PARTE EXPERIMENTAL 313 OBTENCION DE LA MUESTRA Las semillas de capulin, se obtuvieron, en el Mercado de Sonora dei DF. Las semillas se llevaron al iaboratorio en donde se seleccionaron, separando de ellas las cascarillas. Después se trituraron, usando un molino manual de fierro, marca “ATLAS”, y se dejaron secar, por tres dias, a temperatura ambiente Para llevar a cabo {a extraccion se empied la semilla completa, dada la dificultad de separar la almendra de la parte lefiosa, por lo que el porcentaje de aceite obtenido se da con relacién al peso total de fa semilla y para calcular el porcentaje de aceite en la almendra, se realizaron pruebas con relacién al peso de la almendra con respecto al de la semilla total, y el peso fue del 50%. Una vez obtenida la semilla seca, se pesaron aproximadamente 150 gramos de ésta y se colocaron dentro del cartucho del Soxhlet, equipo empleado para realizar la extraccién del aceite. El proceso de extraccién se lievé a cabo por 6 horas para lo que se empled hexano destilado como disolvente. Pasado el tiempo indicado para la extraccién, se quite el matraz del Soxhlet y se destilé el disolvente, para separar el aceite obtenido. El aceite presento un color amarillo oro, con olor caracteristico y consistencia viscosa. Finalmente se realiz6 el calculo del porcentaje de aceite obtenido de acuerdo a ia cantidad de semilla pesada. Calculos: Se pesaron 150 gramos de semilla, los cuales se llevaron a extraccion, después de evaporar el hexano, se obtuvieron 43 gramos de aceite, entonces: 150g. ». 100% 43.9... x X= 28.7 % de aceite con base al Peso total de la semilla 1509. 100% X= 75 g de peso de ia almendra x. 50% de la semilla, TB Qo 100% 43g x X = 57.3 % de aceite en ta Almendra 32.3.11 CONSERVACION DE LA MUESTRA Como se menciono anteriormente, las grasas y los aceites sufren de oxidacién, proceso que provoca la degradacién de los mismos, ademas se llegan a contaminar por hongos y bacterias, por lo que, se emplearon conservadores, los que se adicionaron al aceite, a una temperatura de 60° C y con agitacién constante. Metiiparabeno: 05 % Propilparabeno 0.03 % Butil hidroxi tolueno 02 % 3. PRUEBAS REALIZADAS INDICE DE IODO (Método de Wijs) Se colocaron aproximadamente 02 gramos de la muestra en un matraz con tapon esmerilado, se agregaron 20 mi de tetracloruro de carbono y 25 ml de solucién de reactive de Wijs, se mezclé y se dejo durante 30 minutes con agitacién ocasional. Ala mezcla anterior se adicionaron 20 ml de solucién de yoduro de potasio y 100 ml de aqua destilada. Se agité y se titul con solucién 0.1 M de tiosutfato de sodio, usando casi ai final de Ia titulacién solucién indicadora de almidén hasta que el color de la solucion tomné a amarillo palido Se anotaron los mililitros consumidos y simultaneamente se realiz6 un blanco de manera similar.VISCOSIDAD Se utilizo el viscosimetro tipo “Broockfield” Se equilibro la temperatura de la muestra en un bafio Maria, posteriormente se seleccionan las R.P.M. y se utiliz6 agua No. 2. Se introdujo [a aguia en la muestra en forma inclinada, una vez dentro se atomillé y centrd, de tal modo que el oleaje que se produjera fuese igual en todos los puntos airededor de la agua. ‘Se encendio ef aparato y se dejd funcionar libremente de un minimo de 30 segundos y a un maximo de un minuto. Ai cabo de este tiempo, se oprimio et embrague para detener la escala y se anoté ia lectura sefialada la escala, se repitid a operacion 3 veces y se promediaron las lecturas. INDICE DE ACIDEZ Antes de la valoracién se agregaron a la muestra, una mezcla de alcohol - éter_y se colocé a reflujo suave durante 10 minutos. En un matraz de tapén esmerilado, se colocaron aproximadamente 10 gramos de aceite, perfectamente pesados, se agregaron 50 ml de una mezcla etanol - éter 1.1. Sila muestra no se llegara a disolver en frio, se conecta el matraz a un condensador para refiujo de juntas esmeniadas; se calienta ligeramente agitando con frecuencia, hasta que la muestra se disueiva. Se agregé 1 ml de solucién indicadora de fenolftaleina y se valoro con solucién 0.1 N de hidréxido de potasio hasta que después de la adicién, la solucion permanece ligeramente rosa durante 30 segundos de agitacion. INDICE DE REFRACCION Se ajust la temperatura del Refractémetro Abbe y de la muestra a 25°C, se deposits una gota de la muestra sobre la superficie del prisma de medici6n, evitando ta formacion de burbujas, se obtuvieron un minimo de 3 lecturas por muestra, y se calculé el promedio La diferencia entre cada lectura no debe ser mayor de 0.0002. 34INDICE DE PEROXIDOQ Se peso con exactitud 5.0 gramos de aceite en un matraz de yodo de 250 ml, se adicionaron 30 ml de una mezcla de 3:2 acido acético glacial - cloroformo, se agit hasta disolucién y se adicionaron 0.5 mi de solucién saturada de yoduro de potasio. Se tapo el matraz y se dejo reposar la mezcla por un minuto, se agit de vez en cuando; se adicionaron 30 mi de agua y se inicid ta titulacién con solucién 0.01 Molar de tiosulfato de sodio, se adicionaron 0.5 ml de soluci6n indicadora de almidén y se continud la titulacion, hasta que el color azul desaparece, se corrié un blanco de reactivos. DENSIDAD RELATIVA Las mediciones se realizaron a 25° C Se ensambl6 y se peso el picnometro de 10 mi. en una balanza analitica, se registré el peso en gramos hasta la cuarta cifra decimal, Se retiré 1a tapa del tubo capilar ye! tap6n esmerilado con el termémetro. Se llen6 él picnometro con agua destilada y se dejé entriar a 20°C Se colocé et tapon esmerilado cuidadosamente y se dejo salir el exceso de agua por el tubo capilar Se colocé el picndmetro lieno y ensamblado, pero sin tapa, en un bafio a 25° C, se ajust6 el volumen del tubo capilar. Se secé muy bien el exterior y la boca del capilar, Se colocé la tapa austandola bien. Se secd ef picnémetro con papel absorbente. Se registro el peso hasta la cuarta cifra decimal Para la muestra se siguié el mismo procedimiento, sustituyendo ¢ agua por estaINDICE DE SAPONIFICACION Se colocé de 1.5 a 2.0 gramos del aceite en un matraz de 250 mi con tapén esmerilado, se agregaron .25 ml de la solucién 0.5 N de hidréxido de potasio en etanol. Se ensamblo al matraz un condensador, se calent6 en un bafto de vapor y se mantuvo a reflujo durante 30 minutos agitando por rotacién, él contenido del matraz. Se agregé 1 mi de solucién indicadora de fenotftaleina y se vatoré el exceso de hidroxido de potasio con solucion 0.5 N de acido clorhidrico. Se corrié simultaneamente una prueba en blanco de reactivos usando las mismas cantidades y valorando de la misma manera. DETERMINACION DE MATERIA INSAPONIFICABLE. En un matraz de 250 mi con tap6n esmerilado, se pesaron § gramos de aceite, se agregaron 40 ml de potasa alcohdlica (2 gramos de hidroxido de potasio en 40 mi de etanol), se ensambi6 al matraz un condensador de aire frio, se calento ¢l matraz en bafio de vapor y se mantuvo a reflujo durante 2 horas. Se evaporé el etanol en bafio de vapor, el residuo se disolvid, en 50 ml de agua caliente, pasado ese tiempo, se transfiné la solucién a un embudo de separacion, lavando el matraz con 2 porciones de 25 mi de agua caliente y se colocaron los lavados en el mismo embudo. El contenido del embudo se enfrio a temperatura ambiente, se agregaron unas gotas de etanol y se extrajo con dos porciones de 50 mi de éter, los extractos se reunieron en otro embudo de separacion Los extractos etéreos se lavaron con 20 mi de solucion 0 1 N de hidroxido de sodio, después con 20 mi de solucién 0.2 N de hidroxido de sodio y finalmente con 3 porciones de 15 mil de agua hasta que el lavado no presentara coloracion rosa al adicionar de 2 gotas de solucién indicadora de fenoiftaleina. Los extractos etéreos se colocan en un vaso de precipitado, lavandose el embudo de separacion con 10 mi de éter y se recogieron en el mismo vaso, se evaporé él éter en un bafio de vapor hasta sequedad, se seco el residuo a 100 ° C durante 30 minutos y se pes6 el residuo constituide por la materia insapontficable.DETERMINACION DE ACIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFIA DE GASES Se peso una muestra de 15 miligramos en un vial de peso conocido, después se adicioné 1 ml de solucién estndar (Acido pentadecanoico), se evaporé el hexano y posteriormente se adicionaron 1.5 mi de KOH 5% en metanol. Se colocé el vial en la estufa a 100° C durante 30 minutos, con agitacién ocasional. Se enfrié a temperatura ambiente. Después se adicionaron 1.5 mi de HCi 10% en metanol con un pH de 0 a 1, después se adiciond 1 ml de tricioruro de boro en metanol. Se colocé el vial en la estufa a 100° C durante 30 minutos. Se enfrid a temperatura ambiente y se hicieron 3 extracciones con un mililitro de hexano, se recogieron los extractos organicos en un matraz y se aforaron a 5 mi. Se realizaron las inyecciones correspondientes y se obtuvo el cromatograma. PRUEBA DE SOLUBILIDAD La temperatura que se toma para esta prueba es de 25° C La prueba se realizé en un tubo de ensaye de 16 x 175 m, al cual se le adicionan § gramos del aceite y después el disolvente en las proporciones mencionadas en la siguiente tabla: TERMINOS DISOLVENTE /SUSTANCIA. . (ml/g) Muy soluble Menos de una parte Facilmente soluble De 1 a 10 partes Soluble De 11 a 30 partes Poco soluble De 31 a 100 partes Ligeramente soluble De 101 a 1000 partes Muy ligeramente soluble De 1001 a 10000 partes Casi insoluble Mas de 10000 partes Los disolventes que se utilizaron fueron Hexano, acetato de etilo, éter etilico, acetona, etanol y agua.TEMPERATURA DE SOLIDIFICACION Se colocaron 5 gramos de aceite en un tubo de ensaye y se introdujo un termometro con una escala de -30° C a 60° C, él tubo se colocé dentro de un recipiente que contenia hielo seco y se registré la temperatura a la cual él aceite se solidificd, esta operacién se realizé tres veces con agitacién constante de la muestra, y se promediaron las lecturas, TEMPERATURA DE FUSION Para determinar el punto de fusién se procedio como en el caso anterior, pero el tubo de ensaye se retird del hielo seco y se mantuvo a temperatura ambiente, hasta que se observé la formacion del_liquido, ta prueba se realiz6 por triplicado y se promediaron las lecturas registradas DETERMINACION DE_ESTEROLES Y SUS DERIVADOS Para determinar la presencia de esteroles y sus derivados, se colocd en un tubo de ensaye de 13 x 150 mm 20 microlitros de la muestra y 2000 microlitros de fa solucién reactiva (mezcla enzimatica), se agit6 y se dejo en bafio Maria por 10 minutos, después se ley6 a 546 nandmetros en un espectrofotémetro UV — VIS, marca Perkin — Elmer lamda 5, con una celda de 1 cmy el resultado obtenido se multiplicé por 905 mg/dl (factor de correlacién), ademas se corrié un blanco de reactivos. 38