Professional Documents
Culture Documents
1. Experimento de Griffith
Griffith estaba intentando obtener una vacuna que protegiese frente a las
infecciones por neumococos tipo R y se le ocurri lo siguiente:
Tom neumococos tipo R, los mat a todos calentndolos, los mezcl con
neumococos S vivos y esta mezcla se la inyect a ratones. Sorprendentemente estos
ratones moran y de su sangre se podan obtener neumococos R vivos.
Conclusin: los neumococos S han tomado algo que haba en los neumococos R
muertos y se han transformado en R, es decir, han adquirido la capacidad de fabricar
la cpsula.
Conclusin: los cidos nucleicos contienen la informacin necesaria para que los
neumococos S fabriquen la cpsula, luego los cidos nucleicos son molculas que
almacenan informacin.
1
2. Experimento con bacterifagos
2
virus que se replicaron en presencia de 32P (un istopo radioactivo). Este tipo de
virus solo tenan radioactivo el ADN (la envuelta no, ya que no hay ningn aa
que contenga fsforo).
virus que se replicaron en presencia de 35S (un istopo radioactivo). Estos virus
tenan radioactiva la envuelta proteica (ya que hay aa que contienen azufre) pero
no el ADN, pues ningn nucletido contiene azufre.
Cada uno de estos virus se mezcl por separado con bacterias y se sigui la
marcha de la radioactividad. Se encontr que slo la radioactividad procedente del 32P
penetraba en las bacterias mientras que la correspondiente al 35S se quedaba fuera. Lo
que ocurra con los virus era lo siguiente: el virus se pega por fuera a la bacteria a
continuacin le inyecta el ADN, este ADN contiene toda la informacin para fabricar
nuevos virus de manera que poco a poco la bacteria se va llenando de virus hasta que
explota liberando todos los virus. Con este experimento queda claro que el material
gentico de estos virus es el ADN y no las protenas.
3
1. Componentes de los cidos nucleicos: nucletidos
Al igual que los polisacridos y las protenas, los cidos nucleicos son polmeros.
Las molculas que se unen para formar los cidos nucleicos se denominan nucletidos.
Cada nucletido est a su vez formado por tres molculas que son:
Un azcar, pudiendo ser la -D-ribosa (ARN) o la -D-desoxirribosa (ADN)
El cido fosfrico
Una sustancia de carcter bsico (base nitrogenada). Puede ser de dos tipos:
o Pricas (derivan de la purina). Son dos, adenina y guanina
o Pirimidnicas (derivan de la pirimidina) Son tres, citosina, timina y
uracilo
(Todos estos compuestos contienen nitrgeno. Las bases pricas estn
formadas por dos anillos y la pirimidnica por un anillo)
Nuclesidos
Si unimos el azcar y la base nitrogenada obtenemos un nuclesido. El azcar y
la base se unen mediante un enlace N-glucosdico que se establece entre el C 1 del azcar
y el N1 de las bases pirimidnica o el nitrgeno N9 de de las bases pricas
despendindose una molcula de agua. El nombre de los nuclesidos se construye con
el nombre de la base terminado en osina si es prica o terminado en idina, si es
pirimidnica. Si el nuclesido lleva desoxirribosa, se le antepone el prefijo desoxi-
4
Nucletidos
Los nucletidos se obtienen por esterificacin del nuclesido con cido
fosfrico; la esterificacin se produce con el carbono 5 del monosacrido (para no
confundir los carbonos del azcar con los carbonos de la base, los bioqumicos han
decidido que los carbonos del azcar se enumeren como primas, 1, 2, 3). El nombre
de los nucletidos se construye:
Ribonucletidos: cido - nombre de la base lico. Tambin se utilizan
siglas. Ej. AMP
Desoxirribonucletidos: cido desoxi nombre de la base lico. Tambin
se utilizan siglas Ej. dAMP
La funcin principal que tienen los nucletidos es construir los cidos nucleicos,
pero adems tienen otras funciones:
5
Molculas relacionadas con transferencia de energa (AMP, ADP y ATP). El
nucletido AMP puede ganar fosfatos y as participar en las reacciones en las
que se transfiere energa. Si el AMP gana un fosfato se convierte en ADP y si
gana otro se convierte en ATP. Las reacciones contrarias liberan fosfato y,
por tanto energa.
6
Segundos mensajeros. Son molculas que transmiten al interior de la clula
mensajes que, en forma de hormonas o neurotransmisores (primeros
mensajeros) llegan desde fuera. Uno de los segundos mensajeros ms
importantes es el AMP cclico.
7
La nica parte variable en los cidos nucleicos es la secuencia de las bases
nitrogenadas, es decir A, C, G y T en el ADN y A, C, G y U en el ARN.
Unin de nucletidos
Cuando se descubri todo esto, los cidos nucleicos parecan ser molculas ms
sencillas que las protenas ya que podemos construir protenas variando los 20
aminocidos mientras que en el caso de los cidos nucleicos solo podemos variar cuatro
bases. A esta observacin se une el hecho de que los cromosomas, que contienen el
material gentico de un ser vivo, estn constituidos en un 50% por ADN y otro 50% por
protenas. Por estos motivos, a pesar del experimento de Griffith muchos cientficos
siguieron considerando que el material gentico de un ser vivo eran las protenas y no el
ADN. Esta duda se resolvi definitivamente con el experimento de los bacterifagos.
8
2. Modelo de Watson y Crick
La estructura del ADN fue descubierta por James Watson Y Francis Crick en 1953 y
ello le vali el premio Novel de Medicina en 1962. Watson y Crick no hicieron
experimentos si no que fueron recopilando los datos que otros investigadores iban
publicando sobre el ADN; con ellos propusieron un modelo terico que se comprob
era cierto al 100%.
De todos los datos recopilados los ms importantes fueron dos:
El anlisis de la molcula de ADN por difraccin de rayos X, obtenido por
Rosalind Franklin (la gran olvidada) y Maurice Wilkins. Este anlisis indicaba
que la molcula de ADN tena forma de hlice
Anlisis de las secuencias de nucletidos en ADN obtenido a partir de
organismos de distintas especies. Estos anlisis se resumen en lo que se llama
ley de Chargaf que dice que, en todas las molculas de ADN se cumple que el
porcentaje de adenina es igual al de timina y el de citosina al de guanina.
9
10
11
La estructura secundaria de la molcula de ADN se destruye si calentamos la
muestra por encima de una temperatura crtica (punto de fusin del ADN),
producindose la separacin de las dos cadenas de nucletidos. Este proceso se
denomina desnaturalizacin y es un proceso reversible que ha permitido disear una
tcnica llamada hibridacin, muy utilizada en medicina legal, filogenia, etc.
Tipos de ADN
Estudios posteriores han demostrado que dentro de la clula el ADN puede
variar su conformacin para adaptarse a las condiciones ambientales. Las dos
estructuras especiales alternativas ms importantes son:
ADN-A. No aparece en condiciones fisiolgicas. Se presenta en casos de
importante deshidratacin. Se trata de una hlice ms apretada y en la que las
bases se disponen inclinadas respecto al eje de la hlice
ADN-Z. Se forma cuando aparecen grandes concentraciones del par G - C. es
una hlice levgira e irregular. Se interpreta como seales para protenas
reguladoras de la expresin gnica.
12
En 1957 Meselson y Sthal demostraron que el ADN se duplica segn el modelo
semiconservativo. La demostracin la hicieron en un experimento en el que analizaron
ADN de diferentes densidades mediante ultracentrifugacin en gradientes de cloruro de
cesio:
Cultivaron bacterias de Escherichia coli (E. coli) en un medio con 15N (istopo pesado).
E. coli utilizar ese N para formar sus molculas, por lo que tendr un ADN pesado. Al
cabo de un tiempo las pasaron a un medio con 14 N (istopo normal) y esperaron 30
minutos (tiempo que tarda la bacteria en duplicarse). Se extrajo el ADN bacteriano y se
centrifug comprobndose que el ADN ocupaba una posicin intermedia entre el
normal y el pesado. Este resultado descarta la hiptesis conservativa. En la siguiente
generacin se repite el proceso y aparecen dos tipos de molculas, una normal y otra
hbrida (de densidad intermedia), lo que descarta la hiptesis dispersiva. En las
siguientes generaciones la proporcin de ADN hbrido es cada vez menor.
13
3. Las molculas de ARN
Una vez demostrado que el ADN era el material gentico de la clula, haba que
responder a la siguiente pregunta: en que se traduce la informacin del ADN? Haba
evidencias que indicaban que la informacin del ADN serva para producir protenas:
El experimento de los bacterifagos
Cuando el ADN se daa aparecen alguna protena rara.
14
ARN mensajero:
Son molculas largas y lineales, su vida media es muy corta. Comienza siempre
en el extremo 5 con una secuencia de nucletidos que se llama secuencia lder. Esta
secuencia sirve para que un ribosoma la reconozca y se pegue a ella, a continuacin,
viene una secuencia de nucletidos que el ribosoma lee de 3 en 3; cada grupo de tres
nucletidos equivale a un aa en la protena.
ARN ribosmico:
Forma los ribosomas; 2/3 de un ribosoma es ARN ribosmico, el tercio restante
son protenas. Existen varios tipos de ARN ribosmico que a su vez son diferentes en
clulas procariotas y eucariotas. Representa EL 80% del ARN celular.
ARN transferente:
Hay unos 50 ARNt distintos. En su composicin suelen aparecer bases
modificadas como la inosina, la ridotimidina, el pesudouracilo, etc. Son molculas
pequeas y plegadas en forma de trbol. Tienen cuatro brazos que son zonas de doble
cadena y en el extremo de cada uno aparece un bucle:
Bucle1 o brazo D. Es el lugar de reconocimiento de la aminoacil-ARNt-
sintetasa. Enzima que une un aminocido al extremo 3 segn el
anticodn del ARNt).
Bucle 2 o brazo del anticodn. Contiene 3 nucletidos (denominados
anticodn) que se aparearn a otros 3 (denominados codn) en el ARNm.
15
Bucle 3 o brazo T. Es el lugar de reconocimiento del ribosoma
Extremo 3. Es el lugar de unin con el aminocido
16
De los 64 codones 61 codifican algn aa. y 3 no significan nada, son
seales de stop o fin de la protena.
El cdigo esta degenerado varios codones significan el mismo aa
El cdigo gentico presenta balanceo en la 3 base, lo que quiere decir
que cuando varios codones significan lo mismo, slo suele variar la 3
base del codn. Esta caracterstica explica que ciertas mutaciones no
tengan ningn efecto en la protena.
17
CIDOS NUCLEICOS
1) Seale los errores del siguiente texto. el ADN es el cido nucleico ms abundante
en la clula. Se encuentra, exclusivamente, en el ncleo celular y posee una masa
molecular muy elevada. Qumicamente est formado por dos cadenas de
polinucletidos
2) Formule un dinucletido e indique cuntos enlaces ster contiene
3) Indique a qu tipo de cido nucleico corresponden las siguientes secuencias de bases
nitrogenadas;
5 ..CCGATC..3
3... GGATCC..5
3UACCGA.. 5
5ACCGGC..3
4) El ADN presente en una determinada especie bacteriana posee, sobre el total de
bases nitrogenadas, un 18% de citosina. Calcular el porcentaje de las restantes bases
nitrogenadas presentes en el ADN de esa bacteria.
5) En qu tripletes de ARNm, de los que codifican la Gly, es ms probable que la
sustitucin al azar de una sola base:
a) codifique la Ser
b) sea un codn sin sentido
c) codifique la Met
6) Cuntas secuencias diferentes de ADN llevan informacin para la sntesis del
polipptido H2N-Gly-Cys-Gly-Ala-Ser-COOH?
7) Una hebra de ADN posee la siguiente composicin de bases nitrogenadas: A = 21%,
G = 30%, C = 26% y T = 23%. Esta hebra es replicada por la ADN-polimerasa. La
cadena resultante es utilizada como modelo por la ARN polimerasa. Razone que
proporcin de bases tendr el ARN producido.
8) Cuntas molculas de ADN hay en una clula somtica humana?
9) El ADN del planeta Rama est constituido por seis tipos de nucletidos A, B, C, D,
E y F. A y B se llaman marcinas, C y D orcinas y E y F pirinas. Para el ADN de
Rama valen las reglas siguientes:
Marcinas totales = orcinas totales = pirinas totales
a) Haga un modelo de la estructura del ADN de Rama
b) La mitosis en Rama produce tres clulas hijas. Teniendo esto en cuenta, haga un
esquema de cmo ocurre la replicacin de su modelo de ADN
10) Si extrae el ADN del colifago x-174, descubrir que se compone de un 25% de A,
un 33% de T, un 24% de G y un 18 % de C. Tiene esto algn sentido en relacin
con las reglas de Chargaff?. Qu interpretacin dara a estos resultados?. Cmo
podra replicar un fago como este su ADN?
11) En 1960, Paul Doty y Julius Marmur descubrieron que podra desnaturalizarse el
ADN calentando una solucin del mismo, lo que destrua todos los puentes de
hidrgeno entre las cadenas complementarias y converta a la doble hlice en dos
cadenas sencillas. La temperatura de desnaturalizacin de una muestra de ADN
puede emplearse para estimar su proporcin de pares G-C. Cul puede ser el
18
fundamento de esta estimacin, y qu indicara una temperatura alta de
desnaturalizacin?
12) Comenta:
a) Qu resultado hubiesen obtenido Meselson y Stahl si la replicacin del ADN
hubiese sido conservativa? (conteste para la 1, 2 y 3 generacin)
b) Qu molcula radiactiva utilizaras para marcar el ADN sin marcar el ARN de
un cultivo de clulas en divisin?
c) Sabiendo que el ADN de una determinada bacteria posee, sobre el total de bases
nitrogenadas, un 18% de citosina, calcula el porcentaje de las restantes bases
nitrogenadas presentes en el ADN de esa bacteria
13) Indica:
a) De los siguientes apareamientos de bases, cules no son posibles y porqu: A-C.
G-A, C-G, A-T, G-T y C-T
b) Cmo distinguiras una molcula de ARN de otra de ADN monocatenario.
c) Qu caractersticas posee el ADN para ser el material gentico de la clula
d) De qu tipo de ARN puede tratarse en los siguientes casos:
i) comienza con una secuencia llamada lder
ii) contiene bases raras
iii) forma parte de un pequeo orgnulo
iv) tiene forma de hoja de trbol
v) es el ARN ms abundante de la clula
vi) puede contener exones e intrones
14) Explica:
a) Las principales diferencias entre las formas B, A y Z del ADN
b) Qu son los exones e intrones?
c) Qu se prob en los experimentos de: Griffith, de Hersehey y Chasse y de
Meselson y Stahl?
d) Por qu las proporciones de A y T son siempre iguales en las molculas de
ADN?
15) Una hebra de ADN posee la siguiente composicin de bases nitrogenadas: A=21%,
G=26% y T=23% . Esta hebra es replicada por la ADN polimerasa. La cadena
resultante es utilizada como modelo por la ARN polimerasa. Razone qu
composicin de bases tendr el ARN producido.
16) Busca las frmulas de las bases nitrogenadas y construye el siguiente fragmento de
ARN:
5... CCGG..3.
Construye tambin los siguientes nucletidos: dGMP, CMPcclico, dGTP
17) El siguiente fragmento de ARN contiene la informacin necesaria para fabricar una
protena completa, indica:
a) La secuencia de aminocidos de la protena
b) Qu consecuencia tendra para la protena la sustitucin del nucletido N 24
(G) por una A (empezamos a contar por el extremo 5
c) Escriba la secuencia de ADN de la que procede
19
d) Utilizando las letras A, C, G y U escriba la frmula del trozo de ARN
correspondiente a los 4 primeros nucletidos.
5.....AUCUUAAAAAUGUUUCCAGCAUGGUACAAUGUUCUUCC
AUAAAUG......3
Preguntas de Selectividad
1) Tipos de ARN y funciones que realizan
2) Localizacin y funcin del ARNm en clulas eucariotas
3) Describa el modelo de Watson y Crick para el ADN, razonando qu caractersticas
hacen que sea la principal molcula responsable de la informacin gentica.
4) Escribe la frmula general de un nucletido e indica brevemente las diversas
funciones que desempean en la clula
5) Relaciona las dos columnas:
Uracilo Nuclesido
Adenosina Azcar presente en el ARN
Histonas Nucletido
ATP Nuclesido
Ribosa Base pirimidnica
20