FICHA HISTOLOGA

DATOS DE LOS AUTORES DE REVISIN.

1) Bustamante Angelino Liubing 3) Maquera Huaman Alvaro Alberto.

Guiulfo 4) Perez Rosa Leyby Luz.
2) Esquivias Sotomayor Jubithza. 5) Rondan Estrada Allison Winy.
6) Vargas Cceres Anthony Brian.
 DATOS DEL AUTOR DE REVISIN Y RESUMEN (APELLIDOS Y NOMBRE):
Rondan Estrada Allison Winy.
Cdigo : 015200920K
Capitulo y tema de histologa: Captulo 23 Sistema Genital Femenino.
TITULO IDIOMA ORIGINAL:
The Acinar Cage: Basement Membranes Determine Molecule Exchange and
Mechanical Stability of Human Breast Cell Acini.
AUTOR Y/O AUTORES ORIGINALES COMPLETOS:
Gaiko-Shcherbak A, Fabris G, Dreissen G, Merkel R, Hoffmann B, Noetzel E.
FECHA DE PUBLICACIN:
16 de diciembre del 2015.
REFERENCIA DE BSQUEDA REVISTA PUBLICADA:
PUBMED PLOS ONE.
TITULO TRADUCIDO:
La jaula acinar: La membrana basal determina el intercambio de molculas y
la estabilidad mecnica de los acinos celulares de la mama humana.
PALABRAS CLAVES:
Membrana basal (BM).
Acinos celulares.
Estabilidad mecnica.
Glndulas mamarias.
OBJETIVO DE LA INVESTIGACIN:
Demostrar el papel de la membrana basal como conductor de la afluencia
de molculas acinares y la estabilidad mecnica de las glndulas mamarias
humanas, que son fundamentales para la funcin normal del rgano.
MATERIAL Y MTODOS:
Mantenimiento celular:
Se obtuvieron clulas MCF10A de ATCC, se mantuvieron a 37 C. El
medio de cultivo contiena 5% de suero de caballo, 0,5 mg ml -1
hidrocortisona, 100 ng ml -1 toxina-colrica, 10 mg ml -1 insulina, 100
U ml -1 de penicilina y 100 mg ml -1 estreptomicina.
Ensayo de morfognesis.
Acinos MCF10A se cultivaron con el factor de crecimiento reducido
EHS-gel. El medio de ensayo: DMEM / F12 contiene 2% de suero de
caballo, 5 ng ml -1 factor de crecimiento epidrmico. El medio de
ensayo se suplement con Geltrex (2%) y se cambi cada tercer da.
Inmunotincin e imagen.
- Acinos se lavaron con buffer citoesqueltico y se fijaron con
formaldehdo y glutaraldehdo, despus de enfriar con NaBH, las
muestran se lavaron 2 veces con glicina. La permeabilizacin se
realiz con solucin de Triton X-100-CB al 0,5% durante 20 minutos.
Los anticuerpos primarios se incubaron durante la noche a 4C. Los
anticuerpos secundarios acoplados con colorantes fluorescentes se
aplicaron a las muestras por 45 minutos. Despus de dos etapas de
 lavado con PBS, se aplic la tincin DRAQ5 (sealizacin celular)
durante 10 minutos.
Ensayo de permeabilidad del dextrano.
Se registr la seal de dextrano cada 5 minutos durante 3 horas
usando una lente objetivo de inmersin en agua.
Ensayo de Colagenasa IV: Acini se lavaron con solucin salina equilibrada de
Hank (HBSS, Life Technologies) y se trat con 290 U ml -1 colagenasa I
Ensayo de descelularizacin de la membrana basal: Los acinos se trataron
con octil--D-glucopiransido (OGP, Sigma-Aldrich).
Anlisis estadstico.
Los permetros de los Acinos se compararon utilizando la prueba de
pares de Wilcoxon no paramtricos de dos colas (intervalo de
confianza del 95%). AFM distribuciones de la fuerza y la permeacin
tiempo constante distribuciones se analizaron mediante el uso de dos
colas unpared Wilcoxon firmar-rank test (95% IC)
RESULTADOS:
La
CONCLUSIN:
Los datos adquiridos aclaran que la membrana basal da un soporte
mecnico significativo en los acinos de la glndula mamaria; para probarlo
se realiz la destruccin de los contactos clula-clula y clula-matriz de
anclaje mediante el detergente octil--D-glucopiransido (OGP), dejando
armazones proteicos BM no afectados, mostrando una reaccin inflamatoria
inmediata causada por los acinos MCF10A que despus de 30 min se invirti
mediante la deteccin de colgeno IV en forma de halo, sin embargo, esta
no es la nica funcin que realiza la BM sino que tambin participa como
barrera de difusin pasiva para macromolculas. Para descifrar tales
propiedades biofsicas, es vital vincular el fenotipo biomecnico con el
conocimiento bioqumico de desarrollo del cncer de mama y la progresin.
COMENTARIO DEL ALUMNO:
Las propiedades biofsicas de la membrana basal que rodea las glndulas mamarias
son poco conocidas sin embargo mediante el artculo revisado se dilucid la
importancia de sus cualidades.
La membrana basal es una barrera fsica que consiste en una malla de
colgeno IV anclado a lamininas, entactina, heparan sulfato proteoglicano 2 y NID-
1.
En el tejido glandular de la mama es una importante barrera mecnica.
Adems de ser esencial para la homeostasis (barrera de difusin pasiva para
macromolculas) sirve como blindaje frente el estrs mecnico.
Para su mejor compresin se realizaron algunos experimentos en la lnea
mamaria humana de clulas epiteliales no transformadas (MCF10A):
- Se minimiz la heterogeneidad morfolgica de los acinos (MCF10A),
- Se analiz la influencia del factor de crecimiento epidrmico (EGF) (implicado
en el aclaramiento del lumen MCF10A y el tamao de los acinos),
obtenindose resultados beneficiosos en la maduracin de los acinos al
retirar su aplicacin en el da 9.
 - Se us el trazador dextrano que caus un aumento en el desarrollo de BM y
permiti su caracterizacin como barrera de permeacin independiente del
tamao de los poros.
- Se cuantific las propiedades de resistencia a la fuerza de compresin de los
andamios BM por microscopa de fuerza atmica (AFM) hallndose que los
acinos (MCF10A) nativos requeran fuerzas hasta 3 veces superiores para
alcanzar profundidades de indentacin en comparacin con los depsitos de
BM libres de clulas. Sin embargo es necesario resaltar que las cscaras de
BM descelularizadas y altamente desarrolladas permanecieran
estructuralmente intactas despus de un sangra repetida demostrando as
su naturaleza elstica y comprobndose el papel fundamental de (BM) para
conferir estabilidad mecnica a los acinos de la mama humana.