Lneas 10 (CIAT38), 20 y 22, obtuvieron mayor
nmero de granos por vaina, en comparacin con las Lneas CIAT4,
CIAT51 y 41 que tienen menor nmero de granos por vaina.
El coeficiente de variabilidad es de 20.56%, es un valor aceptable para
las condiciones del cultico, lo cual nos indican la confiabilidad de los
resultados.
Siendo el nmero de granos por vainas promedio para el experimento
en general de 4.47 granos por vaina.

GRANOS POR VAINA

PROEDIO

Figura N 18, Numero de granos por vaina, de las lneas en estudio

IV.3.6. Peso de 100 semillas

En el cuadro 07, se aprecia que el peso de cien granos de frijol
(Phaseolus vulagaris L.) flucta entre 84.29 g y 30.86 g estos valores
corresponden a las Lneas 22 y 34 respectivamente.
Se puede observar que las lneas 22 y 41 obtuvieron mayor peso
promedio de cien granos de semilla, en comparacin con las Lneas 3
(CIAT 9) y 34, obteniendo menor peso de cien granos de semilla.
El coeficiente de variabilidad es de 22.32%, lo cual es aceptable para
experimentos agrcolas, indicando que los resultados presentas
confiabilidad.
Siendo el peso de cien granos promedio para el experimento en general
de 52.52 gr.

PESO DE CIEN SEMILLAS (g)

PROMEDIO

Figura N 19, Peso de cien semillas (g), de las lneas en estudio.

IV.3.7. Peso seco de la planta completado su fisiologa vegetal
En el cuadro 07. Se aprecia que el peso seco de la planta de frijol
(Phaseolus vulagaris L.), completada su fisiologa vegetal flucta entre
52.31 g. y 7.30 g. correspondiente a las Lneas de cdigo CIAT 38 y
CIAT 51 respectivamente.
Se observaron que las lneas CIAT 38 y 34 presentaron mayor peso
promedio de las plantas que han completado su ciclo vegetativo en
comparacin con las lneas CIAT 10, CIAT 17 y CIAT 51 que
obtuvieron menor peso promedio.
El coeficiente de variabilidad es de 53%, el resultado obtenido es
confiables para el experimento agrcola, por lo que los resultados son
confiables.
Siendo el peso seco de la planta completado su fisiologa vegetal
promedio general para el experimento es de 20.92 g.

PESO SECO DE LA PLANTA

PROMEDIO

Figura N 20, Peso seco de la planta completado su fisiologa vegetal

en (g), de las lneas en estudio.

IV.3.8. Procesamiento de datos y anlisis estadstico

Anlisis de suelo

V.

CONCLUSIONES.

Se dan en base a los resultados y discusiones, se concluye como sigue.

1. La eficiencia simbitica de las cepas nativas del genero Rhizobium
spp.

las que mejor resultaron obtuvieron en la mayora de las

variables evaluadas y que sobresalieron fueron: CIAT 38, CIAT 49 y

CIAT 54 en las lneas que fueron introducidos, LINEA 20, LINEA
21, LINEA 22 y LINEA 42 las que son lneas nacionales.
2. En la lnea 22 se obtuvo mayor los ms altos resultados en las
siguientes variables que se evaluaron peso fresco de la raz, en peso
fresco y seco de nodulo, granos por vaina y peso de semilla; CIAT 9
sobresali en: vainas por inflorescencia y ramas por planta; CIAT 21
sobresali en: altura de planta y vainas por planta y en la lnea 38
sobresalieron en tamao de ndulo y peso de la planta completada su
fisiologa vegetal. En la lnea 18 se obtuvo los ms bajos resultados
en las variables: altura de planta, peso fresco de follaje, numero de
ndulos y tamao de ndulo; CIAT 17 peso fresco y seco de raz,
peso fresco y seco de ndulo se puede deber a las condiciones
ambientales desfavorables para el cultivo.

3. Para las variables morfofisiologico, las mejores lneas que destacaron

fueron: LNEA 21, LNEA 24, CIAT 54, LNEA 22 y LNEA 20 y
las lneas de menores valores fueron: LNEA 18, CIAT 12 y CIAT 17.
4.

Para las de nodulacion las lneas que destacaron fueron: LNEA 31,
CIAT 38 y LNEA 22 y las lneas de menor valor fueron: las
LNEAS 18 y LNEAS 17; en cuanto a la posicin de los ndulos
.., forma de nodulo se obserbo que la mayora de las
lneas presentaron REDONDO a REDONDO/OVALADO y el color
interno de nodulo la mayora presentaron de color ROJO Y pocos de
color ROSADO concluyendo que los ndulos nativos del genero

Rhizobium son muy eficientes y pocas con poca eficienca en la

fijacin de los ndulos.
5. Para las variables de rendimiento, las lneas que mejor destacaron
fueron: CIAT 9, LINEA 21, CIAT 4, LINEA 42, LINEA 22, CIAT 38
y las lneas de menor valor fueron CIAT 54, LINEA 41, LINEA 20,
LINEA 27, CIAT 51, INEA 34 y CIAT 51.

VI.

RECOMENDACIONES.

1. para una mejor estimacin de los resultados de las lneas en estudio

se debera continuar con los experimentos en otras condiciones de
suelo y clima
2. realizar experimento con las lneas en estudio con inoculantes de
cepas para ver los resultados en cuanto a la fijacin simbitica.

VII.

BIBLIOGRAFA.

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fisiologa vegetal. Azcon Bieto, J. y Taln, M. 2 Edicion. Mc Graw Hall
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VIII.

ANEXOS.